临床扩增检验实验室PCR技术申报流程
PCR实验室操作标准流程
乙型肝炎病毒(HBV DNA PCR ABI7300)检侧原则操作程序一、INFORMATIONFORTEST检测信息项目名称乙型肝炎病毒核酸措施聚合酶链反映措施根据卫生部《全国临床检查操作规程》第三版（）第七篇第六章第一节二、ANALYTICALPRINCTPLE检测原理聚台酶链式反映(PCR〕可对特定核苷酸片段进行指数级旳扩增，而实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反映体系中加入荧光基团，运用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过原则曲线对未知模板进行定量分析旳措施。
在实时荧光定量PCR反映中，引入了一种荧光化学物质，荧光物质有两种：荧光探针和荧光染料。
我们目前是使用TaqMan荧光探针旳检测原理：PCR扩增时在加入一对引物旳同步加入一种特异性旳荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一种报告荧光基团和一种淬灭荧光基团。
探针完整时，报告基团发射旳荧光信号被淬灭基团吸取；PCR扩增时，Taq酶旳5’一3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接受到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一种荧光分子形成，荧光信号强度也等比例增长（图一）。
这样就可以通过荧光强度变化监测产物量旳变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。
三、操作环节（一）试剂配制1、进入试剂准备区，启动冰箱冷冻层取出HBV-DNA检测试剂盒。
查看外包装盒(涉及生产批号、有效期)，无误后拆开试剂盒，取出核酸提取液、反映液及Taq酶(核对核酸提取液、HBVPCR反映液及Taq酶管上批号与试剂外包装盒批号与否一致)（图1），不一致则不可使用，需更换新旳试剂。
室温平衡20min，完全融化后rpm离心备用。
2、核酸提取液旳分装（1）取0.5ml离心管架置于超净工作台内(开机前用紫外线消毒30分钟)，用右手拿起镊子逐个将离心管放入离心管架（注意应夹住离心管外壁，不能遇到管内壁)，摆放顺序为横列从左往右摆，竖列为从上往下隔行排，离心管个数为n(n=样本数+对照品+质控品)。
PCR实验检测标准操作规范
PCR检测实验室操作规范一、PCR 实验室的设置及管理1．目的：建立实验室的合理设置和科学管理，防止实验污染，保证检测结果的可靠性。
2．适用范围：本程序适用于分子诊断室的设置、工作流程和日常管理等。
3．负责人：4．细则：4．1流感实验室为急传所的专业实验室，从事临床标本的基因扩增检测及相关科研工作等。
4．2 本实验室采用实时荧光定量（定性）PCR 技术作为病毒基因诊断的主要手段，实验室分为三个区：试剂准备区（第一区）、标本处理区（第二区）、扩增分析区（第三区）。
每一工作区配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品、专用工作服，并有明显的区分标识。
标本的接收则在检验科标本接收处进行。
4．3 各工作区专用的仪器设备、办公用品、工作服、实验耗材和清洁用具等，不可混用。
4．4 各工作区配置、功能和内务管理见各相关SOP 文件。
4．5 严格遵守从“试剂准备区→标本处理区→扩增分析区”的单一流向制度，不得逆向进入前一工作区。
4．6 非本实验室工作人员，未经许可不得入内；进修、实习或其他科室人员因科研活动需要，进入实验区域（试剂准备区、标本处理区、扩增分析区）需首先熟悉本程序的各项规定并严格遵守执行，在本实验室人员监督指导下进行。
4．7 实验完毕后做好清洁消毒工作。
二、PCR 实验室工作制度1．目的：保持良好的工作环境，以确保检测结果的可靠性，防止交叉污染，防止差错、事故及纠纷的发生。
2．适用范围：所有本实验室人员。
3．负责人：4．细则：4．1 本实验室进行临床基因扩增检测及相关实验工作，不得进行其它实验操作。
4．2 各区的用品不得混用。
4．3 在各区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程。
4．4 试剂准备区只能进行试剂的贮存及配制等相关操作（见相关SOP 文件）。
4．5 标本处理区只能进行临床标本的保存，核酸提取、保存及其加入至扩增反应管和测定RNA 时cDNA 的合成（见相关SOP 文件）。
24.基因扩增实验室新项目审批程序
XXXXXXXXXXX医院检验科基因扩增实验室作业指导书SOP
文件编号：HHHH/SOP-JY-GL-024-2024页码：第1页共1页发行版本：A
修改状态：1
批准日期：2024年1月17日
实施日期：2024年1月19日
43
基因扩增实验室新项目审批程序
1．目的：医疗单位开展新技术、新项目应当有行政部门准入许可，基因扩增项目属特殊检测项目，必须经过技术准入，而且只能使用国家药品监督管理局批准的基因检测试剂盒。
为此，建立新项目审批程序是为新项目寻找政策依据。
2．范围：基因扩增实验室开展临床需要的基因检测项目。
3．职责：实验室负有对所开展项目办理审批许可的责任，未经许可不得随意开展。
4．程序：
4.1. 新开展新的基因扩增检验项目程序
4.2. 实验室负责人以书面形式，填写新开项目申请，提出新开展检验项目计划，
确定使用仪器、试剂及检验及审核人员资格培训。
4.3. 经医院院务会以及有关专家讨论通过。
4.4. 新开展项目需购买的仪器、试剂按医院购买仪器、试剂程序实施。
4.5. 必要的检验及审核人员要经过培训，考试合格上岗。
4.6. 经过试运行，达到预定标准后，方可正式开展。
4.7. 运行的结果，资料应记录存档。
临床检验中心PCR实验室标准操作程序
临床检验中心PCR实验室标准操作程序****医院临床检验中心临床基因扩增实验室管理程序标准操作程序（SOP）起草人：批准人：生效日期：年月日目录样本编号的标准操作程序(SOP-15) (94)PCR标本管理标准操作程序（SOP-16） (97)标本前处理标准操作程序（SOP-17） (99)核酸扩增及产物分析检测标准操作程序（SOP-18） (101)乙型肝炎病毒基因扩增检测标准操作程序（SOP-19） (103)基因扩增检测实验结果分析标准操作程序(SOP-20) (111)实验结果有效性判断标准操作程序（SOP-21） (115)室内质量控制标准操作程序(SOP-22) (117)实验室试剂耗材购买、验收和贮存的标准操作程序（SOP-23） (126)试剂质检标准操作程序（SOP-24） (136)实验室耗材质检标准操作程序（SOP-25） (140)手套使用及左右手分开的原则（SOP-26） (144)实验室化学试剂贮存使用、废弃物处理及生物防护（SOP-27） (146)抱怨的处理程序（SOP-28） (149)实验室记录管理规章标准操作程序（SOP-29） (156)检验报告单管理标准操作程序（SOP-30） (160)实验室台面摆放顺序程序（SOP-31） (165)实验室常用溶液配置标准操作程序（SOP-32） (167)临床基因扩增实验室的设置1目的：依照实验室设置规范实现核酸扩增荧光检测实验室配置合理，以保证实验工作健康有序及实验结果的可靠性2 范围：临床基因扩增实验室及相关工作人员，并明确各项规章制度3 操作人：** **4 实验室设置规章：4.1 依据：本实验室按《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10号）中临床基因扩增检验实验室基本设置标准结合本实验室的条件进行设置，并严格按照《临床基因扩增检验实验室工作规范》（卫检字2002第8号）的要求开展临床基因扩增工作(拟开展基因扩增检验项目见附表1)4.2 实验室设置:实验室主要由试剂储存和准备区（PCR-Ⅰ）、标本制备区（PCR-Ⅱ）、PCR扩增及产物分析区(PCR-Ⅲ）三个工作室组成。
临床基因扩增PCR实验室SOP标准操作程序文件(32项)
临床基因扩增实验室标准操作程序编写人：审核人：批准人：启用日期：年月日XXX医院前言为使基因扩增检验技术有效地应用于临床，更好地为疾病的预防、诊断和治疗服务，保证检验质量，严格按照《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》要求，制定本实验室管理文件，本实验室任何实验均需遵循本管理文件中规定执行。
临床基因扩增检验技术指以临床诊断治疗为目的，以扩增检测DNA或RNA 为方法的检测技术，快速、可靠、准确、安全、收费合理方式下，以规范的操作对临床标本进行分析。
本室采用经国家药品监督管理局批准的试剂盒。
开展的检测项目：1、乙型肝炎病毒（HBV）核酸定量检测2、人巨细胞病毒（HCMV）核酸定量检测标准操作程序文件1.目的：为了分子实验室的规范管理，特制订本程序。
2.范围：分子实验室。
3.职责：3.1临床PCR检验实验室工作人员共同遵守、相互督促。
3.2因科研活动需要，进入实验区域（试剂准备区、样本准备区、PCR扩增区）的非本室人员需首先熟悉本程序的各项规定并严格遵守执行。
4.实验室设置：4.1实验室设计为：专用走廊、试剂准备区、样本制备区、PCR扩增区组成。
三个区域各有一个缓冲间。
（见设置图）4.2三个工作区各配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品、专用工作服，并有明显的区分标识。
试剂准备区—白色、样品处理区—兰色、基因扩增区—红色。
4.3工作区的配置、功能、内务管理制度见各工作区文件。
4.4 实验室须严格遵守试剂区→样本区→扩增区的流向制度，严禁误入和逆进入各工作区。
4.5实验室流程：1）PCR室工作人员上班后，由过道走廊→试剂区→样本区→扩增区流向，打开排风、光源、温控装置。
2）标本接收区接收标本、验收登记后离心（不开盖），由内走廊入口将标本送入标本制备区缓冲间（标本制备区内门关闭）。
3）PCR工作人员按从试剂区→样本区→扩增区更衣开始流水操作。
PCR实验室标准操作规程SOP
一、基因扩增检验实验室基本情况 （一） 实验室所属法人单位名称：________________________________________________
地址：__________________________________________________________________ 邮编：_____________________________________ 法定代表人：_____________________实验室负责人：_________________________ 联系人：_________________________email：_________________________________ 电话：___________________________传真：__________________________________ （二） 实验室总人数：__________________名 （其中初级职称人数人员___名，占____；中级职称人数人员_____名，占______。）
质量手册
一、 管理性程序： 程序文件的管理和维护 ……………………………………………………………………… 1 PCR 实验室管理制度 …………………………………………………………………………… 2 生物安全准则 ………………………………………………………………………………… 4 实验室生物防护措施 …………………………………………………………………………… 7 实验室传染性废弃物管理制度 ………………………………………………………………… 9 PCR 实验室的人员配置及管理制度 …………………………………………………… 12 PCR 实验室的人员培训计划及措施 …………………………………………………………… 14 PCR 实验记录管理制度 ………………………………………………………………………… 15 惠安县医院 PCR 检验报告单保密制度 ……………………………………………………… 17 检验结果的传送管理制度 ……………………………………………………………………… 19 实验室的清洁制度 ……………………………………………………………………………… 20 化学试剂的管理程序 …………………………………………………………………………… 22 实验室消耗品购买、验收和贮存程序 ………………………………………………………… 23 新项目审批程序 …………………………………………………………………………………… 25 仪器设备的管理制度 …………………………………………………………………………… 26 仪器设备的使用制度 …………………………………………………………………………… 28 仪器设备的标准操作制度 ……………………………………………………………………… 29 仪器设备的维护保养程序和制度 ……………………………………………………………… 31 仪器设备的校准制度 …………………………………………………………………………… 34 仪器设备发生故障的应急处理制度 ………………………………………………………… 35 PCR 检测的标本管理制度 …………………………………………………………………… 36
CBJY-PCR-MP-020新项目审批管理程序
1 目的
医疗单位开展新技术项目应当由卫生厅行政部门准入许可，基因扩增项目属特殊检测项目，必须经过技术准入，而且只能使用国家药品监督管理局批准的基因检测试剂盒。
为此，建立新项目审批程序是为新项目寻找政策依据。
2 适用范围
PCR实验室临床样品检验项目。
3 职责
实验室负有对所开展项目办理审批许可的责任，未经许可不得随意开展。
4 程序
4.1 新开展临床检验项目程序
4.2 室主任或项目负责人以书面形式，填写新开项目申请，提出新开展检验项目计划，确定使用仪器、试剂及操作人员资格培训。
4.3 经医院技术负责人以及有关专家讨论通过。
4.4 新开展项目需购买的仪器、试剂按医院购买仪器、试剂程序实施。
4.5 必要的操作人员要经过培训，考试合格上岗。
4.6 经过试运行，达到预定标准后，方可正式开展。
4.7 运行的结果，资料应记录存档。
第1页共1页。
pcr扩增技术流程
pcr扩增技术流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!PCR 扩增技术流程如下：1. 设计引物：根据目标 DNA 序列设计一对特异性引物，引物的长度一般为 18-25 个核苷酸，GC 含量为 40%-60%，避免引物自身形成二级结构或引物之间形成二聚体。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
申报流程
三级医院及独立实验室（初次申报） 二级医院（初次申报） 扩项申请 再确认流程（现已申报） 上海市医疗技术临床应用能力登记流程
三级医院及独立实验室（初次申报）
上 海 市 临 床 检 验 中 心 负 责 完 成
医疗机构提出技术审核申请 申请资料审查（sop手册和申请材料）
受理、登记、编号、发放受理通知书
文件评审结束，进行文件修改 文件修改完毕，提交整改报告 完成技术审核结论报告 进入上海市医疗 技术临床应用能 力登记流程
再确认流程（现已申报）
上 海 市 临 床 检 验 中 心 负 责 完 成
医疗机构提出技术审核申请 申请资料审查（申请表及相关文件和sop 文件目录） 三级医院和独立 实验室于2月8日 前提交，由卫生 部安排审核
受理、登记、编号、发放受理通知书
文件评审结束，进行文件修改
文件修改完毕，现场评审
现场评审完毕，一个月内提交整改报告 PCR技术的初审工作完成，开始试运行 试运行，等待卫生 部最终验收（试运 行3个月后提交修 改后或原有的质量 手册和申请材料）
三级医院及独立实验室（初次申报）
市临床检验中心向卫生部递交PCR验收申请
卫生部安排专家现场验收
验收结束，一个月内递交整改报告于市临检中心
市临检中心统一递交验收材料给卫生部
卫生部临检中心发文、发证书
完成技术审核结论报告 进入上海市医疗技术临床应用能力登记流程
二级医院（初次申报）
上 海 市 临 床 检 验 中 心 负 责 完 成
医疗机构提出技术审核申请 申请资料审查（sop手册和申请材料）
受理、登记、编号、发放受理通知书
完成技术审核结论报告
进入上海市医疗技术临床应用能力登记流程
需要在5月31日前完成登记工作， 5月31日后卫监将对未确认的医 院进行检查
受理、登记、编号、发放受理通知书
文件评审结束，进行文件修改
文件修改完毕，现场评审
现场评审完毕，一个月内提交整改报告 完成技术审核结论报告 进入上海市医疗床 检 验 中 心 负 责 完 成
医疗机构提出技术审核申请 申请资料审查（相关sop手册和扩项申请表）