小麦成熟胚再生体系优化效果评价及高再生率基因型筛选
晋谷21_号成熟胚再生体系的优化

doidoi:10.3969/j.issn.1002-2481.2022.04.04山西农业科学2022,50(4):469-477Journal of Shanxi Agricultural Sciences晋谷21号成熟胚再生体系的优化王玉玲1,张世芳1,尹艺臻1,马春英1,王育选1,刘清丽2,赵娟1(1.山西农业大学农学院,山西太谷030801;2.辽宁农业职业技术学院,辽宁营口115009)摘要:为了提高谷子成熟胚愈伤组织的诱导率和分化率,建立高效、稳定的再生体系,以优质品种晋谷21号成熟胚为外植体,研究植物激素、蔗糖、硝酸银(AgNO3)、多效唑(PP333)等不同物质对晋谷21号愈伤组织诱导、继代、分化和生根的影响,进而优化了晋谷21号离体再生培养方案,最终确定了晋谷21号各阶段的最适培养基和激素浓度。
结果表明,在MS培养基中加入2.0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、0.2mg/L6-苄氨基嘌呤(6-BA)、5.0%蔗糖时愈伤组织诱导率最高,可达95.24%,较前期试验筛选出的诱导培养基(2.0mg/L2,4-D、0.2mg/L6-BA、3.0%蔗糖)提高了2.38百分点,产生的愈伤组织致密,颜色淡黄,状态更佳,有利于进一步的分化;再分化过程中添加1.0mg/L6-BA、0.5mg/L NAA、3.0mg/L PP333、3.0%蔗糖、14g/L琼脂时分化率最高,可达28.33%,较前期试验筛选出的分化培养基(1.0mg/L6-BA、3.0%蔗糖、5g/L琼脂)提高了15百分点,且分化出的谷苗健壮;生根阶段最适培养基为1/2MS培养基,生根健壮,适合移栽。
关键词:谷子;成熟胚;愈伤组织;植物激素;附加物中图分类号:S515文献标识码:A文章编号:1002-2481(2022)04-0469-09Optimization of Regeneration System of Mature Embryo of Jingu21WANG Yuling1,ZHANG Shifang1,YIN Yizhen1,MA Chunying1,WANG Yuxuan1,LIU Qingli2,ZHAO Juan1(1.College of Agriculture,Shanxi Agricultural University,Taigu030801,China;2.Liaoning Agricultural Technical College,Yingkou115009,China)Abstract:In order to improve the callus induction and differentiation rate of mature embryos of millet and to establish an efficient and stable regeneration system,in this study,mature embryos of a foxtail millet cultivar Jingu21with excellent quality was used as explant.The effects of the substances including plant hormones,sucrose,silver nitrate(AgNO3)and paclobutrazol(PP333)on callus induction,subculture,differentiation and rooting of Jingu21were studied,and the in vitro regeneration culture scheme of Jingu21was optimized,finally,the optimum concentrations of culture mediums and hormones in stages of Jingu21were defined. The results showed when2.0mg/L of2,4-dichlorophenoxyacetic acid(2,4-D),0.2mg/L of6-benzylaminopurine(6-BA)and 5.0%of sucrose were added to MS medium,the callus induction rate was the highest,it reached95.24%,compared with the induction medium screened out in the previous experiment with the addition of2.0mg/L of2,4-D,0.2mg/L of6-BA and3.0%of sucrose,increased by2.38percentage points.Additionally,the callus produced was dense,yellowish and better,which was beneficial to further differentiation.In the process of redifferentiation,when1.0mg/L of6-BA,0.5mg/L of naphthylacetic acid (NAA),3.0mg/L of PP333,3.0%of sucrose,and14g of agar were added,the differentiation rate was the highest,it reached 28.33%,compared with the differentiation medium screened in the previous experiment with the addition of1.0mg/L of6-BA, 3.0%of sucrose and5g/L of agar,increased by15percentage points,and the differentiated millet seedlings were strong.The optimum medium for rooting stage was1/2MS medium,in which roots were robust and suitable for transplanting.Key words:foxtail millet;mature embryo;callus;plant hormone;additive谷子(Setaria italica)又称为粟,是禾本科狗尾草属最古老的作物之一[1]。
二倍体、四倍体小麦成熟胚组织培养研究初报

二倍体、四倍体小麦成熟胚组织培养研究初报毕瑞明;王洪刚【期刊名称】《分子植物育种》【年(卷),期】2007(5)4【摘要】以栽培二粒小麦(Triticum dicoccum Schuble)、硬粒小麦(Triticum durum Desf.)以及普通六倍体小麦祖先种野生二粒小麦(Triticum dicoccoides Korn.)、野生一粒小麦(Triticum aegilopides Bal.)4个基因型麦属植物成熟胚(MEs)为外植体,对成熟胚愈伤组织诱导、分化及植株再生的组织培养效果做了初步研究,筛选出适合于非六倍体小麦成熟胚组织培养的基因型。
结果表明,不同基因型成熟胚愈伤组织的诱导、分化及植株再生差异显著,具有很强的基因型效应和基因型依赖性。
其中栽培二粒小麦的成熟胚表现出较好的组织培养特性,它的愈伤组织诱导率、分化率、成苗率以及组培效率分别为95.00%、90.00%、32.40%、27.70%,显著高于其它基因型。
二倍体、四倍体小麦成熟胚组织培养特性的研究以及组织培养基因型的筛选,为遗传转化体系的建立、小麦功能基因的分离和克隆,以及小麦分子育种工作奠定了基础。
【总页数】5页(P480-484)【关键词】二倍体小麦;四倍体小麦;成熟胚;组织培养【作者】毕瑞明;王洪刚【作者单位】菏泽学院生命科学系;国家小麦改良中心泰安分中心,作物生物学国家重点实验室,山东农业大学农学院【正文语种】中文【中图分类】S512.103.5【相关文献】1.小麦新品种R59成熟胚的组织培养初报 [J], 唐宗祥;任正隆;张怀琼;张怀渝;傅体华2.二倍体栽培大麦与四倍体野生大麦杂交的研究初报 [J], 王广金3.雄性不育二倍体和四倍体西瓜选育初报 [J], 谭素英;刘文革;阎志红4.氮离子注入对同源四倍体水稻成熟胚组织培养体系的影响 [J], 李玉峰;黄群策;梁运章5.不同二倍体和四倍体小麦成熟胚再生体系研究 [J], 邱肖迪;雍遇乐;刘小刚;汝锦龙;郭蔼光;刘香利因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
燕麦成熟胚组织培养植株再生体系的建立与优化

燕麦成熟胚组织培养植株再生体系的建立与优化燕麦成熟胚组织培养植株再生体系的建立与优化是一个复杂的过程,需要综合考虑多个因素,以下是具体的步骤:
1. 外植体的选择和消毒:选择健康、无病害的燕麦种子作为外植体,并对外植体进行表面消毒处理,以避免污染。
2. 愈伤组织的诱导:将消毒后的燕麦种子接种到含有适当植物生长调节剂的培养基上,诱导愈伤组织的形成。
3. 芽的诱导:将愈伤组织转移到含有适当植物生长调节剂的芽诱导培养基上,诱导芽的分化。
4. 根的诱导:将分化出的芽转移到含有适当植物生长调节剂的根诱导培养基上,诱导根的形成。
5. 植株的移栽:将形成的完整植株移栽到适当的基质中,进行驯化和养护。
6. 体系的优化:通过调整植物生长调节剂的种类和浓度、培养条件(如光照、温度、湿度等)以及培养基的配方等因素,优化植株再生体系的效率和质量。
7. 遗传稳定性和品性分析:对再生植株进行遗传稳定性和品性分析,确保再生植株的遗传背景和品性与原始品种一致。
燕麦成熟胚组织培养植株再生体系的建立与优化是一个长期的过程,需要不断地进行试验和优化,才能获得高效、稳定的再生体系。
同时,不同品种的燕麦可能需要不同的培养条件和处理方法,因此在进行体系建立和优化时需要根据具体品种进行调整。
不同基因型荞麦再生体系的研究

目录摘要 (1)第一章前言 (2)1.1荞麦栽培及营养价值 (2)1.1.1荞麦栽培种植历史及现状 (2)1.1.2荞麦营养价值及利用 (2)1.2植物组织培养研究概述 (3)1.2.1植物组织培养的研究进展及意义 (3)1.2.2植物组织培养的类型 (4)1.2.3荞麦的组织培养研究进展 (4)1.2.4荞麦遗传转化体系研究进展 (6)1.3研究目的及意义 (6)第二章荞麦愈伤组织诱导培养条件优化 (7)2.1实验材料与方法 (7)2.1.1材料与试剂 (7)2.1.2激素的配置 (8)2.1.3培养基与培养条件 (8)2.1.4下胚轴离体材料获取 (8)2.1.5下胚轴愈伤组织培养条件 (8)2.1.6愈伤组织色泽评定 (9)2.1.7数据分析 (10)2.2结果与分析 (10)2.2.1荞麦下胚轴愈伤组织的诱导 (10)2.2.2不同基因型荞麦下胚轴愈伤组织的诱导 (12)2.3讨论 (13)2.4小结 (14)第三章荞麦高频离体再生体系的建立 (15)3.1实验材料与方法 (15)3.1.1材料 (15)3.1.2培养基与培养条件 (15)3.1.3实验方法 (15)3.2结果与分析 (16)3.3讨论 (17)3.4小结 (17)第四章农杆菌介导遗传转化体系的建立与GUS染色分析 (18)4.1实验材料与试剂 (18)4.1.1试验材料 (18)4.1.2农杆菌菌株及载体 (18)4.1.3试剂配置 (18)4.1.4GUS组织化学染色试剂 (19)4.2试验方法 (20)4.2.1农杆菌感受态的制备 (20)4.2.2提取质粒 (20)4.2.3电击法转化农杆菌 (21)4.2.4侵染菌液的制备 (21)4.2.5受体材料预培养 (21)4.2.6侵染和共培养 (21)4.2.7GUS染色鉴定 (21)4.3实验结果 (22)4.4讨论 (22)4.5结论 (22)参考文献 (23)附录 (27)Abstract (31)致谢 (33)不同基因型荞麦再生体系的研究摘要荞麦属于蓼科荞麦属,是典型的“药食同源”杂粮作物。
中国冬小麦抗旱指标评价、种质筛选及重要性状与SSR标记的关联分析

中国冬小麦抗旱指标评价、种质筛选及重要性状与SSR标记的关联分析一、本文概述随着全球气候变化和水资源短缺问题日益严重,提高作物的抗旱性成为现代农业研究的重要课题。
冬小麦作为中国主要的粮食作物之一,在保障国家粮食安全中发挥着至关重要的作用。
开展冬小麦抗旱性状的研究,筛选出具有优良抗旱性的种质资源,对于提高中国冬小麦的产量稳定性和适应性具有重大意义。
本文首先介绍了冬小麦抗旱性状的评价指标和方法,包括生理生化指标和农艺性状指标,旨在建立一套科学的抗旱性状评价体系。
通过田间试验和实验室分析,对收集的冬小麦种质资源进行了抗旱性筛选,以期发现具有潜在抗旱优势的种质。
进一步地,本文还探讨了冬小麦重要抗旱性状与分子标记,特别是简单序列重复(SSR)标记的关联性。
通过分子标记技术,揭示了与抗旱性状相关的遗传位点,为冬小麦的分子辅助选择提供了理论基础和技术支持。
本研究不仅为冬小麦抗旱育种提供了科学依据,也为其他作物的抗旱研究提供了参考。
通过综合评价和分子标记的应用,有助于加快抗旱种质的筛选进程,提高育种效率,从而为实现中国农业的可持续发展做出贡献。
二、材料与方法本研究使用了90份具有不同抗旱性的冬小麦种质材料。
这些材料来源于中国的多个小麦产区,包括半湿润、半干旱地区。
每个种质材料都经过了干旱胁迫处理,以评估其抗旱能力。
相对含水量(RWC):在干旱胁迫前后测定叶片的相对含水量,以评估植物的水分保持能力。
脯氨酸含量(Pro):在干旱胁迫前后测定叶片中的脯氨酸含量,脯氨酸是植物在干旱条件下积累的渗透调节物质,其含量与植物的抗旱性相关。
超氧化物歧化酶活性(SOD):在干旱胁迫前后测定叶片中的超氧化物歧化酶活性,该酶参与植物的抗氧化防御系统,其活性与植物的抗旱性相关。
丙二醛含量(MDA):在干旱胁迫前后测定叶片中的丙二醛含量,丙二醛是植物在干旱条件下产生的有害物质,其含量与植物的抗旱性相关。
根据上述抗旱指标的评价结果,对90份冬小麦种质材料进行筛选。
小麦大龄幼胚再生性能改进与农杆菌转化

小麦大龄幼胚再生性能改进与农杆菌转化石珍源;殷桂香;杜丽璞;陶莉丽;徐惠君;叶兴国【期刊名称】《中国农业科学》【年(卷),期】2011(044)002【摘要】[目的]小麦幼胚再生率与幼胚大小关系密切,改进小麦大龄幼胚再生性能促进小麦转基因研究.[方法]以18个普通小麦基因型和5个硬粒小麦基因型为材料,对其开花授粉后15-17 d的大龄幼胚进行破碎处理、组织培养和农杆菌转化,对转化后的幼胚组织和获得的抗性再生植株分别进行组织化学染色检测和PCR检测.[结果]大龄幼胚培养2 d后破碎处理的再生率为18.2%,显著高于完整胚对照(1.7%),培养2 d后进行破碎处理的再生效果高于4和6 d后破碎处理;不同基因型小麦大龄幼胚破碎处理后再生率为16.9%-46.7%,其中,Bobwhite 和中8423大龄幼胚再生率达到了40%以上;大龄幼胚破碎后在弱光条件下培养,再生率进一步提高,较对照(完整胚黑暗培养)提高5.4%-47.4%;农杆菌侵染后GUS瞬时表达率为0-76.7%,其中科农199高达76.7%,其次为Vetry(64.4%)和Alondra(47.2%);经PCR检测,农杆菌转化小麦大龄破碎幼胚获得了候选转基因植株.[结论]破碎处理和弱光培养显著提高了小麦大龄幼胚再生率,比对照提高5-10倍;科农199、Verry和Alondra大龄幼胚对农杆菌侵染比较敏感,适宜作为农杆菌转化的受体材料;农杆菌转化小麦大龄幼胚可以获得转基因植株.【总页数】8页(P225-232)【作者】石珍源;殷桂香;杜丽璞;陶莉丽;徐惠君;叶兴国【作者单位】中国农业科学院作物科学研究所/国家基因资源与遗传改良重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室,北京,100081;北方民族大学生命科学与生物工程学院,银川,750021;中国水稻研究所,杭州,310006;中国农业科学院作物科学研究所/国家基因资源与遗传改良重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室,北京,100081;中国农业科学院作物科学研究所/国家基因资源与遗传改良重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室,北京,100081;中国农业科学院作物科学研究所/国家基因资源与遗传改良重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室,北京,100081;中国农业科学院作物科学研究所/国家基因资源与遗传改良重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室,北京,100081;中国农业科学院作物科学研究所/国家基因资源与遗传改良重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室,北京,100081【正文语种】中文【相关文献】1.小麦幼胚的脱分化状态及再生性能研究 [J], 刘少翔;王卉;孙毅;梁宏;崔贵梅2.农杆菌转化小麦幼胚获得转bar基因再生植株 [J], 梁雪莲;孙毅;郭平毅;刘惠民;刘少翔;王景雪;解志红3.小麦幼胚再生体培养基筛选 [J], 李智俊4.小麦幼胚再生体系的建立 [J], 宋运贤;相天宜5.农杆菌侵染普通小麦大龄幼胚对幼苗再生及生长发育的影响 [J], 杨赛奇;黄望启;徐开杰;王勇锋;卜斌;宋立立;孙风丽;刘曙东;奚亚军因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
山东优异小麦品种(系)的成熟胚培养能力研究

植物遗传资源学报2011,12(6):992-997J o ur na l o f P l a nt G e ne t i c R e s o ur c e s山东优异小麦品种(系)的成熟胚培养能力研究王振东1,孟鹏1,2,高洁2,郭凤芝2,李玉莲2,樊庆琦2,黄承彦2,李根英2(1沈阳农业大学生物科学技术学院,沈阳 110161;2山东省农业科学院作物研究所,济南 250001)摘要:选择C I M、W4、SD2和M SD2四种脱分化培养基,与M R M和1/2M S+5m g/L玉米素两种再生培养基形成8种培养基组合,利用模式品种扬麦158和B o bw hi t e对上述培养基的愈伤诱导和再生效率进行评价,筛选出最佳培养基组合为诱导培养基C I M与再生培养基1/2M S+5m g/L玉米素。
利用这一培养基组合对包括对照品种B o bw hi t e在内的40个山东优异冬小麦品种(系)的成熟胚培养能力进行了研究。
结果显示:不同品种的成熟胚脱分化形成愈伤组织的能力差异不显著,最高诱导率100%,最低诱导率也超过了94%,但这些愈伤组织在发育过程中形成的愈伤状态差别很大,转移到再分化培养基上后,8个品系的再生率超过10%,分别是08H02、08H05、08B08、泰麦20-2、泰山5024、聊9514、菏麦9803、B o bw hi t e,占参试品种的20%,其中08H05的再生率(23.0%)超过了对照品种B o bw hi t e(21.3%)。
有7个品种没有获得再生苗,占17.5%;再生率在1%到10%之间的品种25个,占62.5%。
关键词:小麦;成熟胚;脱分化;再分化;培养能力C u l t u r e C ap ac i t y onMat u r e E m b r yo of S h an d on g E l i t eC om m onWh e at C u l t i var s an dA d van c e dL i n e sW A N GZ he n-do ng1,M E N GP e ng1,2,G A OJ i e2,G U OF e ng-z hi2,L I Y u-l i a n2,F A NQ i ng-qi2,H U A N GC he ng-y a n2,L IG e n-y i ng2(1C o l l e ge o f B i o l o gi c al Sc i e nc e and T e c hno l o gy,She ny ang A gr i c ul t ur al U ni v e r s i t y,She ny ang ll0l6l;2C r o p R e s e ar c h I ns t i t ut e,Shando ng A c ade m y o f A gr i c ul t ur al Sc i e nc e s,J i nan25000l)A b s t r ac t:F o ur m e di a(C I M,W4,SD2a nd M SD2)w e r eus e d f o r c a l l us i nduc t i o n f r o m m a t ur ee m br y o s o f Y a ng m a i158a ndB o bw hi t e,m o de l v a r i e t i e s w i t h hi g h c a pa c i t y i n c a l l us r e g e ne r a t i o n.T w o m e di a(M R M,1/2M S+ 5m g/LZ e a t i n)w e r e us e d f o r t he f o l l o w i ng c a l l us r e g e ne r a t i o n.B o t h v a r i e t i e s ha d t he hi g he s t r e g e ne r a t i o n f r e que n-c y o n c a l l us i nduc t i o n m e di umC I M f o l l o w e d w i t h t he r e g e ne r a t i o n m e di um1/2M S+5m g/LZ e a t i n.T i s s ue c ul t ur e c a pa c i t i e s o f m a t ur e e m br y o s f r o m40Sha ndo ng e l i t e v a r i e t i e s o r a dv a nc e d l i ne s w e r e e v a l ua t e d.T he r e s ul t s s ho w e d t ha t t he c a l l us i nduc t i o n ha d nos i g ni f i c a nt di f f e r e nc e s i n t he s ec ul t i v a r s a nd l i ne s,but t hec a l l us s t a t us a nd t he g r o w t h s pe e d a s w e l l a s t he f o l l o w i ng r e g e ne r a t i o n c a pa c i t y w e r e qui t e di f f e r e nt.A m o ng t he40l i ne s,o nl y08H05 ha d t he hi g he r r e g e ne r a t i o n f r e que nc y(23.3%)t ha n t ha t o f t he B o bw hi t e(21.3%),e i g ht l i ne s(08H02,08H05,08B08,T a i m a i20-2,T a i s ha n5024,L i a o9514,H e m a i9803,B o bw hi t e)w i t h m o r et ha n10%r e g e ne r a t i o n pe r c e nt-a g e,a c c o unt f o r20%i n a l l s ur v e y l i ne s,s e v e n l i ne s c a n no t o bt a i n a ny r e g e ne r a t e d pl a nt l e t,a c c o unt i ng f o r12.5%,a nd25l i ne s a c c o unt f o r62.5%w i t h t he r e g e ne r a t i o n f r e que nc y no m o r e t ha n10%.K e y w or d s:C o m m o n w he a t;M a t ur e e m br y o;D i f f e r e nt i a t i o n;R e g e ne r a t i o n;C ul t ur e c a pa c i t y收稿日期:2011-04-18 修回日期:2011-07-13基金项目:农业部“引进国际先进农业科学技术”(2010-Z24);转基因生物新品种培育重大专项(2009Z X08-002-17B);国家自然科学基金(30871516,30871515)作者简介:王振东,博士,教授,研究方向:植物细胞生物学。
新冬26小麦幼胚盾片再生体系的建立

新冬26小麦幼胚盾片再生体系的建立王勇;任崴;祝长青【摘要】Immature embryo scutella of Xindong No. 26 were used as explants to study the effect of different combinations of auxins and concentrations on callus induction and differentiation of callus. The result showed that differentiation rate of callus induced by 2,4-D with Dicamba in medium was significantly better than that induced by 2,4-D or Dicamba alone. Differentiation medium containing lower concentration of ZT was propitious to differentiation of root. MS medium containing 2, 4-D 1. 5 mg/L and Dicamba 0.5 mg/L for callus induction, R medium containing ZT 1 mg/L and 2,4-D 0.01 mg/L for callus differentiation were the best efficiency , the regeneration frequency of plantlets was 90%. On the base of these results, an efficient and stable regeneration system of Xinjiang wheat cultivars was established for biolistics transformation.%以新冬26小麦的幼胚盾片为实验材料,研究不同激素及其不同浓度对愈伤组织诱导和分化的影响.结果表明:2,4-D和Dicamba组合诱导的愈伤组织分化率显著优于单独添加2,4-D或Dicamba.分化培养基中添加低浓度的ZT有利于根的分化.诱导培养基采用MS附加2,4-D 1.5 mg/L和Dicamba 0.5 mg/L,分化培养基采用R附加ZT1 mg/L和2,4-D0.01 mg/L对愈伤组织分化效果为最佳,绿苗分化率最高可达90%.本研究结果为建立高效、稳定的新疆主栽小麦品种的遗传转化系统奠定了基础.【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2011(030)008【总页数】4页(P17-20)【关键词】新冬26;幼胚盾片;再生【作者】王勇;任崴;祝长青【作者单位】新疆师范大学分子生物学与生物信息研究室,乌鲁木齐 830054;中国科学院新疆生态与地理研究所,乌鲁木齐 830011;新疆师范大学分子生物学与生物信息研究室,乌鲁木齐 830054【正文语种】中文【中图分类】S512.1土地的盐渍化和较低的小麦加工品质一直制约着新疆的粮食生产。