基因工程(一轮复习)
生物种类
常用方法 受体细胞
植物细胞
动物细胞
微生物细胞
农杆菌转化法 _____________
体细胞或受精卵
显微注射法 _____________
_____________ 受精卵
转化法 _____________
原核细胞 Ca2＋处理细胞→ 感受态细胞→重
将目的基因插入到Ti 将含有目的基因的
质粒的T－DNA上→ 表达载体提纯→取
加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠
杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大 肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含 有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：
(1) 质 粒 载 体 作 为 基 因 工 程 的 工 具 ， 应 具 备 的 基 本 条 件 有
转基因植物(如转基因烟草)和
番茄)；利用转基因改良植物的
转基因植物(如抗寒
(如新花色矮牵牛)。
(3)比较基因治疗与基因诊断： 原理 操作过程 正常基因 导入 利用__________ 基因治疗 基因表达 ____________ 有基因缺陷的细胞中， 以表达出正常性状来 治疗(疾病) 临床实验 进展
工程是按照以下思路进行的：确定蛋白质的功能 →蛋白质应有
的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→推测应有的氨基酸序 列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。
2.( 教材 P26 旁栏思考题解答 ) 对天然蛋白质进行改造，你认为应 该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？
提示
毫无疑问应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改
借助宿主细胞完成DNA复制。
答案
(1)能自我复制、具有标记基因
(2) 二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长 含有质粒载体 含有插入了目的基因的重组质粒 (或答含有重组
质粒)
长
二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在该培养基上均能生
四环素
(3)受体细胞
2.如图为农杆菌转化法示意图。请回答以下问题：
mRNA反转录 DNA合成仪
(2)基因表达载体的构建——基因工程的核心
①目的：使目的基因 在受体细胞中稳定存在，并且可以遗
传给下一代 ，同时使目的基因能够表达和发挥作用。 ②基因表达载体的组成
RNA聚合酶
转录 转录
目的基因
③构建过程
同种限制酶
DNA连接
(3)将目的基因导入受体细胞
受体细胞种类不同，导入方法不同
转化过程
导入农杆菌→侵染植 卵(受精卵)→显微注 组表达载体与感 物细胞→整合到受体 射→受精卵发育→ 细胞的染色体DNA上 获得具有新性状的 →表达 动物 受态细胞混合→
感受态细胞吸收
DNA分子
(4)目的基因的检测与鉴定
1.下列物质或过程哪一项不影响磷酸二酯键数目变化？请逐项分 析说明。 ①RNA聚合酶、逆转录酶、Taq酶 ②DNA聚合酶、DNA连接 酶、DNA酶 ③遗传信合酶、逆转录酶和Taq酶的作用都会导致磷 酸二酯键的数量增加， DNA 聚合酶和 DNA 连接酶的作用都会 导致磷酸二酯键的数量增加，而DNA酶的作用会导致磷酸二酯 键的数量减小，遗传信息的翻译会增加肽键的数目， PCR 中 DNA解链会减少氢键的数目，这两个过程酯键数目增加，基因突变是指基因中碱基对的增添、缺失 和替换，其中增添和缺失会导致磷酸二酯键数目改变。
解析
(1) 作为运载体必须具备如下特点：①能自主复制，从而
在受体细胞中稳定保存；②含标记基因，以供重组 DNA 的鉴定 和选择；③具1或多个限制酶切割位点以便外源DNA插入。(2)在
含有氨苄青霉素的培养基上，只有具有 Ampr的大肠杆菌才能够
生长。而 Ampr位于质粒上，故未被转化的和仅含环状目的基因 的大肠杆菌细胞中无 Ampr，故不能在培养基中生长，而仅含有 质粒载体的和含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌均具有 Ampr因而能在培养基中生长。目的基因的插入破坏了质粒载体 的Tetr，故含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌不能在含 有四环素的平板上生长，从而与仅含有质粒载体的大肠杆菌得以 区分。 (3) 噬菌体是病毒，无细胞结构，无法自主合成 DNA，需
提示
适合的质粒是①。由图可知，质粒②上无标记基因，不适
合作为载体；质粒③和④的标记基因上都有限制性核酸内切酶的 识别位点，使用该酶后将会导致标记基因遭破坏，故均不宜选作 载体。
2.基因工程的基本操作程序
(1)目的基因的获取
①目的基因：主要指 编码蛋白质 的基因，一种天然蛋白质都是由基因编码的，改造了基因即对 蛋白质进行了改造，而且改造过的蛋白质可以遗传下去。如 果对蛋白质直接改造，即使改造成功，被改造过的蛋白质分
子还是无法遗传的。 (2) 对基因进行改造比对蛋白质直接改造
要容易操作，难度要小得多。
1.(2015· 全国卷 Ⅱ， 40) 已知生物体内有一种蛋白质 (P) ，该蛋白 质是一种转运蛋白，由 305个氨基酸组成。如果将 P分子中 158
DNA探针 制作特定__________ ____________ 基因诊断 碱基互补配对
与病人样品DNA混合， 临床应用 分析杂交带情况
2.蛋白质工程 (1)概念理解
①基础：蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系。
②操作： 基因修饰 或基因合成。 ③结果： 改造了 现有蛋白质或制造出 新的蛋白质 。 ④目的：根据人们对蛋白质功能的特定需求，对 蛋白质结构 进行分子设计。
(1)图中①过程用到的工具酶的特点是________________ (2)图中②过程用到的工具酶是____________，该过程是基因工 程最核心的步骤，即____________。
(3) 图中③过程，需使用 ________ 溶液处理农杆菌使其成为感受 态。 (4)图中④过程的原理是____________。 (5)检测基因工程是否成功。首先，应检测 _________________，
的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA使 之失效，从而达到保护自身的目的。
3.(教材P6“旁栏思考题”解答)想一想，具备什么条件才能充当 “分子运输车”？ 提示 能自我复制、有一个或多个切割位点、有标记基因及对
受体细胞无害等。
1.(2016· 全国课标卷 Ⅰ ， 40) 某一质粒载体如图所示，外源 DNA 插入到 Ampr 或 Tetr 中会导致相应的基因失活 (Ampr 表示氨苄青 霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体 用BamH Ⅰ酶切后，与用BamH Ⅰ酶切获得的目的基因混合，
(2)操作过程 从预期的蛋白质 功能 出发→设计预期的 蛋白质结构 脱氧核苷酸序列 →
推测应有的 氨基酸序列 →找到相对应的
(基因)→基因表达→产生需要的蛋白质。其流程图如下：
1.蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程有什么不同？ 提示 基因工程是遵循中心法则，从DNA→mRNA→蛋白质→
折叠产生功能，基本上是生产出自然界已有的蛋白质。蛋白质
________(答出两点即可 )，而作为基因表达载体，除满足上述基 本条件外，还需具有启动子和终止子。
(2) 如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠 杆菌细胞中，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分
的，其原因是______________；并且________和________的细胞
DNA 分子
(4) 植物细胞的全能性
基因 分子杂交
(5) 转基因生物的染色体上是否插入目的
抗原—抗体杂交(1)诠释基因组与部分基因(2)诠释PCR技术 ①原理：体外DNA复制 ②需要条件：模板DNA、引物、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA
聚合酶(Taq酶)
③过程： DNA 受热 (90 ～ 95 ℃ ) 变性解旋为单链、冷却 (55 ～ 60 ℃)后RNA引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合 酶作用下延伸(70～75 ℃)合成互补链。
这是目的基因能否在真核细胞内稳定遗传的关键；其次，利用
____________法检测目的基因是否转录出相应的mRNA；最后， 利用____________法检测目的基因是否翻译成蛋白质。 答案 (1) 能识别特定的脱氧核苷酸序列并且在特定位点切开 (2)DNA 连接酶 基因表达载体的构建 (3) 氯化钙
2.(教材P4“寻根问底”改编)根据你所掌握的知识，你能分析出
限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗？
提示 原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，但是，生物
在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，以防止外来 病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具，当外源
DNA 侵入时，会利用限制酶将外源 DNA 切割掉，以保证自身
基因工程
[最新考纲] 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。 2.基因工程的原理及技术( 含 PCR 技术Ⅱ ) 。 3. 基因工程的应用 ( Ⅱ ) 。 4. 蛋白质工程 ( Ⅰ ) 。
5. 实验：DNA的粗提取与鉴定。
考点一
基因工程的基本工具及操作过程
1.基因工程的基本工具 (1)限制性核酸内切酶(限制酶) ①来源：主要从 原核 生物中分离纯化而来。 ②作用：识别 特定的核苷酸序列 并切开特定部位的两个核 苷酸之间的 磷酸二酯键 。
(2)限制酶为何不切割自身DNA? 提示 限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别特定的碱基序
列，并在特定的位点上进行切割；限制酶不切割自身 DNA 的原 因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
(3)限制性核酸内切酶 Mun Ⅰ和限制性核酸内切酶 EcoR Ⅰ的识 ↓ ↓ 别序列及切割位点分别是 和 。如图 —CAATTG— —GAATTC— 表示四种质粒和目的基因， 其中箭头所指部位为限制性核酸内切 酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目 的基因载体的质粒是哪一种？并指明理由。
高考一轮复习人教版基因工程作业
考点规范练37基因工程一、选择题1.微生物常被用于基因工程中。
下列相关叙述正确的是()A.从耐热的细菌中获取PCR所需的DNA连接酶B.大肠杆菌、酵母菌等是基因工程常用的载体C.作为载体的DNA分子需具有合成抗生素的基因D.常利用土壤农杆菌将目的基因导入植物细胞2.科研人员利用相关技术改变了胰岛素B链的第9位氨基酸,从而避免了胰岛素结合成无活性的二聚体形式。
下列相关叙述错误的是()A.该过程的操作对象是胰岛素分子B.可通过测定DNA序列确定突变是否成功C.对胰岛素结构的改造属于蛋白质工程D.胰岛素的本质是蛋白质,不宜口服使用3.在基因工程的操作中,为了防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的原则是()①质粒内,每种限制酶只有一个切割位点②目的基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点③酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列不相同④酶切后,质粒形成的两个黏性末端序列相同A.①③B.①④C.②③D.②④二、非选择题4.科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。
下图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的切割位点。
请分析回答下列问题。
(1)在该过程中,研究人员首先获取了抗盐基因(目的基因),并采用技术对目的基因进行扩增,该技术需要的条件是、酶、原料、模板,该技术必须用酶;然后构建基因表达载体,基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外,还需具有。
(2)用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用SmaⅠ酶切割,原因是。
图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用酶对外源DNA、质粒进行切割。
(3)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者的具体过程是。
5.(2019全国Ⅰ卷)基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。
回答下列问题。
《基因工程》一轮复习教学设计
《基因工程》一轮复习教学设计教学目标：1.理解基因工程的基本概念和原理；2.掌握基因工程的常用技术方法和应用；3.培养学生对基因工程的分析和应用能力；4.培养学生的科学研究和创新意识。
教学内容：1.基因工程的基本概念和历史背景；2.基因工程的主要技术方法和应用；3.基因工程在农业、医学和环境保护中的应用。
教学过程：一、导入（10分钟）1.利用生物信息学课程中所学的基本知识，引导学生回顾DNA和基因的基本概念。
2.引发学生对于基因工程的兴趣与思考，提出“什么是基因工程？它有什么应用？”二、讲授基因工程的基本概念（20分钟）1.介绍基因工程的定义和历史背景，让学生明确基因工程的意义和重要性。
2.解释基因工程的基本原理，包括DNA的分离、修饰和重组等。
3.引导学生思考基因工程的伦理和社会问题，如转基因食物的安全性等。
三、讲授基因工程的常用技术方法（30分钟）1.介绍PCR技术的原理和应用，让学生理解PCR的作用和意义。
2.介绍限制酶切和DNA连接的原理，让学生掌握限制酶的分类和使用方法。
3. 介绍电泳和Southern blotting技术的原理和应用，让学生了解基因分析的常用方法。
四、讲授基因工程的应用（30分钟）1.介绍基因工程在农业领域的应用，如转基因植物的培育、抗虫基因的导入等。
2.介绍基因工程在医学领域的应用，如基因治疗、药物研发等。
3.介绍基因工程在环境保护中的应用，如生物修复、污水处理等。
五、课堂讨论与总结（20分钟）1.引导学生展开讨论，探讨基因工程的潜在风险和社会影响。
2.总结基因工程的基本概念、技术方法和应用。
3.鼓励学生提出自己的观点和问题，培养学生的科学研究和创新意识。
六、作业布置（10分钟）要求学生选择一个基因工程应用领域，撰写一篇科普文章，包括基本概念、主要技术方法和应用实例等内容。
教学评价方法：1.课堂问答：通过提问学生回答问题，检查学生对基因工程的理解和记忆。
2.课堂讨论：引导学生分组进行讨论，展现学生对基因工程的分析和应用能力。
2025人教版高考生物一轮复习课件 第十单元 第61课时 基因工程的基本工具和基本操作程序
2025人教版高考生物一轮复习课件第61课时1.概述基因工程是在微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展起来的。
2.阐明重组DNA技术的三种基本工具。
3.阐明基因工程的基本操作程序。
课标要求考情分析1.基因工程的基本工具2023·新课标·T6 2021·全国乙·T38 2021·湖北·T72.基因工程的基本操作程序2023·全国乙·T38 2023·全国甲·T38 2023·湖北·T4 2023·广东·T20 2021·广东·T22内容索引考点一 基因工程的基本工具考点二 基因工程的基本操作程序课时精练1.基因工程的概念DNA分子转基因遗传特性生物类型基因重组2.基因工程的诞生和发展(1)肺炎链球菌转化实验不仅证明了DNA 是遗传物质，还证明了DNA 可在同种生物不同个体之间。
(2)DNA 双螺旋结构的提出和的证明。
(3)中心法则的确立。
(4)的破译。
(5)基因转移载体的发现。
的发现为DNA 的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。
转移半保留复制遗传密码限制酶、DNA 连接酶和逆转录酶(6) 体外重组的实现。
(7)重组DNA 表达实验的成功。
(8)DNA 测序和合成技术的发明。
(9) 技术的发明。
(10) 技术可以实现对特定基因的定点插入、敲除或替换。
DNA PCR 基因组编辑3.重组DNA技术的基本工具(1)限制性内切核酸酶(简称“限制酶”)原核生物数千特定核苷酸序列磷酸二酯键磷酸二酯键提醒 ①限制酶的识别序列一般由6个核苷酸组成，少数由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。
②限制酶作用的化学键只能是磷酸二酯键。
③在切割含目的基因的DNA分子时，需用限制酶切割两次此DNA分子，产生4个末端。
只有这样才能使目的基因的两端都有可连接的黏性末端或平末端。
2023届一轮复习人教版基因工程作业
练案［38］选择性必修3第十单元生物技术与工程第38讲基因工程一、选择题1.质粒是基因工程中最常用的载体，下列关于质粒的叙述，错误的是（B ）A.质粒是具有自我复制能力的双链环状的DNA分子B.质粒存在于细菌拟核之中，与拟核一起控制细菌的生命活动C.作为载体的质粒上有限制酶的切割位点D.作为载体的质粒存在特殊的标记基因［解析］由分析可知，质粒是具有自我复制能力的双链环状的DNA分子，A正确；拟核DNA是细菌的主要遗传物质，包含控制细菌生命活动的遗传信息，没有了它细菌就无法存活、繁殖，质粒DNA是独立于原核细胞拟核DNA之外的遗传物质，使细菌表达一些特殊的性状, 没有了它细菌依然可以正常生活、繁殖，B错误；作为载体的质粒上有限制酶的切割位点，这是质粒作为运载体的条件之一，C正确；作为载体的质粒存在特殊的标记基因，以便对目的基因进行检测，D正确。
2. OsGLOK EcCAT. EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如下图所示），利用农杆菌转化法转化水稻，在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。
下列叙述正确的是（A ）|潮毒索抗性基因卜*$$|反诟口|_M 0sCΔ01那毒索抗性基因卜T-DNA -----注：U＞启动子［终止子咫叶绿体转运肽A.可用抗原一抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量B.四个基因转录时都以DNA的同一条单链为模板C.应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞D.四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译［解析］可用抗原一抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量，杂交带相对量越多，表明目的基因翻译成的蛋白质含量越高，A正确；由题图可知，在同一个T—DNA中OsGLOl启动子启动转录的方向与其他三个基因的不同，四个基因转录时不都以DNA的同一条单链为模板，B错误；卡那霉素抗性基因不在T-DNA中，而潮霉素抗性基因在T-DNA 中，应选用含潮霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞，C错误；由题意知，利用农杆菌转化法转化水稻，可使目的基因插入到水稻细胞中染色体的DNA上，所以与叶绿体转运肽基因连接的四个基因，在水稻细胞核内进行转录，在核糖体中进行翻译，D错误。
2024届高考一轮复习生物课件(人教版)：基因工程的基本工具和基本操作程序
4.目的基因的检测与鉴定
拓展 提升科学思维
PCR是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各 种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。在 该过程中，引物非常关键，回答下列有关引物的问题： (1)什么是引物？ 提示 引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。 (2)PCR技术为什么需要引物？ 提示 DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从3′端延伸DNA链。
拓展 提升科学思维
构建基因表达载体时，需要选择合适的限制酶切割含有目的基因的DNA
片段和载体。
已知限制性内切核酸酶Ⅰ的识别序列和切点是
，限制性内切
核酸酶Ⅱ的识别序列和切点是
，根据图示分析回答下列问题：
(1)请用图示法写出限制性内切核酸酶Ⅰ和限制性内切核酸酶Ⅱ切割后形 成黏性末端的过程。
提示 限制性内切核酸酶Ⅰ： 限制性内切核酸酶Ⅱ：
本质
DNA
DNA
mRNA
mRNA
位置 目的基因上游 目的基因下游 mRNA首端 mRNA尾端
RNA聚合酶识 别和结合的部 功能 位，驱动基因 转录出mRNA
翻译的起始 使转录在所需要
信号(编码氨 的地方停下来
基酸)
翻译的结束信 号(不编码氨 基酸)
3.将目的基因导入受体细胞
生物种类
植物
动物
微生物
常用方法 农杆菌转化法、花__粉__管__通__道__法__ 显微注射法 Ca2＋ 处理法
(6)若一个DNA分子在PCR中经过n轮循环，理论上需要消耗多少个引物？ 第n轮循环需要消耗多少个引物数？ 提示 经过n轮循环需要消耗引物数为(2n＋1－2)个，第n轮循环需要消耗 的引物数为2n个。
基因工程一轮复习优秀课件
PCR技术
PCR技术是一种体外DNA复制方法，通过反复循环的DNA扩增步骤可以迅速 制备大量DNA片段，用于基因工程和基因诊断。
基因工程的历史和发展
1 起源与发展
2 重要里程碑
3 现状与前景
基因工程起源于20世纪 70年代，随着DNA测序、 合成和编辑技术的不断 发展，得以迅速推进。
1980年首次成功构建了 重组DNA分子，1996年 克隆克隆羊多莉，标志 着基因工程迈向了新的 里程碑。
现代基因工程已经广泛 应用于农业、医学和环 境领域，并为未来的生 物科技发展奠定了基础。
DNA的基本结构和作用
DNA是生物体内携带遗传信息的分子，由碱基、磷酸和糖组成，通过碱基配 对和DNA复制维持生物遗传信息的传递。
核酸的生物合成
核酸的生物合成包括DNA复制、转录和翻译等过程，通过这些过程来合成和 表达蛋白质，实现基因的功能。
基因剪切技术
基因剪切技术是通过酶作用将DNA分子切割成特定片段，为后续的基因操作和基因组测序提供必要的材 料。
基因工程一轮复习优秀课 件
基因工程是利用基因技术对生物体进行改造和调控的过程。本课件将全面介 绍基因工程的历史、应用、技术原理和伦理问题，以及在农业、医学和环境基因工程？
基因工程是利用基因技术对生物体进行改造和调控的过程，通过修改和重组 DNA分子来达到改变生物特性的目的。
基因工程的应用范围
农业
转基因作物、抗虫抗病品种 的培育，提高农作物产量和 质量。
医学
基因治疗、基因诊断和药物 研发，促进人类健康和疾病 防治。
环境保护
生物修复和生物资源的高效 利用，减少环境污染和资源 浪费。
基因工程技术的基本原理
基因工程技术的基本原理包括基因剪切、PCR技术、基因克隆和CRISPRCas9等技术，以及这些技术在基因工程中的应用。
2023届高三生物一轮复习课件：基因工程
或其他数量的核苷酸组成。
6.切割结果：切口有两种：黏性末端和平末端 当限制酶在它识别序列的_中__轴__线__两__侧__将DNA分子的两条链分别切 开时，产生的是黏__性__末__端____； 当限制酶在它识别序列的_中__轴__线__处__切开时，产生的是_平__末__端_；
EcoRⅠ SmaⅠ
不会对人畜有害的原理？①Bt抗虫蛋白只在某类昆虫肠道的碱性环境中才能表现出毒性，而人畜的胃液 呈酸性 ②人畜的肠道细胞没有特异性受体。 一、目的基因的筛选与获取 1.何为目的基因？P76用于改变受体细胞性状和获得预期表达产物的基因，主要指编码蛋白质的基因 库是由mRNA逆转录形成的，只包含真核细胞基因结构中外显子的序列，可在不同物种之间交流；
物细胞 哺乳 不的到溶丝解状。沉淀物、
方案： ①4℃冰箱静置后取 上清液 ②离心后取上清液
2mol/L的 NaCl溶液， 2只试管
二苯胺 沸水浴加热 蓝色
加①体低积温相放等置、几预分冷钟酒的精作（用体？积分数95%）静置，得白色丝状物 提②取搅方拌案时：应轻缓、并沿一个方向的原因？
①抑用制玻核璃酸棒水沿解一酶个的方活向性搅，拌进，而卷抑起制丝D状NA物降，解并；用抑滤制纸DN吸A分取子上面运 动的，水使DNA易形成沉淀析出；低温有利于增加DNA分子柔韧性，
6
●1.基因表达载体的构建目的？ ●2.基因表达载体组成？ ●3.基因表达载体各组成部分的作用？ ●4.转化的概念？ ●5.将目的基因导入受体细胞的方法及适用范围？
7
1.在培养有些转基因植物时，常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是什么？ 2.原理？ 3.采用农杆菌转化法导入目的基因时，为什么目的基因可以整合到染色体的DNA 上? 4.目的基因插入染色体DNA上的目的是什么？ 5.两次拼接、两次导入 6.转基因的植物细胞如何获得最终的新品种？
2025届高中生物学一轮复习检测案43 基因工程及生物技术的安全性与伦理问题(含解析)
检测案43基因工程及生物技术的安全性与伦理问题[基础巩固练]1．下列关于基因工程的叙述，错误的是（）A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B．限制性内切核酸酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达2．[2024·九省联考·安徽]依据《中华人民共和国生物安全法》，生物安全是指国家有效防范和应对危险生物因子及相关因素威胁，生物技术能够稳定健康发展，人民生命健康和生态系统相对处于没有危险和不受威胁的状态，生物领域具备维护国家安全和持续发展的能力。
下列叙述错误的是（）A．高致病性微生物须在高等级生物安全实验室中开展实验活动B．生物技术可广泛应用在人类自身基因组改造和新物种创造中C．外来入侵物种可能增加本土食物来源却给自然生态造成破坏D．动物饲料中的抗生素会通过食物链使人体微生物耐药性增强3．下列有关生物技术安全性和伦理问题的观点，不合理的是（）A．对于转基因技术，我们应该趋利避害，理性看待B．我国禁止生殖性克隆和治疗性克隆C．我国不发展、不生产、不储存生物武器，并反对其扩散D．对于基因检测应该保护个人遗传信息隐私权[提能强化练]4．[2024·九省联考·江西]萤火虫的荧光素酶能催化ATP激活的荧光素氧化发光，这一现象在生物检测和成像方面有重要的应用价值。
为了解决天然荧光素酶不能高效催化人工合成的荧光素DTZ发光的问题，研究人员采用蛋白质工程（又称为第二代基因工程）对它进行了改造。
下列关于蛋白质工程改造天然荧光素酶的叙述，正确的是（）A．通过化学诱变剂可定向改造天然荧光素酶的基因序列B．改造天然荧光素酶所用的基因表达载体不需要启动子和终止子C．可用PCR方法检测突变的荧光素酶基因是否翻译成蛋白质D．改造后的荧光素酶在一定条件下催化DTZ发光是将化学能转化为光能5．[2024·九省联考·甘肃]胰岛素可用于治疗糖尿病，我国科学家打破国外技术垄断，研发了拥有自主知识产权的重组人胰岛素药物，下列叙述错误的是（）A．用PCR技术扩增人胰岛素基因时，每次循环包括变性、复性、延伸三步B．构建人胰岛素基因表达载体时，需使用限制性内切核酸酶和DNA连接酶C．大肠杆菌细胞经Ca2＋处理后，更容易吸收重组的人胰岛素基因表达载体D．抗原—抗体杂交法能检测人胰岛素基因表达载体是否导入大肠杆菌细胞6．（不定项）人染色体DNA中存在串联重复序列，对这些序列进行体外扩增、电泳分离后可得到个体的DNA指纹图谱。
山东专用2024年高考生物一轮复习专题26基因工程与生物技术的安全性和伦理问题专题检测含解析
专题26 基因工程与生物技术的平安性和伦理问题专题检测 A组一、单项选择题1.(2025届浙江七彩阳光高三联考,9)若要使目的基因在受体细胞中表达,须要通过质粒等载体导入受体细胞而不能干脆将目的基因导入受体细胞,其缘由不包括( )A.目的基因无法插入受体细胞DNAB.目的基因无法复制C.目的基因无转录所需的启动部位D.目的基因与受体细胞遗传信息传递方式不同答案 D 目的基因无法插入受体细胞DNA,也无法完成复制,且缺少转录所需的启动部位,因此须要借助质粒等载体导入受体细胞,而目的基因与受体细胞遗传信息传递方式相同,这不是须要借助质粒等载体的缘由,D符合题意。
2.(2025届5·3改编)下面是4种限制酶所识别的DNA分子序列和剪切位点(↓表示剪切点、切出的断面为黏性末端):限制酶1:—↓GATC—。
限制酶2:—CATG↓—。
限制酶3:—G↓GATCC—。
限制酶4:—CCGC ↓GG—。
请指出下列哪项表达正确( )A.在运用限制酶的同时还须要解旋酶B.限制酶1和3剪出的黏性末端相同C.限制酶1、2、4识别的序列都由4个脱氧核苷酸组成D.限制酶1和2切出的DNA片段可通过T4DNA连接酶拼接答案 B 运用限制性核酸内切酶是为了切割目的基因和载体,不须要解旋酶解开DNA双螺旋,A错误;限制性核酸内切酶1和3切出的黏性末端相同,都是GATC—,B正确;限制性核酸内切酶1、2识别的序列都由4个脱氧核苷酸组成,限制酶3、4识别的序列都由6个脱氧核苷酸组成,C错误;限制性核酸内切酶1和2切割形成的DNA片段的黏性末端不同,前者是GATC —,后者是—CATG,不能通过T4DNA连接酶拼接,D错误。
3.(2024浙江宁波一模,25)为获得抗病毒的马铃薯植株,采纳转基因技术将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内。
下列相关叙述正确的是( )A.该转基因马铃薯植株产生的配子中,肯定含有目的基因B.将目的基因导入植物细胞可用农杆菌转化法或显微注射法C.由愈伤组织产生胚状体后再萌发形成完整植株的过程须要生根培育基D.转化了的马铃薯细胞在合适条件下经脱分化即可形成抗病毒马铃薯植株答案 B 若只将目的基因整合到马铃薯细胞的一条染色体上,则通过减数分裂产生的配子中不肯定含有目的基因,A错误;将目的基因导入植物细胞可用农杆菌转化法或显微注射法,B正确;由愈伤组织产生胚状体后再萌发形成完整植株的过程不须要生根培育基,C错误;转化了的马铃薯细胞在合适条件下经脱分化和再分化形成抗病毒马铃薯植株,D错误。
一轮复习基因工程
1.DNA重组技术的基本工具 2.基因工程的基本操作程序 3.基因工程的应用 4.基因工程的成果与发展前景 5.蛋白质工程的崛起
考向指南
•基因工程是生物工程的主要领域，常与其他技术组合运用 而达到定向改造生物的目的。试题中一般以具体实例对基 因工程的操作过程、基因工程的应用、当今基因工程的新 进展等进行考查，如2010年高考就侧重于基因工程有关知 识的考查。上海卷、江苏卷、全国2卷、广东卷等都有考题 出现。
___氨__苄__青__霉__素___的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是___A__(填字
母代号)。
A．启动子
B．tetR
C．复制原点 D．ampR
(3)过程①可采用的操作方法是___C_____(填字母代号)。
A．农杆菌转化
B．大肠杆菌转化
C．显微注射
D．细胞融合
DNA连接酶----“分子缝合针”
2．(2010·江苏生物，27)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位 点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
限制酶
BamHⅠ
HindⅢ
EcoRⅠ
SmaⅠ
识别序列及 G↓GATC C A↓AGCT T G↓AATT C CCC↓GGG 切割位点 C CTAG↑G T TCGA↑A C TTAA↑G GGG↑CCC
4．(2010·福建理综，32节选)红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的 一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限， 目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红 细胞生成素(rhEPO)，其简要生产流程如下图。
请回答： (1)图中①所指的是__P_C_R____技术。 (2)图中②所指的物质是__m_R__N_A__，③所指的 物质是__r_h_E__P_O_。 (4)检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单 克隆抗体。分泌该单克隆抗体的_杂__交__瘤___细 胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与 小鼠骨髓瘤细胞融合而成。