气相色谱法

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具体分析中要消除分流歧视，还应注意色谱柱的
初始温度尽可能的高一些，另外，在安装色谱柱 时要保证柱入口端超过了分流点，二是要保证柱 入口端处于气化室衬管的中央。通常在实际工作 中，只是在分流进样不能满足分析要求时（主要 是灵敏度要求），才考虑使用不分流进样。
2.3.3.1冷柱头进样 冷柱头进样是将样品直接注入处于室温 或更低温度下的色谱柱上，然后再逐步升 高温度使样品组分依次气化通过色谱柱进 行分离，这样就可以避免样品的热分解及 气化室死体积对样品的稀释与扩散作用， 适用于分析热不稳定化合物。此操作需要 特殊的注射器，而且容易有大量的不挥发 样品结在色谱柱进口端造成色谱柱的污染。
２.５.２.４
载气中含有氧气时，会使热丝寿命缩
短，所以，用ＴＣＤ时载气必须彻底 去除氧。而且不要使用聚四氟乙烯作 载气输送管，因为它会渗透氧。
２.５.３ ＥＣＤ操作条件及注意事项
２.５.３.１
ＥＣＤ是灵敏度最高的气相色谱检测 器。ＥＣＤ的放射源一般采用６３Ｎｉ， ＥＣＤ的操作温度一般为２５０～３０ ０℃，通常不应低于２５０ ℃ 。采用氚
临沂市药品检验所
2.3.1进样口和进样模式
2.3.3.1
填充柱进样口是目前最为常用、也是最 简单、最容易操作的GC进样口，该进样口 的作用就是提供一个样品气化室，所有气 化的样品都被载气带入色谱柱进行分离。 进样口可以配置、也可以不配置隔垫吹扫 装置。这种进样口可连接玻璃或不锈钢填 充柱，还可连接大口径毛细管柱作直接进 样分析。
2.2.2气路连接、气流指示和调节 如果采用高压钢瓶，在安装气瓶减压阀 时，应先将瓶口联结处的灰尘擦干净，将 瓶口向外，旋转阀门开关放气数次，吹除 灰尘，将减压阀用扳手拧紧，再用联接管 将减压阀出口联至气相色谱仪。用检漏液 （表面活性剂溶液）检查连接处气密性。
2.2.3气流的测量与气体的流速 气体的流速是以单位时间内通过色谱柱
硅胶变红时也要进行活化，方法是在烘 箱中，140℃左右加热2小时即可。大部分 GC仪器本身带有气体净化器，但也要注意 定期更换填料。即使这样的仪器，也应该 在气源和仪器之间附加一个净化装置。
目前氮气和氢气气源主要有高压钢瓶和气 体发生器两种，高压钢瓶的气体纯度高， 质量好，但是更换不方便。气体发生器使 用方便，但应注意气体的纯度。另外，空 气压缩机是以实验室空气为气体来源的， 且一些空气压缩机可能将油带入气体，故 有机杂质含量可能会高一些，要注意经常 更换净化装置。
气。氮气纯度最好使用99.9%的高纯氮。但
填充柱以火焰离子化检测器也可以采用
99.9%纯氮。实际工作中要在气源与仪器之
间连接气体净化装置。
气体中的杂质主要是一些永久气体、 低分子有机化合物和水蒸汽，一般采用 装有分子筛的过滤器以吸附有机杂质， 采用变色硅胶除去水蒸气。要定期更换 净化装置中的填料，分子筛可以重新活 化后再使用。活化方法是将分子筛从过 滤装置中取出，置于坩锅中，在马福炉 内加热到400-600℃，活化4-6小时。
2.4柱箱
柱箱温度的波动会影响色谱分析结果
的重现性，因此要求柱箱控温精度应在 1℃ ，柱箱温度波动小于±0.1 ℃ 。温度 控制分恒温和程序升温两种，前者用于简 单组分分析，后者用于复杂多组分分析。
2.5 检测器 气相色谱的检测器有：火焰离子化检 测器（FID）；热导检测器（TCD）；电 子俘获检测器（ECD）；火焰光度检测器 （FPD）；氮磷检测器（NPD）；光离子 化检测（PID）；红外光谱检测器（IRD） 和质谱检测器（MSD）等。在药物分析中 火焰离子化检测器(FID )是最常用的检测 器。
2.5.1.2 检测器温度
温度对FID检测器的灵敏度和噪声的影
响不显著，为防止检测器被污染，检测器 温度设置应不低于色谱柱实际工作的最高 温度，一般情况下，检测器的温度不应低 于150℃。
2.5.2 ＴＣＤ操作条件及注意事项
２.５.２.１
检测器温度和载气流速的波动影响
稳定性，故必须稳定。检测器温度一
或检测器的气体体积大小来表示（ml/min）。 现代仪器有电子流量检测器和电子压力控 制器，可编程控制柱头压力和载气流量。
2.3进样系统 进样系统包括样品引入装置（如手动微 量注射器，自动进样器以及顶空进样器） 和气化室（进样口）。进样量的大小、 进样时间的长短，直接影响到柱的分离 和最终定量结果。
2 气相色谱仪的组成
气相色谱仪由气路系统、进样系统、柱分 离系统、检测系统和数据采集系统组成。
检测系统 气路系统 进样 系统
H2,N2或Ar
分离系统
2.1仪器及性能要求
仪器应按国家技术监督局气相色谱仪 检定规程（JJG700-1999）的要求作定期 检定。
2.2 气路系统
2.2.1气源
载气有氮，氦，氢等，常用氦或氮作载
2.3.1.6顶空进样技术
气相色谱顶空进样技术广泛应用于药物中的残留有机溶剂 分析。顶空进样是通过样品基质上方的气体成分来测定这 些组分在原样品中的含量，是一种简单而有效的样品净化 方法。根据取样和进样方式的不同，顶空进样分为静态和 动态。静态顶空就是将样品溶液密封在一个容器（平衡瓶） 中，在一定温度下（平衡温度）加热一段时间（平衡时间） 使气液两相达到平衡，然后取气相部分进入GC分析，药 物中的残留有机溶剂分析通常采用这种顶空进样方法。动 态顶空进样是利用流动的气体（通常采用氦气）将样品中 的挥发性成分“吹扫”出来，再用一个捕集器将吹扫出来 的物质吸附下来，然后经热解吸附将样品送入GC进行分 析，这种技术通常叫做吹扫一捕集（purge trap）进样技 术，在环境分析中最为常用。
2.3.1.2 分流/不分流进样口
是最常用的毛细管柱进样口。它既可用作分 流进样，也可用作不分流进样。与填充柱进样 口相比，该进样口有分流气出口及其控制装置， 除了进样口前有一个控制阀外，在分流气路上 还有一个柱前压调节阀，而且二者使用的衬管 结构不同。分流进样适合于大部分可挥发样品，
能够有效的防止柱污染。
2.3.1.4程序升温气化进样
• 程序升温气化（PTV）进样是将液体或气体样品注射入 处于低温的进样口衬管内，然后按设定程序升高进样口温 度。此进样方式不需要特殊注射器，可有多种操作模式， 即分流模式、不分流模式和溶剂消除模式。PTV进样有以 下优点：
• 1消除了注射器针头的样品歧视，这与冷柱上进样类似；
顶空进样分为手动进样和自动进样，由于 手动进样的压力，温度以及进样量难以控 制，导致分析结果的重现性差，建议采用 自动顶空进样器。
2.3.1.7 热裂解进样技术将待测样品置于裂解装置 内，在严格控制的条件下加热使之迅速裂 解成可挥发的小分子产物，然后将裂解产 物转移到色谱柱直接进行分离分析。热裂 解进样技术通常应用于材料和生物大分子
般设定与柱温相同或高于柱温。
２.５.２.２
载气种类对ＴＣＤ的灵敏度影响较大。 原则上讲，载气与被测物的传热系数 之差越大越好，故理想的载气为氦气。 若不需高灵敏度时，也可采用氮。氢 的热导系数大，也可作为分析某些品
种的载气，但必须注意通风和安全。
２.５.２.３
在检测器通电之前，一定要确保载气 已经通过了检测器，否则，热丝就有 可能被烧断。同时，关机时一定要先 关检测器电源，然后关载气。任何时 候进行有可能切断通过ＴＣＤ的载气 流量的操作，都要先关闭检测器电源。
２.５.３.３
ＥＣＤ要避免与氧气或湿汽接触，否则 噪声会明显增大。因此，载气和尾吹气 都要求很好地净化。
２.５.３.４
因为ＥＣＤ都有放射源，故检测器出 口一定要用管道接到室外，最好接到 通风出口。没有经过特殊培训的人， 不能自己拆开ＥＣＤ每６个月要进行 一次放射性泄漏检查。
２.６ 色谱柱 色谱分析的好坏主要决定于色谱柱。 气相色谱柱按照色谱柱内径的大小和长 度，可分为填充柱和毛细管柱，前者的 内径在２～４ｍｍ，长度为１～１０ｍ 左右；后者内径在０．２～０．５ｍｍ，
2.5.1检测器操作条件及注意事项
2.5.1.1 气体流速
FID检测器需用5种不同的气体：载气、氢气 和空气，由于毛细管柱的柱内载气流量太低（常 规柱为1-5ml/min），不能满足检测器的最佳操作 条件，所以使用毛细管柱时要采用辅助气（尾吹 气），即在色谱柱后增加一路载气直接进入检测 器，就可保证检测器在高灵敏度状态下工作，尾 吹气的另一个重要作用是消除检测器死体积的柱 外效应。一般情况下，氮气（尾吹气;载气）、空 气和氢气三者的比例接近或等于1:10:1（如：氮 气30-40ml/min，空气300-400ml/min ，氢气3040ml/min ） 时，FID的灵敏度最高。
气 相 色 谱 法
1 基本原理
色谱法是利用混合物不同组分在固定相 和流动相中分配系数(或吸附系数、渗透 性等)的差异，使不同组分在作相对运动 的两相中进行反复分配，实现分离的分 析方法。
气——固色谱中被分离物随着载气的流动，被测 组分在吸附剂表面进行吸附，脱附，再吸附，再 脱附„„这样反复的过程不同物质在色谱柱中的 保留时间不同而达到分离的目的。 气——液色谱中被分离物随着载气的流动，被测 组分在固定液中进行溶解，挥发，再溶解，再挥 发„„的过程，使不同物质在色谱柱中的保留时 间不同而达到分离的目的。
在进行药物中残留有机溶剂检查时，应根据供 试品中残留溶剂的沸点选择平衡温度。对沸点较 高的残留溶剂，通常选择较高的平衡温度；但此 时应兼顾供试品的热分解特性，尽量避免供试品 产生的挥发性热分解产物对测定的干扰。平衡时 间一般不应少于30分钟，以保证供试品溶液的气 一液两相有足够的时间达到平衡。平衡的时间也 不宜过长，通常不应超过60分钟，否则可能使顶 空瓶的气密性变差导致定量准确性的降低。对照 品溶液与供试品溶液必须使用相同的顶空进样条 件。顶空样品瓶最好只用一次，若要反复使用， 建议的清洗方法是：先用洗涤剂清洗（太脏的瓶 子可用洗液浸泡），然后用蒸馏水洗，再用色谱 纯甲醇冲洗，置于烘箱中烘干备用。