实验5-10可见分光光度法测定微量铁(精)
(1)抗坏血酸性质不稳定，易氧化变质，最好现用现配。用抗坏血酸还原Fe3+时，酸度高些为宜(pH约为2)，因此应在加入抗坏血酸后，摇匀，再加缓冲溶液和显色剂。
(2)本实验所用的水试样，可以是天然水、工业用水或人工配制的含铁样。待测水样应无色透明，如有浑浊必须预先过滤。
(3)在标准系列的配制中，用（1+1）盐酸或（1+3）氨水调节溶液的pH时，可用以下操作方法预试：另取一个100mL容量瓶，加3.00mL铁标准溶液,再加水至约50mL，然后逐滴加入(1+1)盐酸或（1+3）氨水，用玻璃棒沾取溶液在pH试纸上试验，记录调至溶液pH为2时试剂的加入量（注意该瓶溶液不能用作绘制标准曲线）。在正式实验中，每个容量瓶加入同样量即可。
式中m——根据试样溶液的吸光度，从标准曲线上查出的铁含量，mg；
V——实验所取试样水的体积，L。
作业：实验报告
总结上次实验：
1,10-邻二氮菲在pH = 2~9的水溶液中，能与Fe2+生成稳定的橙红色配合物。试样中Fe3+可预先用还原剂还原为Fe2+。
本实验中用抗坏血酸还原Fe3+，控制溶液pH为4~6，用邻二氮菲显色。通过测绘显色溶液的光吸收曲线，求得λmax作为测定波长，测量一组铁标准溶液的吸光度，绘制标准曲线，并在相同条件下测定试样水中杂质铁的含量。
用吸量管分别吸取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL铁标准溶液于6个100 mL容量瓶中，加入50 mL水，用盐酸溶液或氨水调节pH为2，在各容量瓶中分别加入2.5 mL抗坏血酸溶液，摇匀，再加入10 mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液、5 mL邻二氮菲溶液，用水稀释至刻度，混匀。
(2)初步掌握分光光度计的使用方法，学习测绘光吸收曲线和选择测定波长；
(3)掌握利用标准曲线法进行定量分析的操作与数据处理方法。
实验原理
还原剂：抗坏血酸
显色剂：邻二氮菲
实验用品
分光光度计容量瓶(50 mL、100 mL)吸量管(5 mL、10 mL)
移液管(25 mL) pH试纸
铁标准溶液(0.010 mg·mL-1)试样水溶液（含Fe3+）
在选定波长下，用3cm玻璃吸收池分别取配制的标准系列显色溶液，以未加铁标准溶液的试剂溶液作参比，测定各溶液的吸光度。
用移液管移取试样水50.00 mL，置于100 mL容量瓶中，按配制标准系列同样的操作，顺序加入各种试剂进行还原和显色，并在同样条件下以未加铁标准溶液的试剂溶液作参比，测定试样溶液的吸光度。平行测定两份。
2
3
4
5
6
7
移取溶液体积/ mL
0.00
1.00
标液
2.00
标液
3.00
标液
4.00
标液
5.00
标液
50.00
水样
50.00
水样
100mL溶液含铁量/mg
—
—
吸光度
(2)以100 mL溶液中铁含量(mg)为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制吸光度对铁含量的标准曲线，从标准曲线上查出试样水的铁含量。
(3)按下式计算试样水中铁的质量浓度：
思考题：
(1)实验中加入抗坏血酸和乙酸-乙酸钠缓冲溶液的作用如何?为什么要预先调节溶液的pH为2?
(2)根据实验数据计算邻二氮菲-亚铁配合物的摩尔吸光系数。
用3 cm玻璃吸收池，取上述含4.00 mL铁标准溶液的显色溶液，以未加铁标准溶液的试剂溶液作参比，在分光光度计上从波长440～600 nm之间测定吸光度，一般每隔20 nm测定一个数据；在最大吸收波长附近，每隔5 nm测定一个数据。
以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线。从而选择测定铁的适宜波长。
实验5- 10可见分光光度法测定微量铁
检查预习情况：
1．检查预习笔记
2．提问：
（1）朗伯-比耳定律的物理意义是什么?什么叫吸收曲线?什么叫标准曲线?
（2）邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验中，用（）作还原剂，其化学反应方程式为（）；（）作显色剂，其化学反应方程式为（）。
目的要求
(1)了解利用可见分光光度法进行定量分析的原理和方法；
邻二氮菲溶液(2 g·L-1)抗坏血酸溶液(20 g·L-1)
乙酸-乙酸钠缓冲溶液(pH = 4.5)盐酸溶液(1+1)氨水(1+3)
实验步骤
(1)配制标准系列
(2)测绘吸收曲线
(3)测绘标准曲线
(4)测定试样中的铁含量
数据记录与处理
(1)将标准溶液的铁含量及实验中测得的数据填入下表：
容量瓶编号
0
1
实验报告-紫外-可见分光光度法测铁的含量-
课程实验者名称页数（）专业年级、班同组者姓名级别姓名实验日期年月日一、实验目的：1．了解朗伯-比尔定律的应用，掌握邻二氮菲法测定铁的原理；2．了解TU1901分光光度计的构造；3．掌握TU1901分光光度计的正确使用；4．学会吸收曲线的绘制和样品的测定原理。
二、实验原理邻菲啰啉是测定微量铁的较好试剂。
在pH＝2～9 的条件下，邻菲啰啉与Fe2+生成稳定的橙红色配合物，其lgK形＝21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104，其反应式如下：本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-，20倍Cr3+、Mn2+、V(V)、PO43-，5倍Co2+、Cu2+等均不干扰测定。
显色前首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+。
4 Fe3+ + 2NH2OH = 4 Fe2+ + N2O + H2O + 4H+三、仪器及试剂1. TU1901紫外可见分光光度计2、铁标准溶液：含铁0.01mg/mL。
3、0.1%邻菲罗啉水溶液；4、1%盐酸羟胺水溶液；5、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH4.6）：四、实验步骤课程实验者名称页数（）专业年级、班同组者姓名级别姓名实验日期年月日1．吸收曲线的绘制和测量波长的选择吸取0.0mL和6.0mL 铁标准溶液分别注入两个50 mL容量瓶中，依次加入5ml醋酸-醋酸钠缓冲溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
用1cm 比色皿，以试剂空白为参比，在440~560nm之间，每隔0.5nm测吸光度。
然后以波长为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。
2、标准曲线的绘制分别吸取铁的标准溶液0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml于6只50ml容量瓶中，依次分别加入5ml醋酸－醋酸钠缓冲溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，在其最大吸收波长下，用1cm比色皿，以试剂溶液为空白，测定各溶液的吸光度，以铁含量(mg/50ml)为横坐标，溶液相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
可见分光光度法测定水样中微量铁的含量
实验三 可见分光光度法测定水样中微量铁的含量一、实验目的：1、掌握722型分光光度计构造及使用方法。
2、掌握标准曲线的绘制，并通过标准曲线测出水样中Fe3+的含量。
二、实验原理：在可见光区的吸光光度测定中，若被测组份本身有色，则可直接测定。
若被测组份本身无色或色很浅，则可利用显色剂与其反应（即显色反应），使生成有色化合物，进行吸光度的测定。
大多数显色反应是络合反应。
对显色反应的要求是：1、灵敏度足够高，一般选择产物的摩尔吸光系数大的显色反应，以适合于微量组份的测定；2、选择性好，干扰少或容易消除；3、生成的有色化合物组成恒定，化学性质稳定，与显色剂有较大的颜色差别。
在建立一个新的吸光光度方法时，为了获得较高的灵敏度和准确度，应从显色反应和测量条件两个方面，考虑下列因素：1、研究被测离子、显色剂和有色化合物的吸收光谱，选择合适的测量波长；2、溶液PH值对吸光度的影响；3、显色剂用量、显色时间、颜色的稳定性及温度对吸光度的影响；4、被测离子符合比尔定律的浓度范围；5、干扰离子的影响及其排除的方法；6、参比溶液的选择。
此外，对方法的精密度和准确度，也需进行试验。
铁的显色试剂很多，例如硫氰酸铵、巯基乙酸、磺基水杨酸钠等。
邻二氮菲是测定微量铁的一种较好的试剂，它与二价铁离子反应，生成稳定的橙红色络合物（l g K稳=21.3），最大吸收波长入max=510nm。
Fe2+ + 22+此反应很灵敏，摩尔吸光系数ε为1.1×104。
在PH2~9之间，颜色深度与酸度无关，颜色很稳定，在有还原剂存在的条件下，颜色深度可以保持几个月不变。
本方法的选择性很高，相当于铁含量40倍Sn2+、A13+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-；20倍的Cr3+、Mn2+、VO3—、PO43—；5倍Co2+等均不干扰测定，所以此法应用很广。
分光光度法中，当入射光波长一定，溶液的温度一定，液层厚度一定时，根据Beer定律可得：A=K c即在一定条件下，吸光度与溶液的浓度成正比。
实验报告-物质的吸收光谱——分光光度法测定铁
实验报告-物质的吸收光谱——分光光度法测定铁实验报告⼀、实验名称：物质的吸收光谱——分光光度法测定铁⼆、实验⽬的：1.了解物质的分⼦吸收光谱及其测定⽅法。
初步了解⽐尔定理所反映的物质吸光度与浓度的关系。
2.学习分光光度计的使⽤和分光光度法测定的基本操作，测量溶液在不同波长处的吸光度。
3.学习实验数据的列表与绘图⽅法，绘制吸收曲线。
三、实验原理：1.各种物质分⼦各⾃对某些特定波长的光发⽣强的选择性吸收，形成各有特征的吸收光谱。
测量物质对不同波长光的选择性吸收，可以绘出其吸收程度随波长变化的关系曲线，称作吸收曲线或吸收光谱。
吸收光谱反映了被测物质的分⼦特性，可⽤以鉴别物质。
2.在特定波长下测量物质对光吸收的程度（吸光度A）与物质浓度之间的关系，可以进⾏定量测定。
这⼀吸光度与浓度的关系可⽤光的吸收定律即⽐尔（Beer）定律来表述：A=lg(1/T)=lg(I0 /I)=εbc式中A为吸光度，T为透光率，I0为⼊射光的强度，I为物质吸收后的透射光强度，ε为摩尔吸光系数，b为吸光光程（透光液层的厚度），c为溶液中物质的物质的量浓度。
当实验在同⼀条件下进⾏，⼊射光、吸光系数和液层厚度不变时，吸光度只随溶液的浓度变化，从⽽可以简单表达为A=KC。
3.邻⼆氮菲是测定微量铁的良好试剂，它与Fe2+ 反应，⽣成稳定的橙红⾊络合物铁—邻⼆氮菲配合物。
此反应很灵敏，反应平衡常数lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε为1.1*104 。
在Ph2-9范围内，颜⾊深度与酸度⽆关⽽且很稳定。
四、实验⽤品：U-5100分光光度计（1cm⽐⾊⽫⼀对）、50ml容量瓶4个、50ml烧杯2个、5ml移液管1⽀、10ml量杯3个、吸球1个、胶头滴管3⽀、塑料洗瓶1个、废液缸1个、铁标准溶液20µg/ml、盐酸羟胺10%、邻⼆氮菲0.15%、醋酸钠溶液1mol/L五、实验步骤及现象：1.将4个容量瓶分别标记为1、2、3、4号，然后⽤20µg/ml铁标准溶液润洗⼀个烧杯和移液管各3次，⽤移液管分别取1.00ml、2.00ml和4.00ml 20µg/ml的铁标准溶液于2、3、4号烧杯中。
实验 分光光度法测定微量铁
分光光度法测定微量铁
姓名###专业 化学工程与工艺 学号 2904090120 日期 2011 年 11 月 9 日 星期三
一、实验原理
吸光光度法是根据溶液中物质对光选择性的吸收而进行的分析方法。它具有较高的灵敏 度和一定的准确度，特别适宜于微量祖坟的测定。 吸光光度法测定微量铁的显色剂， 目前大多数采用邻二氮菲为显色剂。 在 pH=2~9 的挑件下， 二价铁离子与邻二氮菲生成稳定的橘红色络合物，络合物的 lgK=21.3 ，摩尔吸光系数为 1.1*104。 显色前要用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子，测定是应控制溶液浓度在 pH=5 左右为宜。 分光光度法测定物质含量是应注意的主要是显色反应的条件和测量吸光度的条件。显色 反应的条件有显色剂用量、介质的酸度、显色时间、显色时溶液的温度、干扰物质的消除方 法等。 测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液。 本实验帮助学生研究邻二氮菲测铁摘入射光波长、 络合物肉 on 工业的稳定性、 显色剂浓度、 溶液 pH 值的影响等几个方面确定实验的最佳条件。
条件实验 显色剂用量的选择
取 7 个 50mL 的容量瓶， 各加入 1mL 铁标准溶液， 1mL 盐酸羟胺， 摇匀。 在分别加入 0.1、 0.3、0.5、0.8、1.0、2.0、4.0mL 邻二氮菲和 5mLNaAc 溶液，以水实施至刻度，摇匀，放置 10min。用 1cm 比色皿，以蒸馏水为参比溶液，在选择波长系测定各溶液的吸光度。以邻二 氮菲溶液的体积 V 为横坐标，吸光度 A 为纵坐标，绘制 A 与 V 的关系的显色剂用量影响曲 线。得出测定铁是显色剂的最适宜用量。
没有干扰离子。 2、本实验量取各种试剂时应分别采用何种量器较为合适？为什么？ 答：应采用移液管或是滴定管，因为要准确量取物质的体积。 3、对所做的条件实验进行讨论并选择适宜的测量条件。 答：显色剂为 2mL 的邻二氮菲溶液，显色时间 10min 为宜。
分光光度法测定微量铁的含量实验报告(标准曲线的测绘与铁含量的测定)
分光光度法测定微量铁的含量实验报告（标准曲线的测绘与铁含量的测定）实验报告：分光光度法测定微量铁的含量一、实验目的1.学习分光光度法测定微量铁含量的原理和方法。
2.掌握标准曲线的测绘方法，了解线性回归方程及其应用。
3.学会利用分光光度计测定样品中微量铁的含量。
二、实验原理分光光度法是一种常用的定量分析方法，其原理基于朗伯-比尔定律。
当一束单色光通过溶液时，光被吸收的程度与溶液的浓度和液层厚度成正比。
在一定波长下，吸光度A与溶液浓度C和液层厚度L的乘积成正比，即A=εCL。
其中，ε为摩尔吸光系数，L为液层厚度，C为溶液浓度。
通过绘制标准曲线，可以求得铁的含量。
三、实验步骤1.准备试剂和仪器：硝酸、高氯酸、硫酸、铁标准溶液（100μg/mL）、分光光度计、比色皿、容量瓶（100mL）、吸量管（10mL、5mL、2mL）等。
2.绘制标准曲线：分别取10mL、5mL、2mL铁标准溶液于三个100mL容量瓶中，各加5mL硝酸，20mL硫酸，摇匀，用去离子水定容。
将各溶液分别移入比色皿中，用分光光度计在562nm波长下测量吸光度。
记录数据并绘制标准曲线。
3.测定样品中铁的含量：将样品溶液移入比色皿中，用分光光度计在562nm波长下测量吸光度。
根据标准曲线查得铁的浓度，计算样品中铁的含量。
四、结果与分析1.标准曲线测绘结果在坐标纸上绘制标准曲线，横坐标为铁标准溶液的浓度（μg/mL），纵坐标为吸光度。
根据实验数据绘制标准曲线（图1）。
可以看出，随着铁浓度的增加，吸光度也逐渐增大。
表明铁浓度与吸光度之间存在线性关系。
可以得出线性回归方程为：y=kx+b（k为斜率，b为截距）。
根据实验数据可计算出斜率k和截距b的值。
图1 标准曲线（请在此处插入标准曲线图）2.铁含量测定结果将样品溶液移入比色皿中，用分光光度计在562nm波长下测量吸光度。
根据标准曲线查得铁的浓度（μg/mL），计算样品中铁的含量（mg/L）。
结果如表1所示。
分光光度法测定铁含量及电导率测定实验报告
分光光度法测定铁含量及电导率测定实验报告实验目的：1.掌握分光光度法测定铁含量的原理和方法；2.了解电导率测定电解质浓度的原理和方法；3.进一步巩固实验操作技能。
实验仪器和试剂：1.分光光度计；2.微量移液器；3.分光比色皿；4.磁力搅拌器；5.pH计；6.铁标准溶液；7.亚硝酸钠；8.醋酸钠；9.硝酸铵；10.硝酸铜；11.硼砂。
实验步骤：一、分光光度法测定铁含量1.用亚硝酸钠溶液调节pH至4.0，加入适量的醋酸钠溶液。
2.用硝酸铵溶液稀释铁标准溶液，并进行涂带试验。
3. 将带样品的玻璃比色皿和带空白试液的玻璃比色皿放入分光光度计，设置波长为486 nm。
4.读取空白试液的吸光度值，并根据比色皿的参数设置计算出吸光度值。
5.读取含铁样品的吸光度值，并根据比色皿的参数设置计算出吸光度值。
6.根据标准曲线，计算含铁样品的铁含量。
二、电导率测定电解质浓度1.用砂纸轻轻打磨电导率计的电极，然后用纯水冲洗干净，再将电极插入样品中。
2.稳定后，读取电导率计上显示的电导率值。
3.根据所用溶液的电导率-浓度标准曲线，计算出样品的电解质浓度。
实验结果：通过分光光度法测定铁含量，得到的标准曲线如下：（标准曲线图）样品的吸光度值为0.345，据此计算出其铁含量为0.25 mg/L。
通过电导率法测定电解质浓度，得到的标准曲线如下：（标准曲线图）样品的电导率值为3.68 mS/cm，据此计算出其电解质浓度为1.25 mol/L。
实验讨论：1.通过实验得到的标准曲线可以用来测定其他含铁样品的铁含量，以及其他含电解质样品的电解质浓度。
2.在分光光度法中，应尽量减小空白试液与含铁样品的差异，以提高测量结果的准确性。
3.在电导率测定中，电导率计的电极应定期清洗和校正，以保证测量结果的准确性。
结论：通过分光光度法测定铁含量和电导率测定电解质浓度的实验，我们成功地测定了样品的铁含量和电解质浓度。
同时，通过实验掌握了分光光度法和电导率法的基本原理和方法，进一步巩固了实验操作技能。
实验分光光度法测定铁
实验分光光度法测定铁The following text is amended on 12 November 2020.实验十四邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一、实验目的1.学习吸光光度法测量波长的选择方法；2.掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理及方法；3.掌握分光光度计的使用方法。
二. 实验原理分光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法，分光光度法用于定量分析的理论基础是朗伯比尔定律，其数学表达式为：A=eb C邻二氮菲(乂称邻菲罗卩林)是测定微量铁的较好试剂，在pH二2〜9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。
摩尔吸光系数£ =11000 L • moE1• cm' ‘。
在显色前，用盐酸疑胺把Fe"还原为Fe=2F『+2NH；0HHClf 2Feh+\：+4H 十+ 2H：0+2C 厂Fe‘ + Phen = Fe‘ - Phen (橘红色)用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钻、银、铜、铅与试剂形成有色配合物；钩、釦、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、钮则在邻二氮菲铁配合物形成的pH范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。
三. 仪器与试剂1.醋酸钠：1 mol • L':；2.盐酸：6 mol • L"1；3.盐酸羟胺：10% (用时配制)；4-邻二氮菲(%):邻二氮菲溶解在lOOmLl: 1乙醇溶液中；5-铁标准溶液。
(1)100 ng-mf1铁标准溶液：准确称取(NH4) 2 Fe (SO,) 2 - 12H：0于烧杯中, 加入20 mL 6 mo 1・I?盐酸及少量水，移至1L容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀.6.仪器：7200型分光光度计及1 cm比色皿。
四、实验步骤1.系列标准溶液配制(1)用移液管吸取10mL100 u g • ml?铁标准溶液于100mL容量瓶中，加入2mL 6 mol - L"盐酸溶液,以水稀释至刻度,摇匀.此溶液F』浓度为10 u g • mL'1.(2)标准曲线的绘制：取50 mL比色管6个，用吸量管分别加入0 mL, 2 mL, 4 mL, 6 mL, 8 mL和10 mLlO u g • ml?铁标准溶液，各加1 mL盐酸羟胺，摇匀；经再加2mL邻二氮菲溶液，5mL酷酸钠溶液，摇匀，以水稀释至刻度，摇匀后放置lOmino 2.吸收曲线的绘制取上述标准溶液中的一个，在分光光度计上，用1 cm比色皿，以水为参比溶液，用不同的波长，从440〜560 nm,每隔10 nm测定一次吸光度，在最大吸收波长处每隔5nm测定一次吸光度。
分光光度法测定水中微量铁-微课
光 源
单色器
吸收池
检测器
数据处理系统
1) 可见光区用玻璃吸收池（比色皿）； 2) 吸收池用于盛放分析试样，使用前用试液润洗2-3次； 使用完毕后，立即用蒸馏水或有机溶剂冲洗干净，并擦 净水渍；比色皿透光面切勿直接用手接触，保持洁净， 先用滤纸吸干、再用擦镜纸擦净外部液体；
4 实验步骤
（1）配制溶液
5 思考与讨论
1.本实验中哪些试剂应准确加入，哪些不必严格准确 加入? 加入溶液的顺序能否颠倒？为什么? 2.加入乙酸钠的目的是什么?
谢谢！
分光光度法测定水中微量铁
黄 菊
分光光度法测定水中微量铁
1 实验目的
2 实验原理
3 仪器和试剂
4 实验步骤
5 思考与讨论
1 实验目的
1） 掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方 法原理。 2）掌握分光光度计的仪器构造和使用方法。
2 实验原理
朗伯-比耳定律: A= lgIi/It = -lgT =bc
3 仪器和试剂
1）主要仪器
仪器 规格/型号
分光光度计 T6新世纪紫外可见分光光度计(含比色皿)
容量瓶
移液管
50、100、1000mL等
1、2、5、10mL等
3 仪器和试剂
2）主要试剂
试剂 铁标准液
盐酸羟胺 邻二氮菲 乙酸钠
配制浓度 10 ug/mL
10 % 0.15 % 1 mol/L
仪器基本结构和使用注意事项
A--吸光度,表征物质对光吸收程度的量 Ii--入射光强 It--透射光强 T--透过率 --摩尔吸光系数 b--液层厚度（光程长度） c--被测物浓度
2 实验原理
根据朗伯-比耳定律：A=ε bc，当入射光波长λ 及光程b 一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质 的浓度c成正比。只要绘出A-c标准曲线，测出试液的吸光度， 就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样中铁的含量。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁【任务分析】邻二氮菲分光光度法测定微量铁是属于可见分光光度法测定无机离子的范畴。
本任务主通过本地自来水公司提供的含铁量数据选择紫外可见分光光度方法【任务实施】1、该实验包括两个部分的内容：一是通过实验进行分析条件的选择。
二是在选择好的分析条件下采用工作曲线法测定微量铁。
2、子任务一：分析条件的选择（1）准备试剂：①配制1000μg/mL的铁标准溶液做储备液，然后稀释得到10μg/mL的溶液作为使用液。
②配制盐酸羟胺溶液100g/L现配现用。
③邻二氮菲溶液1.5g/L，先用少量乙醇溶解，再用蒸馏水稀释至所需浓度（避光保存）。
④醋酸钠溶液1.0mol/L。
⑤氢氧化钠溶液1.0mol/L。
(2)按仪器使用说明书检查仪器。
开机预热20min，并调试至工作状态。
检查仪器波长的正确性和吸收池的配套性。
(3)绘制吸收曲线选择测量波长取两个50mL干净容量瓶；移取10μg/mL铁标准溶液5.00mL于其中一个50mL容量瓶中，然后在两容量瓶中各加入1mL100g/L盐酸羟胺溶液，摇匀。
放置2min后，各加入2mL 1.5g/L邻二氮菲溶液，5mL1.0mol/L醋酸钠溶液，用蒸馏水稀至刻线摇匀。
用2cm吸收池，以试剂空白为参比，在440～540nm间，每隔10nm测量一次吸光度。
在峰值附近每间隔5nm 测量一次。
以波长为横坐标，吸光度为纵坐标确定最大吸收波长A max。
注意！每加入一种试剂都必须摇匀。
改变入射光波长时，必须重新调节参比溶液吸光度为零。
现在一些型号的分光光度计连接电脑使用的时候可以自动扫描产生吸收曲线，速度较快，有条件可以尝试。
(4)有色配合物稳定性试验取两个洁净的容量瓶，用步骤(3)方法配制铁-邻二氮菲有色溶液和试剂空白溶液，放置约2min，立即用2cm吸收池，以试剂空白溶液为参比溶液，在选定的波长下测定吸光度。
以后隔10min、20min、30min、60min、120min测定一次吸光度并记录吸光度和时间。
分光光度法测定微量铁_实验报告
邻二氮杂菲分光光度法测定铁一、目的要求1. 了解分光光度计的基本结构及其使用方法。
2. 掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的实验技术。
3. 了解分光光度分析与测量条件的关系及其依据。
二、基本原理1. 光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应该注意的条件主要是显色反应的条件和测量吸光度的条件。
显色反应的条件有显色剂用量、介质的酸度、显色时溶液的温度、显色时间及干扰物质的消除方法等；测量吸光度的条件包含应选择的入射光波长、吸光度范围和参比溶液等。
2. 邻二氮杂菲-亚铁络合物：邻二氮杂菲是测定微量铁的一种较好试剂。
在pH=2~9的条件下Fe 2+离子与邻二氮杂菲生成极稳定的橘红色络合物，反应式如下：N N+Fe 2+2+此络合物的lgK 稳=21.3，摩尔吸光系数ε=1.1×104。
在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe 2+离子还原为Fe 3+离子，其反应式如下：32222222242Fe NH OH HCl Fe N H O H Cl +++-+→++++测定时，控制溶液酸度在pH5左右较为适宜。
酸度高时，反应进行较慢；酸度太低，则Fe 2+离子水解，影响显色。
Ba 2+、Cd 2+、Hg +、Ag +、Zn 2+等离子与显色剂生成沉淀，Ca 2+、Cu 2+、Ni 2+等离子则形成有色配合物。
当有这些离子共存时，应注意它们的干扰作用。
三、仪器和试剂1. 仪器：尤尼柯2000光度计；50 mL 容量瓶；1 mL ，2 mL ，5 mL 移液管。
2. 试剂：100μg/mL 铁标准溶液：准确称取0.864g 分析纯4422()12NH Fe SO H O 置于一烧杯中，以30mL 2 moL/L HCl 溶解后移入1000mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
10μg/mL 铁标准溶液：由100μg/mL 铁标准溶液准确稀释10倍而成。
10%盐酸羟胺溶液（因其不稳定，需临时配制） 0.1%邻二氮杂菲溶液（新配制）1 moL/LNaAc溶液。