人体寄生虫学实验实验5细粒棘球绦虫(包生绦虫)

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细粒棘球绦虫TSP8、TSP11基因的原核表达及免疫学初步分析

细粒棘球绦虫TSP8、TSP11基因的原核表达及免疫学初步分析

细粒棘球绦虫TSP8、TSP11基因的原核表达及免疫学初步分析细粒棘球绦虫TSP8、TSP11基因的原核表达及免疫学初步分析一、引言:细粒棘球绦虫是一种寄生在人体肠道的寄生虫,它会引起人类细粒棘球绦虫病,严重威胁人类健康。

目前,研究者发现该寄生虫中的TSP8和TSP11基因在其免疫逃避机制中起到了重要作用。

本实验旨在通过原核表达和免疫学初步分析,深入研究这两个基因的功能和作用机制。

二、材料与方法:1. 实验材料准备:从实验室中提取细粒棘球绦虫的DNA和RNA,使用PCR扩增得到TSP8和TSP11基因,并经过酶切后进行质粒重组和连接得到重组质粒。

2. 原核表达:将重组质粒转化到大肠杆菌中,经过培养、感染和蛋白表达诱导后,收集细胞株,并利用裂解液提取可溶性表达蛋白。

3. 免疫学初步分析:通过蛋白质电泳和Western blotting技术,对原核表达产物进行分析,检测TSP8和TSP11基因的表达情况。

同时,将表达蛋白经过新西兰大白兔免疫,收集血清进行间接ELISA、免疫荧光分析和血清中抗体效价的测定。

三、结果:1. 原核表达:将重组质粒转化到大肠杆菌中,经过培养、感染和蛋白表达诱导后,成功获得可溶性表达蛋白。

2. 免疫学初步分析:蛋白质电泳和Western blotting结果显示,TSP8和TSP11基因成功表达。

间接ELISA、免疫荧光分析和血清中抗体效价的测定结果表明,兔血清中出现了与TSP8和TSP11基因相关的特异性抗体。

四、讨论:1. 通过原核表达实验,证明了TSP8和TSP11基因在大肠杆菌中的成功表达,并成功获得可溶性表达蛋白,为下一步研究奠定了基础。

2. 免疫学初步分析结果表明,TSP8和TSP11基因能够诱导抗体的产生,说明这两个基因在细粒棘球绦虫的免疫逃避机制中起到重要作用。

3. 未来可以进一步研究TSP8和TSP11基因的具体功能和作用机制,以及它们与宿主免疫系统之间的相互作用。

人体寄生虫学——绦虫形态学观察及粪检

人体寄生虫学——绦虫形态学观察及粪检
绦虫形态学观察及粪检
教学目的: 了解:细粒棘球绦虫绦虫的成虫形态 理解:包生绦虫棘球蚴砂的组成和形态特点 掌握: 1、猪和牛肉绦虫头节、妊娠节、囊尾蚴和虫卵,以及曼氏迭宫
绦虫的裂头蚴和包生绦虫棘球蚴砂的形态特征 2、猪带绦虫、牛带绦虫、包生绦虫和曼氏迭宫绦虫病原学诊断
方法 3、粪便生理盐水直接涂片法检查蠕虫虫卵
猪囊尾蚴寄生于肌肉
猪带绦虫与牛带绦虫鉴别
体长 节片 头节
猪带绦虫
2-4 m 700-1000节,较薄,略透明 球形,有 顶突和小钩
牛带绦虫
4-8 m 1000-2000节,较厚,不透明 方形,无顶 突和小钩
孕节
子宫分支不整齐, 每侧7-13支
子宫分支整齐, 每侧15-30支, 支端分叉
囊尾蚴 头节有顶突和小钩,可寄生 头节无顶突和小钩,不寄生人体 人体
三、曼氏迭宫绦虫
(一)成虫
头 节
成虫长10-100cm。前部体节宽度大于长度,后部体节 长宽基本相等。头节呈指状,长1-1.5 mm,背腹面各有 1条纵行凹陷的吸槽
(二)虫卵
卫氏并殖吸虫卵和曼氏迭宫绦虫卵的区别
大小 形状 颜色 卵壳 卵黄细胞
卫氏并殖吸虫卵 (80-118)um×(48-60)um
牛带绦虫
乳白色,全长4~8米,较肥厚,链体共有1000~2000个 节片,幼节短宽,成节近方形,孕节比猪带绦虫孕节长
顶突 吸盘
吸盘
猪带绦虫头节
牛带绦虫头节
猪带绦虫孕节
牛带绦虫孕节
(二)囊尾蚴
猪囊尾蚴
牛囊尾蚴
白色半透明,卵圆形的囊状物,囊壁分两层,囊内充 满囊液,头节向内翻卷收缩,其形态与成虫头节相同
四、粪便直接涂片法

细粒棘球绦虫ppt课件

细粒棘球绦虫ppt课件
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羊肝、肺
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三、致病
棘球蚴对人体的危害以机械损害为主
1.局部压迫和刺激症状:肝、肺、脑和骨等部位寄生时 分别可有肝区痛、胸痛、头痛癫痫、骨折等症状 2.包块:触之坚韧,有弹性,扣诊有震颤感 3.毒性和超敏反应:食欲减退、消瘦、贫血、发育障 碍、荨麻疹、血管神经性水肿等 4.继发性病变:棘球蚴囊破裂引起继发感染 急性弥漫性腹膜炎;胆道阻塞、胆绞痛、黄疽等;窒 息、肺阻塞;过敏性休克,甚至死亡。
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3.棘球蚴
生发囊(育囊):
由生发层直
接发育而来,为仅有
吸盘 原头蚴
小钩
一层生发层的小囊,
直径约1mm,借小蒂
皮层 生发囊壁 角 皮 层
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与生发层相连,内含
几个至几十个原头蚴
胚层
3.棘球蚴
棘球蚴砂(hydatid sand):或称
囊砂,是从棘球蚴生发层上脱落而
悬浮于囊液中的原头蚴、生发囊和
六、防治
1.加强宣传教育,普及细粒棘球绦虫知识。 2.捕杀病犬,定期为牧犬驱虫。 3.对病畜内脏应焚烧,防止狼犬感染。 4.注意饮食卫生,防止食入虫卵。 5.治疗病人 手术为主,术中应务必取尽虫囊并避免囊液 外溢,以免造成过敏性休克或种植性扩散。 早期小棘球蚴:阿苯达唑、吡喹酮等
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思考题
1.猪带绦虫和牛带绦虫对人体的危害有何不同? 2.猪带绦虫驱出后,为什么要检查有无头节? 如无头节怎样办? 3.囊虫病的感染方式及临床分型? 4.如何诊断囊虫病? 5.包虫对人体的感染阶段是什么?为什么会在牧 区容易流行? 6.中绦期、棘球蚴砂?
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一、形态
2.虫卵
与猪、牛带绦虫卵光镜下难以区别

人体寄生虫学课件:绦虫

人体寄生虫学课件:绦虫

流行与防治
• 主要分布地区
– 云南、黑龙江、吉林、山东、河南和河北
• 主要流行因素
– 猪饲养不当,如连茅圈 – 人食肉习惯不当(加强肉类管理),“过桥米线”
• 治疗
– 猪带绦虫病:槟榔-南瓜子合剂驱虫效果良好。 – 囊尾蚴病:手术治疗;药物:吡喹酮、阿苯达唑。
Global distribution of Taenia solium cysticercosis/taeniasis
虫卵 —— 六钩蚴 —— 中绦期 —— 成虫
终宿主 中间宿主
链状带绦虫
Taenia solium
简介
➢ 链状带绦虫(Taenia solium)又称猪肉绦 虫、猪带绦虫或有钩绦虫。成虫寄生在人 体的小肠内,引起猪带绦虫病。其幼虫期 寄生于猪或人的肌肉和脑等组织内,引起 猪囊尾蚴病(猪囊虫病)。
➢ 我国古医藉中称之为白虫或寸白虫。
(metacestode) ,有多种幼虫形式。
绦虫主要特点
寄生于人体的绦虫分为假叶目和圆叶目两类:
— 假叶目:曼氏迭宫绦虫、阔节裂头绦虫等
生活史:需要2个中间宿主
1st中间宿主剑水蚤
2nd中间宿主鱼、蛙
终宿主
虫卵 —水 钩球蚴 ———— 原尾蚴 ———— 裂头蚴 —— 成虫
— 圆叶目:猪带绦虫、牛带绦虫、细粒棘球绦虫等 生活史:通常只需要1个中间宿主
不感染人体
六钩蚴经10周在肌肉等组 织中发育为囊尾蚴 六钩蚴孵出,钻入肠壁, 随血流到达肌肉等组织
牛因吞食受虫卵 或孕节污染的饲 料而感染
人因吃了生的或未煮熟的 含活囊尾蚴的肉而感染
虫卵或孕节随粪便 排出,污染环境
囊尾蚴在胆汁作用下翻出头节,在 小肠经2~3个月发育成熟,排出孕 节或虫卵

细粒棘球绦虫和棘球课件

细粒棘球绦虫和棘球课件
授课: 授课:任红斌
一、形态
成虫:体长为2~7 mm, 由头节、幼节、成节和 孕节各1节组成,或偶多 1节。 头节为梨形,具顶突、 吸盘、顶突上和小钩。 各节片均为扁长形,成 节与带绦虫相似。孕节 子宫不规则分支,内含 虫卵200~800个。
棘球蚴
为圆形囊状体, 为圆形囊状体,直径 可由不足1 可由不足 cm至数 至数 十厘米。 十厘米。 囊内充满囊液,微呈 囊内充满囊液, 黄色, 黄色,pH 6.7~7.8, ~ , 内含多种蛋白、肌醇、 内含多种蛋白、肌醇、 卵磷脂、 卵磷脂、尿素及少量 无机盐和酶, 糖、无机盐和酶,具 抗原性。 抗原性。
成虫寄生于终宿主( 成虫寄生于终宿主(犬、狼)小肠上段。 小肠上段。
Echinococcus granulosus (the small, white objects) in the small intestine of a dog. Although these tapeworms are quite small, a single dog can be infected with many of them.
六、防治
病原治疗
棘球蚴病以手术治疗为主 棘球蚴病以 手术治疗为主。 手术 治疗为主。 术前应服阿苯达唑以杀死原头蚴, 术前应服阿苯达唑以杀死原头蚴 , 可防止 播散与复发。 播散与复发。 行囊内摘除术时应先抽吸囊液, 行囊内摘除术时应先抽吸囊液 , 术中防止 囊液溢出而造成过敏性休克和腹腔继发感 染。 早期小的棘球蚴也可用药物治疗, 早期小的棘球蚴也可用药物治疗 , 可试用 阿苯达唑, 阿苯达唑 , 也可使用吡喹酮和甲苯咪唑等 药物。阿苯达唑用量为400 mg/d, 连服 药物 。 阿苯达唑用量为 , 连服3 d,该药有致畸作用,孕妇禁用。 ,该药有致畸作用,孕妇禁用。

包生绦虫

包生绦虫

症状:肝肿大,肝区疼痛,消化不良,恶心、
呕吐等。
2.肺棘球蚴病:
症状:咳嗽、咯血、胸痛等。
3.骨棘球蚴病: 症状:骨折(病理性) 4.脑棘球蚴病: 症状:头痛、呕吐、癫痫、瘫痪、昏迷等。 5.荨麻疹: 渗出的囊液引起过敏反应所致。 6.过敏性休克: 囊壁破裂,大量的囊液流入腹腔,引起Ⅰ型 变态反应。
化验:血红蛋白 15.6g %,白细胞计数 9600 /mm3,白细胞分类正常;尿检查正常,腹部 平片见有一钙化囊,肝扫描时,在腹部平片有 钙化囊的位置处见一缺损区,大约 8cm 大小。 胃肠钡餐检查,钡剂灌肠以胆道检查正常。寄 生虫抗原皮内试验为阳性。 1.据病例分析,患者很可能是患哪种寄生虫病? 2.该种病是如何感染的? 3.据体检和化验,该病在治疗中应注意什么?
(2) 甲苯咪唑: (3) 丙硫咪唑:(首选) 疗效好,副作用轻。 [复习思考题]
1.包生绦虫的成虫及棘球蚴有哪些特征?
2.试述包生绦虫的生活史?
3.包生绦虫的致病因素是什么?
患者男性, 49 岁,青岛市区出生,司机。 1993年 2 月,患者感到饭后 2小时左右在右腹部 有钝痛感。没有明显的发热、畏寒、皮疹、体 重减轻、恶心、呕吐或特异性食物过敏等症状。 平时喜饮凉水。自诉在“文革”期间去过西北 某建设兵团劳动三年,主要工作是养猪,也经 常和狗—起玩耍。 体检:血压 110/ 70mmHg( 14.7/ 9.33kPa), 呼吸16次/分,脉搏 82次/分,体温正常,体 重60kg。腹部柔软,右上腹突出,有中度压痛, 肝大肋下1cm,叩诊时肝大9cm,肠鸣音正常。
四、诊断:
(1) 皮内试验:
是目前的主要诊断方法。
(2) IHA:
是目前推广、应用的主要方法,阳性率可达 82%。 (3) ELISA:

细粒棘球绦虫(中)


• 棘球蚴在人体组织内寄生,常见的寄 生部位是肝(70%)、肺(22%)、 脑、骨等
三、致病作用

致病虫期:棘球蚴(包虫)
1、棘球蚴病(包虫病)
机理:棘球蚴在组织内寄生所致的占位性病变 特点:慢性病(类似良性肿瘤),临床类型与
寄生部位有关
临床类型:肝包虫病、肺包虫病、脑包虫病
•其他:眼包虫、骨包虫、脾包虫、肾包虫等
腹腔包虫手术前后
肝包虫和眼包虫病人
2、棘球蚴囊液引起的过敏和继发感染
棘球蚴囊一旦破裂
• 囊内原头蚴接触周围组织可引起多 发性种植性棘球蚴病(继发感染) • 因囊液具有很强的抗原性和过敏原 性,溢出可产生过敏反应,甚至发 生过敏性休克
腹腔多发包虫病
四、实验诊断

免疫学检查 辅助检查
• • • • X线检查(肺、骨包虫病) CT检查(脑、肝、脾、肾包虫病等) 超声波检查(肝、脾、肾包虫病等) 同位素扫描(肝包虫病等)

禁忌做棘球蚴囊肿穿刺
五、流行情况


地理分布
流行特征及因素
• 终宿主与中间宿主的存在 • 感染来源
六、防治
防治原则
• 减少与犬的接触,杜绝虫卵污染环境 • 治疗病人,首选手术治疗(内囊摘除 术)
• 药物治疗可选用丙硫咪唑,目前常用 丙硫咪唑做术后化疗
细粒棘球绦虫
Echinococcus grLeabharlann nulosus又称:包生绦虫
健康报
一、形态
1、成虫
• 小型绦虫 • 长约2-7mm • 结构特征
狗小肠壁上寄生的成虫
狗小肠寄生的细粒棘球绦虫成虫
细粒棘球绦虫成虫
2、虫卵
与猪带绦虫卵相似

寄生虫细粒棘球绦虫原虫概论阿米巴原虫

痢疾阿米巴生活史痢疾阿米巴生活史滋养体致病滋养体致病阶段寄生人阶段寄生人结肠壁组织内结肠壁组织内组织内滋养体脱落至组织内滋养体脱落至肠腔下行到横结肠肠腔下行到横结肠前包囊前包囊二次有二次有丝分裂丝分裂四核包囊感染阶段四核包囊感染阶段随粪排出随粪排出感染感染在回肠末端或结肠中在回肠末端或结肠中性或碱性环境下脱囊性或碱性环境下脱囊溶组织内阿米巴生活史简单溶组织内阿米巴生活史简单感染阶段
2021/7/24
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2. 虫卵:同带绦虫卵
3. 幼虫:呈球形囊状 体,直径1cm~10cm。
外层:角皮层 囊壁 内层:生发层
棘球蚴囊液 内含物 原头蚴
生发囊 子囊 孙囊
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❖生发层向囊内长出许
多原头蚴和生发囊。 生发囊是仅有一层胚 层的小囊,内含多个 原头蚴。原头蚴、生发囊可继续发育为 子囊。子囊也可由棘球蚴的生发层直接长出。
2021/7/24
2. 临床表现 (1)肠阿米巴病:稀便、便果酱色 、伴奇臭、带血和粘液、局限性腹痛、 胀气、里急后重、厌食、恶心呕吐等。
• 慢性期:长期间歇性腹泻、腹痛、胃肠 胀气和体重下降。
• 并发症:肠穿孔、继发性细菌性腹膜炎 。 2021/7/24
(2)有性生殖 :
① 接合生殖:纤毛虫。
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② 配子生殖:疟原虫。
分类
▪ 叶足纲(叶足虫):伪足运动。溶组织内
阿米巴。
▪ 动鞭纲(鞭毛虫):鞭毛运动。蓝氏贾第
鞭毛虫、阴道毛滴虫。
▪ 叶足纲(孢子虫):不运动,生活史复杂。
疟原虫、弓形虫。
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第七章 叶足虫
第一节 溶组织内阿米巴
溶组织内阿米巴包囊,三色染色。箭头 所指为拟染色体。

细粒棘球绦虫、微小膜壳绦虫

操作较简便,假阳性较少,特异性较高。 对肝棘球蚴感染的阳性率约为82%,肺 棘球蚴阳性率约为33~50%。 敏感性和特异性均超过间接血凝试 验,少有假阳性,已有试剂盒可供 使用。 操作简便、易观察,适 用基层使用。


斑点酶联免疫吸附 试验
亲合素-生物素-酶复合 物酶联免疫吸附试验
包虫病人皮肤试验(Casoni test)
包虫病的世界地理分布
2、流行区分型 棘球绦虫具有较广泛的宿主适应性,幼虫在不 同的中间宿主体内营无性增殖。成虫在自体受 精的过程中可产生突变类型,这些类型有可能 形成独特的遗传株系。 ①森林型(北极型) 分布于较寒冷的地带,以犬、 狼和鹿之间形成野生动物循环。
②畜牧型 呈全世界性分布,以犬和偶蹄类家畜 之间循环为特点,其中又有羊/犬、牛/犬、猪/ 犬等不同类型。
• 细粒棘球绦虫,又称包生绦虫或犬绦虫。成 虫寄生于犬、豺、狼等犬科动物小肠内; • 幼虫(称棘球蚴或包虫)可寄生于人和多种 食草动物(主要为家畜牛、羊等)的组织器 官内,引起包虫病或称棘球蚴病(hydatid disease, hydatidosis, echinococcosis)。
• 是一种人兽共患性寄生虫病。至今,其流行 已成为全球性的公共卫生问题。
棘 球 蚴 砂
(hydatid sand)
棘球蚴模式图
角皮层 生发层 孙囊 子囊 原头蚴 生发囊 囊液 生发囊 子囊 原头蚴
囊砂
二. 生 活 史
生活史
成虫(终宿主犬、狼小肠) 虫卵/孕节 随粪排出污染牧 草、蔬菜、水 犬、狼食入牛 羊内脏 中间宿主:羊、 牛等 人(棘球蚴 病/包虫病) 六钩蚴(小肠)
• • • • 呈球形; 直径平均34µ m; 壳薄易脱落; 壳内为胚膜,较厚, 棕黄色光镜下呈放射 状条纹; • 内含六钩蚴有3对小钩。

细粒棘球绦虫

⑴卡松尼皮内实验 ⑵检测抗体
ELISA、对流免疫电泳(CIEP)、间接血凝实验
⑶检测循环抗原和循环免疫复合物 ⑷血常规
五、流行与防治
(一)流行 细粒棘球绦虫有较广泛的宿主适应性,分布 遍及世界各大洲牧区,我国是世界上棘球蚴病流 行最严重的国家之一,主要流行区在我国西部和 北部广大农牧地区,即新疆、青海、甘肃、宁夏、 西藏、内蒙和四川7省区,其次是陕西、山西和河 北部分地区。迄今全国已有23个省、市、区证实 有当地感染的病人。
(二)防治 1.加强健康教育 2.加强肉类检疫,严格处理病畜内脏和尸体 3.捕杀病犬或定期检查和给予吡喹酮驱虫治 疗 4.治疗患者
(3)幼虫
①棘球蚴或包虫 ②单房性囊,由囊壁和囊内含 物组成 。前者包括角皮层和生 发层,后者包括生发囊、原头 蚴、囊液等。
三、致病及临床
(一)、致病 人误食虫卵而感染,棘球蚴对人体的危害以 机械损害为主,严重程度取决于棘球蚴的体积、 数量、寄生时间和部位。因棘球蚴生长缓慢,往 往在感染后5~20年才出现症状。六钩蚴从虫卵 孵出后侵入肠壁随门静脉入肝,大多在肝脏形成 棘球蚴,少数通过肝脏血窦、肝静脉、右心入肺, 通过肺微血管、左心进入循环者可进入全身各器 官组织。
成虫寄生在终宿主小肠,以顶突上的小钩和吸盘固着 在肠绒毛基部隐窝内、孕节或虫卵随宿主粪便排出。孕节 有较强的活动能力,可沿草地或植物蠕动爬行,致使虫卵 污染动物皮毛和周围环境,包括牧场、畜舍、蔬菜、土壤 及水源等。当中间宿主吞食了虫卵和孕节后,六钩蚴在其 肠内孵出,然后钻入肠壁,经血循环至肝、肺等器官,经 3~5个月发育成直径为1~3cm的棘球蚴。棘球蚴所含的每 个原头蚴都可发育为一条成虫,从感染至发育成熟排出虫 卵和孕节约需8周时间。大多数成虫寿命约5~6个月。
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Hydatid in liver
Hydatid sand consist of protoscolex, brood capsules, & daughter/ granddaughter cysts
肝部B超检查
脑CT检查
肝部CT检查
胸部X光片
Hydatid cyst
腹 部 包 虫 病 患 者
中间宿主和终宿主
曼氏迭宫绦虫

(一)目的要求:了解成虫和裂头蚴的形态特征。 (二)实验内容: 1.成虫(大体标本) 2.裂头蚴(大体标 3.头节(玻片染色标本 4.寄生于蛇、蛙体内的裂头蚴(瓶装标本)
常见的裂头蚴病有
1.眼裂头蚴病(占80%)phyllidea(假)
Vitelline follicles
uterus Deferens cirrus pouch ovary
Vitelline
Cyclophyllidea(圆)
细粒棘球绦虫(包生绦虫)

(一)目的要求:了解成虫和幼虫的形态特征。 (二) 实验内容: 1. 自看标本:成虫(玻片染色标本) 2. 示教标本:成虫(玻片染色标本) 受染棘球蚴的动物肝脏(病理标本)
幼虫(细粒棘球蚴)
圆形囊状物 直径由不足1cm至10cm 由囊壁和囊内容物组囊 液成 囊内容物:生发囊、原头 蚴、囊液、子囊、孙囊
(游走性皮下包块或结节) 3.口腔颌面部裂头蚴病 4.脑裂头蚴病 5.内脏裂头蚴病
出现眼睑肿胀, 结膜充血、水肿 、畏光、流泪等
眼裂头蚴病
Pseudophyllidea (假叶目)
Cyclophyllidea (圆叶目)
Vasa efferens 输出管
Testes
Seminal vesicle 输精管
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