标准品稀释液的配制
人免疫球蛋白G(IgG) ELISA检测方法及步骤
人免疫球蛋白G(IgG) ELISA检测方法及步骤人(Human) 免疫球蛋白G (IgG) ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：IgG试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IgG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将IgG和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中IgG的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：80g/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗IgG抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3．不用的其它试剂应包装好或盖好。
达安新冠PCR试剂盒说明书
达安新冠PCR试剂盒说明书试剂盒组成及试剂配制：1.酶联板（Assayplate）：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3.样品稀释液（SampleDiluent）：1×20ml/瓶4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibodyDiluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidinDiluent）：1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）8.底物溶液（TMBSubstrate）：1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液（WashBuffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10.终止液（StopSolution）：1×10ml/瓶（2NH2SO4）。
样本处理及要求：1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g 离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3.组织匀浆：用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。
为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。
将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
BCA蛋白定量
BCA蛋白定量试剂盒配制及内部操作SOP一、BCA试剂盒配制流程1、标准品配制：配制2mg/ml的BSA标准品，以50ml为例，各成分加入量如下表：原料浓度加入量（mg）厂家货号牛血清白蛋白（BSA）0.2%100北京（二楼生产部提供）YSCW2500氯化钠（NaCl）0.9%450国药集团化学试剂有限公司10019308叠氮化钠0.05%25成都金山化学试剂有限公司/注意：为了确保检测的准确性，应用微量天平精准称量100mg，然后定容至50ml，1ml/管分装，4℃保存。
2、工作液配制由于A液和B液加入比例为50:1，因此配制工作液时A液各成分加入量按照1000ml配制量加入，B液成分按照25ml配制量加入。
原料浓度加入量（g）厂家货号A液（1000ml）二喹啉甲酸（BCA）1％10aladdin B107658无水碳酸钠2％20天津博迪化工股份有限公司/碳酸氢钠0.95%9.5国药集团化学试剂有限公司10018960酒石酸钠0.16% 1.6国药集团化学试剂有限公司30169818氢氧化钠0.4％4国药集团化学试剂有限公司10019762B液（25ml）硫酸铜4％1国药集团化学试剂有限公司81005261备注：A液各成分混合之后，调节PH至11.25。
二、BCA法蛋白定量操作SOP1、标准品稀释按照下表制备一组蛋白质标准品。
将一安瓿的牛血清白蛋白标准品（BSA）稀释到几个干净的小瓶中，最好使用与待测样品相同的缓冲液。
每一个1mL安瓿的2mg/mL牛血清白蛋白标准品足够用于制备下表中所列出的任意一组稀释范围的标准品；每个稀释浓度的标准品的体积足够用于3次重复检测。
用于标准方案的稀释方法（检测范围=20-2,000ug/mL）如下：标准液编号稀释液体积（ul）标准品体积（ul）标准液终浓度（ug/ml）A03002000B125375ul的A1500C325325ul的A1000D175175ul的B750E325325ul的C500F325325ul的E250G325325ul的F125H400100ul的G25I40000用于试管增强方案的稀释方法如下（检测范围=5–250ug/mL）：标准液编号稀释液体积（ul）标准品体积（ul）标准液终浓度（ug/ml）A700100250B400400ul的A125C450300ul的B50D400400ul的C25E400100ul的D5F400002.样品稀释：根据需要，将样品用用PBS或者与待测样品缓冲液相同的溶液稀释至线性范围内（所用稀释液与标准品稀释液应保持一致）。
农药标准品的管理及标样配制操作规程
农药标准品的管理及标样配制操作规程10.1纯标准品的验收及储存管理10.1.1当纯标准品到货后，首先检查包装情况，有否损坏、渗漏及密封状况，以便决定是否同意接收这批货物。
如接收，在药瓶标签上记录接收日期、编上系列号、SR和瓶号。
10.1.2 将收到纯标准品的种类号、SR名称、纯度、失效期、来源、接收日期、接收人、重量等根据药瓶标签上的内容及邮寄材料，逐一填写在“农药标准物数据表”上。
（表—1）10.1.3在合适的储藏条件下储存标准品，纯标准品应放在塑料盒或放干燥剂的瓶里，储存在冷冻冰箱内（-5~-15℃）并锁住，有专人负责检查记录温控变化情况。
10.1.4准备一个专用登记本，无论何时取用纯标准品时，记下其化学名称、SR日期、用量并署名。
10.1.5标准品瓶被打开后，在重新储存前应迅速充入氮气，拧紧瓶盖后用聚四氟乙烯胶带密封。
10.2农药标准贮备液（1000μg/ml）的制备及储存由农药标样制备部门提供每种农药标准贮备液1000μg/ml （安瓿瓶），六个月更新一次，按如下程序配制标准贮备液。
10.2.1从冷冻冰箱内取出所需纯标准品，放至室温。
10.2.2取出储备液制备表或混合标液制备表，填写每种需制备的溶液。
10.2.3使用能够精确至万分之一的分析天平，称量空的称量舟或容量瓶，记下重量，用一个小刮铲或玻璃吸管将纯标准品小心导入称量舟或容量瓶中。
易挥发液体在小容量瓶中，加入少量溶剂，在溶剂液面下小心加入纯标准品，记下最后重量。
10.2.4若使用称量舟称量，用溶剂将全部称量物冲入容量瓶，并烯释至刻度，在超声波振荡器上振荡30秒或更长，直到纯品全部溶解，混匀。
10.2.5计算纯标准品的净重，用已知的标准品纯度值与稀释体积，计算出浓度值mg/ml。
10.2.6由另一分析人员核对计算过程和制备表上的数据。
10.2.7为制备的储备液编号SS，即在所用纯标准品的SR后面加上称重时的顺序号A、B、C、……等，这个编号写在储备液制备表上。
ELISA样本准备及实验步骤
ELISA的标本准备在收集标本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用。
对于隔天再检测的标本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，最好-70℃冻存备用。
标本应避免反复冻融。
液体类标本包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
尿液：用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照此实行。
细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
培养细胞检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
组织标本切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
ELISA实验步骤工作原理（以VEGF ELISA Kit为例）血管内皮细胞生长因子（VEGF）是最重要的血管生长因子之一。
二个亚单位由二硫键连接，组成分子量46-48KDa的糖蛋白质。
索莱宝脂质过氧化物(LPO)含量检测试剂盒说明书
脂质过氧化物（LPO ）含量检测试剂盒说明书微量法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC5245规格：100T/96S产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体110mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体11mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×2瓶2-8℃保存试剂三液体4mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存稀释液液体20mL×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1.试剂二：临用前取1瓶试剂二加入7mL 蒸馏水，此试剂较难溶，可以在70℃加热并剧烈振荡以促进溶解，或者通过超声处理以促进溶解。
每次用前需检查是否有粉剂析出。
用不完的试剂可在2-8℃中保存一个月。
2.标准品：为1000nmol/mL 的标准溶液产品说明：脂质过氧化物（lipid hydroperoxide LPO ）是不饱和脂肪酸链经自由基或活性氧作用后产生的过氧化物。
病理情况下，脂质过氧化反应增强可导致原本低含量的LPO 升高。
LPO 含量升高会对细胞的结构和功能造成损伤，LPO 含量与机体免疫系统和衰老密切相关。
LPO在酸性条件下加热产生丙二醛（MDA），MDA 与硫代巴比妥酸(Thiobarbituric acid ，TBA)缩合，生成棕红色物质三甲川（3,5,5-三甲基恶唑-2,4-二酮），其最大吸收波长在 532nm ，进行比色后可估测样本中LPO 的含量。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵/匀浆器/细胞超声波破碎仪、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织：按照样本质量（g ）：提取液体积（mL ）为1:5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取MDA+ TBA3,5,5-Trimethyloxazolidine-2,4-dione (532 nm)LPO+液）加入提取液，冰浴匀浆；8000g 4℃离心10min，取上清置冰上待测。
BCA 蛋白定量中文说明thermo
说明书Pierce®BCA Protein Assay Kit（Pierce® BCA 蛋白定量分析试剂盒）NCI3225CH NCI3227CH2436.0目录号描述NCI3225CH Pierce BCA Protein Assay Kit（Pierce BCA 蛋白定量分析试剂盒），试剂可用于500 次试管或5000 次微孔板分析NCI3227CH Pierce BCA Protein Assay Kit（Pierce BCA 蛋白定量分析试剂盒），试剂可用于250 次试管或2500 次微孔板分析试剂盒组分：BCA 试剂A，1000mL（产品目录号NCI3225CH）或500mL（产品目录号NCI3225CH)。
含有溶解于0.1M 氢氧化钠中的碳酸钠、碳酸氢钠、二喹啉甲酸（BCA）以及酒石酸钠。
BCA 试剂B，25mL，含有4%的硫酸铜白蛋白标准品，2mg/mL，10 1mL 安瓿，包含浓度为2mg/mL 的牛血清白蛋白（BSA）和0.05%的叠氮化钠，溶解于0.9%生理盐水中。
储存：在收到试剂盒后将其储存于室温。
常温运输。
注：如果在寒冷天气进行运输，或在保存期间，试剂A 或试剂B 发生沉淀，可通过对溶液进行温和加热和搅拌，将沉淀溶解。
当试剂盒发生变色，或证明有微生物污染时，请将试剂丢弃。
目录产品简介 (2)标准品和工作液的制备（两种检测方案均适用） (3)试管检测方案（样品与工作液的比例=1:20） (4)微孔板检测方案（样品与工作液的比例=1:8） (6)常见问题及解决方案 (7)Thermo Scientific 相关产品 (8)附加信息 (9)参考文献 (11)产品简介Thermo Scientific Pierce BCA 蛋白定量分析试剂盒是一种基于二喹啉甲酸（BCA），利用比色法测定总蛋白浓度的蛋白定量试剂盒，可与去污剂兼容。
本方法将双缩脲反应和显色反应结合在一起：前者为在碱性介质中，蛋白质可将Cu2+还原成Cu1+ 的反应，后者为使用含有二喹啉甲酸（BCA）1 的独特试剂，利用比色法检测Cu1+，具有高灵敏度和高选择性的特点。
人血小板活化因子(PAF)分析检测ELISA试剂盒使用说明书
人血小板活化因子（PAF）分析检测ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用Purpose目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中转化生长因子（PAF）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血小板活化因子（PAF）水平。
用纯化的转化生长因子（PAF）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入转化生长因子（PAF），再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的转化生长因子（PAF）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人血小板活化因子（PAF）浓度。
试剂盒内容及其配制：试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）塑料膜板盖1块半块标准品：100ng/ml 1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）标准品稀释缓冲液1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）生物素标记的抗OT抗体1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）亲和链酶素-HRP 1瓶（12ml）1瓶（5ml）洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）底物A 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）底物B 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品：45μmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存自备材料：1. 蒸馏水。
1208肝素生物测定法
1208肝素生物测定法本法系用于肝素类产品的效价测定。
测定方法分为抗Ⅱa因子/抗Xa因子效价测定法和凝血时间测定法，凝血时间测定法又分为兔全血法、血浆复钙法、APTT法。
抗Ⅱa因子/抗Xa因子效价测定法本法系通过微量显色法比较肝素标准品与供试品抗Ⅱa因子和抗Xa因子的活性，以测定供试品的效价。
抗Ⅱa 因子测定法试剂（1）三羟甲基氨基甲烷-聚乙二醇6000缓冲液（pH8.4) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g，氯化钠10. 23g，乙二胺四醋酸二钠2.8g，聚乙二醇6000 l.0g，加水800ml使溶解，用盐酸调节pH值至8.4，用水稀释至1000ml。
（2）抗凝血酶溶液取抗凝血酶（ATⅢ)，加三羟甲基氨基甲烷-聚乙二醇6000缓冲液（pH8.4)溶解并稀释制成每lml中含抗凝血酶0.25IU的溶液。
（3）凝血酶溶液取凝血酶（FⅡa )，加三羟甲基氨基甲烷-聚乙二醇6000缓冲液（pH8.4)溶解并稀释制成每lml中约含5IU的溶液，调整浓度使其在以三羟甲基氨基甲烷-聚乙二醇6000缓冲液（pH8.4)代替肝素作为空白溶液（B1、B2）的抗Ⅱa因子实验中，在405nm波长处的吸光度值在0.8〜1.0。
（4）发色底物溶液取发色底物S-2238(或其他FⅡa特异性发色底物），加水制成0.003mol/L的溶液，临用前用水稀释至0.625mmol/L。
标准品溶液与稀释液的制备试验当日，取肝素标准品，复溶后制成标准品溶液。
取标准品溶液适量，加三羟甲基氨基甲烷-聚乙二醇6000缓冲液（pH8.4)分别稀释制成4 个不同浓度的溶液。
该浓度应在log剂量-反应的线性范围内，一般为每1ml中含0.0085〜0.035IU，相邻两浓度之比值（r）应相同。
供试品溶液与稀释液的制备除另有规定外，按供试品的标示量或估计效价（A T），用三羟甲基氨基甲烷-聚乙二醇6000缓冲液（pH8.4)，照标准品溶液与稀释液的制备法制成4 个不同浓度的溶液，相邻两浓度之比值（r）应与标准品相等，供试品与标准品各剂量组的反应值应相近。
小鼠酶联免疫检测试剂盒,小鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)酶联分析检测ELISA试剂盒使用说明书
小鼠酶联免疫检测试剂盒,小鼠粒细胞集落刺激因子（G-CSF）酶联分析检测ELISA试剂盒使用说明书国内权威的科研试剂供应商，乔羽生物专业经营进口分装和原装、国产的Elisa试剂盒，品质保证，技术严格，无效果退款退货。
Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆上海乔羽生物专业供应：使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本组织因子途径抑制物（G-CSF）含量。
试验原理：G-CSF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知G-CSF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将G-CSF和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中G-CSF的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48小鼠份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗G-CSF抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
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标准品稀释液的配制
标准品稀释液的配制方法可以根据不同实验要求进行调整，一般涉及到浓度和体积的计算。
下面是一种常见的配制方法：
1. 首先确定目标浓度和体积。
假设要配制500mL的稀释液，
浓度为1mg/mL。
2. 根据目标浓度和体积计算所需的标准品量。
如果已有浓度为10mg/mL的标准品溶液，那么需要取得的标准品量为500mL
x 1mg/mL ÷ 10mg/mL = 50mL。
3. 取出所需的标准品量，加入稀释瓶中。
4. 加入适量的溶剂，使总体积达到500mL。
5. 使用瓶塞或盖子密封瓶口，轻轻摇晃几次，使溶液充分混合。
经过以上步骤，标准品稀释液即可配制完成。
需要注意的是，实验中可能会有特殊的要求，请根据实验指引或相关要求进行准确的配制。