八角茴香提取物对番茄灰霉病菌的抑菌活性及作用机理初探
番茄灰霉病菌抗药性及抗药性控制研究的开题报告
番茄灰霉病菌抗药性及抗药性控制研究的开题报告题目：番茄灰霉病菌抗药性及抗药性控制研究一、研究背景和意义番茄灰霉病是一种广泛分布的病害，能够在番茄等多种植物上引起严重危害。
目前，化学防治是控制番茄灰霉病的主要方法。
然而，由于长期使用同一种或同一类杀菌剂，导致灰霉病菌产生抗药性，致使防治效果下降，增加了防治的难度。
因此，为了有效控制番茄灰霉病，研究番茄灰霉病菌的抗药性及抗药性的控制方法，具有重要的理论和现实意义。
这有利于优化防治措施，提高生产效益，降低防治成本，促进农业可持续发展。
二、研究内容和方法1.研究内容(1) 番茄灰霉病菌抗药性鉴定：从不同地区的灰霉病菌分离出不少于50份菌株，通过测定这些菌株的对不同杀菌剂的敏感度，探究灰霉病菌的抗药性状况。
(2) 分析抗药性形成的原因：通过比较不同抗药菌株与不易产生抗药性菌株在基因组中的差异，探索灰霉病菌抗药性形成的原因。
(3) 探究灰霉病菌的生物学特性：测定菌株的产孢量、侵染速度等指标，探究灰霉病菌不同药敏菌株的生物学特性与对药剂的抗性之间的相关性。
(4) 研究抗药性控制方法：通过筛选有效的抗菌剂或者结合化学药剂与生物剂（如拮抗菌）的联合使用，探究抗菌剂抗药性的控制方法。
2.研究方法(1) 分离纯化灰霉病菌菌株，并进行药效测定。
(2) 利用PCR扩增灰霉病菌抗药相关基因，并比较抗药菌株与不易产生抗药性菌株在基因组中的差异。
(3) 测定菌株的产孢量、侵染速度等指标，探究灰霉病菌不同药敏菌株的生物学特性。
(4) 筛选和测试抗菌剂或者结合化学药剂与生物剂（如拮抗菌）的联合使用，探究抗菌剂抗药性的控制方法。
三、预期研究结果(1) 建立灰霉病菌抗药性鉴定的实验方法。
(2) 筛选出具有控制灰霉病菌抗药性的有效药剂。
(3) 揭示灰霉病菌抗药性的形成机制，为后续的抗药性控制提供理论依据。
(4) 探究灰霉病菌生物学特性与对药剂抗性之间的相关性，利用这一结论建立更为科学的灰霉病防治策略。
次氯酸对番茄果实采后灰霉病的防治效果
次氯酸对番茄果实采后灰霉病的防治效果林勇文（漳州职业技术学院食品工程学院，福建漳州363000）摘要本研究采用抑菌圈法测定次氯酸水溶液对灰葡萄孢的抑菌效果，用浸泡法测定次氯酸水溶液对番茄果实灰霉病的防治效果。
通过一系列生测，比较不同有效氯含量的次氯酸水溶液对灰葡萄孢的抑菌效果及对番茄灰霉病菌防效。
结果表明，次氯酸水溶液对灰葡萄孢具有显著的抑制效果，且随着浓度的增加，抑菌效果也相应增强；次氯酸水溶液对番茄灰霉病也具有显著的防治效果，其中，有效氯含量为40mg/L的次氯酸水溶液处理组防效最高，达到83.92%。
本研究为蕃茄农业生产提供了一种简便、有效的防治和保鲜方法，提高果实的品质和市场竞争力。
关键词次氯酸；番茄果实；采后；灰霉病；灰葡萄孢中图分类号S511文献标识码A文章编号1007-7731（2023）23-24-0118-05Effects of chlorine dioxide on gray mold disease in postharvest tomato fruitLIN Yongwen（Food and Biological Engineering,Zhangzhou Institute of Technology,Zhangzhou363000,China）Abstract The inhibitory effect of chlorine dioxide water solution on Botrytis cinerea was determined by the inhibition zone method,while the disease control efficacy of chlorine dioxide water solution on postharvest tomato gray mold was measured using the soaking pared the antibacterial effect of chlorine dioxide water solution with different effective chlorine concentrations on B.cinerea and the disease control efficacy on tomato gray mold through a series of experiments.The results showed that chlorine dioxide water solution demonstrated significant inhibitory effects on B.cinerea,and the antibacterial effect increased correspondingly with the increase in concentration.The chlorine dioxide water solution also exhibited significant control efficacy against tomato gray mold,with the highest efficacy of 83.92%observed in the treatment group with an effective chlorine concentration of40mg/L.This study provides a simple and effective method for disease control and preservation in agricultural production,which was expected enhance fruit quality and market competitiveness.Keywords chlorine dioxide;tomato fruit;postharvest;gray mold;Botrytis cinerea番茄灰霉病是一种由真菌引起的病害，对番茄种植和产量会造成严重危害。
219455643_不同杀菌剂对西红柿灰霉病的防治效果比较
近年来，西红柿栽培面积日益扩大，其病害问题逐年加重，已成为西红柿生产过程中的一项重大障碍。
西红柿灰霉病是由灰葡萄孢菌感染而引发的一种重要病害，该病在全国范围内普遍发生，造成了严重的减产减收问题。
一般地块在发生灰霉病后，西红柿会减产20%-40%，而重症地块可能会减产60%以上。
西红柿灰霉病主要通过菌丝体以及分生孢子的形式存在于病残体内，或者以菌核的方式于土壤内越冬或者越夏[1]。
若条件适宜，经菌核萌发的分生孢子可在气流、雨水、农事操作或者露水等作用下散播，侵入到花器或者伤口内而染病。
低温高湿是灰霉病的主要发病因素，在18-23℃的温度范围内病菌最易滋生。
在温度为20℃，相对湿度持续超过90%时病害最为严重，该病一旦发生传播速度极快，会对西红柿的产量及品质造成严重影响，给种植户造成巨大的经济损失。
当前，防治西红柿灰霉病的主要方式为化学防治，常见防治药剂有百菌清、异菌脲、嘧霉胺等。
长期使用化学药剂尤其是内吸性杀菌剂，极容易导致灰葡萄孢菌产生抗药性，影响其防治效果[2]。
基于此，需要测量灰葡萄孢菌对常见化学杀菌剂的抗性水平，筛选出防治效果优异的杀菌剂，以满足农业生产需求。
本文对当前市场上常见的集中药剂测量了室内抑菌能力及田间病害防治效果，希望能够为西红柿灰霉病的防治提供理论依据。
1 材料及方法1.1 病原菌2019年，由某村采摘灰霉病西红柿，对灰霉病菌分离及纯化后，接种于PDA培养基（土豆200g、葡萄糖20g、琼脂15-20g、水1000ml），并置于1-4℃冰箱内保存备用。
1.2 供试药剂50%甲基托布津可视性粉剂由日本曹达株式会社提供；70%百菌清可湿性粉剂由日本曹达株式会社提供；20%禾益1号悬浮剂由浙江禾益农化有限公司提供；50%扑海因可湿性粉剂由法国罗纳普朗克公司提供；50%福美双可湿性粉剂由天津农药厂提供；40%施佳乐悬浮剂由法国安万特作物科学公司提供。
1.3 室内毒力测定采用抑制灰葡萄孢菌丝生长率的方法进行室内毒力测定。
不同杀菌剂对温室番茄灰霉病防控效果研究
番茄灰霉病是由灰葡萄孢菌（Pers）引起的一种侵染性真菌病害，尤其在温室大棚湿度较大时容易发生，发病后在田间传播速度较快，严重时造成烂果，对番茄生产的威胁极大[1-3]，是影响番茄安全生产的重中国果菜China Fruit &Vegetable栽培生理Cultivation Physiology收稿日期:2023-11-16第一作者简介:孙华之（1978—），女，农艺师，硕士，主要从事农业技术推广工作第44卷,第2期2024年2月不同杀菌剂对温室番茄灰霉病防控效果研究孙华之，王光辉，张乐（山东省济宁市任城区农业技术推广中心，山东济宁272100）摘要:为筛选有效防控番茄灰霉病的药剂，设置了5种不同药剂处理，调查其对番茄灰霉病的防控效果，以及对番茄产量的影响。
结果表明，各药剂处理均对灰霉病表现出一定的控制效果，其中以吡噻菌胺、啶酰菌胺处理的防效均较好，叶部病害防效超过80%，果部病害防效也超过80%，均显著高于其他药剂；从产量上来看，吡噻菌胺、啶酰菌胺处理的增产率均超过20%，可以作为灰霉病防控药剂的首选。
关键词:番茄；温室；灰霉病；防效；产量中图分类号：S432.4文献标志码：A文章编号：1008-1038(2024)02-0060-04DOI：10.19590/ki.1008-1038.2024.02.011Study on Control Efficacy of Five Fungicides AgainstTomato Gray MoldSUN Huazhi,WANG Guanghui,ZHANG Le(Agricultural Technology Extension Center in Rencheng District,Jining City,Shandong Province,Jining 272100,China)Abstract:In order to select highly effective fungicides to control the tomato gray mold,5treatments were setted,aiming to test the control efficiency against tomato gray mold and the influence to yield,using clear water as a control.The result showed that all treatments had control effect at different level except CK.The control effects of penthiopyrad and boscalid were better,with leaf disease control effects exceeding 80%and fruit disease control effects also exceeding 80%,all significantly higher than other pesticides.The increase rate of penthiopyrad and boscalid were more 20%,so the two fungicides were the first selection to control the disease in the future.Keywords:Tomato;greenhouse;gray mold;control efficacy;yield栽培生理要病害之一，可引起20%～30%的产量损失，局部严重地区可减产70%以上，甚至绝收[4-5]。
番茄灰霉生防菌xf的筛选、鉴定及生防因子的初步探索
尖孢镰刀 菌 的 数 量。Ｅｌａｄ 等 报 ［８］ 道 了 ２ 株 哈 茨 木霉可有效控制 大 豆 上 的 灰 霉 病，向 大 豆 叶 片 喷 洒发酵液能使灰霉病 降 低 ５０％ ～１００％。 生 物 防 治 所 使 用 的 菌 株 均 筛 选 于 自 然 界 ，对 环 境 友 好 ，也 解决了农药残留 问 题，为 植 物 病 害 的 防 治 带 来 新 手段。
目前，灰霉病 的 防 治 主 要 依 靠 于 化 学 农 药 和 栽培抗病品种。栽培抗病品种是防治病害的根本 措施，但育种工作 受 到 时 间 与 技 术 的 限 制 以 及 选 育的新品种抗病 单 一，因 此 选 育 出 有 效 抗 灰 霉 的 番茄品种还有待 解 决；而 化 学 农 药 防 治 虽 是 速 度 快、成 本 低 的 有 效 防 治 措 施，但 造 成 环 境 的 污 染， 且农药残留 问 题 已 是 人 们 关 注 的 焦 点 。 ［３－５］ 鉴 于 此 ，人 们 将 目 光 投 向 了 生 物 防 治 。 近 年 来 ，用 有 益 微生物和其代谢 产 物 防 治 植 物 病 害 时 有 报 道，杨 利敏等 在 ［１］ ２０１５ 年 报 道 了 一 株 枯 草 芽 孢 杆 菌 的 无菌发酵滤液在离体叶片上对番茄灰霉的防治效 果可达１００％。 娄 义 等 在 ［７］ ２０１８ 年 报 道 了 ３ 株 芽孢杆菌对番茄 种 子 的 胚 根、胚 轴 有 明 显 的 促 进 作 用 ，并 处 理 盆 栽 番 茄 后 ，通 过 改 变 番 茄 根 系 土 壤 中微生物的种群 变 化，从 而 有 效 减 少 了 病 原 真 菌
番茄灰霉生防菌 ＸＦ的筛选、鉴定及生防因子的初步探索
潘 晓 梅 ，李 昭 煜 ，石 晓 玲 ，林 胜 红 ，李 佳 佳 ，田 永 强
枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌对番茄灰霉病的防治效果
摘要：利用生物药剂防治番茄灰霉病可降低致病菌的抗药性，且对果品安全健康，对环境无污染。
为了研究枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌对番茄灰霉病的防治效果，在室内条件下研究枯草芽孢杆菌和哈茨木霉对番茄灰霉病致病菌灰葡萄孢菌拮抗作用的基础上，在田间条件下研究了二者不同用量对番茄灰霉病的防治效果。
室内对峙试验结果显示，枯草芽孢杆菌和哈茨木霉均对灰葡萄孢菌具有拮抗作用，且均对灰葡萄孢菌菌丝有直接的破坏作用；枯草芽孢杆菌发酵无菌滤液的抑菌效果随着稀释倍数的增大而逐渐降低，其中10倍稀释液的抑菌率达到80.95%，50倍稀释液的抑菌率仅为28.57%。
田间防效试验结果显示，枯草芽孢杆菌和哈茨木霉均对番茄灰霉病具有防治作用，其中枯草芽孢杆菌用量为1125g/hm 2、哈茨木霉用量为18000g/hm 2时防效最好，对叶片的防病效果分别为84.91%和85.85%，对果实的防病效果分别为90.00%和96.00%。
生物药剂枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌均可用于番茄灰霉病的防治。
关键词：番茄灰霉病；枯草芽孢杆菌；哈茨木霉菌；拮抗作用；防治效果中图分类号：S436.412文献标识码：A 文章编号：1008-1631（2024）01-0066-08收稿日期：2023-08-28基金项目：河北省蔬菜产业技术体系冀南高品质蔬菜技术提升岗位项目（HBCT2023100205）；石家庄市科技计划项目（229490132N ）作者简介：王丹丹（1991-），女，河北沧州人，农艺师，硕士，主要从事设施蔬菜栽培与生理研究。
E-mail ：yuwenhanzhu@126.com 。
通讯作者：耿晓彬（1973-），男，河北赵县人，高级农艺师，主要从事农业技术推广工作。
E-mail ：*****************。
Control Effects of Bacillus subtilis and Trichoderma harzianum on Tomato Gray MoldWANG Dan-dan 1，ZHANG Qing-yin 1，LI Yan 1，TIAN Dong-liang 1，CHEN Chang 2，QI Lian-fen 1，SHI Jian-hua 1，GAO Xi-biao 3，GENG Xiao-bin 1*（1.Shijiazhuang Academy of Agriculture and Forestry Sciences ，Shijiazhuang 050041，China ；2.Institute of Coastal Agriculture ，Hebei Academy of Agriculture and Forestry Sciences ，Caofeidian 063200，China ；3.Zhao County Agri-cultural Technology Service Center ，Zhao County 051530，China ）Abstract ：The use of biological agents to control tomato gray mold can reduce the resistance of pathogenic bac-teria ，and is safe and healthy for fruits ，without polluting the environment.In order to study the control effects of Bacillus subtilis and Trichoderma harzianum on tomato gray mold ，the antagonistic effects of B.subtilis and T.harzianum on the pathogenic bacterium Botrytis cinerea were studied under indoor condition.The control effects of different dosages of B.subtilis and T.harzianum on tomato gray mold was studied under field condition.The in-door confrontation test results showed that both B.subtilis and T.harzianum had antagonistic effects on B.cinerea ，and both had a direct destructive effect on its mycelium.The antibacterial effects of sterile filtrate from B.subtilis fermentation gradually decreased with the increasing of dilution ratio.Among them ，the antibacterial rate of 10fold dilution solution reached 80.95%，while the antibacterial rate of 50fold dilution solution was only 28.57%.The results of field control tests showed that both B.subtilis and T.harzianum had control effects ontomato gray mold.Among them ，the best control effect was achieved when the dosage of B.subtilis was 1125g/hm 2and T.harzianum was 18000g/hm 2.The control effectson leaves were 84.91%and 85.85%，respectively ，andon fruits were 90.00%and 96.00%，respectively.Bio-logical agents B.subtilis and T.harzianum can both control tomato gray mold ，reduce the resistance of pathogenic bacteria ，ensure the safety and health of fruits ，and have no pollution to environment.Key words ：Tomato gray mold ；Bacillus subtilis ；Trichoderma harzianum ；Antagonism ；Control effect王丹丹1，张庆银1，李燕1，田东良1，陈昶2，齐连芬1，师建华1，高西彪3，耿晓彬1*（1.石家庄市农林科学研究院，河北石家庄050041；2.河北省农林科学院滨海农业研究所，河北曹妃甸063200；3.赵县农业技术服务中心，河北赵县051530）枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌对番茄灰霉病的防治效果DOI ：10.12148/hbnykx.20240022河北农业科学，2024，28（1）：66-73，80Journal of Hebei Agricultural Sciences第1期番茄（Lycopersicon esculentum）是世界范围内栽培面积很广的蔬菜作物之一，也是中国设施栽培的主要蔬菜之一[1]。
贮藏时间和贮藏方式对八角茴香油质量及抑菌活性的影响
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材 料 与 试 剂
材料 ： 大 红八 角 ， 产地广西 ， ９～１ ０月 采 收 ， 购 于
农 贸市 场 大 红 八 角 整 果 （ 带种 子 ） 室 温 下 阴干 两
周， 粉碎 ， 过２ Ｏ目筛 ， 取筛 下 粉末备 用 。 供试 微 生 物 ： ３种 细菌 （ 大肠 杆 菌 、 产气 肠 杆 菌 、
法 提取 的八 角茴 香油 ， 其 主要成 分反 式茴 香脑 含量 及 抑菌 活性 比有 机 溶 剂 提 取 法 高 ¨ 。因 此 ， 本 文 以水 蒸 气蒸 馏法 提取 的八 角茴 香油 为试 材 ， 研 究 ３种不 同 贮 藏方 式 下八 角茴 香 油质 量 和 抑 菌 活性 随 时 间 的变 化规律 ， 探 讨影 响八 角茴香 油贮 藏稳 定性 的一些 因素
同贮 藏 方 式 下质 量和 抑 菌 活 性 随 时 间的 变 化 规 律 。 结 果 表 明 ： 水 蒸气蒸馏法提取的八角茴香 油共有 １ ２种 组 分 ， 主 要成 分 类 型是 苯 基 丙 烯 基 类 化 合 物 ， 其 中反 式 茴 香 脑 含 量 为 ９ ４ ． ８ ９ ７ ％ 。随着时 间的延长 ， 八 角 茴 香 油 质 量 和 抑 菌 活 性 均 有 一 定 程 度 下 降。 光 照 在 短 时 间 内对 八 角 茴 香 油 质 量 损 失 影 响 很 小 ， 温 度 对 质 量 损 失 有 较 大 影 响。
枯 草芽孢 杆 菌 ） ； ２种 酵 母 菌 （ 啤酒 酵 母 、 酿酒酵母 ） ； ２种霉 菌 （ 青霉 、 黑 曲霉 ） ， 由天 津农 学 院农 学 与 资 源 环 境学 院微 生 物 实 验 室 提 供 ， ４ ｏ ｃ斜 面保 存 ， 用 前 活 化 。培养 基 ： 牛 肉膏蛋 白胨 琼 脂 培养 基 （ 细菌 用 ） ； 酵 母 膏胨 葡萄 糖 琼 脂 培 养 基 （ 酵母 菌用 ） ； 马铃 薯 葡 萄 糖 琼脂 培养 基 （ 霉 菌用 ） 。 试剂 ： Ｎ ａ Ｃ １ 、 石油醚 （ ３ ０—６ Ｏ ｏ Ｃ） ， 无水 Ｎ ａ ： ｓ ０ 、
18种中药提取物对植物病原菌的抑制作用
采用载玻片法【 ，供试浓度为 ０１／ ，直接用孢 Ｊ 们 ． ｍＬ ｇ
子悬 浮液对 １ ． 制备 的提 取物 稀释 １ 即成 。 ２所 ０倍
（ｃｅｏｉｉ ｌｒｔ ｒｍ） 小麦 赤霉 病菌（ｕａｉｍ Ｓｌ ｔ ａｓ ｅｏｉ ｕ ， ｒ ｎ ｃ ｏ Ｆ ｓｒｕ
００ ｇｍＬ。中药 提取 物对 病 原菌 孢子 萌发 抑制 作 用 ．５ ／
供 试菌 种 ： 花枯 萎病 菌 （ ｕａｉｍｏｙｐ ｒｍ 棉 Ｆ ｓｒ ｕ ｘｓｏｕ ｆｐ ｖｓｆｃｕ ， 茄灰 霉病 菌 （ ｏｒｔ ｉ ｒａ ， ． ．ａｉ ｅｔｍ） 番 ｓ ｎ Ｂ ｔ ｉｃ ｅｅ ） ｙｓ ｒ
抑 制 率 均 在 ９ ％ 以上 ；防 己 、莪 术 和 白术 提 取物 对孢 子 萌发 抑 制 活 性 次 之 ， 抑 制 率 均 在 ７％ 以上 。 公 丁 香 、八 角 ０ ０
茴香 、川芎 、姜黄 、黄岑 、羌活、知母和当归等 ８ 中药作为植物源杀菌剂值得进一步研究。 种 关键词：植物源杀菌剂 ；中药提取物 ；抑菌活性
别报道Ｌ，本研究测试 了其提取物对几种重要植物 ７ Ｊ
病 原菌 的生物 活 性 ， 旨在 为发现 新 农药提 供 线索 。
１ 材 料 与 方 法
１１ 供 试材 料 ．
９５ ５ ℃左右 Ｐ ． ｍＬ ０ ＤＡ，摇 匀 ，倒入 灭菌 培养 皿 中 即 成 ， 使 带 毒 培 养 基 中 最 终 提 取 物 质 量 浓 度 为
ｇ ａ ｎ ａ ｕ 均 由西 北农 林科 技 大学 植 物病 理研 究 ｒ ｍｉｅ ｒｍ）
所 提供 。 ．
２ 结果与分析
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八角茴香提取物对番茄灰霉病菌的抑菌活性及作用机理初探我国植物资源丰富,植物本身及其代谢产物都蕴含着很丰富的利用价值,本文以反式茴香脑为研究对象,测定了其对20种植物病原真菌的生物活性,并对抑制效果最好的番茄灰霉病菌(Botrytis cineea)进行了进一步的研究,得到以下的实验结果:1.八角茴香提取物和反式茴香脑对供试病原菌的抑菌活性测定结果表明,二者对供试病原菌均有一定的抑制作用,并且二者对番茄灰霉病菌的抑制效果都很好。
根据初筛结果,进一步研究了八角茴香提取物和反式茴香脑的浓度变化与番茄灰霉病菌的抑菌活性之间的关系,发现其浓度变化和抑菌活性之间呈正相关。
八角茴香提取物和反式茴香脑的抑菌活性均在48h时达到最高值。
2.用浓度为1mg.mL-1的反式茴香脑处理番茄灰霉病原菌的菌丝后,在显微镜下可以观察到菌丝粗细程度不一,有的菌丝表面有凹凸,菌丝内溶物变少或者流失。
在测定菌丝电导率时,发现反式茴香脑使得溶液电导率增大,同时引起了菌丝体内可溶性蛋白、还原糖和丙酮酸含量不同程度的降低。
3.通过反式茴香脑对番茄灰霉病菌的转录组分析,6个样品中共获得44.00Gb Clean Data,各样品的Clean Data均达到7.31Gb,Q30碱基百分比在94.84%及以上。
分别将各样品的Clean Reads与指定的参考基因组进行序列比对,比对效率从79.88%到83.91%不等。
基于比对结果,发现新基因334个,其中173个得到功能注释,4731个基因的结构得到了优化。