纤维蛋白原clauss法检测原理
clauss法检测原理
clauss法检测原理宝子们，今天咱们来唠唠这个Clauss法检测原理呀。
这Clauss法呢，可是在凝血检测方面相当重要的一种方法呢。
咱先来说说这个检测到底是在干啥哈。
简单来讲呢，它主要是用来检测纤维蛋白原的含量的。
纤维蛋白原这个东西啊，就像是咱们身体里凝血系统的小工匠。
想象一下，咱们身体要是哪里不小心破了个小口子，就像房子墙上有个小缝儿似的，这纤维蛋白原就得赶紧工作，把这个小缝儿给补上，不让血一直流个不停。
那Clauss法是怎么知道纤维蛋白原到底有多少呢？这里面就有很有趣的小机制啦。
这个方法呀，它是利用了凝血酶的特殊能力。
凝血酶就像是一个超级指挥官，它能指挥纤维蛋白原发生变化。
当把凝血酶加到含有纤维蛋白原的样本里的时候，哇塞，就像魔法开始施展了一样。
凝血酶会把纤维蛋白原切割成纤维蛋白单体，这些纤维蛋白单体就像一个个小砖头，它们会很快地聚集在一起，形成纤维蛋白凝块。
这个凝块的形成速度和纤维蛋白原的含量可是有着超级密切的关系呢。
如果纤维蛋白原很多，那就像盖房子的时候砖头特别多一样，凝块形成得就快。
要是纤维蛋白原比较少呢，那凝块形成就慢腾腾的。
就好比盖房子，砖头少了，工人想快也快不起来呀。
咱再从微观角度来看看这个过程哈。
纤维蛋白原呢，它的分子结构就像是一个精心设计的小零件组合。
凝血酶就像一把精准的小剪刀，咔嚓咔嚓地把纤维蛋白原剪成合适的形状，让那些纤维蛋白单体能够顺利地手拉手，抱成团。
这个过程中，还有好多小细节呢。
比如说，周围的环境因素，像温度、pH值之类的，也会影响这个反应。
就像咱们人干活的时候，环境舒不舒服也很重要呀。
如果温度不合适，就像大冬天在外面干活，手都冻僵了，肯定干不快。
pH值要是不对，那就像是在一个乱糟糟的场地里干活，也会影响效率。
从仪器检测的角度来说呢，现在的仪器可聪明啦。
它们能够很精确地检测到凝块形成的时间。
然后根据这个时间，再通过一些已经设定好的算法，就能算出纤维蛋白原的含量啦。
clauss法
clauss法Clauss法（Clauss Assay）是目前血浆中凝血酶原（Fibrinogen）测定中最常用的方法之一。
其基本原理是通过凝血酶原的特异性、选择性和灵敏性来实现Fibrinogen的定量。
本文将从Clauss法的历史渊源、测定原理、操作方法以及应用范围等方面进行详细介绍。
一、历史渊源Clauss法的发明者是瑞士生物化学家Rolf Gruner （1921-1999）和美国生物化学家Karl Ludwig Clauss （1925-2000），他们两人都是卡尔斯鲁厄大学（University of Karlsruhe）的教授。
1957年，Gruner 和Clauss一起进行了一项关于血浆凝血因子的研究，他们尝试发现血浆中对凝血酶原的影响，并使用这种影响来确定Fibrinogen的量。
最终，他们建立了一种新的技术——Clauss法。
二、测定原理Clauss法测定Fibrinogen的原理是利用凝血酶原被凝血酶水解形成凝血纤维蛋白的特性。
当人体受到损伤后，凝血酶原被激活，产生的凝血酶将纤维原转变为纤维蛋白，形成凝块。
在Clauss法中，加入凝血酶使得凝血酶原被水解，而这个过程的速率和Fibrinogen的浓度成正比。
在实际操作中，将0.1 mL的稀释后的血浆样品与0.1 mL的0.02 mol/L CaCl2溶液混合，将混合物加入在37℃预热的玻璃管中，然后注入0.05 mL的人凝血酶溶液，同时使用琼脂法测定样品与人凝血酶混合后的凝块重量。
测定凝块重量与已知浓度Fibrinogen的标准品进行比较，从而计算出未知样品的Fibrinogen浓度。
三、操作方法1. 稀释血浆样品：将血浆样品稀释为适当的浓度，常见的是1:10、1:20 和1:40 三档。
多选择稀释质量值（比如0.2mL），计算出稀释液的体积，然后与样本一起混合。
2. 加入CaCl2溶液：在某些Clauss法的试剂盒中，CaCl2已经加入到了显色试剂中，因此不需要再单独加入CaCl2溶液。
纤维蛋白原测试原理
纤维蛋白原测试原理纤维蛋白原测试原理什么是纤维蛋白原？纤维蛋白原（Fibrinogen）是一种在血浆中存在的蛋白质。
它是凝血过程中的关键因子，可以转变为血凝块，起到止血和修复组织的作用。
为什么需要测试纤维蛋白原？纤维蛋白原测试被用于评估血液系统的凝血功能。
高或低的纤维蛋白原水平可能与出血或血栓相关。
通过准确测量纤维蛋白原浓度，可以帮助医生诊断和监测与凝血有关的疾病，如深静脉血栓形成（DVT）、肺栓塞等。
纤维蛋白原测试的原理是什么？纤维蛋白原测试基于凝血酶原时间（PT）和活化部分凝血活酶时间（APTT）两种常用的方法。
凝血酶原时间（PT）法1.准备血浆样本。
2.在一定条件下，将血浆加入试剂盒中。
3.添加凝血酶原激活剂和钙离子，观察血浆的凝聚情况。
4.计时，记录血浆的凝聚时间。
5.根据一个标准曲线，可以推算出纤维蛋白原浓度。
活化部分凝血活酶时间（APTT）法1.准备血浆样本。
2.在一定条件下，将血浆加入试剂盒中。
3.添加活化部分凝血活酶激活剂和钙离子，观察血浆的凝聚情况。
4.计时，记录血浆的凝聚时间。
5.根据一个标准曲线，可以推算出纤维蛋白原浓度。
纤维蛋白原测试的注意事项•这些测试通常在实验室中进行，需要专业人员进行操作和解读结果。
•在进行纤维蛋白原测试前，需要遵循设备和试剂盒的操作规范。
•准确测量纤维蛋白原的浓度有助于医生诊断和监测相关疾病，但仍需结合临床症状和其他实验室数据进行判断。
结论纤维蛋白原测试是评估血液凝聚能力的重要方法之一。
通过了解纤维蛋白原的测试原理，我们能更好地理解其在临床中的应用和意义。
然而，这项测试还需要进一步的研究和临床验证，以便为临床医生提供更准确、可靠的诊断结果。
纤维蛋白原测试的潜在问题和未来发展纤维蛋白原测试虽然在临床实践中起到了重要的作用，但仍然存在一些潜在问题需要解决。
首先，纤维蛋白原测试的结果受到一些生理因素的影响，例如年龄、性别、药物使用等，这可能导致结果的误差。
改良VonClauss法检测冷沉淀凝血因子中纤维蛋白原
龙源期刊网 改良Von Clauss法检测冷沉淀凝血因子中纤维蛋白原作者：胡海军等来源：《青春期健康·人口文化》2014年第04期【摘要】目的：规范血站冷沉淀凝血因子中纤维蛋白原的检测方法，简化操作步骤，提高准确性。
方法：根据Von Clauss法的原理，结合冷沉淀凝血因子中纤维蛋白原的浓度较高特点，将待测或参比血浆稀释比例由原来的10倍稀释调整为20倍稀释。
结果：纤维蛋白原的浓度对数与凝固时间的对数呈现良好的线性关系，相关系数r=-0.999，线性达到1.24～9.92g/L。
结论：血站使用的半自动或全自动血凝仪，内置的纤维蛋白原检测方法为经典的Von Clauss 法，但冷沉淀凝血因子中纤维蛋白原的浓度已超出其线性范围，检测前需手工稀释，将Von Clauss法进行改良后，样本无需稀释，其线性范围完全满足需求，既减少了试验步骤，又减少了因手工稀释带来的误差，提高了准确性。
【关键词】改良Von Clauss法冷沉淀凝血因子纤维蛋白原随着输血医学的不断发展，冷沉淀凝血因子的临床应用倍受国内外医学界的重视[1]。
冷沉淀凝血因子中含Ⅷ因子、纤维蛋白原、纤维结合蛋白、血管性血友病因子等，目前广泛应用于甲型血友病、血管性假性血友病、纤维蛋白缺乏症、DIC、烧伤以及其他出血性疾病的治疗。
冷沉淀凝血因子中Ⅷ因子和纤维蛋白原含量是直接影响治疗效果的重要因素，以2个单位的冷沉淀凝血因子为例，GB 18469-2012《全血及成分血质量要求》中要求纤维蛋白原含量≥150mg，Ⅷ因子含量≥80IU[2]。
血站质控科每月都会对按照制备量的1%或至少4袋进行抽样检测[3]，离心法制备的冷沉淀凝血因子容量为20～30ml，纤维蛋白原浓度一般至少在5g/L以上。
传统的检测方法为将样本进行稀释后检测，为了更好地对冷沉淀凝血因子中的纤维蛋白原进行质量控制，保证准确性，现对Von Clauss试验方法进行改良，报道如下：1材料与方法1.1材料希森美康生物科技（无锡）有限公司提供的纤维蛋白原测定试剂、TC缓冲液，希森美康医用电子（上海）有限公司提供的CA CLEAN I、标准血浆。
纤维蛋白原的检测方法及进展
改良的Jacobsson法
是WHO推荐的参考方法，为第1个血浆Fg国际标准品(89／644) 制备时所推荐使用的方法。该法准确并满足2项有效测定Fg的主 要标准：首先通过凝血酶将可凝固的Fg从血浆中分离出来，其 次使用了简便的分光光度法独立操作的定量步骤.
四．浊度法
该法原理是用凝血酶凝固的血浆，纤维蛋白形成 增加了浊度，并达到一个与Fg浓度成比例的最后 浊度。这种方法灵敏度低，对Fg的最低检测限为 0.5 g／L。
功能测定法利用Fg特异的2种生化反应，即凝血酶的蛋
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白水解作用和随后发生的纤维蛋白单体聚集为纤维蛋白
多聚体。在这些
方法中，通过加入凝血酶形成纤维蛋白凝块后的检测手
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段不同，又可分为重量测定法、酚试剂比色法、紫外光
度法、浊度法和凝血酶凝固时间法等。
一．重量测定法
将Fg转变成纤维蛋白凝块经反复洗涤脱水后，用精 密天平(精确到0．000 1 g)称重。该法简单，不需 要复杂的操作或精密仪器，技术误差很小。在80年 代有一些大型流行病学研究将该法作为参考方法
8.37 9.39 8.51 12.15 13.65 11.33 13.15 14.68 11.72 13.13 13.06 11.77 13.81 20.62 12.19
二．酚试剂比色法
在世界卫生组织(wH0)推荐的参考方法出来前曾作为参考方法。 该法将过量的凝血酶加入血浆中，将产生的纤维蛋白凝块洗涤 数次后溶于NaOH溶液中。用Folin—Ciocalteau酚试剂或Biuret 反应来测定。
紫外光度法
该法将纤维蛋白凝块溶解于碱性尿素溶液中，然
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后通过在280nm波长紫外光直接比色计算纤维蛋白
纤维蛋白单体生成后即开始聚合成纤维蛋白。在纤维蛋白稳定分子（ⅩⅢa） 作用下，经过共价交联的纤维蛋白网更加牢固。纤维蛋白与凝血酶有高亲 和力，因此纤维蛋白生成后即能吸附凝血酶，有助于局部血凝块的形成
纤维蛋白原FIB 美德太平洋凝血试剂
室温 18-25℃稳定 8 小时；
3．参比血浆（国际标准品）复溶后，-20℃密闭保存（37℃速融，
室温平衡 30 分钟），稳定 2 天
操作步骤
A． 样品的采集及试剂的重建
1. 待测血浆样品制备：静脉采血，109mM(3.2%)枸椽酸三钠与全
血按 1:9 比例混合均匀。以 2 500×g 离心 15 分钟，用塑料移液管
B． 维蛋白原标准曲线制备
1. 用 IBS 缓冲液按下图示，制备不同稀释度（浓度）的参比血浆，
以 TS4000 测定参比血浆（600mg/dl）为例，其配制方法如图：
2.按如下步骤测定：每份稀释血浆各重复测 2 次，求秒数均值
试杯中加入各稀释度参比血浆(或稀释患者血浆等) 200uL
加入测试磁珠
1粒
天津市美德太平洋精密仪器制造有限公司 地址：天津华苑产业园区海泰大厦 B 座 电话：+86-22-27837123 传真：+86-22-27837113
Clauss 方法可检测出其他 FIB 定量方法检测不出的 FIB 结构异常
的患者
试剂盒组成
1.凝血酶（冻干品）（100NIH/ml） 5×2.0ml
2.IBS 缓冲液
2×50ml
3 定标血浆
1×1.0ml
试剂有效期及稳定性
1. 原包装试剂 2-8℃密闭保存，有效期 12 个月。
2. 复溶后凝血酶 2—8℃密闭保存，稳定 5 天；
取出血浆，22-24℃保存的标本，血浆样品应在 2 小时内测试完毕。
2. FIB 试剂：按瓶签标明剂量，准确加入缓冲液，在室温下， 轻
轻涡旋 15S 左右，倒置 5 分钟后，轻轻颠倒混匀三次（溶下瓶盖
上试剂），直立静置 30 分钟。用前轻轻涡旋混匀备用。
纤维蛋白原(FIB)
纤维蛋白原（FIB）含量测定方法操作规程一.【产品名称】纤维蛋白原（FIB）含量测定试剂盒（凝固法）二.【预期用途】用于体外人血浆中纤维蛋白原含量测定,用于辅助诊断。
三.【临床意义】FIB含量增高：见于糖尿病及其酸中毒，动脉粥样硬化，急性传染病，急性肾炎尿毒症，休克，外科术后及轻度肝炎等。
FIB含量减低：见于DIC，原发性纤溶症，重症肝炎，肝硬化等。
四.【检验原理】采用Clauss凝固法原理，高浓度凝血酶存在时，待测稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋白原（FIB）含量成反比关系。
五.【主要组成成分】1.FIB凝血酶：5瓶/6瓶（内含凝血酶、缓冲液、高岭土、稳定剂、防腐剂）2. FIB定值血浆：1瓶，定值见瓶标FIB定值血浆经HBsAg、HIV抗体、HCV抗体检测，结果为阴性，但仍需如病人样本一样小心处理。
3.FIB缓冲液：2瓶（内含缓冲液、防腐剂）4.说明书：1份注：不同批号试剂盒中各组份不可互换。
六.【储存条件及有效期】未开启试剂于+2℃～+8℃保存可稳定至标签所示失效日期。
FIB凝血酶试剂复溶后于+2℃～+8℃可保存7天；4小时内-20℃冻存，可稳定20天，使用时37℃迅速解冻，勿反复冻融。
FIB定值血浆复溶后于+2℃～+8℃可保存8小时。
七.【适用仪器】血凝分析仪。
八.【样本要求】1. 静脉采血，置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸酸钠抗凝液（1份抗凝液+9份全血）的塑料管或硅化玻璃管中，轻轻颠倒混匀，3000rpm（或2500g）离心15分钟，收集上层液（血浆，黄色）。
2.不宜使用EDTA●Na2、肝素、草酸盐作为抗凝剂。
3.红细胞比容超过55%或小于20%时，应调整抗凝剂用量。
抗凝剂体积（ml）=0.00185x血液体积（ml）x（100 - 比容）。
4.样本采集避免溶血及组织液污染。
5.样本保存时间如下：+2℃～+8℃保存，不宜超过8小时。
九.【检验方法】1. 试剂重建与保存每瓶FIB凝血酶加入瓶标标示体积的蒸馏水，轻摇溶解。
临床医学检验学主治医师：血栓与止血的检验方法试题及答案
临床医学检验学主治医师：血栓与止血的检验方法试题及答案1、单选纤维蛋白原（Clauss法）的检测原理是以凝血酶作用于待测血浆中的纤维蛋白原，使其转变为纤维蛋白，血浆凝固。
血浆中的纤维蛋白原含量与凝固时间呈负（江南博哥）相关，检测结果与参比血浆制成的标准曲线对比可得出纤维蛋白原的含量。
纤维蛋白原成人参考值是（）.A.2～4mg/dlB.2～4g/LC.200～400g/dlD.200～400g/LE.2～4mg/L正确答案：B2、单选能够鉴别原发性纤溶和继发性纤溶的检查项目是（）.A.PTB.纤维蛋白原定量测定C.D-二聚体测定D.FDP定量测定E.1TT正确答案：C参考解析：D-二聚体在继发纤溶症为阳性或增高，而原发纤溶症为阴性不升高；在DIC时，为阳性或增高，是诊断DIC的重要依据。
3、单选纤维蛋白系统抑制物有（）.A.抗活化素B.组织活化素C.抗血浆素D.抗活化素和组织活化素E.α1-抗胰蛋白酶正确答案：E4、单选抗血友病球蛋白因子称为（）.A.Ⅻ因子B.Ⅹ因子C.Ⅸ因子D.Ⅷ因子E. Ⅱ因子正确答案：D参考解析：Ⅷ因子被称为抗血友病球蛋白因子。
Ⅷ因子抑制物阳性见于反复输血、接受抗血友病球蛋白治疗的血友病A患者、SLE、类风湿关节炎、溃疡性结肠炎、妊娠、恶性肿瘤、DM、结节病等。
5、单选关于APTT测定，下列说法错误的是（）.A.一般肝素治疗期间，APTT维持在正常对照的1.5～3.0倍为宜B.受检者的测定值较正常对照延长超过10秒以上才有病理意义C.APTT测定是反映外源凝血系统最常用的筛选试验D.在中、轻度FⅧ、FⅨ、FⅪ缺乏时，APTT可正常E.在DIC早期APTT缩短正确答案：C参考解析：APTT是一个敏感且可靠的检查内源凝血系统的筛选试验。
6、单选纤维蛋白及纤维蛋白原降解产生有（）.A.X，Y碎片B.X碎片C.X，Y，D碎片D.X，Y，D，E碎片E.D，E碎片正确答案：D7、单选属于二期止血缺陷筛查试验的是（）.A.凝血酶原时间测定B.血浆6-酮-前列腺素F1αC.血浆D-二聚体测定D.血浆蛋白C测定E.束臂试验正确答案：A参考解析：一期止血缺陷筛查试验包括出血时间和束臂试验；二期止血缺陷筛查试验包括凝血酶原时间测定和活化部分凝血活酶时间测定。
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标题：纤维蛋白原Clauss法检测原理解析
纤维蛋白原Clauss法是一种常用的纤维蛋白原定量检测方法，其基本原理是基于纤维蛋白原与凝血酶发生交联反应，通过测定交联物的量来反映纤维蛋白原的浓度。
首先，将血液样本加入特定的凝血酶溶液中，血液中的纤维蛋白原会与凝血酶发生特异性结合，形成纤维蛋白单体。
这些单体随后会聚集形成纤维蛋白网络，这个过程被称为纤维蛋白聚合。
随着聚合过程的进行，纤维蛋白网络会逐渐增大并沉积在反应管底部，形成纤维蛋白凝块。
接下来，通过与已知浓度的纤维蛋白原标准品进行比较，可以确定纤维蛋白原的浓度。
这个过程被称为Clauss定量分析，它是基于纤维蛋白凝块的质量或体积来进行的。
具体来说，通过测量凝块截面积和长度，可以计算出凝块的表面积和体积，从而得到纤维蛋白原的浓度。
此外，Clauss法还使用了一种特殊的技术，称为电阻抗法，来精确测量凝块的长度和宽度。
这种方法利用了血液中红细胞在管中流动时的电阻抗变化，从而可以准确地测量凝块的形状和大小。
总的来说，纤维蛋白原Clauss法检测原理基于纤维蛋白原与凝血酶发生交联反应，通过测量凝块的质量、体积和长度来确定纤维蛋白原的浓度。
这种方法具有较高的准确性和可靠性，是临床上常用的纤维蛋白原定量检测方法。