血浆纤维蛋白原定量测定

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纤维蛋白原检测方法

纤维蛋白原检测方法

纤维蛋白原检测方法纤维蛋白原是一种重要的凝血蛋白,它是由肝脏合成,并在出血和炎症等刺激下转化为纤维蛋白,参与血液的凝固过程。

因此,对纤维蛋白原的检测可以用于评价凝血功能和诊断和预测一些疾病,如凝血功能异常、血栓性疾病和肝功能损害等。

目前应用较广泛的纤维蛋白原检测方法主要包括传统的凝血酶时间法(PT)和定量的免疫测定法(ELISA)。

下面将详细介绍这两种常用的方法以及其他新兴的检测方法。

1.凝血酶时间法(PT):PT是一种传统的纤维蛋白原检测方法,通过观察血浆中纤维蛋白原转化为纤维蛋白的时间来评估凝血功能。

这种方法主要测量血浆的凝血活性,适用于评估整体凝血功能的异常。

它的优点是操作简单,成本低廉,但其缺点是受到外在因素、仪器差异和标准化等因素的影响,结果存在一定的变异性。

2.免疫测定法(ELISA):ELISA是一种定量测定纤维蛋白原浓度的方法,通过纤维蛋白原特异性抗体与待测血浆样本中纤维蛋白原结合,再经过底物反应,通过测定生成的底物产物的颜色变化来定量纤维蛋白原浓度。

这种方法具有高灵敏度和高特异性的优点,可准确测定纤维蛋白原浓度,适用于疾病的诊断和监测。

但是,它的缺点是需要特异性抗体和特定的ELISA试剂盒,成本相对较高。

除了传统的PT和ELISA方法外,还有一些新兴的纤维蛋白原检测方法,如光学相干断层扫描(OCT)、表面增强拉曼散射(SERS)和质谱等。

这些方法克服了传统方法的一些缺点,具有非侵入性、高灵敏度和高特异性的特点,有望成为未来纤维蛋白原检测的趋势。

总之,纤维蛋白原作为一种重要的凝血蛋白,在临床诊断和评估凝血功能方面起着重要作用。

目前,凝血酶时间法和免疫测定法是应用较广泛的纤维蛋白原检测方法,具有各自的特点和适用范围。

随着技术的发展,新兴的检测方法有望在纤维蛋白原检测领域取得更好的应用和发展。

血浆纤维蛋白原测定

血浆纤维蛋白原测定

血浆纤维蛋白原测定seek; pursue; go/search/hanker after; crave; court; woo; go/run after
血浆纤维蛋白原测定
正常参考值
2~4g/L
临床意义
1.纤维蛋白原减少
原发性纤维蛋白原减少的病例极少.先天性纤维蛋白缺乏症是极为罕见的遗传性疾病,通过常染色体隐性基因遗传,此患者肝脏不能合成纤维蛋白原.男、女两性均能发生,但以男婴为多见,患婴出生时,半数出现脐带出血.其血液凝固缓慢或只有部分凝固.
继发性血浆纤维蛋白原减少的原因是由于纤维蛋白溶解酶溶解纤维蛋白所致.如胎盘早剥,分娩时羊水进入血管形成血栓,引起弥漫性血管内凝血,激活纤维蛋白溶酶原,使血中纤维蛋白溶酶活力增加,溶解纤维蛋白,消耗了体内原有的纤维蛋白原,使其含量减少.有时可降至0.5g /L以下.
严重的肝实质损害,如各种原因引起的肝坏死、慢性肝病晚期、肝硬化等都可出现纤维蛋白原的减少.此类疾病还常伴有凝血酶原及第七因子缺乏,往往是病情严重的先兆.
此外,严重的低纤维蛋白原血症也可见于肺及前列腺手术中.
2.纤维蛋白原增加
纤维蛋白原是一种急性时相蛋白,其增加往往是机体的一种非特异反应,常见于下列疾病:1感染:如毒血症、肺炎、轻型肝炎、胆囊炎、肺结核及长期的局部炎症等.
2无菌炎症:如肾病综合征、风湿热、恶性肿瘤、风湿性关节炎等.
3其他:如外科手术、放射治疗、月经期及妊娠也可轻度增高.
3.纤维蛋白原异常
纤维蛋白原异常是一种遗传性疾病,是常染色体显性遗传.患者纤维蛋白原含量可能在正常范围,但纤维蛋白原有质的异常.主要是纤维蛋白原分子的一个多肽上出现了一个异常的氨基酸,临床上可无症状或仅有轻度的出血倾向.。

血浆纤维蛋白原Fbg测定-检验科临检室作业书

血浆纤维蛋白原Fbg测定-检验科临检室作业书

血浆纤维蛋白原Fbg测定1.实验原理确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入纤维蛋白原试剂,采用波长为660nm的光照射样本,凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定,从散射光光强度的测定,可以作出凝血曲线,通过PercentageDetectionMethod法求得凝血时间,再通过凝血时间,求出Fbg含量。

2.标本采集2.1早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。

2.23.8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。

3.标本存放:1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2~8℃保存不超过4小时,长时间保存需在冰冻条件下,(-70℃不超过6个月),只能冻融1次,在37℃迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。

4.标本运输:低温条件下运输。

5.标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。

6.实验材料:6.1德国DadeBehringMarburg公司凝血酶试剂,每瓶加1ml蒸馏水溶解(20人份),未开封试剂2~8℃贮存到说明书上有效期.复溶试剂2~8℃保存不超过5天。

6.2Owren′s巴比妥绥冲液(PH7.35±0.1)用于标本的稀释,2~8℃贮存到说明书上有效期。

6.3DadeControl质控血浆。

用蒸馏水1ml溶解后放置30分钟,才能使用或分装.复溶后,室温保存2小时,2~8℃4小时。

7.仪器设备:7.1仪器名称:SysmexCA-1500全自动血液凝固分析仪7.2仪器厂家:日本Sysmex公司7.3仪器型号:SysmexCA-15007.4仪器技术参数:7.4.1速度:最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时7.4.2试剂位:36个,具冷藏功能。

7.4.3样本位:50个,可自动连续添加。

7.5仪器校准程序:7.5.1校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。

纤维蛋白原(FIB)

纤维蛋白原(FIB)

纤维蛋白原(FIB)一、测定原理:1、仪器自动加样并记录待测血浆在凝血活酶的参与下所需的凝固时间。

2、仪器检测原理(凝固法):检测杯两侧独立的线圈产生相反的磁场,驱动钢珠在杯底沿弯曲的轨道运动。

一旦被测血浆开始凝固(加入少激活试剂),血浆粘度增加,改变了钢珠的运动,使其减慢,并且振减小。

此振幅的变化由数学算法通过计算得到凝固时间。

二、标本要求:1、凝血专用管(CTAD管,枸椽酸钠0.109M,蓝帽)抽取静脉血至刻度线,充分混匀。

2500转离心10分钟后2小时内测定完毕。

2、测定量 5ul血浆1:20稀释三、试剂:1、STAGO公司原装试剂STA®-FIBRINOGEN、OWREN-KOLLER(稀释液)2、保存条件:2-8°C3、使用条件:使用前加蒸馏水5ml混匀,条码扫描后放入仪器试剂柜。

使用时试剂柜内(17±2°C)稳定4天四、仪器和材料:1、STA 全自动血凝仪2、含有磁珠的反应杯五、标准和质控:1、标准:预定标,标准曲线由厂家在试剂中提供。

2、质控品为原装STA-COAG CONTROL N+P两批号定值血浆干粉,保存条件2-8℃。

使用前加蒸馏水1ml,混匀,开启后试剂柜内稳定8小时。

编写:伍海波制定日期:2011.12.1六、操作程序:1、装卸试剂:F2键打开试剂柜,条码扫描后确认试剂量,放入合适孔即可。

2、定标与室内质控:更换试剂批号时仪器自动定标,24小时室内质控自动测定一次,未通过仪器有提示报警。

3、标本测定:F1键打开标本柜,输入号码后随机插入标本孔,选择测定项目后关闭标本柜。

仪器1:20稀释血浆加100ul入反应杯,预温240秒后加入50ul试剂并开始计时,根据曲线自动得出含量。

4、传送并核收结果。

七、注意事项:1、血量与抗凝剂比例适宜,离心时间充分以确保血浆中无血小板干扰测定结果。

2、标本无凝固。

七、计算和参考值计算由仪器自动完成,正常参考值:2-4g/L八、方法学特性1、分析范围:1.5-9g/L,低于1.5g/L仪器可自动减少稀释倍数重测2、不精密度:CV 3.85% (批内)CV3.57%(批间)3、干扰实验编写:伍海波制定日期:2011.12.1。

血浆纤维蛋白原测定

血浆纤维蛋白原测定

血浆纤维蛋白原(Fbg)测定1. 实验原理将试剂加入稀释的抗凝血浆中,试剂中过量的牛凝血酶可直接作用血浆中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白,此反应过程的速率即反映了纤维蛋白原的浓度和功能。

通过660nm光照射血浆,测定其凝固反应的散射浊度变化。

2. 标本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。

2.23.8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。

3. 标本存放全血贮存在4~10oC不超过2小时,最好1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,此血浆在室温22~24oC 下可存放2小时,在2~4oC可存放4小时,在-20oC可存放2周,长时间保存需在冰冻条件下,在-70oC可存放6个月。

冷冻血浆融化时,应将盛血浆的容器置37oC水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化,以免凝血因子消耗,解冻后立即测试。

冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果不准确。

4. 标本运输:低温条件下运输。

5. 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。

6. 实验材料:6.1每个试剂均购自德国Dade Behring Marburg公司。

1)FIB-C测定试剂盒(代号P/N:8469110)冻干牛凝血酶(>35uNIH/ml)8瓶异常质控血浆2瓶2)定标血浆Calibration Plasma(代号P/N: 20003700)3)正常质控血浆Normal control plasma(代号P/N: 20003110)4)低纤维蛋白原质控血浆 Low fibrinogen control(代号P/N:20004200)5)因子稀释液(代号P/N:9757600)6)清洗液A Cleaning solution(代号P/N:9831700)7)清洗液B Cleaning agent(代号P/N:9832700)6.2试剂准备牛凝血酶:用2mL NCCLS II型或相同质量的蒸馏水溶解1瓶牛凝血酶,盖上盖子,轻摇至完全溶解,置15~25oC 30分钟,用前摇匀,勿用力振摇。

血浆纤维蛋白原测定方法

血浆纤维蛋白原测定方法

血浆纤维蛋白原测定方法血浆纤维蛋白原是一种重要的凝血因子,它参与了机体的止血过程。

因此,准确测定血浆纤维蛋白原的含量对于诊断和评估血液病变具有重要意义。

本文将介绍一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。

一、测定原理血浆纤维蛋白原的测定方法主要基于血浆纤维蛋白原与特定试剂的反应原理。

常用的测定方法包括免疫比浊法、免疫电泳法、免疫荧光法、酶联免疫吸附法等。

二、免疫比浊法免疫比浊法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。

其原理是利用特异性抗体与血浆中的纤维蛋白原结合形成免疫复合物,进而使溶液的浊度增加。

通过测量溶液的光密度变化,可以计算出血浆纤维蛋白原的含量。

三、免疫电泳法免疫电泳法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。

其原理是利用电泳的原理,将血浆中的纤维蛋白原与特异性抗体结合,然后通过电泳分离。

根据纤维蛋白原在电泳中的迁移距离,可以确定其含量。

四、免疫荧光法免疫荧光法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。

其原理是利用特异性抗体与血浆中的纤维蛋白原结合,并标记荧光物质。

通过荧光显微镜观察样品中荧光信号的强度,可以确定血浆纤维蛋白原的含量。

五、酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。

其原理是利用特异性抗体与血浆中的纤维蛋白原结合,并标记酶类物质。

通过测量酶的活性或底物的反应产物,可以确定血浆纤维蛋白原的含量。

六、测定结果的解读血浆纤维蛋白原的正常浓度范围在2-4 g/L之间。

如果测定结果低于正常范围,可能表示机体合成纤维蛋白原的能力减弱,或者存在纤维蛋白原消耗过多的情况。

而高于正常范围的测定结果,则可能意味着机体正在经历炎症、肿瘤、肝脏疾病等情况。

七、测定方法的优缺点不同的血浆纤维蛋白原测定方法具有不同的优缺点。

免疫比浊法操作简便、成本低廉,但对样品的干扰较大;免疫电泳法分离效果好,但操作复杂、耗时较长;免疫荧光法灵敏度高,但设备要求较高;酶联免疫吸附法操作简便,但对样品的处理要求较高。

八、总结血浆纤维蛋白原的测定方法有多种,每种方法都有其适用的场景和优缺点。

纤维蛋白原(FIB)

纤维蛋白原(FIB)

纤维蛋白原(FIB)含量测定方法操作规程一.【产品名称】纤维蛋白原(FIB)含量测定试剂盒(凝固法)二.【预期用途】用于体外人血浆中纤维蛋白原含量测定,用于辅助诊断。

三.【临床意义】FIB含量增高:见于糖尿病及其酸中毒,动脉粥样硬化,急性传染病,急性肾炎尿毒症,休克,外科术后及轻度肝炎等。

FIB含量减低:见于DIC,原发性纤溶症,重症肝炎,肝硬化等。

四.【检验原理】采用Clauss凝固法原理,高浓度凝血酶存在时,待测稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋白原(FIB)含量成反比关系。

五.【主要组成成分】1.FIB凝血酶:5瓶/6瓶(内含凝血酶、缓冲液、高岭土、稳定剂、防腐剂)2. FIB定值血浆:1瓶,定值见瓶标FIB定值血浆经HBsAg、HIV抗体、HCV抗体检测,结果为阴性,但仍需如病人样本一样小心处理。

3.FIB缓冲液:2瓶(内含缓冲液、防腐剂)4.说明书:1份注:不同批号试剂盒中各组份不可互换。

六.【储存条件及有效期】未开启试剂于+2℃~+8℃保存可稳定至标签所示失效日期。

FIB凝血酶试剂复溶后于+2℃~+8℃可保存7天;4小时内-20℃冻存,可稳定20天,使用时37℃迅速解冻,勿反复冻融。

FIB定值血浆复溶后于+2℃~+8℃可保存8小时。

七.【适用仪器】血凝分析仪。

八.【样本要求】1. 静脉采血,置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸酸钠抗凝液(1份抗凝液+9份全血)的塑料管或硅化玻璃管中,轻轻颠倒混匀,3000rpm(或2500g)离心15分钟,收集上层液(血浆,黄色)。

2.不宜使用EDTA●Na2、肝素、草酸盐作为抗凝剂。

3.红细胞比容超过55%或小于20%时,应调整抗凝剂用量。

抗凝剂体积(ml)=0.00185x血液体积(ml)x(100 - 比容)。

4.样本采集避免溶血及组织液污染。

5.样本保存时间如下:+2℃~+8℃保存,不宜超过8小时。

九.【检验方法】1. 试剂重建与保存每瓶FIB凝血酶加入瓶标标示体积的蒸馏水,轻摇溶解。

纤维蛋白原测定(FIB)标准操作规程(SOP)

纤维蛋白原测定(FIB)标准操作规程(SOP)

纤维蛋白原测定(FIB)标准操作规程(SOP)原理:在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入试剂。

加入试剂后,采用波长为660nm的光照射样本。

凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。

从散射光光强度的测定,可以做出凝血曲线,通过Percentage Detect ion Method方法求得凝血时间。

一、仪器:(一)型号:Sysmex CA—1500自动血液凝血分析仪(二)分析和计算参数:1.处理量:约120个测试/小时2.所需样本量:10μl3.检验时间:在最长检验时间之内测出结果,典型最长检验时间:100秒4.重复性:CV≤4%5. 计算参数:纤维蛋白原浓度(Fbg)二、试剂及配套品:(一)试剂:1. 凝血酶试剂(Thrombin Reagent)(1)商标:德灵(DADE BEHRING)(2)包装规格:Pack for 10×1ml(3)代码:B4233 G25 E0533 (961) W(4)成分:牛凝血酶冻干粉(lyophilized preparation of bovine thrombin)(近似100 NIH units/ml)(3)代码:B4234-25(4)成分:1)2.84×10²M的巴比妥钠 (sodium barbital)2)1.25×10¹M 的氯化钠 (sodium chloride)3) PH 7.35±0.13. 清洗液(Cleaning)2%次氯酸钠溶液(自配)(二)配套品:1.标准血浆(Standard Human Plasma)(1) 商标:德灵(DADE BEHRING)(2) 代码:No. ORKL2.校准质控血浆(Ci-Trol®)(1) 商标:德灵(DADE BEHRING)(2) 代码:Level 1, B4244-10Level 2, B4244-20Level 3, B4244-303.质控血浆(Control Plasma)(1) 商标:太平洋(Pacific Hemostasis)(2) 代码及规格:Level 1 (Normal), 100595 10×1mlLevel 2 (Abnormal), 100596 10×1mlLevel 3 (Abnormal), 100597 10×1ml三、操作步骤:(一)开机:开机前,先打开连机的打印机。

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