piggyBac转座子应用研究进展
甜菜夜蛾与棉铃虫内源性piggyBac转座子的研究的开题报告
甜菜夜蛾与棉铃虫内源性piggyBac转座子的研究的开题报告一、选题背景与意义甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）为半夜蛾科昆虫，是全球重要的农业害虫之一。
其幼虫可对多种农作物进行大量损害，如蔬菜、水果、玉米、棉花等，给农业生产带来极大的影响。
棉铃虫（Helicoverpa armigera）也是重要的农业害虫之一，对棉花、玉米、蔬菜等作物也造成了很大损失。
目前，甜菜夜蛾和棉铃虫主要通过化学农药来控制，然而由于化学农药的副作用，其使用已经引起了人们的高度关注。
为了避免这种危害，越来越多的研究者试图研究使用基因工程技术来控制害虫，而内源性piggyBac转座子正是一种被广泛用于转基因昆虫研究中的工具。
二、研究目的本研究旨在通过将内源性piggyBac转座子导入甜菜夜蛾和棉铃虫中，观察其对昆虫生长发育以及繁殖力的影响，为探索基于转基因技术的害虫防治方法提供一定的理论和实践依据。
三、研究内容和方法（一）研究内容1. 制备内源性piggyBac转座子。
2. 构建内源性piggyBac转座子质粒载体。
3. 将内源性piggyBac转座子导入甜菜夜蛾和棉铃虫中。
4. 观察转基因昆虫的生长发育以及繁殖力。
5. 检测转基因昆虫是否会对环境造成影响。
（二）研究方法1. 内源性piggyBac转座子的制备：通过PCR扩增内源性piggyBac转座子序列，并进行酶切和连接操作来构建内源性piggyBac转座子。
2. 构建内源性piggyBac转座子质粒载体：将内源性piggyBac转座子插入适当的质粒载体中来构建内源性piggyBac转座子质粒载体。
3. 将内源性piggyBac转座子导入甜菜夜蛾和棉铃虫中：通过生物转化法或注射法将内源性piggyBac转座子质粒载体导入甜菜夜蛾和棉铃虫中。
4. 观察转基因昆虫的生长发育以及繁殖力：观察转基因昆虫与野生型昆虫的生长发育和生殖力，并进行对比分析。
5. 检测转基因昆虫是否会对环境造成影响：通过对转基因昆虫在田间释放后的生态环境进行监测、评估，判断转基因昆虫是否会对环境造成影响。
piggybac 转座子作用机理
piggybac 转座子作用机理一、啥是piggybac转座子呀。
这个piggybac转座子呢，它其实是一种可以在基因组中移动的DNA序列哟。
就好像是基因组这个大社区里的一个“小搬家侠”，能够从一个地方搬到另一个地方呢。
它最早是在昆虫里被发现的，后来人们发现它在好多生物里头都能发挥作用，简直就是生物界的一个“万能小能手”呀。
二、piggybac转座子的结构特点。
它的结构啊，还挺特别的呢。
一般来说，它有两端的反向重复序列，这就像是它的“把手”一样，抓着中间的那些基因信息。
中间呢，就包含了一些和它转座相关的基因，这些基因就像是它的“行动指南”，告诉它什么时候该搬家，怎么搬家。
而且啊，它的大小也不是固定不变的，不同的piggybac转座子可能长度会有点不一样哦。
三、piggybac转座子的转座过程。
这转座过程啊，可有意思啦。
它就像是坐“出租车”一样，先找到合适的“站点”，也就是目标位点。
然后呢，在一些酶的帮助下，它会把自己从原来的位置上“剪”下来。
这时候啊，它就像是一个小包裹一样，准备被运送到新的地方去啦。
接着，它会准确地插入到目标位点上，就像是找到了新的家一样。
这个过程啊，需要好多蛋白质和酶的参与，它们就像是一群勤劳的小助手，帮着piggybac转座子完成这次“搬家之旅”。
四、piggybac转座子的作用。
它的作用那可多啦。
一方面呢，它可以用来进行基因编辑。
科学家们就像是聪明的“设计师”，利用piggybac转座子把一些有用的基因插入到生物的基因组里，或者把一些不好的基因给替换掉，这样就能让生物变得更健康、更优秀啦。
比如说，在农业上，就可以用它来培育出更抗病虫害的农作物呢。
另一方面啊，它还能帮助我们研究基因的功能。
通过让它在基因组里“跳来跳去”，我们就能观察到不同基因的变化，从而了解它们到底是干什么的，就像是给基因们做了一场“大调查”呀。
五、piggybac转座子的应用前景。
这个piggybac转座子的应用前景可是一片光明哟。
一种由piggyBac转座子介导高效构建稳定细胞株的策略
ISSN 1002-4956 CN11-2034/T实验技术与管理Experimental Technology and Management第38卷第3期202丨年3月Vol.38 No.3 Mar. 2021DOI: 10.16791/ki.sjg.2021.03.010一种由piggyBac转座子介导高效构建稳定细胞株的策略盛哲津、王亮2，周斌\李利妹4(1.同济大学生命科学与技术学院，上海200092; 2.上海市浦东新区中医医院，上海200120; 3.同济大学附属东方医院血管外科，上海200120; 4.同济大学附属东方医院医学转化平台，上海200120)摘要：构建稳定细胞株的关键是如何提高外源目的基因插人基因组的效率。
piggyBac转座子（简称PB )通过“切离-粘贴”的机制实现在基因组上的转座，其本质是在基因组的不同位点间进行插入。
利用P B转座子高效插人基因组的特性，并通过改造该转座系统，即分别在P B转座酶的3'端和5'端加入核定位信号肽，然后在人源胚胎肾293细胞系中评价改造后的P B转座子介导获得稳定细胞株的能力。
结果表明，野生型PBase组的克隆形成率是对照组的6.7倍,3'NLSPBase组比野生型PBase组再提高1.3倍。
利用人宫颈癌HeLa 细胞进一步验证上述结果。
可见，经改造后的P B转座子能够提高外源目的基因插入基因组的效率，实现高效构建稳定细胞株。
关键词：piggyBac转座子；稳定细胞株；基因组整合中图分类号：Q2 文献标识码：A 文章编号：1002-4956(2021)03-0045-06Strategy of efficient construction of stable cell linesmediated by piggyBac transposonSHENG Zhejin',WANG Liang2,ZHOU Bin3,LI Limei4(1. School of Life Sciences and Technology, Tongji University, Shanghai 200092, China; 2. Shanghai Pudong New Area Hospital of Traditional Chinese Medicine, Shanghai 200120, China; 3. Department of Vascular Surgery, East Hospital, Tongji University School of Medicine, Shanghai 200120, China; 4. Research Center for Translational Medicine, East Hospital, Tongji University School of Medicine, Shanghai 200120, China)Abstract: Insertion of foreign target genes into the genome is crucial to the construction of stable cell lines. piggyBac transposon (PB) can translocate between different loci in the genome via the “Cut-and-paste” mechanism. The nature of this process is the insertion of foreign target genes into different sites in the genome. A nuclear localization signal peptide is added to the 3' or 5' ends of PB transposase respectively to modify the PB transposon system. The efficiency of the construction of stable cell lines mediated by PB transposon is evaluated in the human embryonic kidney 293 cell line. The results demonstrate that the clone formation rate of wild-type PBase group is 6.7 times that of the control group, and that of B'NLSPBase group is 1.3 times higher than that of wild-type PBase group. The above results are verified in HeLa cells. The modified PB transposon can improve the efficiency of exogenous target gene insertion into the genome, which will help to achieve high efficient construction of stable cell lines.Key words: piggyBac transposon; stable cell lines; genome integration细胞转染技术是现代生命科学领域的一项基本技 术，广泛应用于生命科学的基础研究，推动了诊断、治疗方面的发展1M]。
转座子在基因工程中应用的研究进展
全基因组序列分析
斑马鱼 Danio rerio
全基因组序列分析
血红丛赤壳菌 Nectria haematococca
全基因组序列分析
水稻 Oryza sativa
全基因组序列分析
大豆疫霉菌 Phytophthora sojae
全基因组序列分析
家鼠 Rattus spp
全基因组序列分析
海胆 Strongylocentrotus purpuratus
1
反转录转座子不同于转座子，是以DNA-RNA-DNA的途径来实现转座，在整合酶的作用下，将新 生成的以DNA状态存在的反转录转座子整合到宿主基因组中。这样，反转录转座子在宿主基因组中的 拷贝数得到不断积累，从而使基因组增大。由于反转录转座子带有增强子、启动子等调控元件，所以 会影响宿主基因的表达。在生物进化过程中，反转录转座子起着不可忽视的作用。根据是否具有编码 反转录酶的能力，反转录转座子可分为两个家族: 自主性反转录转座子和非自主性反转录转座子；按 照序列结构中有无长末端重复序列(LTR) 又可分为有LTR反转录转座子和无LTR反转录转座子。自主 性反转录转座子包括内源性反转录病毒(ERV) 、LTR反转录转座子及长散在元件(LINEs)；非自主性反 转录转座子包括短散在元件(SINEs) 及修饰性反转录假基因(刘冬，2008)。
赤拟谷盗 Tribolium castaneum
全基因组序列分析
银锭夜蛾 Macdunnoughia crassisigna
同源克隆
表 1 来源：王建军，等，2009。
与其他转座子相比，piggyBac 转座子在昆虫纲中分布较少，但其却能在亲缘关系较远的物种中发
挥作用。目前，利用 piggyBac 转座子已经成功获得了多种转基因昆虫(表 2)。
piggyBac转座子在金鱼及泥鳅转基因中的应用
piggyBac转座子在金鱼及泥鳅转基因中的应用胡莹莹;郭学双;周阳;曹广力;贡成良;薛仁宇【期刊名称】《水产学报》【年(卷),期】2012(036)010【摘要】为了探讨piggyBac转座子在鲤科鱼类及鳅科鱼类转基因中的适用性,实验通过将PAβ启动子控制的DsRed表达元件插入pigA3GFP中,构建转基因载体pigA3 GFP-AβDsRed.用该载体对草鱼肾脏(CIK)细胞转染,结果显示,通过piggyBac转座子可将外源基因导入到CIK细胞的基因组中,来源于家蚕的A3启动子和来源于巨细胞病毒的CMV启动子在CIK细胞均具有活性.将转基因载体pigA3GFP、pigA3GFP-AβDsRed分别与辅助质粒helper-pigA3混合后以精子介导法导入金鱼和泥鳅的受精卵后,经荧光观察、PCR鉴定、Dot blotting鉴定,证实获得了转基因金鱼和转基因泥鳅.研究表明,PB转座子在鲤科鱼类及鳅科的一些鱼中具有转座活性.%Development of transgenic fish techniques and application will promote traits improvement of fish and benefit exploration of its gene function. To investigate the applicability of the transposon piggyBac in Cyprinidae and Cobitidae fish, the expression element of DsRed under the control of PAβ promoter was inserted into the plasmid pigA3GFP to generate transgenic vector pigA3GFP-AβDsRed. The results of the CIK cell transfected with pigA3GFP-AβDsRed showed that the transposon piggyBac could transfer exogenous genes into CIK genome, and both of the promoter A3 from silkworm and the promoter CMV from CMV have the bioactivity. Moreover, the pigA3GFP-AβDsRed andpigA3GFP were mixed with helper plasmid helper-pigA3 respectively, and then were introduced into the eggs of goldfish and loach by sperm-mediated transfer. The results of fluorescence observation, PCR and Dot blotting verified that both transgenic goldfish and loach were obtained. Therefore,PB transposon was considered to be active in some fishes of Cyprinidae and Cobitidae.【总页数】9页(P1473-1481)【作者】胡莹莹;郭学双;周阳;曹广力;贡成良;薛仁宇【作者单位】苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州215123;苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州215123;苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州215123;苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州215123;苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州215123;苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州215123【正文语种】中文【中图分类】Q782;S917.4【相关文献】1.piggyBac转座子及其转基因昆虫的应用 [J], 唐丽莉;陈斌;何正波;李廷景2.PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体的构建及其整合效率的检测[J], 张婷婷;辛颖;张志强;任充华;杨涵江;王令;张智英3.piggyBac转座子介导的转基因家蚕丝腺生物反应器研究进展 [J], 钟伯雄;危浩;庄兰芳4.绵羊高效转基因通用型piggyBac转座子载体构建及功能验证 [J], 胡广东;郝科兴;黄涛;曾维斌;谷新利;王静5.A3启动子缺陷piggyBac转座子在家蚕中的转基因研究 [J], 杨惠娟;庄兰芳;范伟;兰天云;丁农;陆长德;钟伯雄因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
昆虫转基因载体——piggyBac转座子
总是 !"##$%&’ 转座 子的 切 出模 式 是唯 一 的， 在切出 的地方留 下准确的切 出痕迹， 而其它两 类 转座子通常 在切 出沟 里留 下完 整 的核 苷酸 或 末
［/］ 端残基， 导致不准确的切出痕迹 。
［ !］ B、 :5L 和 $# 因子 。/0112345 转 座子最 初是在 杆
子总是在 ::$$ 目标 位点 处插 入， 因而 被归 纳为
［,］ ::$$— — —特殊的可转移因子家族 。
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!"##$%&’ 转座子的切出和转座
对于一个转座子来 说， 能 否利用 其作为 一个
状病毒 （345MLIN0EMG ） 侵 染 !"#$%&’()*#+ ,# 昆虫 :%@ -"A 细 胞株 系 时， 从 -+((."#+ /.((&,.((+ （ OFP%B%） 或 0)1&2"+’%+ $+(#3&",#$+ （ $5P%B%） 核多 角 体 病 毒 内首次分 离 得到 的
［!］ 出。在黑腹果蝇、 黄色伤 寒蚊、 和 !"#$%&’()*#+ ,#
家蚕卵细胞内等的转座测试也表明 /0112345 转座
增刊
颜海燕等： 昆虫转基因载体— — —!"##$%&’ 转座子
［4］ 用 。
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子能够转座， 而且切出和转座的频率都较高。 !"# $%&&’()* 转座子的切出和转座特征 !"##$%&’ 转座子在切 出和插 入时都 需要其 本
PiggyBac转座子在肝脏中的活性研究
PiggyBac转座子在肝脏中的活性研究刘华华;缪辉;葛梦芸;吴传芳【摘要】本实验运用高压尾静脉注射的方法将PB转座系统导入小鼠肝脏,研究其在肝脏中的转座活性,系统中PB转座子携带表达红色荧光蛋白的基因以指示转座的发生.注射10个月后取出小鼠肝脏,体视荧光显微镜观察肝脏是否有红色荧光,并通过基因组PCR、splinkerettePCR分析PB转座子在肝脏中的插入情况.实验结果表明,PB转座子在肝脏内发生高效转座,检测的68个PB插入位点中有34个位于基因序列,使得PB系统可以作为有效的基因诱变工具来研究基因功能.【期刊名称】《四川大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(053)005【总页数】5页(P1130-1134)【关键词】PiggyBac(PB)转座子;高压尾静脉注射;Splinkerette PCR;插入突变【作者】刘华华;缪辉;葛梦芸;吴传芳【作者单位】四川大学生命科学学院功能基因组实验室,成都610064;四川大学生命科学学院功能基因组实验室,成都610064;四川大学生命科学学院功能基因组实验室,成都610064;四川大学生命科学学院功能基因组实验室,成都610064【正文语种】中文【中图分类】Q789PB(piggyBac)转座子来源于粉纹夜蛾，可以在哺乳动物细胞中高效转座[1-6]，诱导基因的插入突变来研究基因的功能．作为基因诱变剂，PB有独特的优势[1-6]：1)插入位点广泛分布于基因组中，且倾向于插入基因编码的活跃区；2)PB转座发生后精确切离，原插入位点不会发生突变；3)PBase可以单独克隆，反式调节PB的转座；4)PBase对PB的转座没有过量抑制现象；4)PB可以携带遗传标记基因，方便鉴定PB的插入且不影响其转座活性；5)与逆转录病毒相比操作更加安全、简便．我们使用本实验构建好的PB转座系统，包括供体质粒Donor(PB)和辅助质粒Helper(PBase)，其中PB携带红色荧光蛋白(RFP)标记转座的发生，PBase可以在真核细胞中自主表达．目前，PB多用于转基因的研究[7-11]，本实验主要通过研究PB转座子在体内肝脏细胞中的转座活性，分析其在体内作为插入诱变工具的可行性．将外源基因特异性导入肝脏有多种途径，但都有一定的局限性，如逆转录病毒载体导入法需要将肝脏部分切除或通过肝损伤来刺激肝细胞分裂．研究表明，通过物理方法将裸质粒DNA直接导入靶器官同样可以获得目的基因的高效表达[12]．高压尾静脉注射法，即将大体积的注射液快速注入尾静脉，由于肝脏的组织特点，该方法可以直接将质粒注入到肝脏，实现外源基因在肝脏细胞中的表达；此法操作简便，且不会对肝脏造成永久性伤害[13-16]．我们运用这一方法将PB转座系统导入肝脏，通过观察肝脏的红色荧光、基因组PCR和splinkerette PCR技术[17]来确定PB的转座情况以及插入位点．实验结果表明，PB转座子在体内肝脏中有较高的转座活性．该结果为PB共转染系统用于小鼠体内研究又迈了一步，为肝脏基因功能的研究提供了一条新的方法思路．2.1 材料2.1.1 菌株、质粒和实验动物大肠杆菌菌株E. coli. DH5α由本实验室保存，PB转座系统(Donor和Helper)由本实验室提供[18]，Balb/c小鼠由四川大学华西实验动物中心提供．2.1.2 主要试剂Taq酶、限制性内切酶及T4 DNA ligase 均购自Fermentas公司，DNA marker 购自天根生物科技公司，SsoFastTM EvaGreen® 试剂盒购自BIO-RAD公司，pMD-19T载体购自Takara公司，质粒小提试剂盒、胶回收试剂盒及基因组提取试剂盒均购自Foregene公司，质粒大提试剂盒购自Invitrogen 公司，寡核苷酸引物合成、接头(adaptor)片段的合成及测序均由北京六合华大基因科技有限公司完成．2.2 方法2.2.1 高压注射PB转座系统由两种质粒构成，分别是Donor和Helper．其中Donor提供PB必须的转座元件3′ITR(Inverted Terminal Repeat，末端反向重复序列) 和5′ITR(图2A显示ITR的相对位置)，红色荧光蛋白基因位于两段序列之间，指示PB的转座；Helper携带PB转座必须的转座酶PBase．将150只六周龄Balb/c小鼠随机分A、B、C 3个组，三种不同的注射液(表2)分别注射小鼠尾静脉．注射液的体积按小鼠重量的10%计算(如小鼠重量为20g，则注射液体积为2ml)，于5s-7s内将注射液经尾静脉快速推入体内．质粒的注射量详见表1．A、B两组作为阴性对照．the corresponding injection2.2.2 基因组PCR 使用OLYMPUS SZX2-ILLB体视显微镜观察小鼠肝脏是否发出红色荧光，对于实验其间濒临死亡或死亡的小鼠要及时取出并观察是否发出荧光，并进行下文提到的所有检测。
一种高活性piggyBac转座酶及其应用[发明专利]
![一种高活性piggyBac转座酶及其应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/a67a057432687e21af45b307e87101f69e31fb38.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910105753.1(22)申请日 2019.02.01(71)申请人 潘雨堃地址 201100 上海市闵行区都市路2501弄148号(72)发明人 潘雨堃 (74)专利代理机构 上海精晟知识产权代理有限公司 31253代理人 冯子玲(51)Int.Cl.C12N 9/12(2006.01)C12N 15/89(2006.01)A01K 67/027(2006.01)A61K 48/00(2006.01)A61K 38/45(2006.01)(54)发明名称一种高活性piggyBac转座酶及其应用(57)摘要本发明的目的在于提供一种高活性piggyBac转座酶及其应用。
一种piggyBac转座酶，其特征在于：氨基酸位点165位的甘氨酸改变为半胱氨酸，或氨基酸位点282位的蛋氨酸改变为苏氨酸，或这两个位点同时发生上述改变。
本发明的高活性piggyBac转座酶，提高了piggyBac转座子系统的转座效率。
权利要求书1页 说明书19页 附图3页CN 111518785 A 2020.08.11C N 111518785A1.一种piggyBac转座酶，其特征在于：氨基酸位点165位的甘氨酸改变为半胱氨酸，或氨基酸位点282位的蛋氨酸改变为苏氨酸，或这两个位点同时发生上述改变。
2.如权利要求1所述的piggyBac转座酶，在制备介导缺陷piggyBac转座子转座插入HEK293细胞基因组的试剂中的应用。
3.如权利要求1所述的piggyBac转座酶在制备基因整合试剂中的应用。
4.如权利要求1所述的piggyBac转座酶，在制备无痕基因修复的试剂中的应用，其特征在于：piggyBac转座酶为PBase(G165C/M282T)。
5.如权利要求1所述的piggyBac转座酶，在建立转基因非人动物中的应用，其特征在于：包括将编码新型高活性piggyBac转座酶PBase(G165C/M282T)和携带Katshka远红外荧光蛋白编码序列的piggyBac转座子同时显微注射入小鼠受精卵内的步骤。
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中图 分 类 号 ： ８ Ｑ７ ２ 文献标识码 ： Ａ 文章 编 号 ： ０ ７５ ３ （ ０ ０ １ － ０ １０ １ ０ —０ ８ ２ １ ） ２ ０ ９ － ４
转座 子是一 类能在 宿 主基 因组 中变 更插 入 位 置 的 可移动 遗传 因 子 ， 变 更 插 入 位 置 的 过 程 被 称 为 其 转座 。 自 １ ５ 年 美 国 Ｍｃｉｔｃ ９１ ｌ ｏ ｋＢ在玉 米 中发现 了 ｎ 第一个 转 座子 以来 ， 座 子 被 发 现存 在 于 大 多数 的 转 微 生物 和动植 物类 型 中 ， 从噬 菌体 到 线虫 、 昆虫 和 到 人 ， 到玉米 和水稻 ， 些生物 的基 因组 中都 留下 了 再 这
律， 能够被 稳定 地 转 移 到 下 一代 等 特 点 而 受 到 重 视
和关 注 。
１ ｐｇ ｙ ａ 转 座 子 的基 本 结 构 ｉｇ Ｂ ｃ
ｐｇ ｙ ａ 转 座 子 是 来 源 于 鳞 翅 目 昆 虫 的 ＤＮＡ ｉｇ Ｂ ｃ 型 转 座 子 ， 毒 遗 传 学 家 Ｆ ａｅ Ｊ和 同 事 们 在 杆 病 ｒ ｓｒＭ
有 标记 的转 座子 插 入 目的基 因或 基 因组 ， 生 了转 产
座 子 标 签 技 术 、 座 子 定 点 杂 交 技 术 、 座 子 基 因 打 转 转
状 病 毒 （ ａ ｕｏ ｉ ｓ 侵 染 粉 纹 夜 蛾 （ ｒｃ ｏ ｌｓ Ｂ ｃ ｌｖｒ ） ｕ Ｔ ｉｈ ｐ ｕ ｉ ａ ｎ ） Ｔ ３ ８ 细 胞 株 系 时 首 次 分 离 得 到 ｉ Ｎ一６
Ａｂ ｔａ ｔ Ａｎ ｉｅ ｉ ｐｔ ｐ ｓｗｈｃ ｒ ｈ ｊ ｒｆ ｎ ｔｏ ａ ｎ ｔ ａ ｆｅ ｔ ｅｙ ｓｉ ｌｔ ｈ ｏ ｔ Ｓｃ ｌ — ｓｒ ｃ ： ｔ ｎｃｅ ｉｏ ｅ ｉｈ ａ ｅｔ ｅｍａｏ ｕ ｃｉｎ ｌｕ ｉｓｃ ｎｅ ｆｃｉ ｌ ｔ ｇ ｖ ｍｕａ ｅｔ ｅｈ ｓ ’ ｅｌ ｕ
动 物 医 学 进 展 。０ ０ ３ （ ２ ：１９ ２ １ ， １ １ ） ９ —４
Ｐｒ ｇｒ ｓ ｎ Ｖ ｅ ｅ ｉ ａ ｙ Ｍ ｅ ｉ ｉ ｅ ｏ ｅ ｓ ｉ ｔ ｒｎ ｒ ｄｃｎ
ｐｇ ｙ ａ 转 座 子 应 用 研 究 进 展 ｉｇ Ｂ ｃ
杨 欢 ｈ ａ ，ＬＩＣｈ ｎ ｌ ｇ Ｉ Ａｉ ｉ ｇ，ＹＡＮ Ｇ Ｄｏ ｇ ｘ ａ Ｓ ｕｉ ｕ —ｉ ，Ｊ Ａ ～ ｎ ｎ ｑ ｎ — ｉ ，ＬＩＭ ｉ ｏ ａ
（ ａ ｇ ｏ ｇＯｐ ｎＬ ｂ ｒ ｔｒ ｆ Ｖ ｔｒｎ ｒ ｂｉ Ｈｅ ｌ Ｇｕ ｎ ｄ ｎ ｅ ａ ｏａ ｏ ｙ ｏ ｅ ｉ ａ ｙ Ｐｕ ｌ ａｔ ｅ ｃ ｈ，Ｉ ｓｉ ｔ ｆ Ｖ ｔｒｎ ｒ ｄ ｃｎ ｎ ｔ ｕ ｅ ｅｅ ｉａ ｙ Ｍｅ ｉｉｅ， ｔ ｏ Ｇｕ ｎ ｄ ｎ ａ ｇ ｏ ｇＡｃ ｄ ｍｙ ｏ ａ ｅ ｆＡｇ ｉ ｌ ｒ ｌＳ ｉ ｃ ，Ｇ ａ ｇ ｈ ｕ Ｇ ａ ｇ ｏ ｇ， １ ６ ０ Ｃ ｉａ ｒｃ ｔ ａ ｃｅ ｅ ｕ ｎ ｚ ｏ ． ｕ ｎ ｄ ｎ ５ ０ ４ ， ｈ ｎ ） ｕ ｕ ｎ
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Ｐｒ ｇ ｅ ｓ Ｏ ｌＡ ｐ ｏ ｃ ｅ ｏ ｏ ｒ ｓ ｉ ｐｒ ａ ｈ ｓ ｆ ｒ Ａｎｔｇ ｎ Ｅｐｉｏ ｔ ｄ ｉｅ ｔ ｐｅ Ｓ ｕ ｙ
收 稿 日 期 ：０ ００ — ９ ２ １ — ５ １
基 金 项 目 ： 家 自然 科 学基 金 项 目（ ０ ７ １ ８ ； 家科 技 支撑 计 划 项 目（ Ｏ Ｏ Ａ Ｏ Ｂ １ 国 ３９２７） 国 ２ １Ｂ Ｄ ４ Ｏ ） 作 者 简 介 ： 欢 欢 （ ９ Ｏ ） 女 ， 江德 清人 ， 士 研 究生 ， 杨 １８ 一 ， 浙 硕 主要 从 事 分 子 寄 生 虫 学研 究 。 ＊通 讯 作 者
ｐｇ ｙ ａ ｉｇ Ｂ ｃ转座子 已成 为在 昆 虫中应 用 最 广泛 的 转座 子 之 一 。近年 来 国 内外研 究 者 更将 其 应 用领 域 拓 宽 到 了鱼 类 ， 寄生 虫和 哺乳动 物 等转基 因研 究 中。 随 着对 ｐｇ ｙ ａ ｉｇ Ｂ ｅ转座 子 功 能 和分 布 的 深入认 识 ， ｉｇ Ｂ ｃ转 ｐｇ ｙ ａ 座子将 更 多应用 于基 因功 能研 究 ， 因治 疗 ， 基 转座 子介 导 的细胞 系基 因诱 变及基 因工程 蛋 白表达 等基础 研 究
最 早 被 称 为 Ｉ Ｐ 的 转 座 子 。 在 越 来 越 多 的 研 Ｆ ２ 现
靶 技术 和非病 毒 载体 基 因增 补 技 术 等 ， 已使 转 座 早
子成 为 了各种 生物基 因分 析 的有 效工 具 ［ 。随着基 １ ］
因工 程 和 功 能 基 因 组 学 的 发 展 ， 座 子 正 逐 渐 成 为 转
（ ． 国人 民解 放 军 军 事 医 学科 学 院 军 事 兽 医 研 究 所 ， 林 省 人 兽 共 患 病 预 防与 控 制 重 点 实 验 室 ， １中 吉 吉林 长 春 １ ０ ６ ３０２
２吉林农业大学生命科学学 院， ． 吉林 长 春 １ ０ １ ） ３ １８
摘
要 ：ｉｇ Ｂ ｃ转 座 子 是 来 源 于 鳞 翅 目 昆 虫粉 纹 夜 蛾 （ ｒｃ ｏ ｌ ｓ ｉ ｐｇ ｙ ａ Ｔ ｉ ｐ ｕ ｉ ｎ ）的 Ｄ ｈ ａ ＮＡ 型 转 座 子 。 目前
转 座 子 的 足 迹 。 利 用 转 座 子 特 有 的 转 座 功 能 ， 带 将
研究 热点 。其 中尤 以 ｐｇ ｙ ａ ｉｇ Ｂ ｃ转 座 子 具 有 转 座 时 携带 目的基 因不 受 大小 限制 ， 目的基 因能 够 在 基 因 组 中表达 ， 而且 表达 具有 遗传性 ， 循孟 德 尔遗 传 规 遵