应用改进ELISA检测干血棉球HIV抗体的可行性研究-论文
ELISA法检测HIV抗体影响因素分析
ELISA法检测HIV抗体影响因素分析作者：李志明来源：《中外医疗》 2011年第5期李志明(滨州市中心血站山东滨州 256600)【摘要】目的探讨ELISA法在检测HIV抗体中的影响因素,提高实验结果准确性。
方法从试剂的准备、样品的采集和储存以及仪器和操作等方面分析每一环节的质量控制对检验结果的准确性所起到的影响。
结果做好试剂的选择和准备,规范操作,做好每一环节的质量控制,在ELISA法检测HIV抗体中非常重要。
结论选择灵敏度高、特异性好的试剂,严格按照试剂说明书要求,注意操作中的诸多影响因素,能有效保证检测结果的准确性。
【关键词】 ELISA法 HIV抗体影响因素【中图分类号】 R187 【文献标识码】 A 【文章编号】 1674-0742(2011)02(b)-0191-02随着艾滋病流行形势的日趋严峻,新发现的感染者数量不断增加,艾滋病检测也显得越来越重要。
目前国内艾滋病初筛试验室检测HIV抗体的方法主要是酶联免疫法(ELISA)。
ELISA法是敏感性高、特异性强、重复性好的试验诊断方法,其试剂具有稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素,既适用于大规模筛查试验,又可以使用于少量标本的检测等优点。
但ELISA法的实验过程中有很多影响因素,如何消除诸多影响因素,保证检测结果的准确性,笔者在实际工作中经长期观察总结,对ELISA法检测HIV抗体影响因素分析如下。
1 试剂的准备《全国艾滋病检测技术规范》(2009版)规定,HIV抗体检测试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准,在有效期内的试剂,其中酶联免疫试剂应批批检合格,推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。
ELISA多为单纯HIV抗体检测试剂,HIV抗原抗体联合检测试剂可同时检测血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗体。
HIV抗原或抗体被包于固相载体,加入待检样品和酶标记的HIV抗原或抗体,加底物显色,用酶标仪测定结果。
艾滋病检验中HIV抗体ELISA法筛查研究
艾滋病检验中 HIV抗体 ELISA法筛查研究【摘要】目的：研究艾滋病人检验中HIV抗体ELISA法筛查准确率与临床应用价值。
方法：采用2021-1~2021-6雷波县人民医院采集的艾滋病人血样122例，常规组：实施常规胶体金法检测；实验组开展ELISA法筛查。
因为这些都是已知病人所以不通过确诊，记录不同方法的检测时间与我中心检测成本费用。
结果：实验组艾滋病阳性筛查率100%高于常规组的艾滋病阳性筛查率99.18%，互比，无差异性（P＞0.05）。
实验组检测时间长于常规组，实验组检测成本低于常规组，互比，有差异性（P＜0.05）。
结论：艾滋病具有传染性，尽早对疾病确诊，可控制传染源，还可尽早开展治疗，稳定病情，建议跟据当地检测的条件可选择ELISA法或胶体金法对艾滋病患者的HIV抗体进行筛查，从而保证阳性检出率，ELISA法阳性率高，用时长但成本稍低，胶体金法用时短，费用稍高，深获临床医师认可，两种方法均可作为HIV抗体初筛的一种重要筛查手段。
【关键词】HIV抗体；艾滋病；ELISA法；筛查；阳性率；检测时间；检测费用ELISA screening study for HIV antibody in the AIDS test[Abstract] Objective: To study the screening accuracy and clinical application value of HIV antibody ELISA method in AIDS humantest.Methods: 122 AIDS blood samples collected from 2021-1 to 2021-6: conventional group: conventional colloidal gold test; experimental group carried out ELISA screening.Because these are known patients sodo not pass the diagnosis, record the testing time of differentmethods and the testing cost of our center.Results: The AIDS-positive screening rate in the experimental group was 100% higher than 99.18%, with no difference (P> 0.05).The test time was longer than theexperimental group in the conventional group, and the test cost was lower than the conventional group, and it was different (P<0.05).Conclusion: AIDS is infectious, the disease diagnosis as soon as possible, can control the source of infection, can also be treatment as soon as possible, stable condition, suggested according to the local testing conditions can choose ELISA method or colloid AIDS patients screening HIV antibody, to ensure the positive detection rate, ELISA method positive rate, long but low cost, colloidal gold method is short, higher cost, recognized by clinicians, both methods can serve as an important screening means of HIV antibody initial screening.[Keywords] HIV antibody; AIDS; ELISA method; screening; positive rate; test time; test cost艾滋病在临床中也可称作为获得性免疫缺陷综合征，是由于机体感染人类免疫缺陷病毒（HIV）而引发的全身性疾病，艾滋病患者机体免疫功能存在不同程度障碍，若不尽早开展治疗可感染各种疾病，甚至还可引发恶性肿瘤，最终死亡[1]。
ELISA法金标检测法在检测HIV抗体效果观察论文
ELISA法与金标检测法在检测HIV抗体的效果观察摘要：目的：对elisa法和金标法检测hiv抗体的检测效果进行比较，分析两种方法的优缺点。
方法：用elisa法和金标法对1200份待测样本进行hiv抗体初筛出呈阳性的样本，然后用相同的方法对阳性的标本进行复查，最后经过市cdc艾滋病确诊实验室进行确诊。
结果：对送检的1200份待测样本，elisa初筛阳性为8例，金标法阳性为12例，最后确诊为阳性的为7例。
结论：elisa法和金标法都能够进行hiv抗体的初筛检测，金标法敏感性强，假阳性率较高；elisa法敏感性较为理想，其综合准确性高于金标检测法。
关键词：hiv抗体；elisa法；金标法【中图分类号】r446.61【文献标识码】b【文章编号】1672-3783(2012)04-0107-01目前艾滋病已经成为新世纪影响最大的疾病之一，如何准确的检测和筛查出hiv病毒携带者已经成为了当前医学检测工作者的当务之急，而检测hiv抗体是判断患者是否具有hiv感染或者患上aids的重要手段，当前hiv筛查的方法有很多，为了提高检测与筛查的准确性，本文对elisa(酶联免疫分析)法和金标法检测hiv抗体的实验结果进行了比较，现报告如下。
1 资料与方法1.1 研究对象:2010年10月-2011年10月期间我院共收到1200例hiv抗体初筛患者，其中男性435例，女性765例，年龄为20-57岁；均对其抽取静脉血2-5ml，并分离血清待测。
1.2 试剂与仪器:本检测机构使用的试剂均为合格产品，并且所用试剂均在有效期内，elisa法试剂盒和金标法试剂均为上海科华生物工程有限公司提供，其均获得国家卫生部的批准生产文号。
所用仪器为tecan酶标仪、pw-960酶标洗板机，使用前均经过精密校准，且仪器性能稳定，在进行相应的检测操作时均严格按照说明书进行。
1.3 方法:对所有hiv抗体初筛患者的血清标本均采用elisa法和金标法进行初次筛查，在筛查过程中严格按照试剂盒的相应说明书进行操作，对比两种方法的初筛阳性率。
应用改进ELISA检测干血棉球HIV抗体的可行性研究
棉 球处 于较 高 温度 、 存 较长 时 间可能会 引起 ＨＩ 储 Ｖ抗 体 阳性 样 品 ＯＤ值 降低 ， 致 弱 阳性 出现 假 阴 性 结果 ， 实 验 又 对 导 本
检 测 干 血 棉 球 ＨＩ Ｖ抗 体 的 Ｅ ＩＡ法进 行 改进 ， ＬＳ 以提 高 检 测
方 法 的灵 敏度 。
学 意义（ ＞ ００ ０份 ３ ℃储存 ３周 ＳＣ Ｐ ．５ ｏ２ ７ ／ Ｏ比值在 １～３的 ＨＩ 体弱 阳性 干血棉 球 ， Ｅ ＩＡ检测 ， Ｖ抗 用 ＬＳ 有部 分弱 阳
性样 品 出现假 阴性结果 ， 而用改 进 Ｅ ＩＡ法检 测 ， ＬＳ 全部 阳性 。结 论 可用 干血 棉球代 替血 清样 品 ， 改进 Ｅ ＩＡ法进行 用 ＬＳ
［】 国牙病 防治指 导组 ． 二 次全 国 口腔 健康 流行 病学 抽 样调 查 ［ ］北 京 ２全 第 Ｍ．
人 民卫 生 出版 社 ， ９ ９ １ — ２ １９ ： ０ １ ．
【］ 民魁 ， 丁 ， ３傅 张 王邦 康 ， ． 等 中国 ２ ３２名儿 童 与青 少年 错颌 畸形 患病 率 的 ５９
１４１ 按试 剂盒 说 明书操作 ．．
采 用 ４ ０６ ０ｎ ５ ／３ ｍ双 波长 ， 不设
空 白对照 。用美国产 Ｓａ ａ ０ ｔ Ｆ ｘ １０型全 自动酶标分析 仪 比色 ， ｔ ２ 结果 以说 明书给定参考值设 置的酶标仪判断结果 为准 。 １４２ 干血棉球样 品处理液 ．． 取含有 ２ ０ Ｌ血 清样 品的干血 ０ 棉球置于试管 中 ， 加生理盐水 ２０ ， ０ Ｌ 混匀 ， 溶解 ２ ０～３ ｎ ０ｍｉ ， ３０ ０ｒ ｎ 心 １ ｉ， ０ ｍｉ 离 ／ ５ｍ ｎ 取上清液 （ 品处 理液 ） 样 备用 。 １４３ 改进 Ｅ ＩＡ 在 Ｅ ＩＡ 法 中 ， １ 加入 阴性 、 ．． ＬＳ ＬＳ 第 步 阳性 对
ELISA法对抗-HIV灰区标本的再检测分析
ELISA法对抗-HIV灰区标本的再检测分析文进;张斌;吉天鹏;李兵;李惠成;刘兰;王佑珍【期刊名称】《临床输血与检验》【年(卷),期】2005(7)2【摘要】ELISA法检测血样时出现灰(色) 带反应是指对同一血样进行检测时,样本OD值在Cut off (CO) 值20 %上下区带的反应,发生灰带反应提示有一定的抗体活性存在.在感染早期(血清转阳期),由于抗体含量尚低,仅出现OD值轻微升高是可能的,感染个体实际上在某一阶段均经过了灰带区.为保证抗-HIV检测结果的可靠性,有效预防AIDS的传播、蔓延,笔者对21例抗-HIV灰区标本进行再检测分析,现报告如下.【总页数】1页(P121-121)【作者】文进;张斌;吉天鹏;李兵;李惠成;刘兰;王佑珍【作者单位】463000,河南省驻马店市,解放军第一五九医院检验科;463000,河南省驻马店市,解放军第一五九医院检验科;463000,河南省驻马店市,解放军第一五九医院检验科;463000,河南省驻马店市,解放军第一五九医院检验科;463000,河南省驻马店市,解放军第一五九医院检验科;463000,河南省驻马店市,解放军第一五九医院检验科;463000,河南省驻马店市,解放军第一五九医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R446.61;R512.91【相关文献】1.化学发光法对ELISA法HbsAg灰区阴性标本再检测分析 [J], 莫玉前;莫伟平2.ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和r丙肝抗体的检测分析 [J], 尹艳3.ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测分析 [J], 金晶4.ELISA法抗HIV检测设置灰区的意义分析 [J], 黄小娟;仝非;李晓东;辛艳泓5.ELISA法检测抗-HIV灰区设置的探讨 [J], 王桂喜;汪道法因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
ELISA法检测抗-HIV结果影响因素的研究
意 义（ ＞ Ｏ ０ ） Ｐ ． ５ 。结 论 血 液 保存 液对 Ｅ Ｉ Ａ法 检 测抗 一 Ｉ 结 果 影响 明显 ； 溶血 、 血 对 抗一 Ｖ Ｌ Ｓ 法 检 测 结果 无 影 响 。 ＬＳ ＨＶ 而 脂 ＨＩ Ｅ ＩＡ 关 键 词 ： Ｖ 抗体 ； 酶 联 免 疫 吸 附 测 定 ； 血 液 保 存 液 ； 影 响 ＨＩ Ｄ ：０ ３ ６ ／．ｓｎ １ ７ — １ ０ ２ ｌ ． ０ ０ ４ ＯＩ ｉ ． ９ ９ ｊ ｉ ． ６ ３４ ３ ． ０ １ １ ． ｌ ｓ 文献标识码 ： Ａ 文章 编 号 ： ６ ３４ ３ （ ０ ） ０ １ ５ — ２ １ ７ — １ ０ ２ 儿 ｌ — ０ ００
・
１ Ｏ ・ Ｏ５
国际检 验 医学杂志 ２１ 年 ７ 第 ３ 卷第 １ ０１ 月 ２ ０期
Ｉｔ ａ ｄＪｌ ２１， １ ２Ｎ ．０ ｎ ＪＬｂＭｅ， ｙ ０１Ｖｏ ３ ，ｏ １ ｕ ．
・
论
著 ・
ＥＬ Ｓ 法检 测抗一 Ｖ 结果 影 响 因素 的研 究 ＩＡ ＨＩ
梁其 隆 ， 陈龙 菊， 甘芳香
（ 东省茂 名 市 中心血 站质 量管理科 ５ ５ ０ ） 广 ２ ０ ０
摘 要： 的 目 探 讨 标 本 中溶 血 、 血 、 液 保 存 液 对 抗一 Ｖ Ｅ Ｉ Ａ 法检 测 结 果 的 影 响 。 方 法 采 用模 拟 对 照 实验 ， 溶 脂 血 ＨＩ Ｌ Ｓ 用
采用ELISA法对艾滋病受检对象进行初筛的结果观察
采用ELISA法对艾滋病受检对象进行初筛的结果观察【摘要】目的：对采用elisa法对艾滋病受检对象进行初筛的结果进行观察分析，探讨影响检测结果的相关因素，为今后的临床诊治工作提供可靠的参考依据。
方法：对在2010年1月-2012年12月间接受艾滋病筛查的体检者采取elisa法进行检查，并对检测结果和相关影响因素进行分析。
结果：共搜集检测标本5168份，其中初筛结果呈阳性者20例，阳性率为0.39%；经实验室进一步检查发现阴性标本6份，并经分析得到检测过程中所用试剂、标本状况以及操作等均会对检查结果产生一定程度的影响。
结论：采取elisa法对艾滋病受检对象进行初筛时，为了确保检测结果的准确性，应尽量使用质量可靠的试剂与合格的标本，并注意操作，降低假阳性率。
【关键词】 elisa法；艾滋病；初筛； hiv抗体；影响因素中图分类号 r446 文献标识码 b 文章编号 1674-6805（2013）20-0070-02hiv主要通过性、血液、母婴进行传播。
由于艾滋病在临床上治愈、预防接种的希望十分渺茫，并且仅能够展开对症治疗，因此对hiv展开实验室检测为预防艾滋病的一个重要措施。
目前酶联免疫法（elisa）检测抗-hiv在国际上的应用十分的广泛，为对艾滋病进行初筛的一种优良方法，目前在实验室中常用的检测方法按照原理可分成间接elisa法与竞争elisa法两种，其中以间接elisa法的应用率最高[1]。
本次研究中出于对采用elisa法对艾滋病受检对象进行初筛的结果进行观察分析，探讨影响检测结果的相关因素的目的，对5168份艾滋病初筛标本的检测结果进行了回顾性分析，现汇报如下。
1 材料与方法1.1 仪器与试剂仪器：st-36w型洗衣板机；st-360型酶标仪； thermo可调式移液器；dk-600a型水浴恒温箱。
试剂：人类免疫缺陷病毒诊断试剂盒。
检测标本为本地区艾滋病自愿咨询者。
1.2 检测方法检测时严格按照试剂说明书进行，并以《全国艾滋病检测技术规范》（2009年版）为依据对检测结果进行评判，将初筛标本呈阳性者送实验室进行进一步的确认。
胶体金法及酶联免疫法应用于艾滋病抗体检测的价值分析
胶体金法及酶联免疫法应用于艾滋病抗体检测的价值分析崔一峰海安市疾病预防控制中心微生物检验科，江苏南通226600[摘要]目的分析在艾滋病病毒抗体检测中，应用酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA）和胶体金法的检验效果。
方法选取2018年6月—2023年6月海安市疾病预防控制中心复检人类免疫缺陷病毒抗体检测的90份样本作为研究对象，均应用胶体金法及ELISA法检测。
比较两种检测方式的诊断效能。
结果胶体金法检测灵敏度93.33%、特异度86.67%、准确度92.22%；ELISA法检测灵敏度100.00%、特异度93.33%、准确率98.89%。
ELISA法检测灵敏度及准确度均优于胶体金法，差异有统计学意义（χ2= 5.172、4.709，P均<0.05）。
结论在艾滋病诊断中，应用ELISA及胶体金法均有较高的诊断效能，ELISA法检测灵敏度及准确度均优于胶体金法。
[关键词]艾滋病；酶联免疫法；胶体金法；抗体检测；诊断效能[中图分类号]R446 [文献标识码]A [文章编号]2096-1782（2024）02(a)-0105-04Analysis of the Value of Colloidal Gold Method and Enzyme-linked Immu⁃nosorbent Application for HIV Antibody DetectionCUI YifengDepartment of Microbiology Test, Haian Center for Disease Control and Prevention, Nantong, Jiangsu Province, 226600 China[Abstract] Objective To analyze the test effect of application using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and colloidal gold method in antibody of human immunodeficiency virus (HIV) detection. Methods From June 2018 to June 2023, 90 samples of HIV antibody retested by the Center for Disease Control and Prevention of Haian City were selected as the research objects, all of which were detected by colloidal gold method and ELISA method. The diagnos⁃tic efficiency of the two detection methods was compared. Results The sensitivity, specifity and accuracy of colloidal gold method were 93.33%, 86.67% and 92.22%, respectively. The sensitivity, specifity and accuracy of the ELISA method were 100.00%, 93.33% and 98.89%, respectively. The detection sensitivity and accuracy of ELISA method were better than those of colloidal gold method, and the differences were statistically significant (χ2=5.172, 4.709, both P<0.05). Conclusion In the diagnosis of acquired immune deficiency sgndrome, the application of ELISA and colloidal gold method both have high diagnostic efficacy, and the detection sensitivity and accuracy of ELISA method are better than colloidal gold method.[Key words] AIDS; ELISA; Colloidal gold; Antibody detection; Diagnostic efficacy艾滋病为临床中常见的传染性疾病之一，人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV）在进入人体后会攻击机体免疫系统，进而引发安全问题。
干血斑HIV-1核酸定性检测的可靠性研究
D O I:10.13419/ki.aids.2021.05.02•论著•干血斑HIV-1核酸定性检测的可靠性研究姚佳明\陈文先2,潘晓红、郭志宏\丁晓贝\范钦、夏燕\张佳峰1(1.浙江省疾病预防控制中心艾滋病与性病预防控制所，杭州310051; 2.义乌市疾病预防控制中心微生物检验科，浙江义乌322000)摘要：目的探索干血斑(D B S)核酸定性检测用于H I V-1感染诊断的可靠性方法同步采集参加自愿咨询检测人员的D B S样本和配套血清样本各230份，D B S样本用于H I V-1核酸定性检测，血清样本进行常规抗体检测，分析比较两种方法的检测结果。
结果D B S初次核酸定性结果与血清初次抗体检测结果一致率为98.70%，/^PPa值为0.93,经复核及随访复检后两种方法最终判断结果完全一致，一致率为100%。
其中2例抗体不确定样本其核酸定性检测为阳性，随访后W B条带进展，确证为H I V-1抗体阳性;有1例抗体阴性样本其首次核酸定性检测为阳性，双份复核为阴性：结论D B S核酸定性结果与常规血液抗体检测的感染诊断结果一致性好，且流程简便、准确性高，但需考虑不确定范围。
关键词：艾滋病病毒；干血斑；核酸检测；抗体检测中图分类号：R 512.91;R 373.9 文献标志码：A文章编号：1672-5662(2021 )05-0446-04Reliability of the result for HIV-1 qualitative nucleic acid test based on dried blood spots YAO Jiaming', CHENWenxian:,PAN Xiaohong', GUO Zhihong1, DING Xiaobei', FAN Qin1, XIA Yan', ZHANG Jiafeng'. (1. Department o fHIV/AIDS & STD Control and Prevention, Zhejiang Provincial Center for Disease Control and Prevention, Hangzhou310051, China;2. Microbiological laboratory, Yiwu Municipal Center for Disease Control and Prevention, Yiwu 322000)C o r r e s p o n d i n g a u t h e r:Z H A N G Jiafeng, Email: **************.cnSupported b y Mega-Projects o f National Science Research for the 13th Five-Year Plan (2017Z X10201101)Abstract: Objective T o investigate the reliability o f H I V-1qualitative nucleic acid test using dried b l o o d spots(D B S)to diagnose H I V-1infection. Methods D B S s a m p l e s a n d paired s e r u m s a m p l e s w e r e collected synchronouslyf r o m230voluntary attendees seeking counselling a n d testing. Th e D B S s a m p l e s w e r e use d for the H I V-1qualitativenucleic acid test, a n d the s e r u m sa m p l e s w e r e used for routine antibody detection. T h e results o f the t w o m e t h o d s w e r eanalyzed a n d c o m p a r e d.Results T h e concordant rate o f first test results b e t w e e n H I V-1qualitative nucleic acid testusing dried blo o d spots a n d paired s e r u m antibody test w a s98.70%,a n d the Kappa value w a s0.93. After c h e c k a n dfollow-up reexamination, the t w o m ethods' final j u d g m e n t results w e r e entirely consistent, with a constant rate o f 100%.T w o s a m p l e s with indeterminate W e s t e r n blotting (W B) results w e r e initially tested positive in H I V-1qualitative nucleicacid assay. T h e s e t w o s a m p l e s w e r e confi r m e d to be H I V-1antibody positive after follow-up, with W B b a n d i n g patternsprogressed. W i t h s e r u m antibody negative, another s a m p l e w a s initially tested positive in H I V-1qualitative nucleic acidassay but f o u n d negative in the t w o parallel samples' reexamination. Conclusion T h e H I V-1qualitative nucleic acid testusing D B S is consistent with those o f routine blood antibody tests to diagnose H I V-1infection. I t is characterized b ysimple Process a n d high accuracy, but the uncertainty range should b e taken into account.Keywords: H I V; Dried blood spots; Nucleic acid test; A n t i b o d y test干血斑（Dried Blood Spots，DBS)技术最初建立 应用于新生儿代谢紊乱筛查1，国内研究学者开展 DBS在HIV-1抗体筛查2、基因型耐药检测1等方面 的评价研究，近年来又探索应用D I3S抗体检测方法 的优化4于2019年7月1日实施的新版《艾滋病和收稿日期：2020-07-27;修回日期：2020-09-1()基金项目：国家“十三五”科技重大专项(2017Z X10201101)第一作者简介:姚佳明（1995—），男，浙江省杭州市人，从事艾滋病检测工作通信作者.•张佳峰，副主任技师，Email 丨***********.cn 艾滋病病毒感染诊断(WS293-2019)》[5]中指出：成 人、青少年及18月龄以上儿童在HIV抗体筛查试验 有反应前提下，若核酸定性试验阳性或核酸定量试 验>5 000拷贝/mL即可诊断。
浅谈血站筛查抗-HIV两种ELISA试剂质量的评估
浅谈血站筛查抗-HIV两种ELISA试剂质量的评估毕承恩【摘要】目的分析血站筛查抗-HIV的两种ELISA试剂的质量.方法选取1000份血液样本(2012年11月至2014年12月)使用两种国产ELISA试剂进行统计,分析抗-HIV的阴性、阳性结果以及两种ELISA试剂的质量.结果通过本文研究可以看出,A试剂的检出率明显高于B试剂(P.＜0.05),但依旧存在假阳性的例数,而两种ELISA试剂相结合对血液样本进行检测,其可以有效提高抗-HIV的检出率.结论在血站使用两种ELISA试剂对血液样本进行检测,可以看出,其能够确认结果,降低假阳性的例数,不仅能够提高试剂的质量,还能够有效的提高血站采集血液时的检测水平,具有较高的价值,值得广泛应用以及推广.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2016(014)020【总页数】1页(P38)【关键词】血站筛查抗-HIV;ELISA试剂;质量;评估【作者】毕承恩【作者单位】云南省昭通市中心血站,云南邵通657000【正文语种】中文【中图分类】R446ELISA是一种以酶作为标志物，以抗原以及抗体之间的免疫结合反应作为基础的一种测定方法，其试剂操作简便，结果的判断比较客观，同时，其对环境污染较小，也不需要特殊的仪器设备，因而广泛应用于临床。
本文主要对血站筛查抗-HIV的两种ELISA试剂的质量进行评估，详细报道如下，以供临床参考以及研究。
1.1 标本：选取1000份符合《献血者健康检查要求》［1］的血液样本作为研究对象，其是来自于2012年11月至2014年12月的样本。
1.2 试剂：A试剂是来自于上海科华的ELISA抗-HIV1/HIV2，B试剂来自于北京万泰抗-HIV1/HIV2。
以上试剂均经国家药品监督管理局注册批准，批批检定合格的试剂，且在有效期内使用。
1.3 检测方法和结果判断：采用上述两种ELISA试剂同时对1000份血液样本进行检测，检测方法严格按试剂使用说明书编程，帝肯RSP100 和Microlab Star8CH全自动加样，Microlab FAME全自动酶免分析系统进行孵育、洗板、加试剂，最后由auslab酶标软件进行结果判读，初复检样本，S/CO≥1，判定为阳性，对可疑阳性样本或单边试剂阳性的样本进行双孔复检，仍阳性或可疑的样本，送昭通市疾病控制中心HIV确认实验室用蛋白印迹（WB）法进行确认。
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『 ４ １ 朱宗 银 ． 正 畸儿 童 的健 康 教育 叫 ． 全科 护 理 ， ２ ０ ０ ９ ， ７（ １ ） ：１ ８ ３ — １ ８ ４ ． ［ ５ ］ 杨涛 ． 儿 童 口腔 不 良习惯 导 致错 颌 畸 形 的 临床 分 析 和预 防 措施 『 Ｊ 】 ． 中 国
妇幼 保健 ， ２ ０ ０ ７ ， ２ ２（ ５） ： ２ １ ６ ７ — ２ １ ６ ８ ．
［ ６ 】 傅 民魁 ． 我 国 口腔正 畸学 科 的发 展现 状 存 在 问题 和解 决对 策 【 Ｊ 】 ＿ 中华 １ ５ １
腔 医学 杂志 ， ２ ０ ０ ４ ， ３ ９（ ２ ） ： ８ ９ — ９ ０ ． ［ ７ 】 姚红， 赵 尔 ， 秦静怡 ． 错 颌 畸形 患 病率 的研 究 动 态 【 Ｊ ］ ． 中 国初 级 卫 生 保
凝 同后 ３ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ离 心 １ ５ ｍ ｉ ｎ分离血清 ， 置一 ２ ０℃保存使用 。 器材 ： 干棉球 ［ ２ １ ， 在具有 圆形 凹槽 塑料膜一
面， 固定一个 或几个适 当大小 的医用脱脂棉 球作 为血清样 品的
载体 ， 在纸壳 板 的另一 面可注 明样品来源 、 检测 目的 、 采血 日期
（ 每 克 棉 球可 吸纳 约 ２ ０ ０ ～４ ０ ０ Ｌ血 清 ） ， 储 存 和 运输 都 比
较 方便 ， 而 且样 品的前 处 理也 非 常容 易 。为研 讨 干血棉 球 代 替 血清 样 品检测 ＨＩ Ｖ抗 体 的可行性 ， 笔 者用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 对 ２ ９ ８ 份 干 血 棉 球 与 相 同血 清 样 品进 行 了实 验对 比。 为 弥补 干 血
学 意义（ Ｐ＞０ ． ０ ５ ｏ ２ ０份 ３ ７ ℃储存 ３周 Ｓ ／ Ｃ Ｏ比值在 １～３的 ＨＩ Ｖ抗 体弱 阳性 干血棉 球 ， 用Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ检测 ， 有部 分弱 阳
性样 品 出现假 阴性结果 ， 而用改 进 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法检 测 ， 全部 阳性 。结 论 可用 干血 棉球代 替血 清样 品 ， 用 改进 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法进行
棉 球处 于较 高 温度 、 储 存 较长 时 间可能会 引起 ＨＩ Ｖ抗 体 阳性 样 品 ＯＤ值 降低 ， 导 致 弱 阳性 出现 假 阴 性 结果 ， 本 实 验 又 对
检 测 干 血 棉 球 ＨＩ Ｖ抗 体 的 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法进 行 改进 ， 以提 高 检 测
方 法 的灵 敏度 。
健， ２ ０ ０ ３ ． １ ７（ １ ０） ： ５ ９ — ６ ０ ．
了解有 限， 对于错颌畸形 的危 害及 如何 预防 ， 何时应该治疗普遍
缺乏认 识。通过 这次调查 和研究 ， 笔者认 为在今后 的工作 中应 增加对 基层幼儿 同的 口腔 预防保健 知识 的普及 和宣教工 作 ， 定
从 业人员 ， 共 １ ９ ８ 份。
体 阳性 １ ０ ０份 ；经 ３ ７ ℃储 存 ３周 的 ２ ９ ８ 份 相 同血 清干 血棉 球 样 品处 理液 ， 用改进 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ方法检测 ， ＨＩ Ｖ抗体 阳性 ９ ９份。两
种样 品 ＨＩ Ｖ抗体 检测结果符合 率为 ９ ９ ． ０％， 经 ｚ 检验 ， 相同 的
１ ． ２ 试 剂
目前我 国 ＨＩ Ｖ抗体 筛查 实验室都 采用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 检测血 清 样 品中 ＨＩ Ｖ抗体 ， 而血清在 常温下存放 容易变 质 ； 虽然用 滤纸
干 血斑样 品便 于储 存和 运输 ， 但 因样 品载量小 （ 每个滤 纸 片载
珠 海丽 珠试 剂 股份 有 限公 司生 产 ， Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法检 测 Ｈ Ｉ Ｖ 一 １ ／
美 国产 Ｓ ｔ ａ ｔ Ｆ ａ ｘ ２ １ ０ ０型全 自动 酶标 分 析 仪 ， 美 国产 Ｓ ｔ ａ ｔ
Ｆ ａ ｘ ２ ６ ０ ０型洗 板 机 。
１ ． ４ 方 法
的 ＨＩ Ｖ抗 体 ， 这 是本 研究 要探 讨 的两个 问题 。医用脱 脂棉 柔
软膨松 ， 吸水 性 极 强 ， 有 容易 获 得 ， 是血 清 样 品 的最 佳 载 体 。 将 血 清 滴 于 干棉 球 上 制 成 干 血 棉球 ， 具 有 较 大 的 血 清 容 量
等 项 目。
制备： 将 血 清样 品 ２ ０ ０ ＸＬ滴 于 １ Ｉ 个 棉球 载体 上 ， 每份 血 清 可滴 于一至 数个 棉球 载体 ， ３ ７ ℃干燥过 夜 ， 干燥 器 干燥后 后 置密封袋 中 ， 即为干血棉球 。３ ７ ℃储存 ３周 。
（ 下转第 １ ２ ０页 ）
１ ０ ６中 ■ 五 药 辱 干 学Ｃ Ｈ Ｉ Ｎ Ａ Ｍ Ｅ Ｄ Ｉ Ｃ Ｉ Ｎ Ｅ Ａ Ｎ Ｄ Ｐ Ｈ Ａ Ｒ Ｍ Ａ Ｃ Ｙ
分血 清制成 干血棉 球置 ３ ７ ℃储存 ３ 周， 然后， 用干血 棉球样 品液与血 清样 品进行 Ｈ Ｉ Ｖ抗 体检测对 比试 验。血清 样 品按 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ说 明书方法 检测 ， 干血棉球用改进 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ方法检测 。 结果 干血棉球 与相 同的血 清样品检测结果之 间差异无统计
［ ２ 】 全 国牙病 防治指 导组 ． 第 二 次全 国 口腔 健康 流行 病学 抽 样调 查 ［ Ｍ ］ ． 北 京
人 民卫 生 出版 社 ， １ ９ ９ ９ ： １ ０ — １ ２ ．
【 ３ ］ 傅 民魁 ， 张丁， 王邦 康 ， 等． 中国 ２ ５ ３ ９ ２名儿 童 与青 少年 错颌 畸形 患病 率 的
２ ０１ １ 年１ １ 月第１ 卷第 ２ Ｉ 期
表４ 学 龄前儿 童错 颌 畸形 患病率 及分 布表
２ 结 果
哈 尔 滨 市 市 区学 龄 前 儿 童 错 颌 畸形 患 病 率 为 ５ ４ ． ６ ０ ％， 其中 Ｉ 类 错颌 畸形 患病 率 为 ７ ５ ． ８ ０ ％， Ｉ Ｉ 类错 颌 畸形 患病 率为 １ １ ． ３ ０ ％， １ １ Ｉ 类 错 颌 畸形患 病率 为 １ ２ ． ９ ０ ％。存 在各 类 口腔 不 良 习惯 的学龄前 儿童 为 ２ ０ ． １ ０ ％。调查对象 与乳 牙期组 的错颌 畸
血 清干血 棉球 与血清样 品检测 结果之 间差异 无统计 学意 义（ Ｊ Ｐ
＞０ ． ０ ５ ｏ 见表 １ 。
表１ 两种 方法检 测 相同血 清样 品 Ｈ Ｉ Ｖ 抗体 结 果 比较
１ ． １ ． １ 血清样 品制备 １ ． １ ． ２ 干血棉球
采 集静脉血 ５ ｍＬ ， 室温放 置 ２ ｈ ， 自然
调查 ｌ Ｊ Ｊ ． 中华 口腔 医学 杂志 ， ２ ０ ０ ２ ， ３ ７（ ５ ） ： ３ ７ １ — ３ ７ ３ ．
３ 讨 论
本次调查研究 以个别 正常合为标准制定表格 。本项研究分
组条件 明确 ， 样 本量 比较大 ， 涵 盖了哈尔滨市 ８个 区近八所幼儿 同。总人数为 ３ ９ ５ ６名 ， 年龄 ３ － ６ 岁， 男女均等。 本项调查研 究的结果显示哈尔滨市学龄前儿童错颌 畸形发 病率较高 ， 临床就诊率低 ， 学龄 前儿童及家长对错颌畸形 的知识
【 ８ 】 孙燕 ， 姜潮 ． 错颌 畸形 对 青 少年 自尊 发展 影 响 的多 因素 分 析 『 Ｊ １ ． 中华 Ｖ Ｉ 腔
医学杂 志 ， ２ ０ ０ ４ ， ５（ １ ） ： ６ ７ — ６金陵， 等． 西安市 ２ ６ ４ ６名 青 少 年错 颌 畸 形 的 调 查 『 Ｊ １ ． 实 用
照， 待检 样 品 由 ５ ０ Ｌ改为 １ ０ ０ ＸＬ Ｉ ， 温育时间 由３ ０ ａ ｒ ｉ ｎ改 为
６ ０ ｍｉ ｎ ； 其他 步骤和试剂用量 同试剂说 明书 １ ． ４ ． ４ ２ ０份 ３ ７ ｃ ｃ 储存 ３周 Ｓ ／ Ｃ Ｏ 比值在 Ｉ一３的弱 阳性血清 ，
按Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ说 明 书 和 改 进 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ两 种 方 法 检 测 。
形患病率 表见表 ４ 。 口腔不 良习惯各类 型分布表 见表 ５ 。具有 口腔不 良习惯 的总人数为 ７ ９ ５名 ， 占总人 数百分 比为 ２ ０ ． １ ０ ％。
［ 参考文献】
［ １ ］ 傅 民魁 ． 口腔 正畸 学 【 Ｍ］ ． 第 ３版 ． 北京 ： 人 民卫生 出版 社 ， ２ ０ ０ ０ ： ７ ．
口腔 医学 杂志 ， １ ９ ９ ７ ， １ ３（ ３） ： ２ １ ６ — ２ １ ７ ．
期为学龄前儿童及 家长举 办 口腔保健知识讲 座 ［ ８ － ９ １ ， 使儿童及 家
长 认 识 到 预 防 和早 期治 疗 儿 童错 颌 畸形 的重 要 性 和 必 要 性 。
２ ０１ １ 年１ １ 月第１ 卷第 ２ １ 期
应 用 改 进 Ｅ ｕ ｓ Ａ 检 测干 血 棉 球 Ｈ Ｉ Ｖ 抗 体的 可 行 性 研 究
赵 红玉 Ｉ 李 颖２
１ ． 甘 肃省灵台县疾病预防控制中心， 甘肃灵台 ７ ４ ４ ４ ０ ０ ； ２ ． 甘肃省平凉市第二人 民医院 ， 甘肃平 凉 ７ ４ ４ ０ ０ ０ 【 摘 要 】目的 研 讨 以改进 的 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 检 测 干血棉 球 Ｈ Ｉ Ｖ抗体 的可行 性 。方 法 用 包 括 ２ ０份 Ｓ ／ Ｃ Ｏ比值在 １～ ３以 内 的１ ０ ０ 份 ＨＩ Ｖ抗 体 阳性 血清 ， １ ９ ８份 阴性血清 样品进 行实验 研究 ， 每份 血清 分为两 部分 ， 一部 分血 清置 一 ２ ０ ℃； 另一部
Ｈ Ｉ Ｖ一 ２ 抗体 试剂 ， 批号为 ２ ０ １ ０ １ ０ ０ ７ ０ ８ 。
１ ３ 仪 器
体仅 容纳 ５ ０～１ ０ ０ Ｌ血 清 ） ， 其应用 范 围受 到 限制 。选择 何
种 载体 既具 有较大 的样 品载 量 ， 以便进 行多项 目检 测 ， 又便 于 在 常温下容 易储 存 和运 输 ；又用 何种 方法 检测 这 种特 殊载 体
１ 材 料与 方法