耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离鉴定及耐药基因检测

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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌实验室诊断方法

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌实验室诊断方法
制为 P B P改变或高水平 产 B 一 内酰胺 酶( 边 界 MR S A) Z J I 起的 耐药结果 。菌株一旦检测结果为苯唑西林耐药 , 则表示对其 他 B 一 内酰胺类抗生素 ( 抗 MR S A的头孢菌素除外 ) 都耐药或 者不报告这些药物的敏感性。利用头孢西丁检测 m e c A介导 的苯唑西 林耐药 推荐 的质 量控 制菌株 为 A T C C 2 5 9 2 3 . m e c A 阴性 ( 抑菌圈直径 2 3 ~ 2 9 m m) 和 金 黄 色 葡 萄 球 菌
DOI : 1 0 . 1 1 6 5 5 / z g y wy l e 2 01 5 个菌落溶入 5 0 1 蒸馏水 , 9 9℃干浴 1 0
mi n , 3 0 0 0 r / m i n 离心 1 mi n , 2 I x l 上 清液 用 于 2 5 l 的P C R反
AT C C2 9 2 1 3 。
注: 头孢西丁结果可以预测苯唑西林敏感 或者耐药
2 . 1 D N A提 取 : 取冻存实验菌株在 5 %的哥 伦 比亚 羊 血 平 板
1 . 2 微量 肉汤稀释法 : 微量肉汤稀释法培养基用阳离子校正
MH肉汤 ( C A MH B ) ,检测苯唑西林的 MI C值需要添加 2 %
A T C C 4 3 3 0 0 . m e c A 阳性 ( 抑 菌 圈直 径 ≤2 1 mm) 。
表 1 金黄色葡萄球菌对苯唑西林的折点
S C C me c 基 因型别 : 一般来说 . 甲氧西林耐药 的金黄色葡 萄球菌 都携 带有 m e c A基 因 ,但其 耐药 程度 却不 尽一 致 , Me c A基因位于一个可移动 的元件上 ,被称为金黄色葡萄球
郝 崇华 万艳红 裴世静 张燕军 王淑峰 戎建荣

牛乳源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测与耐药性分析

牛乳源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测与耐药性分析

牛乳 源 耐 甲氧 西林 金黄 色 葡萄 球菌 的
检测 与耐 药性 分析
姜 慧娇 ,苏 艳, 韦 海 娜 ,黄 莹
8 3 0 0 5 2 ) ( 新疆农业大学 动物医学学院 , 乌鲁木齐 摘
要: 从 新 疆 昌吉 、 伊 犁、 石 河 子 3个 地 区 奶 牛 养 殖 场 乳 腺 炎 奶 样 中 共 分 离 1 3 4株 金 黄 色 葡 萄 球 菌 , 对 其 中
呈现多重耐药现象 。
关 键 词 : 牛乳 腺炎 ;金 黄 色 葡萄 球 菌 ;耐 甲 氧西 林 金 黄 色 葡 萄 球 菌 ;r n e c A基因 ; 耐 药 性
中 图分 类 号 :¥ 8 5 1 . 6 1 1 文献标识码 : A
An a l y s i s o n De c t e c t i o n o f Me t h i c i l l i n — Re s i s t a n t J S f p Z D c D c c a u r e u s
新 疆 农 业 大 学 学 报
2 0 1 3 , 3 6 ( 1 ) : 1 6 ~2 0
J o u r n a l o f X i n j i a n g Ag r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y
文 章 编 号 :1 0 0 7 — 8 6 1 4 ( 2 0 1 3 ) 0 1 - 0 0 1 6 — 0 5
I s o l a t e d f r o m Bo v i ne M i l k a nd I t s Re s i s t a n c e t o Dr u g s
J I ANG Hu i — j i a o,S U Ya n,W EI Ha i — n a ,HUANG Yi n g

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 检测(荧光PCR法)

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 检测(荧光PCR法)
XX,
汇报人:XX
01
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05
02
04
荧光PCR法是一种 基于DN聚合酶链 反应的检测方法
荧光PCR法通过荧 强弱来定 量分析DN序列
荧光PCR法具有高 灵敏度、高特异性 、快速、简便等优 点
灵敏度高:能够检测到极低浓度的MRS 特异性强:能够准确区分MRS和其他细菌 快速简便:操作简便,检测时间短 结果准确:检测结果准确可靠,重复性好
护公众健康
灵敏度高:荧光PCR法具有 较高的灵敏度,能够检测到 极低浓度的MRS
特异性强:荧光PCR法具有 较高的特异性,能够准确区 分MRS和其他细菌
快速高效:荧光PCR法具 有快速高效的特点,能够在 短时间内完成MRS的检测
自动化程度高:荧光PCR法 可以实现自动化操作,提高 检测效率和准确性
荧光PCR法在MRS检测中的前景展望:提高灵敏度和特异性,提高检测准确性和 可靠性,降低检测成本,提高检测效率,推动MRS检测技术的发展。
汇报人:XX
临床诊断:用于检 测MRS感染,快速 准确
科研研究:用于研 究MRS的传播、变 异和耐药性
公共卫生:用于监 测MRS的流行病学 和防控策略
食品检测:用于检 测食品中的MRS污 染,保障食品安全
样本类型:血液、 尿液、痰液等
采集方法:无菌操 作,避免污染
保存条件:低温、 干燥、避光
处理方法:离心、 过滤、稀释等
样品采集:采集患者样本,如血液、痰液等
核酸提取:使用核酸提取试剂盒提取样本中的DN或RN
荧光PCR反应:将提取的核酸与荧光PCR反应试剂混合,进行 PCR反应
荧光PCR检测:使用荧光PCR检测仪检测反应产物,判断样本 中是否存在MRS

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染临床及耐药分析

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染临床及耐药分析

·药物临床·耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染临床及耐药分析纪玉红刘亚辉李峂(上海邮电医院院感染科上海 200040)摘要目的:分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床特点及耐药情况。

方法:对上海邮电医院2017年1月—12月检测到的MRSA进行回顾性分析。

结果:MRSA检出率达80.95%,三病区(内科)、六病区(外科)比例最高,痰液、咽拭子是MRSA分布最多的样本。

MRSA来源中女性多于男性,81~90岁是MRSA占比最高的年龄段。

MRSA对青霉素、苯唑西林、庆大霉素的耐药率高达100%,对替考拉宁、万古霉素100%敏感。

结论:医院需要建立和完善对MRSA的监测,加强重点环节管理,即重点科室、重点人群的管理,加强抗菌药物的合理应用,落实各项预防与控制措施。

关键词耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率耐药性中图分类号:R181.81; R378.11 文献标志码:C 文章编号:1006-1533(2019)07-0047-02Clinical analysis of drug resistance of methicillin-resistantStaphylococcus aureus infectionJI Yuhong, LIU Yahui, LI Tong(Department of Infection Control, Shanghai Postal and Telecommunication Hospital, Shanghai 200040, China) ABSTRACT Objective: To analyze the clinical characteristics and drug resistance of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Methods: The data from MRSA infection detected in our hospital from January to December, 2017 were retrospectively analyzed. Results: The detection rate of MRSA reached to 80.95%, which was the highest in the third and sixth wards and the most in the samples of sputum and throat swab, and MASA was infected more in women than men and the highest infection was found in the elderly over 81 years older. All the MRSAs were resistant to penicillin, oxacillin and gentamicin, but sensitive to teicoplanin and vancomycin. Conclusion: The monitoring of MRSA should be established and improved in the hospital, the management of key links including key departments and key populations and the rational use of antibacterial agents should be strengthened and the various prevention and control measures should be implemented.KEY WORDS methicillin-resistant Staphylococcus aureus; detection rate; drug resistance耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为临床常见病原菌,1961年临床上首次分离出MRSA[1],随着抗菌药物种类的不断增加及临床广泛使用,MRSA感染逐年增多。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌院内感染和耐药性分析

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌院内感染和耐药性分析

540 2 2 0广 东 雷 州 市 人 民 医院
摘 要 目的 : 了 解耐 甲氧 西林 金 黄 色 为 葡萄球 菌( S 院 内感染和耐 药情况 , MR A) 指 导 临 床 合 理 使 用 抗 生 素 。 方 法 : 医 院 对 所 有 耐 甲氧 西 林 金 黄 色 葡 萄 球 菌 感 染 病 例进行 回顾 性 分 析。 结果 : 年 分 离 出 2 12株 金 黄 色 葡 萄 球 菌 , 中 MR A 17 9 其 S 0 株 , 离率 5 .3 。MR A 感 染 率 高 的 分 5 7% S 前 5位 科 室 分 别 是 神 经 内科 、 经 外 科 、 神 IU 室 、 吸 科 、 通 外 科 。 身体 感 染 部 C 呼 普 位 以 呼 吸 道 感 染 为 主 。MR A 对 万 古 霉 S 素和替 考拉 宁等糖肽 类抗 生素 无耐 药性 , 敏 感 率 10 ; 氯 霉 素 、 福 平 、 方 新 0% 对 利 复 诺 明较 为 敏 感 ; 其 他 抗 生 素 耐 药 性 较 对 高 。结 论 : 医院 MR A 分 离 率 高 , 多 重 S 呈
李 建宁
曹 龙翎
s l e a e o r du e ho p tl n e to halb tk n t e c s ia if cin, d v lp a tra d u r ssa c a i e eo b ce il r g e itn e nd n— sr c o e s fa tb oi . t tpr p ru e o n ii t u cs
道分泌物最多(33 , 6.%)其次为皮肤分泌液
(16 )脓液 、 、 2 .% , 血液 尿液 、 水 、 脊 液 和 腹 脑 其 他 组 织 的 分 离 率 分 别 为 63 、.1 、 .% 28%

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药机制分析

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药机制分析

1.3 MRSA 检测:采用纸片扩散法(KB 法)与最低 抑菌浓 度 法 (MIC 法)两 种 方 法 进 行 MRSA 检 测。 KB法使 用 头 孢 西 丁(FOX)药 敏 纸 片 检 测 MRSA, 药敏结果 判 读 参 照 美 国 临 床 实 验 室 标 准 化 委 员 会
(CLSI)2017 版 抗 微 生 物 药 物 敏 感 试 验 执 行 标 准 ,放 在(35±2)℃ 的 专 门 培 养 箱 里 面 48h 之 后 ,测 出 纸 片 附近的抑菌 圈 直 径,比 如:FOX 纸 片 直 径 ≤21 mm, 即判 为 MRSA,FOX 纸 片 直 径 ≥22 mm 者 判 为 MSSA,介于二者之间可进行 MIC法筛选。 1.4 mec基 因 检 测:①DNA 模 板 的 提 取:在 高 压 灭 菌 的 试 管 内 将 待 测 菌 株 用0.9% 氯 化 钠 注 射 液 调 到2.0(1.8~2.2)麦 氏 单 位 菌 悬 液,沸 水 中 煮 15 min,吸取1000μL 菌悬液于编好号的35个 EP 管
为:80V90 mA、连 上 电 源,在 恒 压 情 况 下 电 泳,之 后,通过凝胶成像系统来得到成像,且将结果存留。 1.5 基 因 测 序:采 取 mec 基 因 且 阳 性 较 好 的 菌 株,将其 PCR 产 物 送 英 潍 捷 基 (上 海)贸 易 企 业 做 测序,之后,将得到 的 数 据 和 GenBank 里 面 的 相 关
1 材 料 与 方 法 1.1 菌株来 源:实 验 所 用 菌 株 来 源 山 西 医 学 科 学 院 、山 西 大 医 院 从 临 床 标 本 分 离 的 剔 除 重 复 与 污 染
文献[3],由 上 海 生 工 生 物 工 程 公 司 合 成。 引 物 序 列 见 表 1。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌qacA基因的检测及分型

94 1
河北 医药 20 年 4 第 3 卷 第 8 09 月 1 期
Hbi e c u a, 0,o3 A r o8 eeM d aJ r l 09Vl 1 o N . il on 2

论 著 ・
耐 甲氧 西林 金 黄 色 葡 萄球 菌 qc aA基 因 的 检 测 及 分 型
s p yoo c s ue s( S , hc ee i ltd f m iee tsmpe n o Fh si li re o po ie te t h l c u ru MR A) w ih w r s ae r df rn a ls i l opt n od r t rvd h a c a o o l a
的MS R A再 流 行 , 少院 内感 染 提 供 依 据 。 方 法 减 收 集 分 离 自我 院 患 者 的 MR A4 株 , 用 聚 合 酶 链 式 反 S 5 采
应 (C 对 该 4 株 MR A耐 消毒 剂基 因 qc P R) 5 S aA进行检测并采用脉冲场凝胶 电泳( F E 方 法进行 类型分析 。 PG )
e ie c o g ie te c n c l ain l s f iifc ns n o a od t ep p lr y o S i lt r g rss n vd n e t ud l ia t a e o s e t t .a d t v i o ua t fMR A w t mu i u e i a t h i r o u d n a h i h d t n e r a e t n ci o rh s i . t o s a d d ce s e i e t n i u o pt1 M eh d T e4 t iso S e e q c e ed tr i e y p lme ae h f o n a h 5 s an f r MR A g n a A w r ee m n db y r o s

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析及基因同源性检测


A b s t r a c t
Ob j e c t i v e
T o i n v e s t i g a t e t h e r e s i s t a n c e a n d g e n e h o mo l o g y o f MRS A i s o l a t e d f r o m h o s p i t a l
p e r f o r me d b y K— B me t h o d , me c A g e n e wa s d e t e c t e d b y P CR. T h e g e n e h o mo l o g y wa s a n a l y z e d b y P u l s e d F i e l d
s t r a i ns we r e f o u nd r e s i s t a n t t o v a nc o my c i n .t e i c o pl a n i n a nd l i n e z o l i d . 2 1 s ra t i ns O f M RS A a l 1 c a r r i e d me c A g e ne . a n d t h e g e n e h o mo l o g y o f t he m wa s po o r .Co nc l us i o n Ⅳ【 RSA i s o l a t e d f r o m t h e ir f s t a f f i l i me d h os pi t a l o f Anh u i me d i c a l
Ge l El e c t r o p h o r e s i s ( P F GE 1 . Re s u l t s T h e r e s i s t a n t r a t e o f 2 1 s t r a i n s o f M RS A t o c l i n d a my c i n , e r y t h r o my c i n a n d

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析和mecA基因检测

耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)是医院和社区感染的重要病原菌。

自20世纪90年代初起MRSA检出率有逐年上升趋势,已引起全世界重视。

MRSA不仅对β内酰胺类抗生素耐药,还常对喹诺酮类、氨基糖苷类和大环内酯类等抗菌药物耐药。

由于其多重耐药性,易造成医院感染的暴发流行,全身感染的病死率高达50%以上。

已成为临床抗感染治疗的一大难题[1]。

为正确掌握临床分离MRSA耐药性,给临床用药提供参考,我们分析了太原地区3所综合性医院临床分离的101株MRSA来源、分布、耐药监测情况并对其进行了mecA基因检测。

1材料和方法1.1菌株来源:收集2007—2008年太原地区3所综合性医院(山西省人民医院、山西医科大学第一医院、山西医科大学第二医院)临床分离的MRSA101株,剔除同一患者相同部位的重复菌株。

来源于住院和门诊患者的各类临床标本,包括痰、导管末段、血液、脓液、脑脊液、伤口分泌物、引流液、穿刺物等。

1.2主要试剂与仪器:金黄色葡萄球菌凝集试剂Slidex Staphplus,APIStaph葡萄球菌鉴定试条,VITEK-60全自动微生物分析系统均为法国生物梅里埃公司产品;药物敏感实验培养基为MH培养基购自天津金章生物技术公司现成品;抗生素药敏纸片为Oxoid公司产品。

聚合酶链反应(PCR)扩增所需试剂均为上海生工工程公司产品。

1.3药敏实验:采用纸片扩散法(Kirby-Bauer法)进行。

质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923。

药敏实验结果按美国临床实验室标准化委员会(CLSI)标准判断结果,采用Whonet5.4软件统计分析数据。

1.4MRSA检测:根据CLSI推荐的头孢西汀纸片扩散法检测。

应用标准的纸片扩散法实验条件,金黄色葡萄球菌孵育18h,使用反射光阅读头孢西汀抑菌圈直径。

判断标准是若抑菌圈直径≤21mm判断为MRSA。

抑菌圈直径≥22mm,判断为MSSA。

1.5mecA基因检测,用PCR法。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型与耐药性研究


[] 6漆
坚, 程
献 . 绿 假 单 胞 菌 耐 药 性 分 析 [ ] 中华 医 院 感 染 学 铜 J.
杂 志 ,0 7 1 (0 :2 5 2 0 ,7 1 ) 1 8 .
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
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中 国实 验 诊 断 学
21 0 2年 7月
第 1 6卷
第 7期

11 5 一 9
念 珠菌感 染 主要 危 险 因素 , 其 耐 药 性 的分 析 有 助 对
于 肺部 真菌感 染 的诊 治[ 1 。
[] a e F re An rl ,ta. ni trasc tdp e — 4 B u r T, errR, gi e 1Ve tao-soi e nu T lJ l - a mo i: cdn er kfco n . co M o y[] S m i epi nai iec ,i atr dmi b g J . e R s n s a r n r
ge o rvnin J . eprC r,0 5 5 :2 . i frpee t  ̄] R si ae2 0 ,0 7 5 s o [] 3曹 玉 , 伟 , 孙 冷 萍 , I U 呼 吸 机 相 关 性 肺 炎 病 原 菌 的构 等.C
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