诱导细胞凋亡的相关基因
p53基因名称
p53基因名称摘要：1.p53 基因的简介2.p53 基因的功能与作用3.p53 基因在医学研究中的应用4.p53 基因与肿瘤的关系5.我国在p53 基因研究方面的进展正文：p53 基因，全称为“肿瘤蛋白53”，是一种在生物体内起着重要作用的基因。
作为人体最重要的肿瘤抑制基因之一，它具有调节细胞生长、DNA 修复和细胞凋亡等功能。
近年来，随着对p53 基因研究的不断深入，它在医学领域的应用也日益广泛。
1.p53 基因的简介p53 基因首次于1979 年被科学家发现，它位于人体的第17 号染色体上。
作为一种抑癌基因，p53 在细胞周期调控、DNA 损伤修复、细胞凋亡等方面发挥着重要作用。
当细胞受到致癌因素影响时，p53 基因能诱导细胞进入停滞期，从而阻止细胞癌变。
2.p53 基因的功能与作用（1）细胞周期调控：p53 基因通过调节细胞周期蛋白的表达，控制细胞在生长、分裂和凋亡等不同阶段之间的转换。
（2）DNA 损伤修复：当细胞DNA 受到损伤时，p53 基因能促进DNA 修复酶的活性，使细胞恢复正常状态。
（3）细胞凋亡：在细胞受到严重损伤或致癌因素影响时，p53 基因能启动细胞凋亡程序，使细胞自动死亡，防止细胞癌变。
3.p53 基因在医学研究中的应用近年来，随着对p53 基因研究的不断深入，它在医学领域的应用也日益广泛。
例如，p53 基因突变检测可用于预测肿瘤的发生风险；p53 基因表达水平的检测可作为肿瘤治疗效果的监测指标；通过基因工程技术，恢复p53 基因的正常功能，可作为肿瘤治疗的新策略等。
4.p53 基因与肿瘤的关系p53 基因在肿瘤的发生、发展过程中起着重要作用。
一方面，p53 基因突变会导致细胞增殖失控，从而促进肿瘤的发生；另一方面，p53 基因突变会影响肿瘤细胞的凋亡，使肿瘤细胞具有更强的生存能力。
因此，研究p53 基因与肿瘤的关系，有助于揭示肿瘤发生、发展的机制，为肿瘤的预防和治疗提供新的思路。
凋亡细胞的诱导及检测
凋亡细胞的诱导及检测一、实验目的1、掌握培养细胞诱导凋亡的方法2、掌握凋亡细胞形态特征检测方法3、掌握基因组DNA特征及凋亡相关蛋白的检测方法4、熟悉PCR原理及技术5、熟悉凋亡相关知识、科研的基本思路二、实验内容1、培养细胞凋亡的诱导、凋亡细胞形态学、细胞增殖活力检查2、凋亡细胞的DNA ladder、caspase3活性检测3、培养细胞RNA的提取及定量、逆转录PCR4、PCR法扩增凋亡相关基因Bcl-2和Bax、琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物三、实验步骤与操作第一天（8学时）理论知识讲解：凋亡诱导方法及诱导药物剂量计算（细胞加药后诱导期间讲解）实验内容及安排：1、培养细胞的凋亡诱导（实验教材p137，p144）约需2h2、倒置相差显微镜下观察凋亡细胞的形态变化（实验教材p145）3、培养细胞的Giemsa染色、吖啶橙荧光染色、碘化丙啶（PI）/Ho.33342荧光双染检测（实验教材p146-148）4、MTT法检测细胞内琥珀酸脱氢酶活性及细胞存活率计算方法（实验教材p137）操作步骤：1）凋亡诱导：用25ml培养瓶体外培养人肿瘤细胞株（BEL-7402细胞或HepG2），2～3d传一代。
a) 实验前一天将细胞以2ⅹ104/ml接种于预先放入盖玻片的24孔板中。
在试验前2～4 h加入凋亡诱导剂大蒜素（60 mg/L），37℃、5%CO2、饱和湿度条件下继续培养，用于细胞形态观察。
设正常对照组、大蒜素诱导组。
b) 实验前一天将细胞以每孔5×104密度接种于96孔板中，在对数生长期进行分组实验：设空白组、正常对照组、大蒜素诱导组（空白组未加任何处理、正常对照组加PBS），用于MTT法测定细胞内琥珀酸脱氢酶活性。
2）凋亡细胞形态观察：体外培养的正常肝癌BEL-7402细胞为上皮形细胞，多边形，胞体丰满，核大而明显，可见多个核仁，细胞之间边界清晰，折光性好。
60 mg/L大蒜素作用2～4 h，BEL-7402细胞出现典型的细胞凋亡形态变化：细胞体积缩小，染色质浓聚边集、裂解，细胞表面凸起多个小泡。
IL-17A_基因敲除对氟诱导小鼠肝炎症反应和肝细胞凋亡的影响
畜牧兽医学报 2023,54(7):3108-3117A c t a V e t e r i n a r i a e t Z o o t e c h n i c a S i n i c ad o i :10.11843/j.i s s n .0366-6964.2023.07.041开放科学(资源服务)标识码(O S I D ):I L -17A 基因敲除对氟诱导小鼠肝炎症反应和肝细胞凋亡的影响赵阳飞,于洋欢,王金明,张建海,孙子龙,牛瑞燕,王俊东*(山西农业大学动物医学学院,太谷030801)摘 要:畜禽水和食物中广泛存在的氟严重威胁着畜禽的肝健康和动物性食品的安全㊂为阐明氟致肝损伤的内在机制,明确I L -17A 在氟诱导肝炎症反应和肝细胞凋亡中的调节作用,本研究将24只野生型C 57小鼠和12只I L -17A 基因敲除小鼠随机分为对照组㊁N a F 组㊁K O+N a F 组㊂同时,运用H E 染色观察肝的组织形态变化,并通过E L I S A ㊁流式细胞术㊁免疫组化检测肝中炎症细胞㊁炎症因子㊁凋亡的变化情况㊂结果显示,氟暴露诱导了肝组织结构损伤,增加了肝中炎症因子(T N F -α㊁I L -17A ㊁I N F -γ㊁I L -23㊁T G F -β)㊁M 2型巨噬细胞和树突状细胞的水平,并降低了I L -1β㊁自然杀伤细胞㊁γδT 细胞㊁C D 4+T 细胞水平和C D 4+T 细胞/C D 8+T 细胞比值㊂同时,凋亡检测结果显示,氟暴露增加了肝中凋亡细胞的数量和凋亡关键基因(C y t -c ㊁C a s pa s e 3)的蛋白表达水平㊂然而,与N a F 组相比,K O+N a F 组的肝损伤减轻,肝中炎症因子(T N F α㊁I L -17A ㊁I N F -γ㊁I L -23㊁T G F -β)和树突状细胞含量显著降低,I L -1β表达水平显著升高,且凋亡细胞数量㊁C y t -c 和C a s p a s e 3的蛋白表达水平显著降低㊂综上表明,I L -17A 基因敲除能够缓解氟诱导的炎症反应和肝细胞凋亡㊂本研究为氟中毒性肝损伤的研究和科学防治提供理论依据和新思路㊂关键词:氟中毒;I L -17A ;肝;炎症反应;凋亡中图分类号:S 856.9 文献标志码:A 文章编号:0366-6964(2023)07-3108-10收稿日期:2022-11-28基金项目:山西省应用基础研究计划(20210302124063)作者简介:赵阳飞(1991-),男,山西阳城人,讲师,博士,主要从事环境兽医学及动物营养代谢病研究,E -m a i l :z y f 91s k y @163.c o m *通信作者:王俊东,主要从事环境兽医学及动物营养代谢病研究,E -m a i l :w a n g jd 53@o u t l o o k .c o m E f fe c t s of I L -17A K n o c k o u t o n F l u o r i d e -I n d u c e d H e pa t i c I n f l a m m a t i o n a n d H e p a t o c y t e A p o pt o s i s Z H A O Y a n g f e i ,Y U Y a n g h u a n ,WA N G J i n m i n g ,Z H A N G J i a n h a i ,S U N Z i l o n g ,N I U R u i ya n ,WA N G J u n d o n g*(C o l l e g e o f V e t e r i n a r y M e d i c i n e ,S h a n x i A g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y ,T a i gu 030801,C h i n a )A b s t r a c t :T h e f l u o r i d e w i d e l y p r e s e n t i n w a t e r a n d f o o d o f l i v e s t o c k a n d p o u l t r y s e r i o u s l y th r e a t -e n s t h e l i v e r h e a l t h o f l i v e s t o c k a n d p o u l t r y a n d t h e s a f e t y of a n i m a l f o o d .T o e l u c i d a t e t h e i n t e r -n a l m e c h a n i s m o f f l u o r i d e -i n d u c e d l i v e r i n j u r y ,a n d c l a r i f y t h e r eg u l a t o r y ro l e o f I L -17A i n f l u o r -i d e -i n d u c e d l i v e r i n f l a mm a t i o n a n d h e p a t o c y t e a p o p t o s i s ,t h i s s t u d y r a n d o m l y di v i d e d 24w i l d -t y p e C 57m i c e a n d 12I L -17A k n o c k o u t m i c e i n t o c o n t r o l ,N a F ,a n d K O+N a F g r o u ps .I n a d d i -t i o n ,H E s t a i n i n g ,E L I S A ,f l o w c y t o m e t r y ,a n d i mm u n o h i s t o c h e m i s t r y we r e u s e d t o d e t e c t t h e c h a n g e s of m o r p h o l og y ,i n f l a mm a t o r y c e l l s ,i n f l a mm a t o r y f a c t o r s ,a n d a p o pt o s i s i n t h e l i v e r .T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t f l u o r i d e e x p o s u r e i n d u c e d l i v e r m o r p h o l o g y d a m a ge ,i n c r e a s e d t h e c o n -t e n t of i n f l a mm a t o r y f a c t o r s (T N F -α,I L -17A ,I N F -γ,I L -23,T G F -β)a n d t h e l e v e l s o f M 2m a c -7期赵阳飞等:I L-17A基因敲除对氟诱导小鼠肝炎症反应和肝细胞凋亡的影响r o p h a g e s a n d d e n d r i t i c c e l l s,d e c r e a s e d t h e l e v e l s o f I L-1β,n a t u r a l k i l l e r c e l l s,γδT c e l l s,C D4+Tc e l l s a nd t he r a t i o of C D4+T c e l l s/C D8+T c e l l s i n t h e l i v e r.I n a d d i t i o n,t h e r e s u l t s o f a p o p t o s i sd e t e c t i o n s h o w e d t h a t f l u o r i d e e x p o s u r e i n c r e a s e d t h e a p o p t o t i c c e l l s a n d t h e p r o t e i n e x p r e s s i o n l e v e l s o f k e y a p o p t o s i s g e n e s C y t-c a n d C a s p a s e3i n t h e l i v e r.H o w e v e r,c o m p a r e d w i t h t h e N a F g r o u p,t h e l i v e r i n j u r y w a s a l l e v i a t e d,t h e c o n t e n t s o f i n f l a mm a t o r y f a c t o r s(I N F-γ,T N F-α, T G F-β,I L-23,I L-17A)a n d d e n d r i t i c c e l l s w e r e s i g n i f i c a n t l y r e d u c e d,a n d t h e n u m b e r o f a p o p-t o t i c c e l l s a n d t h e p r o t e i n e x p r e s s i o n l e v e l s o f C y t-c a n d C a s p a s e3w e r e s i g n i f i c a n t l y d e c r e a s e d i n t h e l i v e r o f K O+N a F g r o u p.I n s u mm a r y,I L-17A k n o c k o u t a l l e v i a t e d f l u o r i d e-i n d u c e d i n f l a m-m a t o r y r e s p o n s e a n d h e p a t o c y t e a p o p t o s i s.T h i s s t u d y p r o v i d e s t h e o r e t i c a l b a s i s a n d n e w i d e a s f o r t h e r e s e a r c h a n d t h e s c i e n t i f i c p r e v e n t i o n/t r e a t m e n t o f f l u o r o t o x i c l i v e r i n j u r y.K e y w o r d s:f l u o r o s i s;I L-17A;l i v e r;i n f l a mm a t o r y r e s p o n s e;a p o p t o s i s*C o r r e s p o n d i n g a u t h o r:WA N G J u n d o n g,E-m a i l:w a n g j d53@o u t l o o k.c o m由于地理因素和环境因素的影响,氟广泛存在于人畜生活的水和食物中㊂长期过量的氟暴露能够导致人畜氟中毒㊂畜禽氟中毒导致繁殖率㊁生产性能㊁使用价值降低,使其成为威胁我国畜牧业发展的潜在因素[1-2]㊂肝作为机体重要的解毒和代谢器官,前期研究氟能够导致肝结构和功能的损伤[3]㊂肝损伤能够导致机体物质代谢紊乱和有害物质的蓄积,进而影响畜禽的生产性能和动物性食品安全㊂因此,深入探究氟致肝损伤的致病机理寻找可能的治疗靶点对于维持畜牧业的可持续发展和动物性食品安全具有重要意义㊂I L-17作为T h17细胞分泌的促炎因子,其家族包含I L17A~F㊂I L-17家族中I L-17A含量最多,且生物活性最强,通常所说的I L-17即I L-17A[4]㊂前期研究发现氟暴露后肝中I L-17A显著升高㊂I L-17A的高表达将导致中性粒细胞的募集和免疫细胞的慢性浸润[5]㊂同时,I L-17A可通过I L-17A受体通路促进细胞因子的产生,导致自身免疫和组织损伤[6]㊂最近的研究发现,I L-17A能够调节多种细胞的凋亡过程[7]㊂凋亡作为清除受损和有害细胞的程序性死亡过程,其与炎症反应密切相关㊂凋亡能够促进炎症病灶受损细胞的清除,而炎症反应过程中产生的炎症因子能够促进凋亡的增加[8-9]㊂然而,炎症反应和凋亡在氟诱导肝损伤中的相互作用关系,及I L-17A在该过程中的调节作用尚不清楚㊂为此,本研究建立I L-17A基因敲除氟中毒小鼠模型,运用H E染色㊁E L I S A㊁流式细胞术㊁免疫组化等技术检测肝的组织形态变化㊁炎症细胞含量㊁炎症因子水平和凋亡情况,进而探究氟对肝炎症反应和凋亡的影响,并明确I L-17A在该过程中的调节作用㊂1材料与方法1.1试验材料C57小鼠和I L-17A基因敲除小鼠购自南模生物有限公司;氟化钠购自S i g m a公司;H E染色试剂盒和B C A蛋白检测试剂盒购自索莱宝科技有限公司;E L I S A试剂盒购自西唐生物科技有限公司;J C-1和A n n e x i n V购自碧云天生物技术研究所;流式细胞抗体购自B D P h a r m i n g e n公司;免疫组化一抗和二抗购自武汉三鹰生物科技有限公司㊂1.2动物模型24只野生型8周龄C57成年雄性小鼠随机分为对照组和N a F组,12只8周龄I L-17A基因敲除雄性小鼠作为K O+N a F组(体重20~25g)㊂对照组饮用去离子水,N a F组和K O+N a F组饮用50m g㊃L-1N a F的去离子水[5]㊂标准实验室条件下按照试验分组饲养12周㊂饲养结束后眼球采血,断颈处死小鼠,收集肝样品㊂1.3H E染色小鼠处死后立即取适量大小肝组织固定于4%多聚甲醛㊂固定后的组织块进行冲洗㊁脱水㊁透明㊁浸蜡㊁包埋㊁切片制成5μm的石蜡切片㊂然后,石蜡切片经过脱蜡至水㊁苏木精(5m i n)和伊红(1 m i n)浸染㊁脱水㊁透明㊁封片㊂最后400倍镜下随机挑选10个区域观察组织中的异常病理变化并记录,并根据记录综合评定每组肝的损伤情况㊂肝的组织形态㊂1.4透射电镜透射电镜用于观察肝的超微结构变化㊂快速切9013畜牧兽医学报54卷取2mm3的新鲜肝组织放入预冷的2.5%戊二醛溶液中固定2h㊂组织块经乙醇和丙酮常规脱水,环氧树脂包埋㊂然后,用超薄切片机制作50~70n m 切片,并用醋酸铀染色液(30m i n)和柠檬酸铅染色液(10m i n)染色㊂最后,用透射电镜观察肝超微结构㊂1.5E L I S A检测用预冷的P B S洗涤肝,并切取适量组织加入到10倍体积的P B S中㊂组织匀浆后,4ħ离心(12000g,15m i n),吸取上清备用㊂然后,B C A测定蛋白浓度,并按照E L I S A试剂盒说明书步骤检测匀浆液中炎症因子(I L-6㊁T N F-α㊁I L-17㊁T G F-β㊁I N F-γ㊁I L-1β㊁I L-23)的含量㊂最后,计算每m g肝组织匀浆液中炎症因子含量=炎症因子含量/蛋白浓度㊂1.6流式细胞检测本研究分别用C D3+/C D4+㊁C D3+/C D8+㊁C D68㊁C D11c㊁C D56㊁C C1㊁γδT C R流式抗体标记C D4+T细胞㊁C D8+T细胞㊁巨噬细胞㊁树突状细胞㊁自然杀伤细胞㊁肥大细胞㊁γδT细胞㊂小鼠处死后,取新鲜肝组织制备细胞悬液㊂细胞悬液经过滤和洗涤后,用裂解液破碎红细胞㊂随后用流式抗体(1ʒ100)孵育30m i n(对于胞内蛋白在抗体孵育前进行固定和破膜)㊂洗涤3次后上机(B D L S R F o r t-e s s a细胞分析仪),并使用F l o w J o处理数据㊂1.7免疫组化石蜡切片常规脱蜡至水,3%H2O2消除内源性过氧化物酶,并用柠檬酸钠-E D T A抗原修复液100ħ修复15m i n㊂P B S洗涤后,兔抗鼠一抗(C a s p a s e3和C y t-c,1ʒ100)4ħ孵育过夜,生物素化的山羊抗兔二抗(1ʒ1500)室温下孵育1h㊂然后,用D A B显色(试验过程中防止组织干燥),并用中性树脂封片㊂最后,用普通显微镜观察和图像分析软件(I m a g e-P r o P l u s)分析光密度值㊂1.8数据统计数据用 xʃs 表示,并用G r a p h P a d P r i s m6分析数据的显著性㊂通过O n e-w a y a n a l y s i s o f v a-r i a n c e(A N O V A)分析,随后进行T u k e y检验㊂P<0.05表示具有统计学意义㊂2结果2.1I L-17A基因敲除对氟诱导的肝组织形态和超微结构损伤的影响通过H E染色和透射电镜观察组织病理学和超微结构变化(图1)㊂结果显示,对照组小鼠的肝形态结构正常,肝索排列紧密且有规则,线粒体和内质网形态正常,无明显异常㊂然而,氟暴露后肝中炎症细胞浸润增加,肝细胞间隙增大,颗粒变性㊁空泡变性㊁核固缩㊁核溶解肝细胞数量增多,线粒体畸形和脊损伤增加,内质网扩张和破碎增加㊂与N a F组相比,I L-17A基因敲除后肝组织结构损伤减轻,核固缩和核溶解细胞数量减少,炎症细胞浸润降低,畸形线粒体数量降低,内质网损伤减轻㊁数量增多㊂结果表明,I L-17A缓黄色箭头:炎症细胞;蓝色剪头:颗粒变性;黄色箭头:空炮变性;橙色箭头:核固缩;紫色箭头:核溶解;N.细胞核;M.线粒体;E.内质网Y e l l o w a r r o w:i n f l a mm a t o r y c e l l s;B l u e a r r o w:p a r t i c l e d e n a t u r a t i o n;Y e l l o w a r r o w:v a c u o l a r d e n a t u r a t i o n;O r a n g e a r r o w: n u c l e a r s o l i d i f i c a t i o n;P u r p l e a r r o w:k a r y o l y s i s;N.N u c l e a r;M.M i t o c h o n d r i a;E.E n d o p l a s m i c r e t i c u l u m图1H E染色(400ˑ,n=6)和透射电镜结果(20000ˑ,n=3)F i g.1T h e r e s u l t s o f H E s t a i n i n g(400ˑ,n=6)a n d t r a n s m i s s i o n e l e c t r o n m i c r o s c o p y(T E M,20000ˑ,n=3) 01137期赵阳飞等:I L-17A基因敲除对氟诱导小鼠肝炎症反应和肝细胞凋亡的影响解了氟诱导的肝组织形态和超微结构损伤㊂2.2I L-17A基因敲除对氟诱导肝炎症因子表达改变的影响本研究运用E L I S A检测炎症反应过程中关键炎症因子(I L-6㊁T N F-α㊁I L-17㊁T G F-β㊁I N F-γ㊁I L-1β㊁I L-23)在肝中的含量(图2)㊂与对照组相比, N a F组肝中T N F-α㊁I L-17㊁I N F-γ㊁I L-23㊁T G F-β的含量显著升高(P<0.05,P<0.01),I L-1β的含量显著降低(P<0.01),然而,与N a F组相比,K O+ N a F组肝中T N F-α㊁I L-17㊁I N F-γ㊁I L-23㊁T G F-β的含量显著降低(P<0.05,P<0.01),I L-1β的含量显著升高(P<0.01)㊂I L-6含量在N a F组和K O+ N a F组无显著变化㊂这些结果表明,I L-17A基因敲除缓解了氟诱导的肝炎症因子表达改变㊂与对照组相比,*.P<0.05,**.P<0.01;#.P<0.05,与N a F组相比,##.P<0.01;下同*.P<0.05,**.P<0.01,v s c o n t r o l g r o u p;#.P<0.05,##.P<0.01,v s N a F g r o u p;T h e s a m e a s b e l o w 图2肝炎症因子E L I S A检测结果(n=8, xʃs)F i g.2E L I S A d e t e c t i o n r e s u l t s o f h e p a t i c i n f l a m m a t o r y f a c t o r s(n=8, xʃs)2.3I L-17A基因敲除对氟诱导肝C D4+T细胞和C D8+T细胞水平改变的影响本研究用流式细胞术检测了肝中C D4+T细胞和C D8+T细胞㊂如图3所示,氟暴露后肝C D4+T 细胞和C D4+T细胞/C D8+T细胞比值显著降低(P<0.05)㊂然而,与N a F组相比,I L-17A基因敲除显著增加了肝中C D4+T细胞和C D4+T细胞/ C D8+T细胞比值(P<0.05)㊂C D8+T细胞在N a F组和K O+N a F组中无显著差异㊂2.4I L-17A基因敲除对氟诱导肝炎症细胞水平改变的影响本研究通过流式细胞术检测肝中树突状细胞㊁巨噬细胞㊁肥大细胞㊁自然杀伤细胞㊁γδT细胞含量观察I L-17A基因敲除对氟诱导肝炎症细胞水平改变的影响(图4)㊂结果显示,与对照组相比,N a F组肝中自然杀伤细胞和γδT细胞显著降低,M2型巨噬细胞和树突状细胞显著升高(P<0.05)㊂I L-17A 基因敲除后肝中树突状细胞与N a F组相比显著降低(P<0.05)㊂同时,K O+N a F组中的γδT细胞和M2型巨噬细胞与对照组比无显著差异㊂上述结果表明,I L-17A基因敲除缓解了氟诱导的肝炎症细胞水平改变㊂2.5I L-17A基因敲除对氟诱导肝细胞凋亡的影响为探究I L-17A基因敲除对氟诱导的肝细胞凋1113畜 牧 兽 医 学 报54卷图3 C D 4+T 细胞和C D 8+T 细胞含量流式检测结果(n =6, x ʃs )F i g .3 T h e f l o w c y t o m e t r y re s u l t s of C D 4+T c e l l a n d C D 8+T c e l l c o n t e n t s (n =6, x ʃs )亡的影响,本研究运用流式细胞术和免疫组化检测了凋亡肝细胞数和凋亡标志蛋白C a s p a s e 3和C y t -c 的蛋白表达水平㊂A n n e x i n V 和P I 双染法是流式细胞术检测细胞凋亡的经典方法,流式结果如图5所示,与对照组相比,N a F 组中肝细胞凋亡率显著增加(P <0.05)㊂然而,与N a F 组相比,K O+N a F组中肝细胞凋亡率显著降低(P <0.05)㊂与流式结果相似,免疫组化结果显示(图6,表1),与对照组相比,N a F 组肝中C a s p a s e 3和C yt -c 的蛋白表达水平极显著增加(P <0.01),而I L -17A 基因敲除显著降低了C a s p a s e 3和C yt -c 蛋白表达与N a F 组相比(P <0.05,P <0.01)㊂结果表明,I L -17A 基因敲除减轻了氟诱导的肝细胞凋亡㊂表1 肝C a s p a s e 3和C y t -c 蛋光密度值统计结果(n =5, x ʃs )T a b l e 1 T h e o p t i c a l d e n s i t y v a l u e s t a t i s t i c a l r e s u l t s o f C a s p a s e 3a n d C yt -c p r o t e i n i n t h e l i v e r (n =5, x ʃs )蛋白名称P r o t e i n n a m e s对照组C o n t r o l g r o u pN a F 组N a F g r o u pK O+N a F 组K O+N a F g r o u pC a s p a s e 30.1775ʃ0.00130.1906ʃ0.0025**0.1835ʃ0.0021#C yt -c 0.1160ʃ0.00290.1834ʃ0.0052**0.1529ʃ0.0046##3 讨 论氟中毒是一种广泛分布于世界许多国家和地区的人畜共患性地方病,中国是受其危害较为严重的国家之一[10]㊂氟中毒主要是由于长期慢性的氟暴露引起,并造成机体多种组织和器官的损伤㊂肝是氟中毒的重要靶器官,氟能够损伤肝的结构和功能,进而影响机体的物质代谢和有害物质的蓄积[1]㊂在一项关于美国青少年血氟含量与肝功能相关性调查的研究发现血清氟含量与肝功能呈负相关,氟暴露影响肝功能,反过来肝功能损伤会影响氟的吸收和代谢过程,这样的恶性循环进一步加重了氟对肝的危害[11]㊂同时,大量研究发现氟暴露能够导致肝中核固缩㊁核溶解㊁空泡变性㊁脂肪变性增多,线粒体和内质网损伤,以及炎症细胞的浸润[5,12]㊂与上述研究结果相似,在本研究中氟暴露导致了肝组织形态和超微结构损伤㊂在前期研究中,作者发现氟暴露后肝中I L -17A 含量和炎症细胞浸润显著增加[5]㊂I L -17A 作为重要的促炎因子,其在炎症的发生和发展过程中发挥重要的调节作用[13]㊂因此,作者推测I L -17A 在氟诱导了肝的炎症损伤中发挥重要的作用㊂I L -17A 参与急慢性炎症过程,I L -17A 的高表达能够促进免疫细胞的慢性浸润和多种炎症因子的21137期赵阳飞等:I L -17A基因敲除对氟诱导小鼠肝炎症反应和肝细胞凋亡的影响图4 巨噬细胞㊁树突状细胞㊁自然杀伤细胞㊁肥大细胞㊁γδT 细胞含量流式检测结果(n =6, x ʃs )F i g .4 T h e f l o w c y t o m e t r y r e s u l t s o f m a c r o p h a ge s ,d e n d r i t i c c e l l s ,n a t u r a l k i l l e r c e l l s ,m a s t c e l l s ,a n d γδT c e l l s c o n t e n t s (n =6, x ʃs )表达,并最终导致炎症反应和组织损伤[14-15]㊂Z h a n g 等[16]研究发现,I L -17A 功能的阻断能够有效缓解胆汁淤积诱导的肝细胞坏死和肝损伤㊂同时,G o m e s 等[17]的研究也发现阻断I L -17A 信号传导可减少脂肪变性和肝损伤,并预防肝细胞癌㊂相似地,在本研究中I L -17A 的基因敲除缓解了氟诱导的肝组织形态损伤㊂为探究I L -17A 基因敲除缓解肝损伤的机制,本研究进一步检测了肝中炎症因子和炎症细胞的变化情况㊂炎症反应是机体抵御不良刺激的一种防御反应,但过强或长期的炎症反应能够诱导机体组织器官的功能损伤[18]㊂已有大量的研究报道外源性毒物能够导致肝中炎症因子和炎性细胞的水平改变,进而引发肝炎症[19]㊂同时,研究发现氟作为广泛存在与水和食物中的外源性毒物能够增加肝中炎症因子I L -2㊁I L -4㊁I L -6㊁I L -13㊁I L -21㊁T N F -α和T G F -β3113畜 牧 兽 医 学 报54卷图5 肝细胞凋亡流式检测结果(n =6, x ʃs )F i g .5 T h e f l o w c y t o m e t r y r e s u l t s o f h e p a t o c y t e a p o pt o s i s (n =6, x ʃs)图6 肝C a s p a s e 3和C y t -c 蛋白免疫组化结果(400ˑ)F i g .6 C a s p a s e 3a n d C yt -c i m m u n o h i s t o c h e m i c a l r e s u l t s (400ˑ)水平升高,以及I F N -γ/I L -4和I L -2/I L -10比值的降低[20]㊂与上述结果相似,本研究中氟暴露增加了肝中T N F -α㊁I L -17A ㊁I N F -γ㊁I L -23㊁T G F -β含量,以及M 2型巨噬细胞和树突状细胞水平㊂同时,氟暴露降低了I L -1β㊁自然杀伤细胞㊁γδT 细胞和C D 4+T 细胞水平,以及C D 4+T 细胞/C D 8+T 细胞比值㊂I L -23㊁I L -17㊁T N F -α㊁I N F -γ㊁I L -1β是关键的促炎细胞因子,T G F -β是关键的抑炎细胞因子[21]㊂巨噬细胞㊁树突状细胞㊁T 淋巴细胞㊁自然杀伤细胞㊁γδT 细胞能够产生炎症因子,并介导炎症反应过程[18]㊂C D 4+T 细胞是机体免疫力的重要指标,其含量降低表明机体免疫力减弱㊂C D 4+T 细胞/C D 8+T 细41137期赵阳飞等:I L-17A基因敲除对氟诱导小鼠肝炎症反应和肝细胞凋亡的影响胞比值是免疫调节的一项重要指标,其比值的异常表明免疫功能的紊乱[22]㊂这些结果表明氟暴露降低了肝的免疫能力,扰乱了肝炎症平衡,增加了肝的炎症反应㊂I L-17A作为炎症反应过程中重要的促炎因子,其不仅能够增加炎症因子的分泌,而且能够促进炎症细胞在受损组织中的浸润[14]㊂Z h a n g 等[16]发现阻断I L-17A的作用显著减少肝中促炎细胞因子㊁中性粒细胞㊁巨噬细胞的流入㊂在本试验中,与N a F组相比,I L-17A基因敲除降低了肝中T N Fα㊁I L-17A㊁I N F-γ㊁I L-23㊁T G F-β的表达水平和树突状细胞含量,增加了I L-1β的表达水平㊂虽γδT细胞和M2型巨噬细胞与氟组无显著差异,但其与对照组比无显著差异㊂有趣的是在本研究中I L-1β㊁自然杀伤细胞和γδT细胞在氟组降低,且I L-17A基因敲除增加了I L-1β水平㊂I L-1β结果可能的机制:I L-1β作为组织的细胞防御和组织修复的关键因子,其在细胞增殖㊁分化和凋亡等生物过程中发挥重要作用㊂肝作为自我修复能力较强的器官,受到氟的损伤后启动修复机制,抑制了I L-1β的表达㊂I L-17A基因的敲除能够缓解氟诱导的肝损伤,从而促进I L-1β的表达趋于正常㊂自然杀伤细胞和γδT细胞结果可能的机制:自然杀伤细胞和γδT细胞较为敏感,容易受到外源性毒物氟的刺激,激活细胞的凋亡程序,进而导致肝中自然杀伤细胞和γδT细胞数量的降低㊂自然杀伤细胞和γδT细胞作为机体重要的免疫细胞,其数量的减少能够降低机体的免疫力,进一步影响机体的炎症反应㊂同时,I L-17A基因的敲除未参与到上述诱导自然杀伤细胞和γδT细胞凋亡的过程㊂因此,I L-17A基因的敲除未缓解氟诱导的上述改变㊂在未来的研究中作者将进一步探究I L-1β㊁自然杀伤细胞和γδT 细胞在氟致肝损伤中的作用机制㊂上述结果表明, I L-17A基因敲除缓解了氟诱导的肝炎症损伤㊂已有大量研究发现,炎症反应与细胞凋亡密切相关,一方面大量的炎症因子能够诱导细胞凋亡的发生,另一方面细胞凋亡能够清除炎症病灶内中性粒细胞和其他滞留细胞,限制组织损伤,促进炎症吸收[23]㊂因此,本研究进一步探究了I L-17A基因敲除对氟诱导的肝细胞凋亡的影响㊂细胞凋亡是一种维持细胞微环境稳态的细胞自主性和程序性死亡方式㊂在生理条件下,机体通过凋亡去除不需要的和异常的细胞㊂而在病理条件下,受不利条件刺激细胞凋亡增加,导致正常细胞损伤[24]㊂已有研究发现,氟可导致肝细胞的凋亡增加[25-26]㊂例如,O u y a n g等[25]报道氟通过C y t-c/ C a s p a s e3/9通路诱导了鸭肝细胞的凋亡㊂L u等[26]报道氟通过氧化应激和凋亡导致了小鼠肝损伤㊂与上述研究结果相似,本研究中氟暴露增加了肝中的凋亡细胞,以及凋亡关键基因C y t-c和C a s p a s e3的蛋白表达水平㊂C y t-c是凋亡C a s p a s e级联反应的关键蛋白酶激活因子,C a s p a s e3是介导凋亡信号和执行细胞凋亡的关键激酶[8]㊂同时,本研究发现I L-17A基因敲除减轻了氟诱导的肝细胞凋亡,降低了C y t-c和C a s p a s e3的蛋白表达水平㊂在外源性毒物诱导肝炎症的研究发现,I L-17A作为重要炎症因子,其能够刺激多种细胞释放金属蛋白酶和炎症因子,促进炎症细胞的募集和肝炎症反应[14]㊂最近研究发现,I L-17A能够通过I L-17A受体通路调节细胞自噬㊁线粒体损伤㊁凋亡等生物过程[27-28]㊂例如,K i m等[27]研究发现I L-17A通过损伤线粒体功能诱导滑膜成纤维细胞的凋亡㊂因此,I L-17A缓解氟诱导的肝细胞凋亡的机制可能是氟引起了肝的炎症反应,炎症因子的大量释放刺激肝细胞的凋亡,同时氟作为外源性毒物能够激活I L-17A受体通路诱导肝细胞凋亡㊂然而,I L-17A基因的敲除缓解了氟诱导的肝炎症反应,减轻了炎症因子刺激的凋亡,并阻断了I L-17A受体通路诱导的肝细胞凋亡㊂4结论氟暴露损伤了肝的组织形态,并改变了肝内炎症因子(T N F-α㊁I L-17㊁I N F-γ㊁I L-23㊁T G F-β㊁I L-1β)和炎症细胞(M2型巨噬细胞㊁树突状细胞㊁C D4+T 细胞㊁自然杀伤细胞㊁γδT细胞)的水平㊂同时,氟暴露诱导了肝细胞凋亡㊂然而,I L-17A基因敲除能够缓解氟诱导的肝炎症反应,并减轻氟诱导的肝细胞凋亡㊂本研究明确了I L-17A在氟诱导肝炎症反应和凋亡中的作用,并进一步揭示了氟肝毒性的内在机理,为氟中毒的防治提供了理论依据㊂参考文献(R e f e r e n c e s):[1] Z HA O S Y,G U O J X,X U E H J,e t a l.S y s t e m a t i ci m p a c t s o f f l u o r i d e e x p o s u r e o n t h e m e t a b o l o m i c s o fr a t s[J].E c o t o x i c o l E n v i r o n S a f,2022,242:113888.[2]龚涛,陈涛,柏才敏,等.高氟对雏鸡肝细胞周期和凋亡影响的研究[J].畜牧兽医学报,2009,405113畜牧兽医学报54卷(11):1675-1680.G O N G T,C H E N T,B A I C M,e t a l.E f f e c t o fd ie t a r y h i g hf l u o r i n e o n t h e c e l l c y c l e a n d a p o 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细胞凋亡的信号途径
细胞凋亡的意义 ：
细胞凋亡普遍存在于生物界，既发生于生理状态下， 也发生于病理状态下。
细胞凋亡对胚胎发育及形态发生（morphogenesis）、 组织内正常细胞群的稳定、机体的防御和免疫反应、 疾病或中毒时引起的细胞损伤、老化、肿瘤的发生进 展起着重要作用，并具有潜在的治疗意义，至今仍是 生物医学研究的热点。
Extrinsic (receptor mediated)
Intrinsic (mitochondrial homeostasis)
Damage (p53)
Bax,Bak
(effector)
Caspase 9 (initiator)
干预凋亡Fas信号传导：
Fas 受体途径
*Fas在肝病如肝损伤、肝炎、肝硬化和肝癌等的发病机制上起 到一个重要的调节作用；*Fas信号通路还可促进神经再生。
Fas 受体途径
1. Fas Death-signaling pathway
DD DED
DD DED
FLIP
X
FLIP
Casp 8
caspases 3, 6, 7 Apoptosis
caspases 3, 6, 7 Apoptosis
FADD -------FADD(Fas-associated protein with death domain C端的死亡结构域(DD)和N端死亡效应结构域(DED),DD结构域与Fas及TNF受体家族中的其它受体中的DD结构域结合,接受凋亡信号.
Extrinsic apoptotic pathway
凋亡的受体途径
Death receptor-induced signaling
2003 0276
Hale Waihona Puke Cell-extrinsic and cell-intrinsic apoptotic signaling pathways
细胞凋亡相关基因与血液系统恶性肿瘤
由于染 色体易位 ｔｎ ，８ 导致 １ （ １） ８号染色体 的 ｂ】２ 因 ｃ一 基
易 位至 ｌ ４号 染 色 体 ＩＨ 基 因 区 ， 成 ｌＨ—ｃ ２嵌 台 基 因 ｔ ｇ 形 ｇ ｂｌ 一
因有关 ，ｃ ２突变型 ｐ ｂｌ 一 可抑制 ｃｍｙ 介导 的凋亡作 用 ． ． ｅ 但不 影响其增殖作用 在白血病 细胞中， ｒｙ 表达增高 ， ｃａｅ － 可增强细 胞对各种诱导稠亡处理的敏感性 ， 不直接 介导细胞稠 亡ｔ 但 可 与 ｂ ｔ 、 变 型 Ｐ 协 同促 进 白血病 发 生 有 关研 究 发现 ， ｃ２突 一 ” Ｂ ｒ ｔ 淋 巴瘤患者经 常伴有 Ｅ ｕｋｔ ｔ Ｂ病毒感染 ，－ ｃ ｅ ｍｙ 基因导人 Ｅ Ｂ 病毒感染所 致的永 生性 Ｂ细胞 系， 导致 Ｂ靶 细胞 的多克 隆增 殖， 激活 ｃｍｙ 基因的作用 ， — ｃ 从而增加 了 Ｂ ｒ ｉ 淋 巴瘤发生 的 ｕｋｔ ｔ 机会 。Ｂ ｒｉ 淋 巴瘤患者 ｃｍｙ ｕｋｔ ｔ — ｃ基因有高表达 ， 而正常位于
则 ｃｍｙ — ｃ加 速 细 胞 凋亡 。ｃｍｙ — ｃ介 导 凋 亡 与 其 他 稠 亡 相 关 基
常见于 Ｂ细胞 白血病 和淋 巴瘤 。 ｃ ２家族 中存在 多个 同源蛋 ｂｌ
白 ， ｂ ｘ ｂ ｌ ｂ ｌｘ、 ａ 如 ａ 、￣ Ｘ ｃ＿ｌｂｄ等 。ｂ ｘ高表 达 可 拮 抗 ｂｌ２的 ａ ｃ一 凋 亡抑 制 作 用 ， 不 直 接 引 起 细 胞 凋 亡 １ 。ｂ ｌｂ ｘ比例 是 影 但 ］ ｃ／ ａ
比例降低 ， 有助于凋亡ｍ。 增高水平 常与细胞 Ｄ Ｐ ＮＡ损伤程 度 呈正 比， 意义在 于对 某些 损伤 ＤＮＡ 嗣素 （ 其 如放 射线 、 化
EGCG诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡相关基因的差异表达
３ 年第 ４ Ｏ 卷第 １ ３ 期 Ｃ ｈ ｉ ｎ Ｊ Ｃ ｌ ｉ ｎ Ｏ ｎ ｃ ｏ ｌ ２ ０ １ ３ ， Ｖ ｏ １ ． ４ ０ ， Ｎ ｏ ． １ ３ ｗ ｗ ｗ ． ｃ ｊ ｃ ｏ ． ａ ｎ
Ｅ Ｇ Ｃ Ｇ 诱导 人胃癌 Ｍ Ｇ Ｃ － ８ ０ ３ 细胞 凋亡相关基 因的
效应 ， 并 探 讨 其 分 子 机 制 。方 法 ： 运 用Ｄ Ｎ Ａ含 量 分 析 、 Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ／ Ｐ Ｉ 双标记法 、 Ｄ Ｎ Ａ琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 以 及 透射 电子 显 微 镜 形 态 学 方 法 来观 察 细胞 凋 亡 。 通过 Ｓ ｕ ｐ ｅ ｒ Ａ ｒ ｒ ａ ｙ 人 细胞 凋 亡基 因 芯 片检 测 ｌ Ｏ ０ １ ｘ ｍ ｏ ｌ ／ ＬＥ Ｇ Ｃ Ｇ作 用 于 ＭＧ Ｃ 一 ８ ０ ３ 细胞 １ ２ ｈ 后 凋 亡相 关 基 因的 表 达谱 ， 采用 Ｒ Ｔ — Ｐ Ｃ Ｒ和 Ｗ ｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ 技 术验证上 调基 因 Ｆ ａ ｓ — Ｌ和 下 调 基 因 Ｂ ａ ｇ 一 １ 。结 果 ： ２ ５ 、 ５ ０ 、 １ ０ ０ 、 ２ ０ ０ Ｉ ｘ ｍｏ ｌ ／ Ｌ Ｅ Ｇ Ｃ Ｇ作 用 于 ＭＧ Ｃ 一 ８ ０ ３ 细胞 ２ ４ ｈ 后， Ｄ Ｎ Ａ含 量 分 析 出现 了 明显 的 亚 二 倍 体 峰 ； １ ０ ０￣ ｍｏ ｌ ／ Ｌ Ｅ Ｇ Ｃ Ｇ作 用 ４ 、 ８ 、 １ ２ 、 ２ ４ ｈ 后， Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ／ Ｐ Ｉ 双 标 记 法
sting通路相关基因
sting通路相关基因Sting通路是一种重要的免疫反应通路，它可以识别并响应细胞内外的DNA和RNA，从而引发免疫反应。
Sting通路的激活可以促进炎症反应、细胞凋亡、自噬和抗病毒免疫等生物学过程。
在本文中，我们将讨论Sting通路相关基因的功能和作用。
1. Sting基因Sting基因是Sting通路的核心基因，它编码一种膜蛋白，被称为Sting蛋白。
Sting蛋白是一种跨膜蛋白，它位于内质网膜上，并且在细胞内外都有表达。
Sting 蛋白的主要功能是识别细胞内外的DNA和RNA，并将信号传递给下游的信号通路，从而引发免疫反应。
2. Tmem173基因Tmem173基因也被称为Sting1基因，它是Sting通路的另一个核心基因。
Tmem173基因编码的蛋白与Sting蛋白相似，也是一种跨膜蛋白，它与Sting 蛋白一起参与Sting通路的激活。
Tmem173基因的突变会导致Sting通路的异常激活，从而引发自身免疫疾病。
3. Ifih1基因Ifih1基因编码的蛋白被称为MDA5，它是一种能够识别细胞内RNA的受体。
MDA5与Sting蛋白相互作用，共同参与Sting通路的激活。
Ifih1基因的突变会导致MDA5的功能异常，从而影响Sting通路的激活和免疫反应的发生。
4. Tbk1基因Tbk1基因编码的蛋白是一种激酶，它与Sting蛋白和Ifih1蛋白相互作用，共同参与Sting通路的激活。
Tbk1蛋白的主要功能是磷酸化Sting蛋白和Ifih1蛋白，从而促进Sting通路的激活和免疫反应的发生。
Tbk1基因的突变会导致Tbk1蛋白的功能异常，从而影响Sting通路的激活和免疫反应的发生。
5. Irf3基因Irf3基因编码的蛋白是一种转录因子，它与Sting蛋白和Tbk1蛋白相互作用，共同参与Sting通路的激活。
Irf3蛋白的主要功能是转录免疫相关基因，从而促进炎症反应和抗病毒免疫的发生。
多基因遗传表达分析系统检测rhIL-24诱导人卵巢癌细胞凋亡相关基因的应用
・
１ ３ ｌ ２・
中 国免 疫 学 杂 志 ２ ０ １ ３年 第 ２ ９卷
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ０ － ４ ８ ４ Ｘ ． ２ ０ １ ３ ． １ ２ ． ０ １ ９
多基 因遗 传 表 达 分 析 系统 检 测 ｒ ｂ Ｈ￣ ． ２ ４诱 导 人 卵 巢 癌 细 胞 凋 亡 相 关 基 因 的
［ 摘
要］ 目的 ： 探讨重组人 白细胞介素 ２ ４ （ ｒ ｅ ｃ ｏ ｍ ｂ ｉ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｕ ｍａ ｎ ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｌ ｅ ｕ ｋ ｉ ｎ 一 ２ ４， ｒ ｈ ｌ Ｌ ． ２ ４ ） 诱导人卵巢癌 Ｓ Ｋ Ｏ Ｖ ３细胞株 、 ｓ Ｋ —
Ｏ Ｖ ３ ／ ｄ ｄ Ｄ人 卵巢癌耐顺铂细胞株 的凋亡相关 ６个基 因表达 的变化 。方法 ： 体外培养人卵巢癌 Ｓ Ｋ Ｏ Ｖ ３细胞株 、 人卵巢癌耐顺铂 Ｓ Ｋ Ｏ Ｖ ３ ／ ｄ ｄ Ｄ细胞 株 ． 用ｒ ｈ Ｉ Ｌ 一 ２ ４单独及其联合顺铂作用 于两种不 同的细胞 株 ， 提取 Ｒ Ｎ Ａ， 经逆 转录和 聚合 酶链反应 ， 应用 多基 因遗传表达分析 系统 （ Ｇ ｅ Ｘ Ｐ ） 同时检测 ６个凋亡基 因。结果 ： ｒ ｈ ｌ Ｌ 一 ２ ４诱导上 调人 卵巢 癌 Ｓ Ｋ Ｏ Ｖ ３细胞株 Ｂ ａ ｘ 、 Ｒ ｂ 、 Ｐ ５ ３基 因， 激 活Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ 一 ３ ， 下调 Ｂ ｃ １ ． ２ 、 Ｂ ｉ ｒ ｃ ５基因 ； ｒ ｈ ｌ Ｌ ． ２ ４诱导上调人卵巢癌耐顺铂 Ｓ Ｋ Ｏ Ｖ ３ ／ ｄ ｄ ｐ细胞株 Ｂ ａ ｘ 、 Ｒ ｂ 基因， 激活 Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ － ３ ， 下调 Ｂ ｃ １ ２基因 ： ｒ ｈ ｌ Ｌ 一 ２ ４联合 Ｄ Ｄ Ｐ组其 上述 基因表达 变化更加显著 。结论 ： ｒ ｈ ｌ Ｌ 一 ２ ４诱 导人卵巢癌 细胞凋亡主要通过 上调 Ｂ ａ ｘ 、 Ｒ ｂ 、 Ｐ ５ ３ ． 激活 Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ ３ ， 下调 Ｂ ｃ ｌ － ２， Ｂ ｉ ｒ ｃ ５等凋亡相关基 因。 ［ 关键词 ］ Ｇ ｅ Ｘ Ｐ分析系统 ； 白细胞介 素 ２ ４ ； 卵巢癌细胞 ； 凋亡 ； 基 因
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诱导细胞凋亡的相关基因
诱导细胞凋亡的相关基因是在细胞凋亡研究中比较重要的一部分，这些基因的调控关系着细胞是否会发生凋亡。
细胞凋亡是一种重要的生命现象，它在机体发育、维持稳态、抵御病毒感染以及肿瘤防御等方面起着重要的作用。
本文将介绍一些诱导细胞凋亡的基因。
1. TP53（p53）基因
TP53基因编码的蛋白质p53是一个重要的肿瘤抑制因子，在
细胞发生DNA损伤或其他各种应激条件下可以通过直接作用
于DNA序列来调节基因表达，从而诱导细胞进入凋亡通路。
p53能够促进Bax（促凋亡蛋白）的转录，抑制Bcl-2（抗凋
亡蛋白）的表达，从而增加细胞的凋亡几率。
2. BCL-2、BCL-XL和MCL-1基因
BCL-2家族是一组具有调节细胞凋亡功能的蛋白质，包括
BCL-2、BCL-XL、MCL-1等。
这些蛋白质都具有抗凋亡的作用，它们通过它们的BH3结构域与其他Bcl-2家族成员形成
异二聚体或者同异二聚体，直接或间接调节线粒体外膜通道的形成，从而阻止Bax、Bak等促凋亡蛋白聚集在线粒体外膜上，导致细胞凋亡的发生。
3. CASP3（caspase-3）基因
CASP3是一种半胱氨酸天冬氨酸酶家族成员，是细胞凋亡的
关键调节因子。
CASP3可以被半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase-8、caspase-9）活化，然后作为效应凋亡酶，促使细
胞凋亡。
4. IL-2RG（Interleukin-2 receptor γ chain）基因
IL-2RG是IL-2受体共同γ链的基因。
在细胞凋亡中，IL-2RG
能够被诱导表达，这是因为IL-2RG的表达与T细胞凋亡相关。
IL-2RG能够直接活化JAK/STAT通路，从而诱导细胞凋亡。
5. NF-κB基因
NF-κB是一个转录因子家族，参与细胞的生长、分化、细胞炎症反应、细胞凋亡等多种生物学过程。
NF-κB的活化可以通过不同途径，如信号通路的激活、细胞应激等，从而诱导细胞凋亡。
综上所述，诱导细胞凋亡的基因是多种多样的，它们的调控关系着细胞是否会发生凋亡。
在对细胞凋亡的研究中，深入了解这些基因的功能机制，可为治疗肿瘤、炎症等疾病提供科学依据，以及为探究机体发育与进化提供理论基础。