结合态淀粉合成酶(GBSS)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)活性检测试剂盒说明书__紫外分光光度法UPLC-MS-4462
1-吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）活性检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4462规格:50T/48S紫外分光光度法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液一液体60mL×1瓶4℃保存提取液二液体0.6mL×1支-20℃保存试剂一液体40mL×1瓶4℃保存试剂二液体6mL×1瓶4℃保存试剂三粉剂×2瓶-20℃保存试剂四粉剂×2瓶-20℃保存溶液的配制：1、试剂三：临用前加入2.5mL蒸馏水溶解，现配现用，-20℃分装保存，-20℃保存一周；2、试剂四：临用前每瓶加入3mL蒸馏水溶解，现配现用，-20℃分装保存，-20℃保存一周。
产品说明：在干旱、盐渍化、重金属、紫外线等不同的胁迫条件下，均会诱导植物体内脯氨酸的积累，对植物起到保护作用。
高等植物中，脯氨酸的合成有两条途径，分别以谷氨酸和鸟氨酸为前体。
谷氨酸途径主要负责胁迫条件下脯氨酸的积累，而鸟氨酸途径主要在氮充足条件下起作用，与胁迫情况下脯氨酸的积累没有关系。
1-吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）是脯氨酸的谷氨酸合成途径中的关键酶，P5CS是一个双功能酶，在NADPH 和ATP作用下，可催化谷氨酸磷酸化及谷氨酸γ-半醛还原，通过测定NADPH在340nm处吸光度的变化，可计算出P5CS的活性高低。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水、EP管。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）组织样本：按质量（g）︰提取液体积（mL）1︰5~10比例（建议称取0.1g样本，加入1.0mL提取液一）加入提取液一，再加入10μL提取液二，冰浴匀浆后于4℃，8000rpm，离心15min，弃沉淀，取上清液置于冰上待测。
α-淀粉酶测定试剂盒(CNPG3底物法)产品技术要求zhongshengbeikong
α-淀粉酶测定试剂盒（CNPG3底物法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中α-淀粉酶的活性。
1.1规格液体单剂型试剂(R)：60mL×2 ；试剂(R)：80mL×2。
1.2规格划分说明根据净含量划分规格。
1.3主要组成成分试剂盒由试剂（R）液体组成。
1.3.1 试剂（R）液体主要组分：2-（N-吗啉基）-乙磺酸（MES）50mmol/L2-氯-对硝基苯-α-D-麦芽三糖（CNPG3）1.8 mmol/LNaCl350 mmol/L醋酸钙 6 mmo/L 硫氰酸钾900 mmol/L 叠氮钠0.01% 2.1 外观试剂(R)应为无色或浅黄色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
2.2净含量液体试剂净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白吸光度在波长405nm(400nm～420nm)处（光径1cm），试剂空白吸光度（A）应≤0.350,试剂空白吸光度变化率（△A/min）应≤0.002。
2.4 准确度测定GBW(E)090593,相对偏差应不超过±10％。
2.5 分析灵敏度对应于浓度为 85U/L的淀粉酶所引起的吸光度变化率（△A/min）的绝对值应在0.006～0.040的范围内。
2.6 重复性重复测定血清样本，变异系数（CV）应≤5%。
2.7 批间差测定血清样本，批间差（R）应≤10%。
2.8 线性范围在[5，2000]U/L检测范围内，线性相关系数（r）应≥0.990。
在(50,2000]U/L范围内，线性相对偏差应不超过±10％；在[5,50]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过± 5U/L。
2.9 稳定性2.9.1效期稳定性原包装的试剂盒在2℃～8℃避光贮存，有效期为12个月。
试剂有效期满后2个月以内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
2.9.2开盖稳定性试剂开盖后，在2℃～8℃避光保存，可稳定30天；开盖稳定期满后1天内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
淀粉分支酶(SBE)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
淀粉分支酶（SBE）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC1860规格：50T/24S产品内容：提取液：液体25mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×2支，4℃保存。
临用前每支加入1mL双蒸水，缓慢加热，逐渐升温至沸腾，使其充分溶解，备用；试剂三：液体25mL×1瓶，4℃保存；试剂四：液体5mL×1瓶，4℃保存。
产品说明：SBE（EC 2.4.1.18）主要存在于植物中，是参与支链淀粉合成的关键酶，测定SBE活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。
淀粉和碘结合后在660nm有特征光吸收，SBE可切断支链淀粉侧支，从而降低了淀粉-碘复合物在660nm 吸收值，一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
需自备的的仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水操作步骤：一、粗酶液提取称取约0.1g组织加入1mL提取液，冰浴中匀浆。
15000g，4℃离心15min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤1、分光光度计预热30min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零。
2、加样表试剂名称（μL）对照管测定管煮沸1min后灭活的粗酶液250粗酶液250试剂一320320试剂二3030混匀，37℃准确保温20min，置沸水浴中1min终止反应（盖紧防止水分散失），冷却试剂三500500试剂四100100混匀，室温静置10min，用蒸馏水调零，660nm处读取各管吸光值。
注：若有样品浑浊，建议离心后取上清测定。
三、SBE活力单位的计算1、按照蛋白浓度计算单位的定义：以波长660nm的吸光度下降百分率表示，每mg蛋白在1mL反应体系中每分钟降低1％碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE活性（U/mg prot）=（A对照管-A测定管）÷T A对照管×100%÷1%÷（Cpr×V样本）×V反应÷T=（A对照管-A测定管）÷T A对照管÷Cpr×242、按照样本鲜重计算单位的定义：以波长660nm的吸光度下降百分率表示，每g组织在1mL反应体系中每分钟降低1％碘蓝值为一个酶活性单位。
NADH氧化酶（NOX）活性检测试剂盒说明书
NADH氧化酶（NOX可见分光光度法货号：BC0630规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体25 mL×1瓶4℃保存试剂二液体5 mL×1瓶4℃保存试剂三液体0.5 mL×1支-20℃保存试剂四液体70 mL×1瓶4℃保存试剂五液体10 mL×1瓶4℃保存试剂六粉剂×2瓶-20℃保存溶液的配制：试剂六：临用前加入9 mL双蒸水，用不完的试剂-20℃分装保存。
产品说明：NOX（EC 1.6.99.3）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可在氧气存在下，直接将NADH氧化为NAD+。
该酶不仅参与NAD+的再生，而且与免疫反应密切相关。
NOX能够将NADH氧化为NAD+，NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝（DCPIP）的还原相偶联，蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP，在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：1.准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10µL试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2.将匀浆600g，4℃离心5min。
将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。
3.将上清液转移至另一EP管中，即胞浆提取物，用于线粒体中泄露NOX活性测定。
4.沉淀即为线粒体，加入200µL试剂二和2µL试剂三，反复吹打充分混匀，用于NOX活性测定，并用于蛋白浓度测定。
谷氨酸合成酶(GOGAT)活性检测试剂盒说明书__紫外分光光度法UPLC-MS-4450
谷氨酸合成酶（GOGAT）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法货号：UPLC-MS-4450规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体60mL×1瓶4℃保存试剂一液体60mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×2支4℃保存试剂三粉剂×2支4℃保存试剂四粉剂×2支-20℃保存溶液的配制：1、工作液的配制：取试剂二、试剂三、试剂四各一支加入30mL试剂一中溶解，现用现配，可分装后-20℃保存，避免反复冻融。
产品说明：GOGAT主要存在于原核生物、酵母菌及高等植物非绿色组织的前质体中，和谷氨酰胺合成酶（GS）共同构成GS/GOGAT循环，参与氨同化的调控。
GOGAT以NADH为电子供体，催化谷氨酰胺的氨基转移到α-酮戊二酸形成两分子的谷氨酸，NADH在340nm 吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；10000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
10000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
紫外分光光度法测定单宁含量检测试剂盒说明书
单宁含量检测试剂盒说明书紫外分光光度法货号：BC1390规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体75mL×2瓶2-8℃保存试剂一粉剂×1瓶常温保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、标准品：10mg 单宁酸。
临用前加入1.175mL 提取液溶解为5000nmol/mL 的标准液，2-8℃保存两周。
产品说明：单宁又称植物多酚，是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物。
单宁可作为潜在的生物标记物；与蛋白质结合的能力又称为收敛性或涩性。
其收敛性是多种生理活性的基础，如止血、抗肿瘤、抗衰老等生理活性，也是影响产品口感的因素之一。
根据光谱特性，单宁在275nm 下有较强的紫外吸收，通过利用活性炭能够特异吸附单宁的性质来检测单宁含量。
技术指标：最低检出限：0.385nmol/mL 线性范围：0.39-18nmol/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）将样本烘干至恒重，粉碎，过30-50目筛之后，称取约0.1g ，加入2mL 提取液（封口膜封口防止液体溅出），于70℃水浴，准确提取30min ，期间可摇晃数次。
12000rpm，25℃，离心10min ，取上清，用提取液定容至2mL ，待测。
二、测定步骤1.紫外分光光度计预热30min ，波长调至275nm ，提取液调零。
Beijing Solarbio Science &Technology Co.,LtdTel:400-968-6088Fax:************2.标准液的稀释：将标准液用提取液稀释为25、12.5、6.25、3.125、1.5625、0.78125nmol/mL标准溶液。
Ca++Mg++-ATP 酶活性检测试剂盒说明书
BC0960 -- 第 1 页，共 4 页Ca Mg -ATP 酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC0960 规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 规格 保存条件 试剂一 液体30 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂二 液体4 mL×1 瓶 2-8℃保存 试剂三 粉剂×2支 -20℃保存 试剂四 液体2 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂五 液体3 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂六 粉剂×1瓶 2-8℃保存 试剂七 粉剂×1瓶 2-8℃保存 试剂八 液体15 mL×1 瓶 常温保存 标准品液体1 mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、 试剂三：临用前取1支加入1 mL 蒸馏水充分混匀待用；现用现配。
用不完的试剂-20℃分装保存一周。
2、 试剂六：临用前加入15 mL 蒸馏水，溶解后2-8℃保存两周。
3、 试剂七：临用前加入15 mL 蒸馏水，溶解后2-8℃保存两周。
4、 标准品：10mmol/L 标准磷贮备液。
将标准品 20倍稀释，即取0.1 mL 标准品加1.9 mL 蒸馏水充分混匀，配成0.5 μmol/mL 标准磷应用液，现用现配。
5、 定磷剂的配制：按H 2O ：试剂六：试剂七：试剂八=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色。
若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂根据样本量现用现配。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
产品说明：Ca ++Mg ++-ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP 水解生成ADP 和无机磷。
根据Ca ++Mg ++-ATP 酶分解ATP 生成ADP 及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP 酶活性高低。
ATP ADP + Pi注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
紫外分光光度法测蛋白酶酶活
2013/05/13紫外分光光度法测蛋白酶酶活1、原理蛋白酶在一定的温度与pH条件下，水解酪素底物，然后加入三氯乙酸终止酶反应，并使未水解的酪素沉淀除去，滤液对紫外光有吸收，可用紫外分光光度法测定。
根据吸光度计算其酶活力。
酶活单位的定义：每1mL粗酶液，在一定温度和pH值条件下，1min水解酪素产生1ug酪氨酸为一个酶活力单位，以（u/mL）表示。
2、试剂和溶液三氯乙酸、氢氧化钠、盐酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、乳酸、乳酸钠、硼酸钠（硼砂）均为分析纯，酪素、酪氨酸为生化试剂。
2.1 三氯乙酸c（CCL3·COOH）=0.4mol/L称取三氯乙酸65.4g，用水溶解并定容至1000 mL。
2.2 氢氧化钠溶液c（NaOH）=0.5mol/L按GB601配制。
2.3 盐酸溶液c（HCL）＝1 mol/L及0.1 mol/L1 mol/L HＣＬ:取90mL浓盐酸溶解于去离子水中，定容至1000mL。
0.1 mol/L HＣＬ：取9mL浓盐酸溶解于去离子水中，定容至1000mL。
2.4 缓冲溶液a、磷酸缓冲液（pH＝7.5）适用于中性蛋白酶称取磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）6.02g和磷酸二氢钠（NaH2PO4·12H2O）0.5g，加水溶解并定容至1000mL。
b、乳酸缓冲液（pH＝3.0）适用于酸性蛋白酶甲液称取乳酸（80％～90％）10.6g，加水溶解并定容至1000 mL。
乙液称取乳酸钠（70％）16g，加水溶解并定容至1000 mL。
使用溶液取甲液8 mL，加乙液1 mL，混匀，稀释一倍，即成0.05moi/L乳酸缓冲溶液。
c、硼酸缓冲溶液（pH＝10.5）适用于碱性蛋白酶甲液称取硼酸钠（硼砂）19.08g，加水溶解并定容至1000 mL。
乙液称取氢氧化钠4.0g，加水溶解并定容至1000 mL。
使用溶液取甲液500 mL、乙液400 mL混匀，用水稀释至1000mL。
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结合态淀粉合成酶（GBSS）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC3290
规格：50T/48S25T/24S
产品内容：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体40mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存；临用前每支加入7mL试剂一。
试剂三：粉剂×2瓶，-20℃保存；
试剂四：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每支加入5mL试剂一。
试剂五：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每支加入8mL试剂一。
试剂六：粉剂×2支，-20℃保存；临用前加入416μL双蒸水，充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存；
试剂七：液体250μL×3支，-20℃保存；
试剂八：液体12.5μL×2瓶；每支临用前加入溶解好的4mL试剂四
反应液Ⅰ的配制：临用前在试剂二中加入7mL试剂一，缓慢加热，逐渐升温使其溶解，冷却后加入试剂三混合溶解。
这样可以分两批配制并且测定。
产品说明：
GBSS（EC 2.4.1.21）以束缚态存在于淀粉体中，催化淀粉链的加长反应，主要负责直链淀粉的合成。
GBSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上，同时生成ADP；进一步通过反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH，其中NADPH 生成量与前一步反应生成的ADP数量呈正比，通过340nm下测定NADPH的增加量，可以计算GBSS活性。
需自备的的仪器和用品：
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液制备
称取约0.1g组织加入1mL提取液，冰浴中匀浆。
10000g，4℃离心10min，弃上清，在沉淀中加入1mL 提取液充分混匀，置冰上待测。
二、测定步骤
试剂名称（μL）测定管
样本200
反应液Ⅰ270
混匀，30℃保温20min，置沸水浴中1min（盖紧，防止水分散失），冰浴冷却
试剂八150
混匀，30℃保温30min，置沸水浴中1min（盖紧，防止水分散失），冰浴冷却，10000g常
温离心10min，取上清液。
37℃预热试剂五和上清液。
上清液450
试剂五300
试剂六15
试剂七15
混匀后立即在340nm波长下记录初始吸光度A1和2min后的吸光度A2，计算ΔA=A2-A1。
注意：试剂二如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混匀。
三、GBSS活性计算
1、按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
GBSS活性（U/mg prot）=[ΔA÷（ε×d）×V测]÷(Cpr×V样÷V反总×V上清)÷T
=43.2×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
2、按照样本鲜重计算
单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
SSS活性（U/g鲜重）=[ΔA÷（ε×d）×V测]÷(W÷V提取×V样÷V反总×V上清)÷T
=43.2×ΔA÷W。
V测：测量体积，0.78mL；
V反总：反应体积，0.62mL；
V提取：加入提取液体积，1mL；
T：反应时间，20min；
cm)；ε：NADPH消光系数，6.22×10-3mL/(nmol
˙
d：石英比色皿光径，1cm；
V样本：加入样本的量，0.2mL；
V上清：吸取上清液的量，0.45mL；
Cpr：样本蛋白浓度；
W：样本鲜重。