双抗体夹心一步法及两步法测HBsAg的结果分析
乙肝HBsAg定量检测及其临床意义(新疆20180422)
200
127
42 21
0
0.00 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.09 0.10
2.“假阳性”原因
• 内源性干扰因素：类风湿因子、补体、治疗性抗体、 溶菌酶、合并其他病毒感染、自身免疫性疾病、血 液透析等。
• 外源性干扰因素：溶血、细菌污染、凝固不全、操 作失误（如临近孔污染、加错样）等。
3.灰区
◆“灰区”的概念 在定性ELISA测定中，处于阳性判定 值（CO值）附近、临床意义可疑的一部分结果。CO值的确 定要使测定结果的假阳性和假阴性发生率最低。如果试剂 盒CO值上移或下移，可导致假阴性或假阳性结果。
• 线性范围宽（0.03-2500IU/mL） 宽広线い性レ范ン围ジ
• 一次测定即可得到最终结果
全方位提升实验室的检测质量和效率
CMIA
★ 化学发光微粒子免疫分析技术(CMIA)(Abbot，Architect HBsAg QT)
过 程 示 意 图
★ 电化学发光免疫分析(ECLI)(Roche，Elecsys HBsAg II)
◆1963年澳大利亚科学家Blumberg首次 发现，当时称澳大利亚抗原(后简称澳 抗)。后来研究表明，澳抗即HBV表面膜 （Blumberg,1925.7.28-2011.4.25） 颗粒，改称HBV表面抗原。与盖杜谢克 共获1976年诺贝尔生理学及医学奖。 ◆2013.7在北京举办了“HBsAg发现50 周年学术研讨会”。主要针对发现、检 测、病理及治疗转归等进行了讨论。
☆HBV-DNA（基因诊断）
新型HBV感染的生物学标志
欧洲肝脏病学会（EASL）发布了2017版《慢性HBV感 染管理临床实践指南》，该指南新增了HBV感染的3种 新型生物学标志物。 ◆ cccDNA：HBV持续感染的关键所在，对评估HBV感 染是否治愈至关重要。检测需肝活检，方法尚待标准 化，限制了在临床的广泛应用。
乙肝两对半1
固 相 载 体
阴 性 结 果
洗版分离洗掉抗原
二、HBsAb检测原理 （ELISA法）
方法：双抗原夹心法：一步法 试剂原材料：预包被HBsAg,配以酶标记抗 原（ HBsAg-HRP）及TMB等其他试剂。
双抗体夹心法模式：
固 相 载 体
包被Ag Ab
标记HBsAg
一步法检测：
形成复合物
Ag
标记HBsAg
HBeAb
固 相 载 体
阴 性 结 果
rHBeAg 中和试剂
标记HBeAb
固相-液相-液相竞争法检测HBeAb时，标本中的 HBeAg及中和试剂rHBeAg对检测结果的干扰
HBeAb（包被） HBeAg(标本）
固 相 载 体
rHBeAg 中和试剂
标记抗体
固相-液相-液相竞争法检测HBeAb时，标本中的 HBeAg及中和试剂rHBeAg对检测结果的干扰
固 相 载 体
包被Ab
血清HBeAb
固相-液相-液相竞争法
HBeAb（标本） 固相HBeAb 标记HBeAb
固 相 载 体
rHBeAg 中和试剂
.
阳 性 结 果
固相-液相-液相竞争法检测HBeAb
HBeAb HBeAb（标本）
固 相 载 体
阳 性 结 果
rHBeAg 中和试剂
标记HBeAb
固相-液相-液相竞争法检测HBeAb
HBV感染的实验室检测是目前国内最为常见的 检验项目，也是医患纠纷产生较多的领域之一。 • 乙肝两对半： HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。 • 检测结果：定性、半定量、定量。 • 试剂原材料：抗原（天然抗原、重组抗原）、抗 体（单抗、多抗、Fab）。 • 检测技术： ELISA、化学发光、时间分辨荧光、免疫层析等。 • 检测方法：夹心法（一步法，两步法），竞争法 （固相－液相竞争法，液相－液相竞争法等）。
应用双试剂检测HBsAg在兵检中检测结果分析
应用双试剂检测HBsAg在兵检中检测结果分析在征兵体检中，我县已多年应用双试剂检测HbsAg，结果令人满意，大大地提高了征兵的质量，进一步杜绝了漏检、退兵地现象。
选择两家合格厂家生产的HbsAg试剂，对同一标本在同等条件下，严格按试剂盒说明书进行操作。
现将最近3年内我县适龄青年采用双试剂检测结果作浅显分析。
资料与方法征兵体检抽血人数1059人。
试剂：上海荣盛生物技术有限公司；郑州安图绿科生物有限公司。
两家公司的产品均采用ELISA法进行HBsAg检测，严格按照试剂盒说明书操作。
实验步骤：①取出一定量的包被孔，编号。
留一孔做空白对照、其余加入阴性对照三孔和阳性对照二孔50μl/孔及待测标本50μl/孔于相应的反应孔内。
②除空白孔以外，各孔分别加入酶结合物50μl(或1滴/孔)。
③在微型振荡器上振荡30秒使孔内液体混合均匀(该步骤非常重要)。
④贴上板贴，置37℃下温育30分钟。
⑤撕下板贴，洗板：甩去孔内液体，洗板6次，最后在吸水纸上拍干。
⑥每孔加入底物液、显色剂各50μl(或1滴/孔)，37℃避光温育10分钟。
⑦加终止液50μl/孔(或1滴/孔)。
轻轻振荡混匀后，立即测试结果。
⑧使用酶标仪测量：单波长测定，以空白孔调零，450nm测定各孔的OD值；直接采用450nm/(620～630nm)双波长测定各孔的OD值。
结果两家公司的产品均采用ELISA法进行HBsAg检测。
讨论对照表表明，如果单用上海荣盛生产的试剂盒，漏检率1.04%，如果单用郑州安图绿科生产的试剂盒，漏检率0.85%。
采用双试剂对同一样本进行检测，可使漏检率大大减低，从而大大提高了兵检的质量。
针对两组存在的差异，本文认为是由于试剂本身存在包被抗原的组成、长短、合成方式等方面的不同及使用单克匹配位点的不同，或试剂盒的生产工艺、保存、运输等环节的差异也会影响其质量，加之不同地区、人群的流行感染株的差异及感染者体内抗体模式的多样化及标本自身因素存在干扰因子(内源性物质和外源性物质)等因素的影响，另外试剂采用的方法学本身差异、操作因素的影响等等，有时就会出现极个别的标本在不同的试剂间有不同的结果；甚至同一标本在不同时间检测结果亦不一致的情况。
【实验诊断学】乙肝两对半检查实验
我国HBV感染概况
• 一般人群HBsAg携带率高达7.18%；现有慢性HBV感染者约9 300万 人，占全世界的1/4；
• 其中慢性乙型病毒性肝炎患者超过 2 000万例，占全世界慢性乙 肝患者的1/3；
• 15岁以下儿童HBsAg携带率下降显著，1-4岁组仅为0.96%；1~ 4岁 组HBsAb阳性率由1992年15.75%升至72.25%; 抗HBcAb阳性率由 1992年30.08%降至3.76%
15
乙型肝炎病毒病毒标志物检测
✓乙型肝炎表面抗原（HBsAg）✓乙肝核心抗体（抗-HBc）
✓乙肝病毒前S1抗原
【实验原理】
• 酶联免疫吸附试验（ELISA） • 一种固相酶免疫测定技术：先将抗体或抗原包被到
某种固相载体表面，与待测样品中的抗原或抗体发生 反应，再加入酶标抗体或抗原与免疫复合物结合，最 后加入酶反应底物，根据底物被酶催化产生的颜色及 其吸光度（A）值的大小进行定性或定量分析。
ELISA检测类型
• HBcAg(核心抗原)： 是乙肝病毒存在的直接标志， 与HBV复制呈正相关。存在于肝细胞内，血中 检测不出。
• 当肝细胞破坏,HBcAg释放出来，被酶水解成 HBeAg,所以HBeAg提示肝细胞损伤，HBeAg阳性 标志着较强的感染和传染性
结果报告
• HBsAg: 阴性（阳性） • HBsAb: 阴性（阳性） • HBeAg: 阴性（阳性） • HBeAb: 阴性（阳性） • HBcAb: 阴性（阳性）
注意事项
• HBcAb测定：待测标本稀释后的检测结果为临 床意义；不作稀释的检测结果为流行病学意义。
实验-两对半的检测.
• HBeAb：中和竞争法（血清中的e抗体与固相e抗体竞争结合e抗原）
• HBcAb：竞争抑制法
双抗原（体）夹心法测抗体（原）
*
待测抗体
包被抗原
*
酶标抗原
酶标抗体
待测抗原
包被抗体
双抗原夹心法 双抗体夹心法 Anti-HIV, Anti-HBs
HBsAg ,HCV core Ag, HBeAg,HBV preS1,PreS2
表面抗原阳性结果、灰区标本、矛盾结果或少见模式均须复查 生物安全：试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。
常见的检测模式（临床意义2）
HBeA b + + HBcAb 临床意义 + + + +
急肝、慢肝活动期、有传染性 急肝、慢性HBsAg携带者
模式 HBsAg HBsAb HBeA g 1 + + 2 + 3 + 4 -
酶联：抗原或抗体的酶标记。 免疫：以抗原抗体特异性反应为基础。 吸附：抗原或抗体包被于固相载体表面。
在固相载体表面实现抗原抗体的反应，通过酶标记的手段，酶催化底 物形成水解、氧化或还原反应，形成有色物质，其颜色的深浅与标本中的 抗原或抗体的量直接相关。
ELISA技术特点
• 具有良好的灵敏度和特异性，能满足临床 需要，应用广泛。 • 操作简单、无需昂贵的仪器投入，价格便 宜。
⑦ 中和试剂（只有检测HBeAb的试剂盒才有）
实验准备
• 配制洗涤液：用蒸馏水按1：20稀释浓缩洗 涤液。
• 为节省试验时间，除检测核心抗体（HBcAb） 组外，其余组可在加样后的温育时间中才配 制洗涤液。
实验操作
1、加样：第一、二孔为阴、阳对照孔，分别加入阴、阳对 照50ul。其余各孔为样品孔，各加入待测标本50ul（检 测HBcAb 时，待测标本需用稀释后的洗涤液做1：30稀 释）。 2、加中和试剂（只有检测HBeAb时才需要）：每孔50ul 3、加酶结合物：每孔50ul 4、温育：封板→充分混匀后置37°C水浴30分钟 5、洗涤：弃去反应条孔内液体，用洗涤液注満每孔，放置 或振荡1分钟，弃去拍干→反复5次（注意：最后一次一 定要拍干） 6、显色：每孔先加显色剂A 50ul，再加显色剂B 50ul，混 匀后置37°C水浴10分钟 7、中止显色：每孔加入中止液50ul 8、判断结果：
应用双抗原夹心法和间接法两种方法检测丙型肝炎病毒抗体的准确性对比分析
应用双抗原夹心法和间接法两种方法检测丙型肝炎病毒抗体的准确性对比分析【摘要】目的：评估丙型肝炎病毒抗体检测患者实施双抗原夹心法和间接法检测的应用价值。
方法：对158例本医院实施治疗的丙型肝炎病毒抗体检测予以项目研究，选于2020年7月至2020年1月，全部患者均予以间接法、双抗原夹心法，分析两组方案的诊断准确性。
结果：（1）丙型肝炎病毒抗体检测患者确诊结果阳性59例，占比37.34%；阴性99例，占比62.66%。
间接法阳性67例，占比42.41%；阴性91例，占比57.59%。
双抗原夹心法检测阳性63例，占比39.87%；阴性95例，占比60.13%。
（2）丙型肝炎病毒抗体检测患者双抗原夹心法检测诊断结果灵敏度（94.92%）、特异度（92.93%）、准确性（93.67%）均明显高于间接法（77.97%、78.79%、78.48%），两者差异明显（P＜0.05）。
结论：丙型肝炎病毒抗体检测患者予以双抗原夹心法检测准确性相对较高。
【关键词】丙型肝炎病毒抗体检测；间接法；双抗原夹心法丙型肝炎病毒感染是一种全球性公共卫生问题，影响着数百万人的健康，准确地检测丙型肝炎病毒抗体对于早期诊断、治疗选择以及预防疫情扩散至关重要[1]。
在丙型肝炎病毒抗体检测中，双抗原夹心法和间接法是常用的两种方法，本研究针对丙型肝炎病毒抗体检测方式进行分析，讨论双抗原夹心法和间接法两种方法检测的应用价值。
1临床资料与方法1.1临床资料对2020年7月至2020年1月本医院实施治疗的丙型肝炎病毒抗体检测予以项目研究，选于138例，丙型肝炎病毒抗体检测患者年龄最高值是63岁，年龄最低值是24岁，年龄平均值经计算为（44.19±10.15）岁。
1.2方法全部患者均予以间接法、双抗原夹心法，间接法：按照说明书进行操作，步骤为：试验前处理-样本加入-一级抗体结合-洗涤-二级抗体结合-洗涤-荧光显微镜观察，判断样本中是否存在丙型肝炎病毒抗体[2]。
[基础科学]斑点免疫层析试验
实验二十三斑点免疫层析试验(Dot immunogold chromatographic assay)斑点金免疫层析试验是将胶体金标记技术和蛋白质层析技术相结合的以硝酸纤维素膜为载体的快速的固相膜免疫分析技术。
本法除层析条装置外，不需任何仪器设备。
本实验以双抗体夹心法测定HBsAg为例。
【实验原理】金标抗HBsAg抗体(兔型)干片粘贴在近下端，抗HBsAg单克隆抗体(鼠型)羊抗兔IgG抗体分别包被在NC膜的测试区和质控区。
测试时，试纸条下端浸入血清样品中或滴加血清样品，通过层析作用，上端移动，流经干片时将金标抗HBsAg抗体复溶，若待检血清中含HBsAg，即形成金标抗HBsAg-HBsAg复合物，移至测试区时，形成金标抗HBsAg-HBsAg-抗HBsAg复合物，金标抗HBsAg 被固定下来显示红色线条，呈阳性反应，多余的金标抗HBsAg抗体移至质控区被羊抗兔免疫球蛋白抗体捕获，呈现红色质控线条。
【主要试剂与器材】1.胶体金层析条所用试剂全部为干试剂被组合在该层析条上，有商品供应。
2.样品待检血清和HBsAg阳性质控血清【操作方法】1.将试剂条标记线一端浸入待检样品中2～5秒或在样品加样处加一定量待检样品，平放于水平桌面上。
2.室温下5～15min，目测观察结果。
【结果判断】结果判断见图23-1。
HBsAg阳性(+)：两条紫红色条带出现，样品中含有乙肝表面抗原。
HBsAg阴性(-)：仅质控区(C)出现一条紫红色条带，样品中检测不出乙肝表面抗原。
试剂条无效：质控区(C)未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质失效。
图23-1 斑点免疫层析试验结果判断示意图【注意事项】1.打开试剂条包装后应在1h内应使用。
2.将试剂条插入血清/血浆样品中，血清/血浆样品液面不能超过试剂条的标记线。
3.若发现试剂条无效，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂盒重新测试。
如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品。
ELISA一步法检测HBsAg假阴性结果分析
ELISA一步法检测HBsAg假阴性结果分析发表时间：2014-05-19T09:03:25.263Z 来源：《医药前沿》2014年第6期供稿作者：陈静[导读] 一步法检测,与质控物吸光度比较,从开始出现弱阳性为该标本最低稀释比。
陈静（沈阳市第四人民医院 110031）【摘要】目的探讨采用ELISA一步法检测导致出现(HBsAg) 钩状效应（HBsAg假阴性）的原因。
方法选择我院健康体检者150例，其中，HBeAg阳性HBsAg阴性标本35例,倍比稀释标本后分别应用ELISA二步法和一步法检测HBsAg,观察两种方法的阳性率及不同稀释比与吸光度的变化。
结果检测35份标本原血清结果,一步法HBsAg均为阴性,二步法均为阳性；一步法,大部分标本从原血清至1: 7均为阴性，吸光度值OD为0.076,1: 17稀释后OD值逐渐升高,从1:126至1: 1 023吸光度变化不大(OD值:3.30±0.15),1:2058后OD值逐渐下降；二步法从原血清到1:266吸光度变化不大(OD值:3.20±0.17)),1:524后OD值逐渐下降。
结论 ELISA二步法可避免HBsAg浓度过高致钩状效应所引起的HBsAg检测结果假阴性。
【关键词】酶联免疫吸附(ELISA)实验乙肝病毒表面抗原HBsAg 钩状效应【中图分类号】R441 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）06-0198-01酶联免疫吸附(ELISA)实验[1],按其操作步骤分为一步法和二步法。
一步法因为操作更简单而深受广大用户的青睐, 但是在一步法实际工作中，我们发现ELISA一步法钩状效应明显[2]，就会出现HBsAg假阴性，易造成漏检现象。
同时，我们采用二步法检测HBeAg及抗-HBc双项阳性血清标本中的HBsAg，将标本倍比稀释后检测吸光度OD值的变化，对比一步法出现钩状效应，引起HBsAg假阴性结果出现的原因。
乙肝二对半测定结果的临床分析
乙肝二对半测定结果的临床分析乙肝病毒感染是一种全球性公共卫生问题，感染乙肝病毒（HBV）的个体可能患上急性乙肝，也可能成为慢性乙肝携带者。
乙肝二对半测定是一种常用的诊断乙肝病毒感染的方法，通过测定乙肝表面抗原（HBsAg）和乙肝表面抗体（Anti-HBs）的结果来判断个体的感染状态。
本文将对乙肝二对半测定的结果进行临床分析，以帮助医学工作者更好地理解和解读相关检测结果。
一、乙肝二对半测定的原理和步骤乙肝二对半测定是采用酶联免疫吸附试验（ELISA）的方法进行的。
ELISA是一种常用的免疫学检测方法，通过利用酶与抗原或抗体之间的反应来检测目标物质的存在与否。
乙肝二对半测定主要包含两个步骤：1. 测定乙肝表面抗原（HBsAg）：这是一项检测乙肝病毒感染的关键指标。
如果HBsAg呈阳性，即表示个体目前被乙肝病毒感染。
但需要注意的是，HBsAg阳性并不一定意味着个体一定会发展成为慢性乙肝携带者，一部分人会在感染后自愈。
2. 测定乙肝表面抗体（Anti-HBs）：这是一种抗体，它能够识别并结合乙肝表面抗原。
如果个体血液中含有足够浓度的Anti-HBs，那么可以判断他/她之前已经感染过乙肝病毒并产生了免疫反应。
这种情况下，一般认为个体已经康复或者接种过乙肝疫苗。
二、乙肝二对半测定结果的解读根据乙肝二对半测定的结果，可以将个体分为以下几种情况：1. HBsAg阴性、Anti-HBs阴性：这种结果表示个体没有乙肝病毒感染的迹象，可以认为个体是健康的。
但需要注意的是，虽然结果是阴性，但并不能排除最近被感染或者乙肝病毒携带者的可能性。
在某些情况下，个体可能需要进行更多的检测以确认结果的准确性。
2. HBsAg阳性、Anti-HBs阴性：这种情况下，个体目前被乙肝病毒感染。
需要进一步的检测来判断是否属于慢性感染，以及是否需要进行进一步的治疗。
个体在这个阶段应该采取预防措施，避免传播给他人，同时也需要遵循医生的建议进行治疗。
用二种方法检测乙肝病毒表面标志物结果分析
用二种方法检测乙肝病毒表面标志物结果分析摘要】目的: 比较胶体金法与酶联免疫法(ELISA ) 检测乙型肝炎病毒(HBV) 表面标志物（HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc，以下简称乙肝两对半）的结果，探讨这二种方法的符合率。
方法: 分别用酶联免疫法和胶体金法检测200 例成人血清标本乙肝两对半，将两种检测结果进行分析、比较。
结果:200 例标本中，ELISA 法和胶体金法检测HBsAg 结果差异无统计学意义(P ＞0.05)，两法的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb 总符合率分别为100%、100%、100%、98.00%、99.00%；结论: ELISA 法灵敏度高，易观察，适合大规模标本的测定。
胶体金法简便快速，特异性较高，不需要特殊设备，易于观察结果，但存在一定假阳性或假阴性率，不能完全替代ELISA 法进行乙肝病毒血清标志物的检测，适合在基层医疗单位、急诊标本和单份标本初筛时使用。
【关键词】酶联免疫法(ELISA) 胶体金法乙肝两对半据世界卫生组织报道，全球约20 亿人曾感染过HBV，其中3.5 亿人为慢性HBV 感染者，每年约有100 万人死于HBV 感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌。
据估计，全世界现有乙肝病毒携带者3.6 亿，其中我国约有1.3 亿。
乙型肝炎的流行不仅影响人们的健康，也给社会带来沉重的经济负担。
随着人们健康意识的增强，乙型两对半检测已成为人们的日常体检、门诊常规检查项目。
目前最常用的是用ELISA 法检测乙肝两对半，ELISA 法由于具有较高的灵敏度和特异性，且容易开展，因而成为实验室普遍使用的方法，但检测时间长，操作较繁琐，不便单个标本快速检测。
胶体金法是近年来开展的一种快速检测方法，其操作简便，不需要特殊设备和条件，可在基层医疗单位开展，目前也常应用于门诊体检和急诊患者的单个标本检测等。
现用ELISA 法和胶体金法对200 名成人血清进行乙肝两对半检测，并对结果进行分析比较，以探讨这二种方法的符合程度。
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双抗体夹心一步法及两步法测HBsAg的结果分析①【摘要】目的分别用双抗体夹心一步法及两步法检测200份慢性乙肝患者标本(亦作为阳性对照标本)及临床随机体检标本372份和186份排除乙肝病毒感染的阴性对照标本,并对结果进行分析比较,以寻找一种更适合基层医院的最简便快速价廉的方法。
结论根据2种方法的检测结果对双抗体夹心一步法及两步法测hbsag的结果及方法进行比较后本人认为对于hbeag阴性的标本,用一步法和两步法检测hbsag的结果是完全吻合的;而对于极少数hbeag阳性hbsag阴性的标本可用两步法检测hbsag,以排除是否因hbsag浓度过高的“带现象”引起的假阴性亦即鈎镰效应。
【关键词】双抗体夹心一步法两步法 hbsag hbeag hbsag的酶免疫检验方法根据反应模式分为“一步法”和“两步法”。
“一步法”是将待测样品和酶标记抗体同时加入到反应孔中进行反应,从反应开始到反应结束大约需要1个小时,而“两步法”则是先将样品加入到反应孔中,待反应结束后再加入酶标记抗体,从而使得待测样品的“捕获反应”和酶标记抗体的“酶联反应”分开进行,从反应开始到结束大约需要2个小时。
两步法较一步法相比大大延长了检测时间,降低了检测效率,不利于基层医院的广泛推广。
由于hbeag多见于hbsag阳性的患者血清,hbeag的检出是hbv 在体内复制及血清具有强感染性的一个指标,血中hbsag的滴度越高hbeag的检出率亦越高[1]。
hbeag阳性可以作为一步法测hbsag 是否出现鈎镰效应的一个判断指标。
1 资料与方法
1.1 一般资料
已诊断为慢性乙肝患者的血清标本200份来自我院2010年门诊及住院病人以及肝病医院,372份血液标本来自我院2010年体检者,186份阴性对照标本来自我院门诊体检者。
1.2 试剂与仪器
试剂由北京万泰生物药业有限公司提供;酶标仪khbst——360,
洗板机dnx—— 9620a系北京普朗新技术有限公司产品。
1.3 方法
严格按照双抗体夹心“一步法”及“两步法”的操作规程进行操作。
2 结果
(1)2种方法检测758份血清hbsag结果,见表1
(2)2种方法的灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率[2]结果(表
2)
3 讨论
将372例体检者标本分别用一步法和两步法检测,其阳性结果和阴性结果个数及其对应标本的结果是完全吻合的;另外将其中24例阳性标本检测其hbeag结果均为阴性。
而上述200例乙肝患者标本用一步法测出阴性的2例再进一步检测hbeag,发现其hbeag为阳性,这便是一步法因鈎镰效应引起的hbsag假阴性。
从上表还可以知道一步法和两步法检测的特异度和假阳性率均相同,即二者的误诊率
均为零。
因此本人认为,2011年国家强制将两步法取代一步法,虽然一定程度降低了鈎镰效应提高了检出率,但大大延长了hbsag的检测时间降低了检测效率,这是检验同仁们不愿看到的;为了提高检测效率,方便就诊较远的同志能当天取得报告,同时发现鈎镰效应引起的假阴性,可以用一步法联合检测hbeag。
当然对于足以引起鈎镰效应的高浓度的hbsag,为了有利于临床诊疗和治疗效果的监测,可以用灵敏度更高的电化学发光和时间分辩荧光免疫检测进行定量或半定量。
由于电化学发光和时间分辩荧光免疫检测大大增加了检测成本,加重了就医负担,对于需治疗的乙肝患者进行临床治疗效果的监测来说是很必要的,但对于绝大多数不用临床治疗的乙肝携带者及健康体检者来说却是没有多大的必要。
本人通过大量临床实践认为,对于两对半检测的标本可以先用一步法检测其hbsag,如果hbeag阳性而hbsag为阴性则是因抗原浓度太高致鈎镰效应引起的假阴性,此时可以用灵敏度更高的电化学发光和时间分辩荧光免疫检测进行定量或半定量以准确测出其hbsag的含量,便于临床治疗及疗效观察;而对于随诊及体检两对半者只需进行双抗体夹心一步法检测hbsag就可以了;这样既降低了检测成本,同时也大大缩短了检测时间,适合在基层医院广泛开展。
参考文献
[1] 许化溪.病原生物学检验—理论与临床[m]．北京:人民卫生出版社,2007．。