尿素中的氮含量的测定
实验八：尿素中氮的测定
一.实验目的
1.学会用甲醛法测定氮含量，掌握间接滴定的原理。
2.学会NH
4
+的强化，掌握试样消化操作。
3.掌握容量瓶、移液管的正确操作。
4.进一步熟悉分析天平的使用。
二.实验原理：
1.尿素是有机碱，不能被强酸直接滴定，需要先消化。
尿素CO(NH
2)
2
是有机弱碱，K b=1.3×10-14，不能满足cK b≥10-8弱碱直接被
准确滴定的条件，可用浓硫酸将其转化为(NH
4)
2
SO
4
：
CO(NH
2)
2
+ 2H
2
SO
4
= (NH
4
)
2
SO
4
+ CO
2
↑ + SO
3
↑
CO(NH
2)
2
+ H
2
SO
4
+ H
2
O = (NH
4
)
2
SO
4
+ CO
2
↑
2.尿素CO(NH
2)
2
经浓硫酸消化后转化为(NH
4
)
2
SO
4
，过量的H
2
SO
4
以甲基红作指
示剂，用NaOH标准溶液滴定至溶液从红色到黄色。
3.NH
4
+是弱酸，不能被强碱直接滴定，要把弱酸强化
NH4+是一个弱酸，Ka=5.6×10-10，也不满足cKa≥10-8弱酸直接被准确滴定的条件，可用甲醛将其转化。4NH4+ + 6HCHO = (CH2)6N4H+ + 3H+ + 6H2O
4.由于生成的(CH
2)
6
N
4
H+(K
a
=7.1×10-6)和H+可用NaOH标准溶液滴定，滴定终
点生成的(CH
2)
6
N
4
是弱碱，化学计量点时，溶液的pH值约为8.7，应选用酚
酞为指示剂，溶液中有两种指示剂，在滴定前溶液为红色，滴入NaOH标准溶液后，随着溶液中氢离子的减少，颜色的变化次序为红→橙→金黄（第一次）→黄→金黄（第二次）。第一次出现金黄时未到终点，此时是指示剂甲基红的颜色变化，待过纯黄后，再出现第二次的金黄，已到终点，此时是指示剂酚酞的颜色变化在起作用。。
铵盐与甲醛的反应在室温下进行较慢，加甲醛后，需放置几分钟，使反应进行完全。
5.由N ：H+：OH-的比例关系得出
N% = [C(NaOH)×V(NaOH)×M(N) ]÷[m(CO(NH)
2
×25.00/250.00)]×100%三.主要仪器与试剂
主要仪器：分析天平，250m烧杯（3个），50mL滴定管，称量瓶，干燥器，量筒，250mL容量瓶。
主要试剂：NaOH溶液（2mol·L-1及0.1mol·L-1的标准溶液），酚酞指示剂，甲醛溶液，基准试剂，尿素试样
四、实验步骤
1.在一周前洗净100mL小烧杯、小表面皿、10mL量筒，放实验柜中晾干。
2.准确称取尿素试样0.6～0.7g于100mL烧杯中，加6mL浓硫酸，盖上表面皿。
3.在通风橱内缓缓加热，当有密集的CO2溢出时，移走煤气灯，至无CO
2
气泡少时，用大火加热至冒出的浓白雾又变稀时，再加热2min，在通风橱中冷却。
4.吹洗表面皿和杯壁，加30mL纯水稀释，稍冷后完全转移至250mL容量瓶中，稀释至标线，摇匀。
5.准确移取25.00mL试液三份，分别加3滴甲基红指示剂，先用2mol·L-1，后
用0.1mol·L-1 NaOH溶液中和过剩的H
2SO
4
至纯黄。
6.取30ml甲醛溶液，以酚酞为指示剂，用0.1mol/L的氢氧化钠溶液中和至微红色。
7.在中和好的消化液中，加入10ml甲醛溶液，充分摇动，放置5min。
8.加入5滴1%酚酞指示剂，溶液由红色至金黄色，到纯黄，最后到金黄色即为终点。
五.实验结果及分析
★思考题
1.尿素是个有机碱，为什么不能用标准酸直接滴定？尿素消化后转化成，
为什么不能用标准碱直接滴定？实验中NH
4
+如何强化？
答：尿素为弱碱，因此不能用标准酸溶液直接滴定。由于NH
4
+的酸性太弱(K a=5.6×10-10)，因此不能直接用标准溶液滴定。
甲醛与NH
4
+作用，生成质子化的六次甲基四胺(Ka=7.1×10-6)和H+，其
反应如下： 4NH
4+ + 6HCHO = (CH
2
)
6
N
4
H+ + 3H+ + 6H
2
O
所生成的H+和(CH
2)
6
N
4
H+可用NaOH标准溶液滴定，采用酚酞作指示剂。
2.写出尿素消化和NH
4
+强化的主要反应式，拟出尿素中含氮的质量分数计算公式。
答：尿素消化：CO(NH
2)
2
+ 3H
2
SO
4
= （NH
4
）
2
SO
4
+ 2SO
2
↑+ 2H
2
0 + CO
2
↑
NH
4+强化：4NH
4
+ + 6HCHO = (CH
2
)
6
N
4
H+ + 3H+ + 6H
2
O
N% = [C(NaOH)×V(NaOH)×M(N) ]÷[m(CO(NH)
2
×25.00/250.00)]×100%
3.中和硫酸过程中氢氧化钠的量是否要准确控制？若不足或过量时对实验结果有什么影响？碱加过量了该怎么办？中和过量的碱是否要记录？
答：要准确控制，不足是消耗氢氧化钠偏大，使测出氮的含量偏高，反之，
过量则偏低。碱加过量了滴加0.5mol·L-1H
2SO
4
溶液至试液为橙红或红色，
再用0.1mol·L-1NaOH溶液滴定至纯黄，10s后为金黄。不需要记录不会影响氮含量的测定。
4.为什么加入的甲醛事先要用碱中和，中和所用的减量是否要准确？要不要
记录？
答：甲醛中常含有微量的甲酸（甲醛受空气氧化所致），应将其除去，否则会产生误差
用的碱量需要准确，否则会产生误差，但不需要记录。
5.随着滴定的进行，溶液的颜色由红色—金黄色—纯黄色—金黄色。是哪些
指示剂在起作用？
答：红色和第一次出现金黄色及纯黄色，是指示剂甲基红的颜色变化，待过纯黄后，再出现第二次的金黄，已到终点，此时是指示剂酚酞的颜色变化在起作用。
★问题：
1.当中和过剩硫酸，若用酚酞做指示剂，对测定结果将产生正误差还是负误
差？
答：负误差，以酚酞为指示剂，会有部分NH
4
+被中和。所用的碱偏多，从而滴定待测溶液用的碱量偏小。
2.滴定待测酸量时，若不在加酚酞而仍用甲基红作指示剂，将会产生怎样的
结果？
答：虽然甲醛溶液中有少量酚酞指示剂，由于量少，不能灵敏的指示终点。
如不加酚酞，试液中原有的指示剂是甲基红，是酸性范围变色的指示剂，使弱酸的氢离子不能被滴定，使 N% 偏小。
★补充
1.1为什么尿素消化步骤中所用器皿均需干燥，怎样干燥？
尿素消化时溶解酸为浓硫酸，稀释对酸解不利。如尿素未完全酸解，则测定结果将偏低，所以所用器皿（100mL烧杯，小表面皿、10mL量筒）均要干燥。⑵一周前，将它们洗至纯水，在实验柜内铺上吸水纸，将烧杯倒合、表面皿凹面朝上放在吸水纸上，量筒倒放在洗净的烧杯中，自然晾干一周。
2.1怎样取用浓硫酸？实验中要注意什么？⑴从浓硫酸滴瓶中取，滴瓶的滴
管垂直，不伸进量筒。
⑵注意：①不要将浓硫酸滴在量筒以外的地方。如不小心滴在桌上，应立
即处理干净，因实验桌桌面不耐浓硫酸腐蚀。建议：将浓硫酸滴瓶放在搪瓷盘中滴加。②操作中不要碰翻盛浓硫酸的量筒或烧杯。
2.2为什么小烧杯只盖表面皿，不能放玻棒？
⑴为防止尿素消化时溅出试液，须盖表面皿，但不能放玻璃棒,以免小烧杯
倾翻。
⑵用实验室提供的烧杯夹夹住100mL烧杯，在稍离石棉网的上方摇动烧杯可
使试液混合均匀。使用烧杯夹需注意夹稳烧杯，取下烧杯夹时，不要带翻烧杯。
3.1消化过程中怎样掌握火焰的大小？大火加热后能观察到哪些现象？
⑴溶解开始时，只要缓缓加热，用中火。当看到细而密的气泡出现时退火，避免反应过于剧烈。待大量CO2逸出后，继续加热至无CO2逸出，改用大火加热，此时火焰要接触石棉网，必要时垫木块，加热温度要高。
⑵大火加热后，烧杯内有大量白雾产生。继续加热，在烧杯壁逐渐看到有浓硫酸的回流圈，并慢慢上升，随后看到液面上方白雾变稀甚至变清，烧杯上部有雾，雾又慢慢变淡，再加热2min，此时还可能会观察到试液内出现大气泡，停止加热。
3.2消化过程中的注意事项有哪些？
⑴不要打开表面皿，以免有试液溅出；
⑵消化过程一定要大火，大火才能反应完全；大火加热才会有足够强的气流托起雾，使液面上方变清，白雾变稀，借此判断反应完成。若消化不完全，测定结果将偏低。
⑶由于实验室用的是液化气，灯是由煤气灯改装而来，所以火焰中的黄色可能不会全部消失，这意味着火焰中有炭黑存在。若黄火接触到表面皿，使表面皿上沾有炭黑，下一步洗表面皿时会将炭黑洗入试液中，因此消化时要尽量大火，但又不能超过石棉网的石棉芯，避免黄火接触表面皿。此外通风橱抽风功率大时，会使火焰斜向一边，使黄火接触到表面皿，因此要调节好通风橱的抽力，或调节通风橱门开启的大小，使黄火不斜向一边。
3.3为什么要在通风橱中冷却？
因烧杯中还有SO3，放在通风橱外会污染实验室环境。
4.1为什么吹洗表面皿和杯壁，为什么冷却后才能吹洗？
⑴将反应过程中溅在表面皿和杯壁上的试液冲洗到溶液中，以免试液损失；
⑵稀释浓硫酸是一个放热过程，若在热的时候冲洗杯壁和表面皿，会使试液溅出，发生意外。此外，大火加热后的表面皿、烧杯突然碰到冷水容易炸裂。
4.2怎样将试液全部转移到容量瓶中？
⑴从通风橱中取出已冷却的烧杯，用洗瓶吹洗表面皿、烧杯壁，加30mL纯水稀释，搅拌，稍冷后，在容量瓶口上方取出玻璃棒伸入瓶口，玻璃棒的顶端靠近瓶颈内壁，杯嘴靠住玻璃棒，沿玻璃棒慢慢加入试液，溶液沿瓶壁流下，待试液全部流完后，将烧杯轻轻上提，同时直立，使附着在玻璃棒和烧杯嘴之间的1滴试液收回到烧杯中，将玻璃棒放回到烧杯（不放在烧杯嘴处）。
用洗瓶吹洗玻璃棒、杯壁3次，每次的洗涤液都要全部转移到容量瓶中，吹洗瓶颈，加纯水到容量瓶容积的2/3。右手拿住瓶颈标线以上处，直立旋摇容量瓶，使试液初步混合，消除体积效应。
⑵待溶液冷至室温，慢慢加水到接近标线1cm处，等1～2min，使沾附在瓶颈上方的水流下。在原烧杯内加少许纯水，用滴管取水后伸入瓶颈，但稍向旁侧倾斜滴加水，使水顺壁流下，直到弯月面的最低点和标线相切为止。4.3怎样混合容量瓶中的试液？
塞好瓶塞，左手大拇指在前，中指及无名指、小指在后，拿住瓶颈标线以上部分，而以食指压住瓶塞上部，用右手指尖顶住瓶底边缘。如容量瓶小于100mL，则不必用手顶住，将容量瓶倒转，使气泡上升到顶，如此反复倒转十余次即可。
5.1能否将洗至纯水的吸管直接伸入容量瓶中，吸取溶液荡洗三次？
不能。将洗至纯水的吸管伸入容量瓶中，已将纯水带入容量瓶，导致试液浓度改变，应将容量瓶中的试液倒入小烧杯后荡洗吸管，烧杯与吸管同时荡洗后倒去试液，再取新的试液进行第二次荡洗，重复操作进行第三次荡洗。
5.2用吸管移取试液时，是移取一份测一份，还是移取三份后测？
同时移取3份试液分别放在三只250mL烧杯中，然后测试，因在同一状态下移取试液，测定结果精密度好。
5.3中和多余的强酸时，为什么用甲基红作指示剂，而不用酚酞？
若用酚酞做指示剂，会有部分NH4+被中和。
由于试液中同时存在强酸H2SO4和弱酸NH4+，但中和多余的强酸时不能中和 NH4+。由于NH4+是弱酸，Ka=5.56×10-10，其溶液显弱酸性，如
0.1mol·L-1 NH4Cl溶液的pH值为5.12。若用酚酞做指示剂，NaOH溶液中
和至试液微红时，pH=9，就有部分NH4+被中和。甲基红为酸性范围指示剂，变色pH范围为4.4～6.2，pKa=5.2，指示剂的理论变色点处于强碱滴定强酸的突跃范围（pH从4.31至9.70），但不在强碱滴定弱酸的突跃范围（在弱碱范围），因此选用甲基红做指示剂。
5.4怎样中和多余的硫酸？
在试液中加入3滴0.1%甲基红指示剂，试液为红色。由于过剩的硫酸较多，先用滴管滴加2mol·L-1NaOH溶液，边滴边搅，注意将NaOH直接滴入溶液，不可沾在玻璃棒与杯壁上，以免引起误差。当中和至滴落点出现黄色，经搅拌又恢复为红色，但红色的成分逐渐变少，稍透黄的成分时，说明中和已接近终点，用洗瓶吹洗玻璃棒、杯壁，改用滴定管滴加0.1mol·L-1NaOH 溶液，中和的终点是纯黄色，若短时间内又出现红色或透红的成分，则称泛红，仍小心滴加NaOH溶液至纯黄色，10s后为金黄色即为中和的终点。
若试液一直为纯黄色，则表示NaOH加多了，滴加0.5mol·L-1H2SO4溶液至试液为橙红或红色，再用0.1mol·L-1NaOH溶液滴定至纯黄，10s后为金黄。
三份试液同时中和好后进行下面的实验。
★存在的问题
1尿素消化时，液面上方一直有白雾。
原因：灯的火焰温度不高；
解决方法：在加热前，先检查煤气灯，用黄火小、火焰高的煤气灯。
2 消化时打翻烧杯，浓硫酸翻在实验桌上。
原因：开、关煤气灯龙头时碰翻烧杯；或碰到石棉网边上的铁丝，将烧杯带翻
解决方法：注意伸手去开关龙头时周围应有一定的空间，应先把周围的物品移开，再去开关煤气龙头，如反应中要立即改小火或去火，可先把煤气灯移开，再做处理。
3 在容量瓶中稀释溶液时超过瓶颈标线。
原因：定容操作不过关或是太粗心
解决方法：重做
4 中和甲醛时，微红不会判断，以至NaOH滴加过多
解决方法：观察时，以白瓷板做背景，微红较易察觉。
5中和多余的强酸时，返红、纯黄、金黄几种颜色不会区分与判断，导致反复用酸、碱调节。
解决方法：可试中和一份消化液至纯黄，细心观察颜色的变化，从红→橙→纯黄→又返金黄，甚至变橙的变化中学会区分纯黄与金黄。如金黄中红的成分在慢慢增加，变成橙色或橙红，这就是返红。以试中和得到的纯黄做参比，学会金黄色的判断。
6 怎样判断滴定终点出现的金黄色是第一次的还是终点的？
滴定中会出现滴落点或整个溶液是黄色，经搅拌后溶液的颜色变为金黄色，判断是否是终点的方法是：先读数，再加半滴NaOH溶液，搅拌后溶液的颜色是金黄或黄色，则是第一次的金黄，不是终点。出现这种现象的原因是滴加NaOH的速度太快，使溶液中短暂出现黄色，经搅拌又回到金黄，此时应继续滴定。若滴加半滴后，溶液变为橙色或略带红色成分，则是第二次的金黄色，终点已到，前面的读数为终读数。因为到了终点时的金黄色再加NaOH溶液，必然过了终点，红色成分要增加，出现橙色。
由此得出结论，滴定时一定要观察到纯黄色，并保持一段时间后出现金黄色即为终点。
七讨论
测定氮含量的方法
土壤、肥料以及有机化合物（如食品）中，测定氮含量的常用方法是先将氮转化为铵盐，然后再测量NH4+的含量。
⑴甲醛法甲醛与铵盐作用可定量的置换出氢离子，以甲基红为指示剂，用
NaOH标准溶液滴定。甲醛法准确度较差，但简便、快捷，生产实际中应用较广，适用于强酸铵盐中氮的测定。
⑵蒸馏法将含铵盐的试液置于蒸馏瓶中，加浓碱使NH4+转化为NH3，蒸馏，
用过量的盐酸标准溶液吸收NH3，再以甲基红为指示剂，用NaOH标准溶液滴定过剩的盐酸，以求出含氮量。也可用过量的H3BO3溶液吸收NH3，其反应为： NH3 + H3BO3 ＝ NH4+ + H2BO3- 再用盐酸标准溶液滴定生成的H2BO3-，终点产物是NH4+和H3BO3，pH=5，可用甲基红作指示剂。用H3BO3吸收NH3的优点是只需一种盐酸标准溶液，而且H3BO3是很弱的酸，它可吸收NH3，却不影响滴定，只要保证过量而无需知其准确浓度和体积。如试样为有机物质，需先用CuSO4作催化剂，用浓硫酸加热消化试样，使有机物中的氮组分转化为NH4+，再用蒸馏法测定，该法称为克氏定氮法。
蒸馏法应用范围广，试样为无机物质和有机物质均适用，即使试样中有其它酸碱存在（非挥发性），也无影响。蒸馏法的缺点是手续麻烦，费时费事。
测定NH
4HCO
3
中的氮含量的方法（请同学回答）
⑴能否用甲醛法测定NH
4HCO
3
中的氮含量；
⑵能否用酸碱滴定法直接测定NH
4HCO
3
中的氮含量；
实验十三血清尿素氮测定(脲酶—Berthelot比色法)
实验十三血清尿素氮测定（脲酶—Berthelot比色法） 一、实验目的与要求 1 了解血液尿素氮（BUN）在人体营养学上的生理学意义及其在代谢上的重要性。 2 掌握血液尿素氮测定方法及721分光光度计或AT648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。 二、实验原理 尿素在脲酶作用下分解生成氨。在碱性条件下，经次氯酸氧化生成的氯胺与苯酚被亚硝基铁氰化钠催化生成蓝色的靛酶。其反应式为： CH2NH2N尿素O+HOH脲酶NH3彩+CHOH2N氨基甲酸O-2NH3+CO2 氨 NH3+OCl-NH2Cl+OH- 次氯酸氨胺催化剂 NH2Cl+OH+OH-Cl-+H2O+HONH2 苯酚P胺基苯酚 HONH2+OH-+O2==N——O-+H2O 酚靛三、实验仪器与试剂 1 仪器 （1） AT648半自动生化分析仪1台； （2） 4孔恒温水浴锅1个； （3）振动摇床1台。 2 分组及仪器2人一组，每组仪器包括： （1）试管架1个； （2） 2ml试管10个； （3） 20μl微量加样器1个； （4） 1ml移液管1个； （5） 5ml移液管2个； （6）吸耳球1个； （7）搪瓷盘1个； （8）微量加样滴头； （9）吸水纸。 3 本试剂盒内含5种试剂： （1）脲酶（冻干） 2瓶 （2） pH 8.0缓冲液：由乙二胺四乙酸二钠盐和磷酸氢二钾组成 1×46ml （3）显色剂Ⅰ：由苯酚和亚硝基铁氰化钠组成 1×225ml （4）显色剂Ⅱ：由氢氧化钠和安替福民组成 1×225ml （5）尿素氮标准液（20mg/dl） 2×2ml 四、实验步骤 1 血清 （1）取脲酶一瓶，用23.0ml pH 8.0缓冲液溶解。 （2）于一系列试管中，按下表加入各溶液。表131系列反应管中所加溶液的量 空白管标准管样品管样品（μl）——20标准液（μl）—20—酶液（μl）0.50.50.5 （3）于37℃水浴中保温15min，然后各管分别加入显色剂Ⅰ和显色剂Ⅱ各2.5ml。 （4）再于37℃水浴中保温20min，取出冷却至室温，于721分光光度计/ AT648半自动生
土壤中氮含量的测定分析(精)
土壤中氮含量的测定分析 核心提示：摘要：概述了土壤中氮元素的存在形式、土壤全氮、无机氮(包括铵态氮、硝态氮)水解氮、酰胺态氮的测定方法。关键词：土壤；全氮；测定方法土壤是作物氮素营养的主要来源，土壤中的氮素包括无机态氮和有机态... 摘要：概述了土壤中氮元素的存在形式、土壤全氮、无机氮(包括铵态氮、硝态氮)水解氮、酰胺态氮的测定方法。 关键词：土壤；全氮；测定方法 土壤是作物氮素营养的主要来源，土壤中的氮素包括无机态氮和有机态氮两大类，其中95%以上为有机态氮，主要包括腐殖质、蛋白质、氨基酸等。小分子的氨基酸可直接被植物吸收，有机态氮必须经过矿化作用转化为铵，才能被作物吸收，属于缓效氮。 土壤全氮中无机态氮含量不到 5%，主要是铵和硝酸盐，亚硝酸盐、氨、氮气和氮氧化物等很少。大部分铵态氮和硝态氮容易被作物直接吸收利用，属于速效氮。无机态氮包括存在于土壤溶液中的硝酸根和吸附在土壤颗粒上的铵离子，作物都能直接吸收。土壤对硝酸根的吸附很弱，所以硝酸根非常容易随水流失。在还原条件下，硝酸根在微生物的作用下可以还原为气态氮而逸出土壤，即反硝化脱氮。部分铵离子可以被粘土矿物固定而难以被作物吸收，而在碱性土壤中非常容易以氨的形式挥发掉。土壤腐殖质的合成过程中，也会利用大量无机氮素，由于腐殖质分解很慢，这些氮素的有效性很低。 土壤中的氮素主要来自施肥、生物固氮、雨水和灌溉水，后二者对土壤氮贡献很小，施肥是耕作土壤氮素的主要来源，而自然土壤的氮素主要来自生物固氮。 土壤含氮量受植被、温度、耕作、施肥等影响，一般耕地表层含氮量为0.05%～0.30%，少数肥沃的耕地、草原、林地的表层土壤含氮量在 0.50%～0.60%以上。我国土壤的含氮量，从东向西、从北向南逐渐减少。进入土壤中的各种形态的氮素，无论是化学肥料，还是有机肥料，都可以在物理、化学和生物因素的作用下进行相互转化。 1 土壤全氮的测定 1.1 开氏法 近百年来，许多科学工作者对全氮的测定方法不断改进，提出了许多新方法，主要有重铬酸钾-硫酸消化法、高氯酸-硫酸消化法、硒粉-硫酸铜-硫酸消化法。但开氏法目前仍作为一个统一的标准方法，此法容易掌握，测定结果稳定，准确率较高。 开氏法测氮的原理为：在盐类和催化剂的参与下，用浓硫酸消煮，使有机氮分解为铵态氮。碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以酸标准溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包括硝态氮）。含有硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消
尿素测定方法
实验十七 实验名称：尿素的测定 实验目的与要求：掌握测定血清尿素的基本原理 实验仪器、试剂：半自动生化分析仪、尿素测定试剂盒 实验原理： 尿素经脲酶水解生成NH3与CO2,在谷氨酸脱氢酶（GLDH）的作用下，氨与α-酮戊二酸及还原型辅酶Ⅰ（NADH）反应生成谷氨酸和NAD+，NADH在340nm 处的吸光度下降速率与待测样品中尿素的含量成正比。 操作方法： 1、将试剂R1：R2=4：1混合，即为工作液 2、按下列顺序加入各试剂 单位ml 空白标准样本 蒸馏水0.01 —— 样本－－0.01 标准液－0.01 － 工作液 1.0 1.0 1.0 3、混匀各管，340nm,空白管调零，延时30秒，读取初始吸光度A1，60秒后读取A2，计算ΔA 实验现象与数据：记录ΔA 结果分析与结论：尿素＝ΔA样/ΔA标×C标（8.32 mmol/l） 参考范围：1.7-8.3mmol/l 临床意义： 实验十八 实验名称：血清尿酸的测定 实验目的与要求：掌握尿酸酶-过氧化物酶耦联法测定尿酸的基本原理 实验仪器、试剂：尿酸测定试剂盒，722E/723分光光度计 实验原理：尿酸酶氧化尿酸，生成尿囊素和过氧化氢，在过氧化物酶催化下，过氧化氢使ESBmT和4－氨基安替比林缩合成有色化合物，其在546nm吸光度与尿酸浓度成正比。 操作方法： 按以下步骤操作 单位ml 标准测定空白 样本－0.025 － 标准液0.025 －－ 蒸馏水－－0.025 酶试剂 1.0 1.0 1.0 混匀37℃温浴5min，以空白管调零。546nm，0.5cm比色杯，测定各管的A 实验现象与数据：记录各管的A 结果分析与结论：血清尿酸浓度＝A样/A标×C标（357μmol/l）参考值：男202－416μmol/L，女142-339μmol/L
血尿素氮(BUN)的正常值是多少
血尿素氮(BUN)的正常值是多少，其增高和减低的临床意 义是什么？ 文章来源：有问必答健康社区2005-1-24 17:07:12 血尿素氮(BUN)的正常值为：3.2 ～6.0mmol/L。尿素分子结构式为 CO(NH2)2，分子量为60，其中含氮28，故BUN约为尿素之半(28/60)，血尿素氮的正常值为 SUN×28/60。 增高的临床意义： (1)肾前性：①生成增加(假性氮质血症Pseudoazotemia)：高蛋白饮食；消化道出血；组织分解加快(感染、高热、外伤、手术、用皮质类固醇、饥饿早期)；蛋白合成受抑制(用四环素)。增高程度与原有肾功能有关，例如肾功能正常时，消化道出血达800mL时才增高，而肾功能损害时，远低于此数，如200mL时即可增高。②肾血流灌注减少(低灌注性氮质血症hypoperfusion azotemia)：由于重吸收增加，小球滤过减少。a 绝对血溶量减少(脱水，失血，肾上腺皮质功能减低)；b 有效血容量减少(严重心衰，急性心梗，心包填塞症，肝硬化，肾病综合征)。 (2)肾性(肾实质性氮质血症parenchyma l azotemia)：各种肾实质性病变，如肾小球肾炎、间质性肾炎、急慢性肾衰竭、肾内占位性和破坏性病变等。 (3)肾后性：尿路梗阻导致滤过减少和重吸收增加。 由上可见，一些肾外因素可使BUN增高，如能除外肾前因素，BUN>21.4mmol/L(60mg/dl)即为尿毒症诊断指标之一。 减低的临床意义： (1)生成减少(低蛋白饮食、肝衰竭)。 (2)排出增多(吐、泻、多尿)：肾衰竭经透析后，由于尿素分子量较肌酐为小，易于透析出去，故血尿素氮较肌酐相对低；如饮食减少或合并吐泻时也相对较低，此时称低氮质血症(hypoazotemia)，二者之比<1/10。 编辑词条尿素氮 血尿素氮—肾功能主要指标之一。所以尿素氮的变化对非蛋白氮数值的影响较
科普一下：临床医学检验中“尿素”与“尿素氮”的正确使用!
科普一下：临床医学检验中“尿素”与“尿素氮”的正确使用！ 发表时间：2019-12-04T11:09:47.143Z 来源：《健康世期界》2019年15期作者：徐登波 [导读] 四川省成都市武侯区人民医院 610041 我国经济建设以来，医疗行业得到较快发展，其中医学检验技术在此过程中得到不断优化，成为临床诊断中较为重要的一种检测方法，能够有效提升临床诊断准确性，不但能够使临床工作顺利开展，而且对患者疾病情况实施全面的测定，为采取针对性治疗方案奠定良好的基础。随着人们生活质量的不断提高，生活与工作压力逐渐增加，肾病发生率逐年提升，主要是受一些因素的影响，比如饮食习惯、生活习惯以及环境等，对患者生活质量造成不同程度的影响，这就需要采用科学、有效的检验方法对疾病实施有效评价，以此能够提升临床诊断准确性，从而提高患者治疗的效果，为提升患者生活质量奠定良好的基础。本文以尿素与尿素氮为例，首先阐述尿素氮与尿素的临床检验与尿素氮临床检验意义，而后对尿素氮检验使用与常见问题进行探究，最后着重探讨尿素在临床中的使用与两者之间检验方法的正确选择，分析在临床治疗过程中检验方法的正确使用，这对选择正确的治疗方法具有加大促进作用。 一、尿素氮与尿素的临床检验 在对患者肾功能医学检验的过程中，尿素临床检验在其中较为重要，但是因传统书籍中把尿素编写为尿素氮，导致临床医生在对两者检验区别与分析的过程中，很难对两者有全面的理解，致使无法深入分析尿素氮与尿素检验之间存在的差异性，这对临床科学判定产生不同程度的影响，所以为了提高肾功能患者诊断正确性，需要对尿素氮与尿素临床检验进行深入分析与应用，这提供患者治疗效果，恢复肾功能具有较大促进作用。 二、尿素氮临床检验意义 在对尿素氮进行临床检验的过程中，会出现数值增高的情况，这在较大程度上与肾前性少尿、肾功能损伤以及摄入过多等因素有关。此外，在对尿素氮进行临床检验期间，能够有效提升临床诊断准确率，但是在一些情况下检验报告很难对患者具体病情进行准确反应，这就需要通过化验单实施针对性判断，以此对患者实际病情与病情发展得出有效结论。除此之外，还需要采用科学的临床检验方法，能够为尿素氮数值的有效控制奠定良好的基础，并且在此基础上也是提高治疗方法疗效的重要标准。尿素氮数值降低在检验的过程中也时有发生，主要是与患者怀孕、肝脏功能等因素有较大关系，若出现数值降低的情况，应当对肝功能进行全面检查，并在此基础上对此进行全面分析，以此采取针对性治疗措施，这对疾病治疗具有较大的促进作用，为患者生活质量的提升意义重大。 三、尿素氮检验使用分析 1、尿素氮检验使用 目前我国临床在对尿素氮检验的过程中，一般情况下正常值为3.3 mmol/L-6.0mmol/L之间为正常，其检验的主要目的是对患者肾功能情况进行准确判断，由此可以看出尿素氮在使用的过程中，对患者疾病诊断与治疗尤为重要。此外，在一些情况下对患者进行痛风检验实施评定的过程中，主要使用血尿素氮检测方法，在检验的过程中首先需要对患者近期饮食情况、身体状况以及服用药物类型等进行全面了解，以此为提升检验结果的准确性奠定良好的基础，能够有效提高检验结果分析的准确性，与此同时对检验结果产生的不良影响的有效降低具有较大促进作用。在对尿素氮临床检验的过程中，对检验结果进行评定分析，能够为患者临床诊断与针对性治疗提供有利的数据依据。 2、尿素氮临床检验常见问题 我国尿素氮在进行临床检验的过程中存在一些问题，比如抗凝剂使用不当、稳定性差以及NADH不足等问题，所以需要对患者临床实际检验中存在的问题进行深入分析，并在此基础上采取针对性解决方法，不但能够避免问题的发生，而且还可为检验准确性的提高奠定良好的基础，这对提高患者生活质量尤为重要。但是，因尿素氮中NADH稳定性相对较差，并且易被氧化，根据目前医疗技术很难对此问题进行解决，这就需要在检验期间应采取有效措施，最大程度降低环境因素的影响，并且在此基础上还需要对检测偏差进行纠正，以此确保将偏差降至最低，可有效提升检验结果的准确性，从而使尿素氮临床医学检验具有较高的科学性与可靠性。 四、尿素在临床医学检验中的使用 尿素与尿素氮之间能够相互转换，并且有固定的转换公式：mg/dL尿素氮0.0357=mmol/L尿素。尿素在临床医学检验的过程中，与尿素氮之间需要进行转换，在转换的过程职工能够通过计算来完成，但是在实际检验的过程中，不能只通过简单计算对尿素实施有效检验，其中与尿素氮检验相比较为全面，并且在此基础上具有较高的准确性，能够针对患者疾病情况收集评价信息。目前，尿素医学临床检验一般情况下采用尿素酶方法与直接方法实施有效测定，其中直接方法是通过尿素与相关试剂之间的有效作用，而对肾功能测定的方法主要使用二乙酰胯方法，尿素酶在医学检验的过程中，主要是将尿素转换成氨，再实施测定的一种方法，两者方法相比，直接方法在检测的过程中相对简单，并且在此基础上具有较高的灵活性，但是在检验期间加热环节会出现不同程度的异味，对检验过程产生一定影响，随着医学技术的不断发展逐渐被尿素酶替代。尿素酶所采用的方法具有较高的特异性，并且反应专一，不受外界因素的影响，具有较高的准确率，其缺点是检测过程需要花费大量时间来完成，并且会受到氨的影响。这就需要在临床实际应用的过程中，根据患者实际情况针对性选择检测方法。在检测的过程中，还应采取有效措施降低外部因素与内部因素造成的影响，从而为检测准确率的提升奠定良好的基础，也为临床医师进行准确诊断提供有利依据。 五、正确选择尿素与尿素临床检验方法 尿素氮与尿素两种临床检验方法在检验期间会受到较多因素的影响，这就需要在检测期间对影响因素与实际检测情况进行深入分析，以此选择科学合理的检验方法。此外，检验工作人员需要认识到检验方法选择的重要性，并且检验方法选择完成后需要对患者实际疾病情况进行全面了解，同时此基础上对医院医疗技术进行分析，针对性选择制备检测过程中所使用到的材料与试剂，能够确保检验结果的正确性，以此避免因一些材料与试剂存放不正确导致检验结果出现偏差。除此之外，检验工作人员还应采取有效措施对检验结果产生的偏差与
实验五血清尿素氮的测定
血清尿素氮的测定 一.实验原理 血清中尿素在氨基硫脲存在下，与二乙酰一肟在强酸溶液中共煮时，可生成双乙酰和尿素形成的红色复合物(二嗪衍生物)，其颜色深浅与尿素含量成正比，与同样处理的尿素标准液比色。即可求得血清中尿素的含量。 由于反应在强酸中进行，所产生的羟胺是干挠物质，所以必须用氧化剂将其氧化除去。 在呈色反应中产生的有色复合物对光不稳定．加入氨基硫脲可增加其稳定性，还可提高尿素与双乙酰反应的灵敏度。 二.实验操作 取试管3支，注明空白管、标准管、测定管，按下表操作 540nm比色，以空白管调零，测定各管吸光度值。 三.计算
血清尿素氮（mmol / L ）=——————— X 17.85 测定管吸光度标准管吸光度 正常值参考范围3．57～14．28mmol ／L 四.临床意义 血液中非蛋白含氮化合物包括尿素、尿酸、肌酸、肌酐、 胆红素及氨等。其中尿素含量约占l ／3～1／2。尿素是蛋白质代谢的产物．通过肾脏排出，故测血清尿素氮可作为检测肾脏功能的试验，并且其增高程度与病变的严重程度呈平行关系。 五.试剂 1.尿素氮试剂：蒸馏水lOOml ，浓硫酸44ml ，85％磷酸66ml ，冷却至室温后，加氨基硫脲50mg ，硫酸镉(3CdSO ４·8H 2O)2g ，溶解后稀释至1000ml 。 2.20g ／L 二乙酰一肟试剂：称取二乙酰一肟20g ，加入蒸馏水约900ml ，溶解后稀释至1000ml. ３.尿素氮标准贮存液(357mmol ／L)：称取尿素1.072g 溶解于蒸馏水中定容至1000ml 。 ４.尿素氮标准应用液(17.85mmol ／L)；取贮存液5ml ，加蒸馏水至100ml 。
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书 1.实验原理 脲酶-谷氨酸脱氢酶（Urease-GLDH）连续监测法。尿素被脲酶水解产氨。在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反应生成谷氨酸，NADH同时被氧化成NAD＋。NADH的减少和样品中尿素浓度成正比。本法是连续监测法。 脲酶 尿素+ 2H2O 2 NH4＋+ 2 HCO3－ 谷氨酸脱氢酶 NH4＋+α-酮戊二酸+NADH L-谷氨酸+NAD＋+H2O 2 标本： 2.1 病人准备：血清无特殊要求。要留取24小时尿样。 2.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用
无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。 3. 标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。 4. 标本运输：常温条件下保存运输。 5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。 6. 实验材料 6.1 试剂：申能尿素测定试剂盒（142 3107170 1 试剂1：6×64ml＋试剂2：6×16ml） 6.1.1 试剂组成 试剂1： Tris缓冲液pH7.8 120mmol/L α-酮戊二酸7mmol/L ADP 0.6mmol/L 谷氨酸脱氢酶≥1000U/L
脲酶≥6000U/L 试剂2： NADH 0.25mmol/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存 试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用。不要入口，吞下有害。保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。应采取必要的预防措施使用试剂。 6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品
血液检查正常参考值
血液检查 ?一、血液一般检查： 1、红细胞计数(RBC) [正常参考值] 男：×10?×10?12个/L(400万-550万个/mm3)。 女：×10?×10?12个/L(350万-500万个/mm3)。 儿童：×10?×10?12个/L(400万-530万个/mm3)。 [临床意义] 红细胞减少多见于各种贫血，如急性、慢性再生障碍性贫血、缺铁性贫血等。 红细胞增多常见于身体缺氧、血液浓缩、真性红细胞增多症、肺气肿等。 2、血红蛋白测定(Hb) [正常参考值] 男：120-160g/L(12-16g/dL)。 女：110-150g/L(11-15g/dL)。 儿童：120-140g/L(12-14g/dL)。 [临床意义] 血红蛋白减少多见于各种贫血，如急性、慢性再生障碍性贫血、缺铁性贫血等。 血红蛋白增多常见于身体缺氧、血液浓缩、真性红细胞增多症、肺气肿等。 3、白细胞计数(WBC) [正常参考值] 成人：4×109-10×109/L(4000-10000/mm3)。 新生儿：15×109-20×109/L(/mm3)。 [临床意义] 生理性白细胞增高多见于剧烈运动、进食后、妊娠、新生儿。另外采血部位不同，也可使白细胞数有差异，如耳垂血比手指血的白细胞数平均要高一些。 病理性白细胞增高多见于急性化脓性感染、尿毒症、白血病、组织损伤、急性出血等。 病理性白细胞减少再生障碍性贫血、某些传染病、肝硬化、脾功能亢进、放疗化疗等。 4、白细胞分类计数(DC) [正常参考值] 中性秆状核粒细胞：。 中性分叶核粒细胞：。 嗜酸性粒细胞：。 淋巴细胞：。 单核细胞：。 [临床意义] 中性杆状核粒细胞增高见于急性化脓性感染、大出血、严重组织损伤、慢性粒细胞膜性白血病及安眠药中毒等。 中性分叶核粒细胞减少多见于某些传染病、再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症等。
实验2 氮肥中含氮量的测定 可参考《分析化学》P170
实验二氮肥中含氮量的测定(甲醛法) 请同学们参考《分析化学实验》P170-172页的实验内容 一、氢氧化钠标准溶液的配制和标定 （一）目的要求 1.了解碱标准溶液一般的配制和标定方法。 2.掌握用邻苯二甲酸氢钾标定氢氧化钠溶液的方法。 （二）原理 碱标准溶液常用氢氧化钠来配制。氢氧化钾一般并不优于氢氧化钠，而且价格高，因此仅在个别特殊情况下使用。 由于氢氧化钠固体易吸收空气的CO2和水分，因此碱标准溶液不能直接配制，而必须用标定法。 氢氧化钠吸收空气中的CO2，以及水中溶解的CO2，使配得的溶液中含有少量Na2CO3。含有碳酸盐的标准碱溶液，将使滴定反应复杂化，甚至使测定发生一定的误差。因此应配制不含碳酸盐的碱溶液： 1. 取1份纯净的NaOH，加入1份水，搅拌使之溶解，配制成50%的NaOH浓溶液（约14.5mol·L-1）。在此溶液中，碳酸钠几乎不溶解。待碳酸钠沉降下来之后，吸取上层清液，用新煮沸并冷却的蒸馏水稀释至所需的浓度。 2. 1L氢氧化钠标准溶液中，加入1~2mL20%BaCl2溶液，摇匀后用橡皮塞塞紧，静置过夜，待碳酸钡完全沉淀后，将上层清液转入另一试剂瓶中，塞好备用。 苛性碱标准溶液侵蚀玻璃，最好用塑料瓶贮存。在一般情况下，可用玻璃瓶贮存碱标准溶液，但须用橡皮塞。浓NaOH溶液和NaOH标准溶液在存放过程中要密封。因此，常安装虹吸管和钠石碳管（如图4-2），以防止其吸收空气中的CO2。 标定碱溶液时，常用邻苯二甲酸氢钾和草酸等作基准物质，亦可用标准酸溶液与之比较以进行间接标定。 用邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）标定氢氧化钠时，反应如下： KHC8H4O4 + NaOH == NaKC8H4O4 + H2O 化学计量点时溶液pH值约9.1，可用酚酞作指示剂。 邻苯二甲酸氢钾易得到纯品，在空气中不吸水，容易保存。 （三）试剂
血尿素氮
3、蛋白质分解或摄入过多如急性传染病、高热、上消化道大出血、大面积烧伤、严重创伤、大手术后和甲状腺功能亢、高蛋白饮食等，但血肌酐一般不升高。以上情况矫正后，血BUN可以下降。 降低：急性肾小管坏死。 血肌酐〈Scr〉和尿素氮〈BuN〉两者分别为含氮的有机物和蛋白质代谢的终末产物，在肾功能正常的情况下，这些小分子物质从肾小球滤出，故可用作肾小球滤过功能的诊断和过筛指标。当肾小球滤过功能减低时，血肌酐和尿素氮因潴留而增高。 不过要说的是，看化验单是一个综合的判断过程，只有在全面掌握病情时才能得出正确的结论。 尿素氮偏高的危害 尿素氮的正常指标为：2.86－7.14mmol/L，这是我们定义上的正常值，一旦超出这个范围，我们就是尿素氮偏高。 肾功能不全时血尿素氮升高，但不是唯一的临床表现，还会出现血肌酐的升高，同时还会有血压升高、食欲减退、牙龈出血、电解质紊乱、代谢性酸中毒、尿液检查异常等临床表现，所以说单凭尿素氮升高这一项不能说就是肾功能不全。 尿素氮偏高的原因可见下列三种情况： 第一种情况：肾性偏高见于急性肾炎、慢性肾炎、中毒性肾炎、严重肾盂肾炎、肾结核、肾血管硬化症、先天性多囊肾和肾肿瘤等引起的肾功能障碍。尤其是对尿毒症的诊断有特殊价值，其增高程度与病情严重性成正比，如氮质血症期BUN超过9mmol/L，至尿毒症期BUN可超过20mmol/L，有助于病情的估计。 第二种情况：肾前性偏高见于充血性心力衰竭、重度烧伤、休克、消化道大出血、脱水、严重感染、糖尿病酸中毒、肾上腺皮质功能减退、肝肾综合征等。 第三种情况：肾后性偏高见于因尿路梗阻增加肾组织压力，使肾小球滤过压降低时，如前列腺肥大、肿瘤压迫所致的尿道梗阻或两侧输尿管结石等。单纯的尿素氮升高可以因为饮食中摄入过多的蛋白质类食物引起，改变饮食结构，平衡蛋白质、含糖类食物和蔬菜的搭配，很快就可以恢复正常。所以，为明确病因，最好跟医生咨询过后再决定治疗手段。 尿素氮高有什么危害，怎么治？
牛奶中尿素氮含量检测及在营养管理中的意义及原因分析
牛奶中尿素氮含量检测及在营养管理中的意义 牛奶中尿素氮含量检测及在营养管理中的意义 自20世纪90年代中期以来，欧美等奶业发达国家将牛奶中尿素氮的含量的检测作为其牛群改良计划(DHI)中必备的检测指标。MUN检测比检测血液中尿素氮更加容易和廉价。 一些研究表明，当乳中尿素N的量低于19mg/100ml时，牛的受胎率可以增加20%。很显然，当MUN>19mg/100ml时，子宫内环境不利于胚胎着床。 MUN含量过低通常表明日粮蛋白质缺乏。另外，日粮中非降解蛋白量过高会造成MUN浓度过低。 当日粮中可降解蛋白量过低，日粮蛋白质在瘤胃中消化受阻，会导致干物质采食量的下降和产奶量的下降。乳蛋白量过低通常由于MUN过低，NSC采食量下降和日粮非降解蛋白含量有关。所以，检测MUN的含量对于更为准确地平衡日粮，提高乳蛋白量和提高繁殖效率都具有主要的理论和实践意义。 大多数牛群不需要每个都测定MUN，测定MUN的最佳时机是当日粮发生显著的变化以后，如使用新的饲料原料，精料饲喂量过多，初始测定需要决定正常的或者典型的MUN范围。 牛群需要按照产奶的阶段分为4组，产奶期<50天;产奶期50天-100天;产奶期101天-200天;产奶期>200天。产奶期<50天的牛测定MUN对决定产奶高峰期的营养计划至关重要。产奶50天-100天的牛测定MUN的意义，在于看是否受胎率会受到影响，对于产奶101天-200天的牛群，测定MUM主要是观察是否日粮蛋白质的摄入量会影响产奶量。对于200天以上产奶的牛，如果MUN过高，表明日粮蛋白质部分被浪费。理想的范围为14mg-18mg/100ml。如果MUN超出正常的较为理想的范围，可重新对配方进行评估和调整。为了确保蛋白质不会成为产奶的限制因素，MUN值最好接近正常值的上限(18mg/100ml)。 影响牛奶尿素氮的饲料、饲养因素 1、泌乳牛的日粮中，日粮总粗蛋白水平过高，与此相对应的日粮干物质的单位能量浓度过低，由此形成奶牛的日粮出现能氮失衡，造成多余的氨被浪费。 比如，初产牛日粮干物质，单位能量浓度低于1.6兆卡/公斤，高产牛日粮干物质蛋白单位能量浓度，低于1.7兆卡/公斤。 初产牛的日粮干物质蛋白超过20%，高产牛日粮干物质蛋白超过18%，低产牛日粮干物质蛋白超过17.5%，都可能造成牛奶尿素氮超标。 2、饲喂了过多的瘤胃降解蛋白和可溶性蛋白，或者两者都有。即使日粮的总蛋白只是正常的，也有可能造成牛奶尿素氮升高。 3、如果奶牛发生了瘤胃酸中毒，瘤胃微生物随之减少，微生物蛋白也会降低，而氨则不能被瘤胃微生物扑捉，从而使大量的氨进入了血液，由此奶牛血液中的PH值升高，牛奶尿素氮也将相应升高。
氮肥中氮含量的测定—氨态氮的测定方法电子教案(精)
相关知识 依据国家标准GB/T8572-2010复合肥料中总氮含量的测定 知识点：肥料中氮的测定方法 1、氨态氮的测定 （1）酸量法(碳酸氢铵和氨水） ①方法原理:试液与过量的硫酸标准滴定溶液作用，加热煮沸5min ，冷却后加2d 混合指示剂，用氢氧化钠标准溶液返滴定剩余硫酸，由硫酸标准溶液的量和消耗量氢氧化钠标准溶液的量，求出氨态氮的含量。反应如下： 2NH 4HCO 3＋H 2SO 4＝(NH 3)2SO 4＋2CO 2↑＋2H 2O 2NaOH ＋H 2SO 4(剩余)＝Na 2SO 4＋2H 2O ②结果计算: 试样中氮含量以质量分数表示，按下式计算 ③方法讨论 此方法适用于碳酸氢铵、氨水中氮含量的测定。 迅速精确称量试样，立即将试样用水洗入已盛有已知浓度硫酸溶液的锥形瓶中，使试样完全溶解反应。 （2）蒸馏后滴定法 ①方法原理:样品与过量强碱溶液作用，然后从碱性溶液中蒸馏出的氨，用过量的硫酸标准溶液吸收，以甲基红或甲基红-亚甲基蓝乙醇溶液为指示剂，用氢氧化钠标准溶液返滴定至终点。由硫酸标准溶液的量和消耗的氢氧化钠标准溶液的量，求出氨态氮的含量。 NH 4+＋OH -＝NH 3↑＋H 2O 2NH 3＋H 2SO 4＝(NH 4)2SO 4 2NaOH ＋H 2SO 4(剩余)＝Na 2SO 4＋2H 2O ②结果计算: 计算试样中的含氮量同酸量法 ③方法讨论 此方法适用于含铵盐的肥料和不含受热易分解的尿素或石灰氮之类的肥料的测定。 蒸馏后滴定法操作过程相对繁琐，但测定结果准确，使用范围广，常用作仲裁分析。 （3）甲醛法 氨态氮 强酸的铵盐 甲醛法 强碱分解-蒸馏法 氨水或弱酸的铵盐：返滴定法
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法 1.实验原理 脲酶-谷氨酸脱氢酶（Urease-GLDH）连续监测法。 尿素被脲酶水解产氨。在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反应生成谷氨酸，NADH同时被氧化成NAD＋。NADH 的减少和样品中尿素浓度成正比。本法是连续监测法。 脲酶 尿素+ 2H2O 2 NH4＋+ 2 HCO3－ 谷氨酸脱氢酶 NH4＋+α-酮戊二酸+NADH L-谷氨酸+NAD ＋+H 2O 2 标本： 2.1 病人准备：血清无特殊要求。要留取24小时尿样。 2.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。
3. 标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。 4. 标本运输：常温条件下保存运输。 5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。 6. 实验材料 6.1 试剂：奥林巴斯尿素测定试剂盒试剂1：＋试剂2：6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.2 试剂稳定性与贮存 试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 6.1.4 注意事项：此试剂为体外诊断用。不要入口，吞下有害。保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的
比值计算检验项目及其临床诊断价值 尿素氮肌酐比值计算
比值计算检验项目及其临床诊断价值尿素氮肌酐比值计算 1 比值检验在贫血性疾病中应用 1.1 红细胞内AST/血红蛋白比值（AST/HBG）［1］红细胞内的酶活力在红细胞成熟和衰老的过程中不断下降，其中天冬门氨酸转移酶是年青红细胞（网织红细胞）进行蛋白质代谢的酶类之一，其活力大小与红细胞的年青程度有关。网织红细胞计数是了解红细胞年青程度的主要指标之一，但受多种因素的影响，计数误差大。葛才保建立了红细胞内AST 测定方法，并提出AST/HBG比值的计算和结果表达方法，在研究不同贫血患者的AST/HBG 比值结果后，发现缺铁性贫血、急性上消化道出血、溶血性贫血患者的AST/HBG比值均明显高于健康人，而再生障碍障碍性贫血者则明显低于健康人，认为此法能从总体上反映红细胞的年青程度，因而更为真实和准确。 1.2 血清转铁蛋白受体/铁蛋白比值（STIR/logSF）［2］缺铁性贫血（IDA）是围产期妇女的常见疾病，母体患有IDA会影响胎儿在体内的生长发育，也会因哺乳影响新生儿的铁营养情况。由于围产期妇女的贫血多为轻度贫血，以往的实验室指标的敏感性和特异性不高。SF虽是常用的IDA诊断检验项目，但易受炎症及肿瘤因素的干扰，从而影响其对IDA 的诊断准确性。STIR是反映缺铁性红细胞生成的指标，75%～80%的STIR存在于红骨髓的红系红细胞表面，与缺铁性贫血有关。夏虹等实验研究证明:反映红细胞变化的MCV、MCH、MCHC、RDW参数均不能完全提示围产期贫血妇女为小细胞低色贫血，STIR比SF 更能准确反映机体是否存在有缺铁状态。采用STIR/logSF可提高缺铁诊断的敏感度，在检测亚临床状态的IDA有较高的诊断及鉴别诊断价值。 2 比值检验在肝脏疾病中的应用 2.1 谷氨酸转肽酶/丙氨酸氨基转移酶比值（GGT/ALT）［3］GGT是一种广泛存在人体组织的上皮细胞内的膜结合酶，正常人血清中含量很少，主要来自于肝脏，在病毒性肝炎、肝硬化阻塞性黄疸、胰腺疾病、肝脏肿瘤、胆结石等疾病中均可不同程度的升高。但在肝脏良、恶性疾病中升高的幅度有明显差距，在急性弥漫性肝炎，特别是原发性肝癌和肝转移癌时，血清GGT急速升高，其活性与肝脏恶性肿瘤直径大小呈明显正相关，但弥漫性肝炎病例则在治愈后显著下降。各类肝病时，因肝细胞破坏丙氨酸氨基转移酶常明显升高，而原发性肝癌和肝转移癌除晚期肝破坏外，一般很少出现升高。 袁永斌等人对不同肝病患者和健康人进行了GGT和ALT联合检测，研究了132例不同肝病时的GGT/ALT比值变化情况，结果如下:健康对照组1.11±0.56、无肝病其他肿瘤（60例）1.17±0.42、病毒肝炎（46例）1.01±0.89、肝硬化（13例）1.95±0.75、脂肪肝（15例）3.33±1.66、肝血管病2.16±0.80、肝转移性癌（29例）4.09±3.44、原发性肝癌（30例）4.53±4.16。实验表明病毒性肝炎患者GGT/ALT比值较低，肝脏恶性肿瘤患者则明显
尿素与尿素氮的关系
尿素与尿素氮的关系 1、BUN≠UREA 尿素，分子量 60.056（N原子量为14.007，O原子量为15.999，H原子量为1.008，C原子量为12.011），可得： Urea
尿素软膏中尿素含量的测定
尿素软膏中尿素含量的测定 首都医药1999年第2期第6卷药检技术 作者：姜厚德 单位：安徽省金寨县青山镇卫生院(237331) 关键词：尿素；非水滴定；含量测定 摘要用非水滴定法测定尿素软膏中尿素含量，并用B.P法作比较，二者测定结果较接近，用于测定自制尿素软膏的尿素含量也全部合格。此法关键是用醋酐增强了尿素的碱性而使滴定终点突跃明显；加入苯溶解凡士林，排除了在测定过程中的干扰。 尿素(Urea)为脱水药，作用与山梨醇相似，外用可抗菌、止痒及软化角质。尿素软膏为皮肤科常用制剂。英国药典(BP)和美国药典(USP)对尿素的制剂和原料的含量测定均采用凯氏定氮法，当测定软膏时，常因基质的突然沸腾而导致失败。笔者采用非水滴定法测定尿素软膏中尿素的含量，取得较好效果。 1实验依据 由于尿素是极弱的碱(Kb＝1.5×10-14)，在水和冰醋酸中都不能进行滴定，为增强滴定突跃，故采用增强尿素的碱性以便直接滴定。 2试药和仪器 尿素、高氯酸、盐酸、醋酐均为AR；25型酸度计(上海雷磁仪器厂)，S648型电热恒温水浴箱(上海医疗器械七厂)。 3方法和结果 3.1通过多次筛选和实验，取能实现明显滴定终点突跃的醋酐-苯(1∶1v/v)为溶媒。 3.2准确称取干燥至恒重的尿素5份，用电位滴定法，甘汞电极和玻璃电极分别为参比电极和指示电极，加结晶紫指示液3滴，用0.1mol HClO4液滴定，经酸度计测量加入不同体积时所对应的电位值，画表求得△E/△V的最大值为400mv，5份供试品的终点颜色均为刚转黄色。
3.3精密称取15%尿素软膏0.5g，加入醋酐-苯10ml，置水浴上加热并振摇使溶解，放冷，加入结晶紫指示液3滴，用0.1mol HClO4液滴定至恰显黄色，并将结果用空白校正，即得(每1mol/ml hClO4液和0.006006g的CH4NO相当)。 3.4精密称取干燥至恒重的尿素8份，各用4份分别以B.P法和本法测定，平均含量分别为98.40%和98.47%，比较接近一致。 3.5回收率测定：精密称取干燥至恒重的尿素约75mg，加入凡士林0.5g，按本法进行，以B.P法测得的含量98.4%为标准，计算称取量中含尿素的量。计算结果平均回收率为100.03%。再用本法对本院制剂室自制的15%尿素软膏进行含量测定，结果全部合格。 4讨论 4.1本法为利于溶解凡士林及作为惰性溶媒，故加入苯。 4.2加入醋酐旨在提高尿素的碱性，因为醋酐含乙酰阳离子〔(CH3CO)3＋O〕，比醋酸含质子〔CH3COOH2＋〕的酸性更强。 4.3非水滴定法简便易行、快速准确，适合医院制剂室作为中间品质量控制和含量测定的方法。
血清尿素测定参考方法
ICS 11．020 C 50 VS 中华人民共禾口国卫,--l=行业标准 WS／T 345—20 11 血清尿素测定参考方法 Reference procedure of the measurement of urea in serum 201 1-09-30发布2012—04—01实施 中华人民共和国卫生部发布
目次 前言 1范围· ·Ⅲ， 2规范性引用文件● 3术语和缩略语·● 4测定原理·· ··0 5测定样品 0 6测定试剂.0 6．1警示与安全注意事项.0 6．2试剂原料- 0 6．3试剂眭能要求.0 6．4试剂制备 0 6．5标准液的制备·0 7测定条件·，7．1仪器· 7．2最终反应混合液的浓度 7．3血清尿素测定条件，如7．4校准的扩展不确定度u 8测定······u 8．1无蛋白滤液的制备··· 8．2试剂准备 8．3标准曲线制作··· 8．4测定方法······ 8．5测定范围u他挖地n 8．6误差的来源 8．7测定样品要求 9结果计算·····- 9．1计算实际吸光度值···n¨¨n 9．2标准曲线的制作·一n 9．3样品测定结果的计算·-‘H 9i 4卓岔换算·····- M 附录A(规范性附录)L一谷氨酸脱氢酶催化活性浓度测定 附录B(规范性附录)脲酶催化活性浓度测定···¨n
前言 本标准修改采用由国际检验医学溯源联合委员会(JCTLM)批准的《CDC人血清尿素参考方法(分光光度法)》，并参考ISO 15193：2009《体外诊断器具生物源样品中量的测定参考测定程序的表述》适当增加内容。 本标准按照GB／T 1．1—2009给出的规则起草。本标准由卫 生部临床检验标准专业委员会提出。本标准起草单位：卫生部 临床检验中心。本标准主要起草人：杨振华、陈宝荣、邵燕、陈 琦、孙慧颖、胡滨。 Ⅲ
尿素中氮的测定
序号 1 2 3 尿素的总质量 氢氧化钠初读数 氢氧化钠末读数 V(氢氧化钠) N的含量 相对误差 S 计算T 查表后的T (置信 界限为95%) N的含量 尿素中氮的测定 一、实验目的 1．学会用甲醛法测定氮含量，掌握简洁地定的原理。 2．学会铵根离子的强化，掌握是系统消化系统。 3．掌握容量瓶、移液管的正确操作。 4．进一步熟悉分析天平的使用。 二、实验原理 尿素是有机碱，不能被强酸直接滴定，需要先消化。 尿素的消化尿素是有机碱。Kb=1.3* ,不满足弱碱被直接滴定的条件，可用浓硫酸将其转化为l硫酸铵。 尿素经浓硫酸消化后转化为硫酸铵，过量的硫酸依甲基红为指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定至溶液从红色到黄色。 铵根是弱酸，不能被强碱直接滴定，要把弱酸强化 弱酸的强化铵根是一个弱酸可用甲醛将其转化，一反应式见书上，由于生成的是弱碱，化学计量点时溶液的PH为8.7，应选用酚酞为指示剂，溶液中有两种指示剂，在滴定前溶液为红色，滴入氢氧化钠溶液后，随着溶液氢离子的减少，颜色的变化顺序依次为红-橙（第一次）——黄——金黄色（第二次），第一次出现金黄时未到终点，此时是指示剂甲基红的颜色变化，待过纯黄后，再出现第二次金黄色时，已到终点，此时是指示剂酚酞的颜色变化。 铵盐与甲醛的反映在室温中进行的较慢，加甲醛后，需放置几分钟，使反应进行完全。 主要仪器：分析天平。250ml烧瓶三个，50ml滴定管，称量瓶，干燥器，量筒，250ml容量瓶 主要试剂：NaoH溶液，酚酞指示剂，甲醛溶液，尿素试样
实验步骤：准确称量尿素试样0.5~0.6g于100ml烧杯中，加入6ml 浓硫酸，盖上表面皿。在通风处中缓缓加热，当有密集的CO2溢出时，移走煤气灯，直至无二氧化碳气泡冒出时，用大火加热至冒出的浓白烟又变稀时再加热2min.，在通风厨中冷却。吹洗表面皿和杯壁，加30ml纯水稀释，稍冷后完全转移至250ml 容量瓶中，稀释至标线，摇匀。准确移取25.00ml试剂三份，分别加3滴甲基红指示剂，先用2mol/l,后用0.1mol/l的NaoH 溶液中和过剩的硫酸至纯黄。取30ml的甲醛溶液，以酚酞为指示剂，用0.1mol/l的氢氧化钠溶液中和(甲醛与铵盐反应后生成的含H 化合物)至微红色，在中和好的消化液中，加入10ml甲醛溶液，充分摇动，放置五分钟。加入五滴1%的酚酞指示剂，溶液由红色至金黄色，至纯黄，最后到金黄色即为终点。 思考题：中和硫酸过程中氢氧化钠的两是否要准确控制？若不足或过量时对实验结果由和影响？ 要准确控制，不足时氢氧化钠消耗偏大，实测出单的含量偏高，反之，过量则偏低。 一、实验目的 1. 学习尿素试样测定前的消化方法。 2. 学习以甲醛强化间接法测定尿素中的氮含量的原理和方法。 二、实验原理 尿素CO(NH２)２经浓硫酸消化后转化为(NH４)２SO４，过量的H２SO４以甲基红作指示剂，
尿素中含氮量的测定
尿素中含氮量的测定 一、实验目的 1.学会用甲醛法测定氮含量，掌握间接滴定的原理。 2.学会NH 4+的强化，掌握试样消化操作。 3.掌握容量瓶、移液管的正确操作。 4.进一步熟悉分析天平的使用。 二、实验原理 常用的含氮化肥有NH 4Cl 、(NH 4)2SO 4、NH 4NO 3、NH 4HCO 3和尿素等，其中NH 4Cl 、(NH 4)2SO 4和NH 4NO 3是强酸弱碱盐。由于NH 4+的酸性太弱(Ka=5.6×10-10)，因此不能直接用NaOH 标准溶液滴定，但用甲醛法可以间接测定其含量。尿素通过处理也可以用甲醛法测定其含氮量。甲醛与NH 4+作用，生成质子化的六次甲基四胺(Ka=7.1×10-6)和H +，其反应如下： 4NH 4+ + 6HCHO = (CH 2)6N 4H + + 3H + + 6H 2O 所生成的H +和(CH 2)6N 4H +可用NaOH 标准溶液滴定，采用酚酞作指示剂。 标定NaOH 标准溶液的基准物质为邻苯二甲酸氢钾，其反应为： 化学计量点时，溶液呈弱碱性(pH=9.20)，可选用酚酞作指示剂。 三、仪器与试剂 容量瓶(250mL)、移液管(25mL)、锥形瓶(250mL)、碱式滴定管(50mL)、洗耳球、分析天平 氢氧化钠、邻苯二甲酸氢钾、硫酸铵、甲基红指示剂(0.2%水溶液)、酚酞(0.2%乙醇溶液)、甲醛溶液(1:1) 四、实验步骤 1．0.1mol·L -1NaOH 标准溶液的配制及标定 CO O H CO O K +NaO H CO O K CO O Na +H 2O
用台秤迅速称取1g NaOH固体于100mL小烧杯中，加约30mL无CO2的去离子水溶解，然后转移至容量瓶中，用去离子水稀释至250mL，摇匀后，用橡皮塞塞紧。洗净碱式滴定管，检查不漏水后，用所配制的NaOH溶液润洗2～3次，每次用量5～10mL，然后将碱液装入滴定管中至“0”刻度线上，排除管尖的气泡，调整液面至0.00刻度或零点稍下处，静置1min后，精确读取滴定管内液面位置，并记录在报告本上。 用差减法准确称取0.4～0.6g已烘干的邻苯二甲酸氢钾两份，分别放入两个已编号的250mL锥形瓶中，加20～30mL水溶解(若不溶可稍加热，冷却后)，加入1～2滴酚酞指示剂，用0.1mol·L-1 NaOH溶液滴定至呈微红色，半分钟不褪色，即为终点，计算NaOH标准溶液的浓度。 2．硫酸铵(NH4)2SO4中氮含量的测定 准确称取1.6～2.0g(NH4)2SO4试样于小烧杯中，用少量蒸馏水溶解，然后完全转移至250mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 用移液管移取25.00mL上述试液于250mL锥形瓶中，加水20mL，加1～2滴甲基红指示剂，溶液呈黄色；然后加入10mL已中和的1∶1甲醛溶液和1～2滴酚酞指示剂，摇匀，静置2min后，用0.1mol·L－１NaOH标准溶液滴定至溶液呈淡红色，持续半分钟不褪色即为终点，记下读数，计算试样中氮的百分含量，以N%表示。平行测定两次，要求相对平均偏差不大于5%。 思考题 1．尿素为有机碱，为什么不能用标准酸溶液直接滴定?尿素经消化转为NH4+，为什么不能用NaOH溶液直接滴定? 答：尿素为弱碱，因此不能用标准酸溶液直接滴定。由于NH4+的酸性太弱(K a=5.6×10-10)，因此不能直接用NaOH标准溶液滴定。 2．计算称取试样量的原则是什么?本实验试样量如何计算? 答：试样消耗滴定剂的体积控制在20-25ml。计算称取试样量的原则是尽