动物血液原虫病病原检查技术
25601218_猪附红细胞体病的诊断及防治技术
浙江畜牧兽医２０２１年第５期欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍５．２ 方法 产前２０～３０ｄ的母猪，应接种大肠杆菌等疫苗，或根据兽医的要求接种一些其他的疫苗，在对怀孕１００ｄ左右的母猪进行驱虫，这包括体外和体内的寄生虫。
分娩前４日开始减少饲喂量，每头饲喂量从２．５ｋｇ／ｄ逐步减少到０．５ｋｇ／ｄ，以防妊娠延长及子宫炎、乳房炎、无乳综合症的发生，并可将死胎头数减少到最低。
产仔舍及产床在临产母猪进入前必须做好清洗、消毒等的准备工作。
临产前３～７ｄ的母猪清洗消毒后进入产仔舍，还要在母猪产仔时必须要做到人工监护分娩，在其产仔过程中给予一些必要的帮助，以最大程度地提高活产仔数。
产后要对母猪作适当的药物护理及个别有问题母猪的药物综合处理（包括产道冲洗、抗菌素和催产素的使用等）。
分娩当天喂料０～０．５ｋｇ／头，随后每天增加０．５～１ｋｇ，４天时达到日采食量２．５ｋｇ以上。
６ 哺乳期母猪６．１ 目标 提高母猪泌乳量和乳汁质量；提高母猪采食量，以防止母猪膘情迅速下降；提高仔猪的成活率；提高仔猪的断奶体重。
６．２ 方法 尽可能地把产房的温度控制在１５～２０℃，不要高于２２℃，但要对哺乳仔猪作小范围的保温工作。
在１８℃的室温产仔的母猪热应激较小，产仔较快，死胎较少。
在高的屋舍温度时，母猪采食量减少，背膘下降，且体重下降，从而导致仔猪死亡率升高而且断奶时体重减少。
产后５ｄ可以敞开饲喂，平时每天可喂２～３次不等，但在高温季节，如采食量不够，那每天就应喂４～５次。
要保证充足的饮水，照明时间维持在１２～１６ｈ。
收稿日期：２０２１ ０３ ０４猪附红细胞体病的诊断及防治技术王惠强（兰溪市黄店镇人民政府，浙江兰溪３２１１１１）中图分类号：Ｓ８５２．７２ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００５－７３０７（２０２１）０５－００３０－００２ 猪附红细胞体病是由附红细胞体寄生于人和动物血液中红细胞表面或血浆中而引起的一种人畜共患传染病，临床上以贫血、黄疸和发热为特征，故又称为黄疸性贫血、类边虫病、赤兽体病和红皮病等。
牛泰勒虫病的诊断及防治技术
50牛泰勒虫病的诊断及防治技术牛泰勒虫病主要是由环形泰勒虫寄生在牛体内而引起的血液原虫病，该病主要通过中间宿主——蜱传播，当携带有该病病原的蜱虫叮咬牛时可导致牛患病。
笔者采用临床观察和实验室诊断相结合的方法，对牛场疑似患有泰勒虫病的病牛进行诊断，并制定相应的治疗方案，现将诊治情况介绍如下。
一、发病情况2022年8月上旬，安徽省合肥市蜀山区金华奶牛场1头2岁奶牛精神不振，后期沉郁，食欲减退，反刍减弱，体温升至41℃，可视黏膜苍白黄染。
肩前淋巴结肿大，触诊有痛感，步态蹒跚，行动不便，喜孤立。
静卧在阴凉偏僻的地方，鼻镜干燥，便秘，后期拉稀。
用抗菌类药物治疗未见好转。
后来在对牛全身检查过程中，在腋下发现璃眼蜱。
二、实验室检验采集耳静脉血涂片，干燥后先用吉姆萨染液（A 液）固定，再滴加吉姆萨染液（B液）3分钟染色，经水洗、吸干置于1600倍油镜下镜检观察，红细胞内见有环形、椭圆形、逗点儿形虫体，数量1至10个不等，肩前淋巴结穿刺发现有石榴体。
三、诊断根据流行病学及实验室检验，诊断该奶牛患牛泰勒虫病。
牛泰勒虫病是牛的一种原虫病，曾称泰氏焦虫病，以病牛出现高热、贫血、出血、消瘦和体表淋巴结肿胀为特征。
四、剖检变化对病死牛剖检可见全身性出血，淋巴结肿大3～5倍，切面有暗红色病灶和灰白色结节；皱胃黏膜肿胀、充血，有针头至黄豆大暗红色或黄白色结节，坏死后形成糜烂或溃疡，边缘不整稍隆起，周围黏膜充血、出血，构成细窄的暗红色带；脾脏肿大，被膜有出血点；肾脏肿大、质软；肝脏肿大、质软，有灰白或暗红色病灶。
五、病原寄生虫病原寄生虫是环形泰勒虫和瑟氏泰勒虫，寄生于红细胞内的虫体呈环形、椭圆形、逗点形或杆形，环形泰勒虫圆形虫体多于杆形虫体，瑟氏泰勒虫杆形虫体多于圆形虫体。
红细胞内一般寄生虫体。
寄生在网状内皮系统细胞的环形泰勒虫，进行裂体增殖形成多核虫体，裂殖体呈圆形、椭圆形或肾形，位于淋巴细胞、单核细胞胞浆内或细胞外。
泰勒虫的生活史需要2个宿主参加，传播者蜱为终宿主，牛为中间宿主。
实验动物病原微生物检测中的标本采集技术
实验动物病原微生物检测中的标本采集技术实验动物的病原菌和寄生虫多定植于身体的特定部位，检测时需从相应部位采样以提高检出率，因此实验动物的细菌学、真菌学和寄生虫学检测涉及的标本种类众多，且采样方法和样品的制备各不相同。
一、细菌和真菌检测时的标本采集（一）皮毛、鳞屑标本将动物进行吸入麻醉（乙醚等）后适当保定，待检部位用75%乙醇消毒，直接用灭菌接种刀、镊刮取皮毛、鳞屑少许。
（二）呼吸道分泌物标本将动物麻醉后仰卧保定，并使四肢舒展固定。
用75%乙醇从腹股沟到颈部进行逆毛涂刷消毒，沿腹正中线从腹部以下至下颌剪开皮肤，使腹部、胸部以及颈部肌肉全部暴露，无菌分离颈部肌肉暴露气管，于咽部以下5mm左右气管上剪一“V”形口，插入无菌接种针由下至上直达咽部轻轻转动数下，沾取气管分泌物。
如分泌物过少，可将咽部及部分气管剪下增菌培养。
（三）回盲部内容物标本将动物麻醉后仰卧保定，并使四肢舒展固定。
用75%乙醇从腹股沟到颈部进行逆毛涂刷消毒，沿腹正中线从腹部以下至下颌剪开皮肤，使腹部、胸部以及颈部肌肉全部暴露，无菌剪开腹部肌肉暴露回盲部，在回盲部剪一小口，用接种环伸入直接挑取适量内容物。
如内容物过少，可剪下包括回盲部在内的一段肠组织适当剪碎后作增菌培养。
（四）粪便标本将粪便前段弃去，取中段粪便，加适量PBS或培养液匀浆后接种，如为稀软便可直接接种。
（五）肛拭标本将灭菌棉签用生理盐水或培养液浸润后，轻轻插入动物肛门深处3～4cm，缓缓转动后取出。
（六）病灶组织分泌物及浓汁标本标本用于直接接种时，保定动物并对病灶周围用75%乙醇消毒，用接种环直接沾取分泌物或脓汁进行接种，或取下少量病变组织（对已死亡动物）于培养基表面接触后再划线接种；标本用于制备涂片时，可于载玻片上滴加适量灭菌生理盐水，挑取少量脓汁与之混匀且风干，火焰上固定，或取适量病灶分泌物与生理盐水混匀涂抹成相对较浓的涂片。
二、检测体内寄生虫的标本采集和制备体内寄生虫寄生于肠道、血液和组织内，检测时须根据不同的寄生部位采集相应标本。
动物寄生虫病PCR诊断技术样本
动物寄生虫病PCR诊断技术样本动物寄生虫病是指动物体内寄生的一类寄生虫引起的疾病，它们通过寄生在动物体内并侵害宿主的组织、器官和系统，引起一系列不同程度的病理损害。
动物寄生虫病对养殖业、畜牧业和野生动物保护等方面都有重要影响，因此及早、可靠地诊断寄生虫感染是非常重要的。
寄生虫病的诊断一直是医学科学家和兽医师所关注的重要领域，为了提高动物寄生虫病的诊断效率和准确性，PCR（Polymerase Chain Reaction，聚合酶链反应）技术被广泛应用于寄生虫病的诊断。
PCR技术是一种通过DNA扩增来检测目标DNA序列的技术，它采用了一种在体外复制DNA的酶，聚合酶，通过不断重复的步骤，复制目标DNA 片段从而使其增加几个数量级。
PCR技术的基本原理是将DNA样本与反向引物和正向引物结合，并加入DNA聚合酶、四种碱基和缺失单碱基的dNTP，通过反复温度循环中的DNA变性、引物结合和DNA合成，最终得到数倍于起始数量的目标DNA序列。
PCR技术具有敏感、特异性强、高通量、快速和准确等优点。
在动物寄生虫病诊断中，可以通过设计特异的引物，将寄生虫的DNA从动物组织或体液样本中扩增出来，并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳或实时荧光PCR等方法进行分析和检测。
对于一些传统的诊断方法难以确诊的情况，如寄生虫病在早期感染、轻微感染和低密度感染等情况下，PCR技术能够提供更为敏感和准确的结论。
根据动物寄生虫病的特点，适宜的PCR样本包括动物体内组织和体液样本。
常见的动物寄生虫病的PCR样本有：1.血液样本：对于一些血吸虫感染、疟原虫感染等疾病，可以通过提取感染动物的全血样本中的寄生虫DNA进行诊断。
2.组织样本：通过对动物组织样本进行PCR扩增，可以检测到一些针对特定寄生虫的DNA片段。
例如，肉眼可见的病变组织、手术获取的寄生虫感染的组织切片等。
3.分泌物样本：对于一些存在寄生虫卵或囊泡排出的动物寄生虫病，如弓形虫感染等，可以通过采集动物的分泌物样本，提取其中的寄生虫DNA进行PCR检测。
寄生虫的病原学诊断方法定义
寄生虫的病原学诊断方法定义一、寄生虫病原学诊断方法的概念寄生虫病原学诊断方法呢，就是专门用来确定一个人或者动物是不是感染了寄生虫，以及感染了哪种寄生虫的一些办法。
这就像是侦探破案一样，要从各种蛛丝马迹里找到寄生虫这个“小坏蛋”。
二、常见的寄生虫病原学诊断方法1. 粪便检查直接涂片法：这个方法超级简单，就像从一碗汤里直接捞东西看一样。
把粪便涂在玻片上，然后在显微镜下看有没有寄生虫的虫卵、幼虫或者成虫的片段。
不过这个方法有个小缺点，就是如果寄生虫数量很少，可能就不太容易发现。
饱和盐水浮聚法：这个就比较有趣啦。
利用某些虫卵比重比较轻的特点，把粪便和饱和盐水混合，虫卵就会浮到上面，这样就更容易找到那些在粪便里藏着的虫卵啦。
沉淀法：有点像把泥沙沉淀到水底一样。
把粪便加水搅拌后，让它沉淀，然后把上面的液体倒掉，反复几次，最后剩下的沉淀物里就可能有寄生虫的虫卵或者幼虫啦。
2. 血液检查涂片染色法：把血液涂在玻片上，染上颜色，然后在显微镜下看有没有寄生虫在血液里游来游去。
像疟原虫就是通过这种方法发现的呢。
厚血膜法：和涂片染色法有点像，但是涂片比较厚，这样可以提高检测到寄生虫的概率，不过看的时候可能会稍微麻烦一点。
3. 组织活检这是一种比较“厉害”的方法啦。
如果怀疑寄生虫在某个器官或者组织里，就取一点组织出来，在显微镜下看有没有寄生虫。
比如说怀疑肝吸虫在肝脏里，就取一点肝脏组织来检查。
不过这个方法有点小疼，而且有一定的风险，毕竟是要取组织的嘛。
4. 其他方法痰液检查：对于一些能在呼吸道生存的寄生虫，像肺吸虫，检查痰液就很重要啦。
看看痰液里有没有肺吸虫的虫卵或者幼虫。
肛周检查：像蛲虫这种寄生虫，雌性成虫会在晚上爬到肛周产卵。
所以在肛周取一些样本检查，就有可能发现蛲虫的虫卵呢。
三、这些诊断方法的意义这些寄生虫病原学诊断方法可重要啦。
它们就像是健康的守护者，如果能准确诊断出寄生虫感染，就能及时治疗，让患者或者动物早日恢复健康。
牛羊寄生虫病的诊治
养殖与饲料2018年第2期摘要本文主要从体外寄生虫的诊断、体内寄生虫的诊断、幼虫和虫卵的诊断、血液原虫的诊断等方面介绍牛羊寄生虫病的诊断，并提出预防和治疗措施，加强饲养管理、杀灭牛羊圈舍内的虫卵和虫体、清除环境中的中间宿主等，减少此类病原的危害，提高牛羊养殖的经济效益。
关键词牛；羊；寄生虫病；诊治牛羊寄生虫病的诊治古丽帕热木·库麦依新疆昌吉奇台县乔仁乡农业（畜牧业）发展中心，新疆昌吉831814收稿日期：2017-12-20古丽帕热木·库麦依，女，1976年生，兽医师。
寄生虫病是由于寄生虫侵入动物机体引起动物发病的一类疾病，通常牛羊的寄生虫病主要集中在其侵入皮肤、内脏、口腔等部位。
寄生虫通常分为2种，一种是外寄生虫，主要寄生于动物的皮毛组织，侵害其皮肤，通过吸附等方式寄生；一种是内寄生虫，主要寄生于动物的体内，包括呼吸道、消化道内，并通过移行到其他部位。
1牛羊寄生虫病的诊断牛羊被寄生虫感染后，可以见到身体消瘦、被毛粗乱，扒开被毛可见皮肤有出血点，长期感染的动物具有贫血、黄疸、水肿等明显的临床症状，同时由于消化吸收功能被破坏，使得动物生长发育变缓。
因此，诊断主要是通过寄生虫病发病的季节、发病的症状、群体发病情况、病原的传播方式以及疾病的流行规律等方面进行。
1）体外寄生虫的诊断。
牛羊的体外寄生虫主要有牛皮蝇、羊鼻蝇、硬蜱、软蜱、痒螨、疥螨、毛虱等，这类寄生虫的共性特点是寄生在动物皮毛上，靠吸取动物的营养维持生命并进行繁殖。
这类寄生虫可以通过人的肉眼看到，而且感染后动物的皮毛表现非常明显，可见被毛脏乱，扒开被毛可见皮肤有不同程度的发红和出血。
发病牛羊感觉痒，找地方蹭皮毛。
可以将捕捉到的寄生虫放置于75%乙醇溶液，借助实验室的解剖镜或放大镜观察寄生虫的虫体结构和外观形状，从而对其进行确诊。
2）体内寄生虫的诊断。
牛羊的内寄生虫种类较多，主要为蠕虫、焦虫、绦虫、吸虫等。
这类寄生虫主要的共性特点是寄生在牛羊体内的呼吸道、消化道内和其他脏器中，在动物体内摄取营养物质，并维持生命和进行繁殖发育。
5-1寄生虫病的诊断技术-兽医学概论(动物科学专业使用)
组织或组织液内寄生虫病诊断
1.淋巴结穿刺、染色检查（泰勒虫柯赫氏蓝体） 2.取腹水抹片、染色检查(适用于弓形虫病) 3.生殖道原体检查法： 寄生于生殖道的虫体主要有牛胎儿三毛滴虫和马媾疫 锥虫。 牛胎儿毛滴虫存在于病母牛的阴道与子宫的分泌 物、流产胎儿的羊水、羊膜或其第四胃内容物中，也存在 于公牛的包皮鞘内，应采取以上各处的病料寻找虫体。
离心集虫法
其操作过程是，采病畜抗凝血 6~7 毫升，以每分钟 500 转的速度，离心5 分钟，使其中大部分红细胞沉降；而后 将含有少量红细胞，白细胞和虫体的上层血浆移入另一离 心管中，补加一些生理盐水，以每分钟 2500 转的速度离 心10分钟。取沉淀物制成抹片，按上述染色法染色检查。 此法适用于伊氏锥虫病和梨形虫病。 其原理是锥虫和感染有梨形虫的红细胞较正常红细胞 的比重为轻，所以在第一次沉淀时，正常红细胞下降，而 锥虫和感染有梨形虫的红细胞尚悬浮在血浆中。第二次离 心沉淀时，则将其浓集于管底。
（2） 幼虫检查法
1.漏斗幼虫分离法（贝尔曼法）：取粪便15~20克，放在漏斗 内的金属筛上，漏斗下接一短橡皮管，管下再接一小试管。 2.粪便培养法：在培养皿底部加滤纸一张，而后将欲培养的粪 便加水调成硬糊状，塑成半球形，放于皿内的纸上，并使半球 形粪球的顶部略高出平皿边沿，使加盖时与皿盖相接触。将此 皿置25℃温箱中，注意保持皿内湿度（应使底部的垫纸保持潮 湿状态）。经7天后，多数虫卵即可发育成第三期幼虫，并集 中于皿盖上的水滴中。将幼虫吸出置载玻片上，放显微镜下检 查。 3.毛蚴孵化法：日本血吸虫
外寄生虫病的诊断-检查方法
1.肉眼检查： 适用于痒螨
2.显微镜检查：适用于疥螨，将刮下的皮屑，放于载玻片 上，滴加50%甘油溶液，覆以另一张载玻片。搓压玻片使 病料散开，分开载玻片，置显微镜下检查。 3.虫体浓集法
肉牛肉牛寄生虫病的牛巴贝斯虫病临床诊疗技术
肉牛肉牛寄生虫病的牛巴贝斯虫病临床诊疗技术牛巴贝斯虫病，是由数种巴贝斯虫引起的一种血液原虫病。
临床上以高热、贫血、黄疸及血红蛋白尿为主要特征，我国已报道的牛巴贝斯虫有3种，分别为双芽巴贝斯虫、牛巴贝斯虫和卵形巴贝斯虫。
（一）病原及生活史1.双芽巴贝斯虫该虫属于大型虫体，虫体长度大于红细胞半径，典型的虫体是以锐角相连的双梨籽形，每个红细胞内有1～2个虫体，3个或3个以上少见。
2.牛巴贝斯虫虫体小于红细胞半径，多数呈单梨籽形或椭圆形，也有呈双梨籽形的，但两虫体的尖端相连成钝角，一般每个红细胞内有1～3个虫体。
3.卵形巴贝斯虫该虫为大型虫体，虫体呈卵形、圆形、出芽形、单梨籽形、双梨籽形等多种形态，内含1～2个染色质团，核外逸现象常见，姬姆萨染色虫体中央往往不着色，形成空泡。
三种巴贝斯虫的发育都需要2个宿主。
在中间宿主牛体内以二分裂或出芽增殖，在终末宿主（即传播者）蜱的体内进行有性繁殖。
蜱在吸血时，将病原寄生虫传播给健康动物，使其感染发病。
（二）流行特点该病呈一定的地区性，流行季节为蜱活动的季节。
8月龄以内的牛能耐过，1～2岁的牛发病较重，2～3岁的牛更重，死亡率也高。
（三）症状该病潜伏期为1～2周。
突然发病，体温升高40℃以上，呈稽留热；病牛食欲减退或消失、反刍停止；可视黏膜黄染、点状出血；腹泻或便秘，尿呈红色乃至酱油色。
（四）诊断诊断本病要注意与其他血液原虫病如泰勒虫病、伊氏锥虫病等进行鉴别。
本病主要依靠实验室检查，方法为采耳尖血涂片、自然干燥，甲醇固定后用姬姆萨氏液染色，若在红细胞内见到梨籽形虫体，即可确诊。
（五）治疗对初发或病情较轻的病牛，立即注射抗梨形虫药物；对重症病牛采取强心、补液等对症措施。
特效药物有以下几种。
1.锥黄素该药按3～4mg/kg的剂量，配成0.5号～1.0号溶液静脉注射，症状未减轻时，24h后再注射1次。
病牛在治疗后的数天内，须避免烈日照射。
2.贝尼尔该药按3.5～3.8mg/kg的剂量，配成5号～7号溶液深部肌肉注射。
规模化养牛场血液原虫病的诊断报告
规模化养牛场血液原虫病的诊断报告作者：黄涛谭召军来源：《湖北畜牧兽医》2014年第03期摘要：对贵州省某规模化养牛场出现临床症状的奶牛29头进行血液原虫检查。
结果表明，所送检的29头奶牛的血液样本均有不同程度的血液原虫的感染。
感染血液原虫的种类包括附红细胞体、牛巴贝斯虫及牛环形泰勒虫。
发病奶牛场进行治疗之后，疫情得到缓解。
关键词：血液原虫；临床症状；诊断；治疗中图分类号：S858.23文献标识码：A文章编号：1007-273X（2014）03-0050-01血液原虫病是根据动物的病原原虫的寄生部位命名[1]。
牛血液原虫病主要为动物梨形虫病，由顶复门（Apicomplexa）、梨形虫纲（Piroplasmea）中的巴贝斯科（Babesiidae）和泰勒科（Theileriidae）原虫所引起一类血液原虫病，并包括易与梨形虫病混合感染的牛的红细胞的边缘边虫（Anaplasmamarginale）和附红细胞体（Eperythrozoon）病[1-3]。
该类病在世界各地流行，我国各地也常有发生，造成畜牧业巨大经济损失。
临床上常常引起牛羊的高度贫血，黄疸，高热，巴贝斯虫亦能引起血红蛋白尿[4]。
1材料与方法1.1材料无菌采集贵州省某发病牛场牛静脉血液样本29份。
1.2方法1.2.1流行病学调查对该养殖场进行发病牛的流行病学调查，记录结果。
1.2.2临床症状观察对规模养牛场的29只发病牛进行临床症状观察，并记录结果。
1.2.3实验室检查及诊断从牛静脉无菌采取肉牛血液制成涂片，经甲醇干燥、固定和姬姆萨染色后镜检，观察虫体形体、大小和位置，判断有无血液原虫并确认血液原虫的种类。
2结果2.1流行病学调查结果该养牛校区牛存栏约2 000头，其中本地黄牛有1 000头左右；、外地引进黄牛约1 000头。
牛场自2013年8月开始出现以上症状。
养殖方式兼有山地放牧，且根据贵州省调查血液原虫常发生于5～10月。
2.2临床症状牛只出现咳嗽，体温升高至40.5℃，呈稽留热。
家禽常见的血液原虫性寄生虫病及其防治
饲料营养不全面，各种营养物质之间的不平衡,尤其是 维生素缺乏时不利于肠道粘膜的健康发育,诱发鸡群感染球 虫病。饲料中盐分含量过高时，鸡群饮水量增加,不利于水线 管理、增加漏水的频率，引起鸡体肠道代谢紊乱，肠道菌群失 去平衡，发生肠道炎症，从而诱发鸡群感染球虫病。饲料发生 霉变，发生霉菌毒素超标，致使鸡群霉菌中毒，引起肠道炎 症，从而诱发鸡群感染球虫病。另外免疫接种不科学,球虫免 疫失败，也是造成鸡群暴发球虫病的主要因素。 2 临床症状
DOI:10.3969/J.ISSN.1671-6027.2021.05.169
在鸡群饲养过程中，球虫病的发生相对普遍，给鸡群带 来的危害非常严重，必须做好完善的防治措施，同时还要正 确掌握鸡球虫病的临床症状和诊断技巧，每天认真观察鸡群 精神状态，一旦发现有感染球虫病的征兆,立即采取相应的、 合理化的防治措施,才能有效控制球虫病，降低养鸡成本和 对鸡群的危害。 1发病原因
作者简介:房德明1 972〜)，山东诸城人,大专,助理畜牧师, 研究方向:动物养殖和疫病防治。
根据典型的临床症状、剖检病变可以初步诊断鸡群是否 感染了球虫病, 通过实验室粪便涂片检查是否存在球虫虫 卵,还可以刮取病变部粘膜少许，放在载玻片上再滴1~2滴 甘油饱和盐水混合均匀,盖上盖玻片,放在显微镜下观察是 否有典型的球虫卵囊。如有球虫卵终可确诊感染球虫病。
(1) 概况。住白细胞虫病是禽鸟的急性或慢性的原生动 物病,包括:火鸡、鸭、鹅、珍珠鸡和鸡。这种病最早在野生鸟 类发现，并于1 895年有对火鸡的报道。最近十年很少有急性 住白细胞虫病在家禽暴发的报道。这种病一般临床症状不明 显。 急性暴发多数是雏鸟袁而成鸟( 种群) 一般发生慢性病症。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
动物血液原虫病病原检查技术
一、实验目的要求
掌握动物血液原虫病的血液涂片技术和染色方法；正确判断各种常见血液原虫的形态特点。
二、实验器材
（一）仪器设备生物显微镜（带油镜镜头）、载玻片、注射针头、剪刀、染色缸
（二）试剂姬姆萨氏染料、甘油、甲醇、香柏油
（三）实验动物鸡
（四）示教标本
1．伊氏锥虫
2．双芽巴贝斯虫
3．环形泰勒虫
4．卡氏住白细胞虫
5．沙氏住白细胞虫
三、实验方法、步骤和操作要领
（一）姬姆萨氏染色液的配制
1．姬姆萨氏染色液原液配方。
姬姆萨氏染色粉0.5g
中性纯甘油25ml
无水中性甲醇25ml
2．姬姆萨氏染色液原液配制过程。
（1）先将姬姆萨氏染色粉置研钵中，加少量甘油充分研磨，再加甘油再研磨，直至甘油全部加完为止。
将其倒入棕色小口试剂瓶中，在研钵中加入少量甲醇以冲洗甘油染液，冲洗液仍倒入上述瓶中，再加甲醇再洗再倒入，直至25 ml甲醇全部用完为止。
（2）塞紧瓶盖，充分摇匀，而后将瓶置于65℃温箱中24h或室温3～5d，并不时摇动，然后过滤到棕色小口试剂瓶中，即为原液。
（二）血液涂片的制作及染色
1．血液涂片的制作。
（1）薄片法（适合于观察红细胞内虫体，如巴贝斯虫）。
①用消毒注射针头刺破鸡的翅下静脉。
②用洁净载玻片的一端，从鸡的翅下静脉穿刺处接触血滴表面，蘸取少量血液。
③另取一块边缘光滑的载玻片，作为推片。
先将此推片的一端置于血滴的前方，然后稍向后移，触及血滴，使血液均匀分布于两玻片之间，形成一线。
④推片载玻片与血片载玻片成30～45°角，平稳地向前推进，使血液接触面散布均匀，即成薄的血片。
⑤抹片完成后，立即置流动空气中干燥，以防血球皱缩或破裂，并加甲醇固定，待干。
（2）厚滴法（适合于观察血浆内虫体，如伊氏锥虫）。
①取血液1～2滴置洁净载玻片上。
②用另一块载玻片之角，将血滴涂散至直径1cm即可。
③置室温中待其自行干燥(至少经1h之久，否则血膜附着不牢，染色时易脱)。
④染色前先将血片置于蒸馏水中，使红细胞溶解，血红蛋白脱落，血膜呈灰白色为止，再进行染色。
2．血液涂片的染色过程。
（1）血片用甲醇固定2 min。
（2）将血片浸于用10份蒸馏水加1份染液稀释的染色液缸中30 min (过夜最好)。
或将蒸馏水与染液按2∶1稀释好的染色液直接滴加于血片上，染色10 min 。
（3）血片取出后，用洁净的水冲洗。
待干镜检。
附：血液涂片的制作及染色流程图。
（图16-1）
图16-1 血液抹片的制作及染色流程图
四、实验注意事项
1．配制染色液时姬姆萨氏染料必须充分研磨。
2．采血前先用酒精棉消毒待干，以免皮屑污染血片和酒精溶血。
3．取血滴时必须在针头刺破后流出的表层血液用玻片迅速蘸取，以免血液凝固。
4．注意在病畜出现高温期，未作药物处理前采血，以提高虫体检出率。
5．涂片时血膜不宜过厚，使红细胞均匀分布于玻片上。
6．血片必须充分干燥后再用甲醇固定，以免血膜脱落。
五、实验报告
如何制作染色效果好且无杂质污染的血液涂片？试作分析、阐述。
附：参考资料
1．家畜常见血液原虫的形态特征描述。
（1）伊氏锥虫。
伊氏锥虫寄生于动物血浆内，虫体呈纺锤或柳叶状，体长18～24µm，宽1～2µm。
前端比后端更尖。
经姬姆萨染色后，虫体呈淡蓝色。
在显微镜下可看见下列几部分构造：① 原生质：浅蓝色部分。
② 核：在虫体中部呈紫红色椭圆形。
③ 副基体：在虫体后端呈紫红色的小圆点。
④ 波动膜：在虫体的一侧呈波状。
⑤ 鞭毛：在虫体后端，从付基体附近的毛基体开始围绕波动膜边缘，直到虫体的前端游离，呈细长鞭毛状。
（图16-2、图16-3）
（2）双芽巴贝斯虫。
双芽巴贝斯虫寄生在红细胞内。
虫体较大，有梨形、环形、椭圆形、变形虫形等。
典型虫体呈双梨形，细的一端联在一起成锐角排列。
虫体大于红细胞半径，经姬姆萨染色后，原生质浅蓝色，边缘较深，有二团紫红色的染色质。
（图16-4）
图16-2 锥虫模式图 1.核 2.波动膜 3.副基体 4.生毛体 5.颗粒 6.空泡 7.鞭毛
图16-3 血液涂片中的锥虫
图16-4 血液涂片中的双芽巴贝斯虫
（3）环形泰勒虫。
环形泰勒虫寄生在牛的淋巴细胞、巨噬细胞及红细胞内。
配子体呈小环形，短棒状或逗点状。
在每个红细胞中通常有1～5个虫体，大小为0.7～2.9µm，染色后原生质呈浅蓝色，染色质呈紫红色。
（图16-5）
裂殖体，又称石榴体，有不同形状和大小，存在于淋细胞的胞浆中或淋巴液中。
通常可看到浅蓝色的原生质背景上有暗紫色数目不等的染色质核。
（图16-6）
图16-5 泰勒虫配子体图16-6 泰勒虫裂殖体（石榴体）
2．家禽常见血液原虫的形态特征描述。
（1）卡氏住白细胞虫。
卡氏住白细胞虫配子体寄生在鸡的血细胞内。
配子体刚侵入红细胞时呈圆点状或逗点，每个红细胞内可有1～3虫体（图16-7）。
随着虫体的发育长大，红细胞的胞浆及胞核萎缩消失，配子体变为近圆形，大小为15.5×15.0μｍ；有一紫红色的核仁（图16-8）。
图16-7 卡氏住白细胞虫第Ⅰ期配子体
图16-8 卡氏住白细胞虫第Ⅴ期配子体
（2）沙氏住白细胞虫。
沙氏住白细胞虫配子体寄生在鸡的血细胞内。
虫体常把红细胞的核推至一边，引起红细胞严重变形，呈梭状或纺锤形。
（图16-9）
图16-9 沙氏住白细胞虫配子体。