非洲菊的组织培养快速繁殖技术
非洲菊切花组培繁苗
非洲菊切花的种植现状与前景
种植现状
非洲菊切花的种植主要集中在南方地区，部分北方地区也有 种植。目前种植技术已经比较成熟，产量和品质得到了提高 。
前景展望
随着人们对花卉消费的增加和种植技术的不断改进，非洲菊 切花的种植前景十分广阔。未来有望成为重要的出口创汇花 卉之一。
02
组培繁苗技术介绍
组培技术的原理与特点
基因编辑技术的应用
基因编辑技术将为非洲菊切花组培繁苗提供更广阔的发展空间，实 现定向改良品种性状。
拓展应用领域
除了非洲菊切花，组织培养技术还可以拓展应用到其他花卉产业中 ，推动花卉产业的可持续发展。
组培繁苗技术的未来研究方向与挑战
01
02
03
提高繁殖系数
针对非洲菊切花的特点， 研究更加高效的繁殖方法 ，提高繁殖系数。
增殖培养
在适宜的培养基和激素条件下，对已分化的不定芽进行增殖培养，以获得大量 生长健壮的组培苗。
非洲菊切花组培苗的生根培养
选择适宜的生根培养基
选择适合非洲菊切花组培苗生根的培 养基，其中应含有适宜的激素和营养 成分。
控制光照和温度
生根过程中，应保持适宜的光照和温 度条件，以促进组培苗的生根。
非洲菊切花组培苗的移栽与管理
非洲菊切花组培繁苗
汇报人： 2023-12-30
目录
• 非洲菊切花概述 • 组培繁苗技术介绍 • 非洲菊切花组培繁苗技术 • 组培繁苗技术的应用与展望 • 结论
01
非洲菊切花概述
非洲菊切花的特性与用途
特性
非洲菊切花具有鲜艳的颜色、丰 富的花型和良好的耐久性，适合 作为室内外装饰和节日庆典用花 。
Байду номын сангаас
非洲菊组织培养与快速繁殖试验研究
林业科学现代农业科技2011年第6期非洲菊又名扶郎花,属于菊科大丁草属,为多年生草本植物,是一种美丽的切花植物。
非洲菊传统的繁殖方法为播种或分株繁殖,其种子寿命短、发芽率低,且非洲菊为异花授粉植物,自交不孕。
因此,其种子后代必然发生变异,要想保持原品种性状的稳定性,必须采用无性繁殖[1-2]。
非洲菊常用的无性繁殖方式为分株繁殖,每株每年只能分出5~6株,繁殖速度极慢,分株繁殖易使病毒逐代积累造成种性退化,也不适于现代的大规模生产。
因此,进行组织培养快速繁殖十分必要。
根据多年来组织培养经验,现对非洲菊的组织培养技术总结如下。
1材料与方法1.1外植体选择及准备1.1.1外植体。
花托、茎尖、花梗。
1.1.2外植体的处理。
选取直径为1cm 左右、花苞片处于紧包状态的花蕾,用脱脂棉蘸清水将花蕾洗净,在超净工作台上先用70%酒精消毒45s ,再用0.1%升汞灭菌10~15min ,用无菌水冲洗5次,剥去包片和全部小花,留下花托并切成2~4块进行接种。
1.2培养基与培养条件1.2.1培养基。
所有培养基制备后,均经121℃、152.0kPa灭菌20min 后备用。
(1)芽分化培养基。
以花托为外植体,接种在“池上真一培养基”上(配方如下:KNO 31900mg/L 、NH 4NO 31650mg/L 、KH 2PO 4170mg/L 、MgSO 4·7H 2O 370mg/L 、CaCl 2·2H 2O 440mg/L 、FeSO 4·7H 2O 27.8mg/L 、EDTA 37.3mg/L 、MnSO 4·7H 2O 22.3mg/L ,NaH 2PO 485mg/L 、H 3BO 36.2mg/L 、KI 0.83mg/L 、Na 2MoO 4·2H 2O 0.25mg/L 、CoCl 2·6H 2O 0.025mg/L 、ZnSO 4·7H 2O 8.6mg/L 、CuSO 4·5H 2O 0.025mg/L 、V B 130mg/L 、V B 61mg/L 、烟酸10mg/L 、硫酸腺嘌呤80mg/L ),并附加不同浓度的6-BA 和NAA ;以茎尖为外植体,接种在MS 培养基,并附加不同浓度的KT 和IAA ;以花梗为外植体,接种在MS 培养基,附加不同浓度的6-BA 和IAA 。
一种促进非洲菊组培移栽苗生根的方法与流程
一种促进非洲菊组培移栽苗生根的方法与流程本发明涉及非洲菊育苗技术领域，尤其涉及一种促进非洲菊组培移栽苗生根的方法。
背景技术：非洲菊为菊科多年生草本植物，是世界五大切花之一。
非洲菊自花不授粉，传统非洲菊生产常采用分株繁殖的方法进行繁殖，但分株繁殖繁殖系数较低、易积累病害、分株后代生长不齐、苗弱、品种易退化。
组培苗具有遗传性状稳定、长势均匀一致、生长快、抗逆能力强的优点，因此目前国内外非洲菊生产多采用组培苗。
组培移栽苗若根系发育不好，将严重影响植株生长、降低其商品价值，多次继代的组培移栽苗更是会出现根系弱、生长缓慢、长势弱等问题，因此生产中大多需要每隔一段时间重新诱导一次而不是使用多次继代的组培苗。
因此采取某些手段促进非洲菊组培移栽苗生根对非洲菊工厂化生产具有一定的意义。
印度梨形孢是一种可以人工培养的类丛枝菌根真菌，众多研究表明它对植物根系的形成、植株生长、植株抗性能力具有明显的促进作用。
但目前尚无其在非洲菊生产中应用的报道。
利用印度梨形孢促进非洲菊组培移栽苗生根一旦被证实可行，将会具有较大的生产应用价值和经济价值。
本发明提供了一种利用印度梨形孢促进非洲菊组培移栽苗生根和恢复多次继代的非洲菊组培移栽苗根系活力的方法。
技术实现要素：本发明提供了一种促进非洲菊组培移栽苗生根的方法，能够有效地解决非洲菊组培移栽苗根系发育较差及有其产生的一系列问题。
本发明的技术方案：一种促进非洲菊组培移栽苗生根的方法，包括印度梨形孢发酵液的制备、非洲菊组培苗的移栽、印度梨形孢发酵液浇灌，之后验证印度梨形孢发酵液促进生根的效果。
通过浇灌印度梨形孢，利用印度梨形孢促进非洲菊组培移栽苗生根、改善根系、进而促进植株生长，此外本发明还可较好地多次继代引起的再生植株根系弱、生长缓慢、苗弱、成活率低等问题，对非洲菊植株商品价值的提升具有重要意义。
本发明步骤简单、可操作性强、效果显著。
具体方法为：（1）印度梨形孢发酵液的制备活化印度梨形孢菌株，然后挑取菌落边缘部分的气生菌丝接种于pda固体培养基上；放置于28℃的黑暗培养箱内培养5d，挑取菌丝于装有100ml灭菌的pda液体培养基的250ml三角瓶内，在温度为28℃，转速为120r/min的摇床内培养3天，经单层纱布过滤后收集滤液，用水稀释至孢子浓度为2×107个/ml，获得印度梨形孢发酵液。
非洲菊切花组培繁苗技术
非洲菊切花组培繁苗技术非洲菊是一种生命力旺盛、开花时间长、色彩丰富、耐寒性强、抗逆性能好的观赏植物，常被用于景观绿化、花坛围边或切花栽培。
随着人们对花卉观赏性的需求和生产技术的不断提高，非洲菊的栽培技术也不断创新和改进。
其中，组培繁苗技术是提高非洲菊栽培效益的关键。
本文将围绕非洲菊切花组培繁苗技术进行阐述和探讨。
组培繁苗概述组培繁殖技术是指通过人工创造一定的条件，在不同生理发育阶段的组织培养为新植株的育种方法。
与传统的繁殖技术相比，组培繁殖具有繁殖周期短、繁殖量大、繁殖品种多、质量高等优点。
因此，组培繁殖技术被广泛应用于植物繁殖、品种改良、研究等领域，取得了显著的经济和生态效益。
非洲菊组培繁苗技术实验设计非洲菊切叶组培方法采用MS基础培养基，控制生长调节物质的浓度、pH值和培养温度等条件，研究非洲菊的繁殖过程。
实验分为以下四个阶段：1.切叶：从非洲菊的健康、无病虫害的植株上取出12片鲜嫩的叶片，切去叶柄，将叶片放入消毒液液中浸泡10min，用流动水冲洗消毒后放在滤纸上，切好的叶片直径不应超过0.8cm。
2.发根：将切好的叶片放入含有生长调节物质的MS基础培养液中，室温下恒温摇床培养14天。
对于小叶片，可以直接放入MS培养液中使其发根；对于大叶片，首先将其切成小片，将面积小的片放入培养液中。
3.出苗：发根完成后，将叶片移入不含生长调节物质的MS基础培养液，继续培养7天。
在这个过程中，不断观察培养瓶内的生长情况，确保营养培养液的充足和光照、温度、湿度等环境指标的合理控制。
4.移栽：经过以上三个步骤，非洲菊的切叶组培成功完成。
将培养瓶中的新苗移栽到含有生长调节物质的MS培养基上进行根系生长后定植，观察其生长状况和移栽后的适应能力。
技术要点1.叶片的选择：非洲菊是一种多年生草本植物，因此，宜选择具有健康、无病虫害的植株叶片，且叶片鲜嫩、无伤口的部位进行切割。
切割好的叶片直径不超过0.8cm。
2.消毒：切好的叶片一定要进行消毒，以避免其携带细菌或病毒导致组培失败。
非洲菊切花组培繁苗
非洲菊切花组培繁苗培技术介绍如下：外置体的选取选择品种纯、花色好、无病虫害的健康植株，剪取株体内部新叶（淡黄绿色）。
将叶柄两侧叶片用消毒剪刀剪去，并将其叶柄剪成0.5厘米一段，放入消过毒的三角瓶中待用。
（用叶片或花蕾作外置体也可以）。
培养条件①诱导芽培养基：MS+IBA（0.5至1）；②继代培养基同①；③生根培养基Nb+BA（0.5至1）+IAA（0.5至1），琼脂0.8%至1%，蔗糖3%，pH5.8至6.0；培养温度20℃至22℃，光照强度1500至2000勒克斯，光照时间一天10至12小时。
不定芽诱导及生根培养将三角瓶中备好的外置体，用70%酒精和0.1%干汞进行灭菌消毒，并用无菌水冲洗干净。
在灭菌灯下，分置于盛有培养基①的三角瓶中，培养35天。
当其愈伤组织分化出丛状芽团时，将芽团在无菌条件下切成小块，转置到盛有培养基②的三角瓶中断代增殖一次。
25至30天后当增殖体1至2厘米高时，再切取增殖体0.5至1厘米，将其转置于盛有培养基③的瓶中进行生根培养。
保持室温在22℃，经25至30天培养即可生根。
由诱导、继代增殖到生根，共需90至95天。
炼苗移栽当瓶内苗根长1.5至2厘米时，将苗瓶放置到栽植处3至5天，开瓶使小苗完全适应栽植地环境。
然后将瓶苗移出，洗净根部培养基，按4×3厘米栽于假植床里。
假植床下层为粗沙、中层为筛细的腐殖土、上层为细沙，并用0.2%高锰酸钾消毒。
栽后用微喷法浇透水，前10天湿度保持80%，温度18℃至22℃。
当菊苗长出3至4片叶后，按5×厘米将其移栽到土质疏松肥沃的假植床内。
待苗高10厘米时，按25×20厘米定植，进行正常管理。
从组培到定植，大约需7至8个月时间。
非洲菊的组织培养
非洲菊的组织培养03应生黄炳耀韦生周旋非洲菊为多年生草本植物，传统的繁殖方法为播种或分株繁殖。
但非洲菊种子寿命短、发芽率低，而且播种繁殖变异率很高，难以得到性状一致的种苗，因而不能用于规模生产；而分株繁殖则存在繁殖慢，易退化和传播病害，也不适于现代的大规模生产，因而目前国外一般都采用组织培养的方法来生产种苗。
非洲菊的组培研究在国内已有报道，但均局限于对个别或少数品种的不同外殖体、不定芽诱导率及生长方面的研究，即局限于实验室阶段的研究。
在本项目中，为配合非洲菊种质资源库的建立及在生产中迅速推广非洲菊的优良品种，尽快提高我国非洲菊切花的品质，我们不仅对多达45个非洲菊品种进行了组培快繁，做了研究、比较。
同时，也对组培快繁过程中某些因素对以后大田生产、切花品质及产量的影响进行了探索。
现将结果报告如下：材料与方法1.材料：试验材料为本所从国内外收集的所有非洲菊品种共计45个，取花梗长为1-3cm 的花蕾，切取花托部位作为外殖体。
2.方法：将花梗在0.1％氯化汞溶液中消毒12分钟后取出，用无菌水冲洗7-8次。
切下花托部位并分切为3-5mm小块，放于诱导培养基(MS+BA2mg\L+NAA0.2+IAA0.2)上培养。
置于光照1000lux，温度25±3℃下培养,约10天后切口处形成愈伤组织。
待诱导出的不定芽长至3-4片叶，叶长约3-4cm大小时切下，置于增殖培养基(MS+Kt5+IAA0.2)上，于光照1500-2000lux，温度25±3 ℃下进行增殖培养，周期为20-25天。
将丛芽切成单株芽苗，放于生根培养基(1\2MS+NAA0.1)上进行诱导生根，温度、光照条件与增殖阶段相同。
经过一个月生根培养，将生根苗出瓶移栽到苗床并统计生根率。
试验结果一、非洲菊不定芽的诱导：结果表明，各品种之间产生不定芽的能力差异很大，对四种培养基的反应也不同。
其中"皇后""红粉佳人""胭脂""国王""金边红"在Ｃ培养基上不定芽诱导率最高；"红太阳""黑珍珠""蛋黄""红宝石""灿烂""紫薇"则在Ｂ培养基上诱导率最高；而"龙吐珠"则只在Ｄ培养基上才可诱导出不定芽。
非洲菊组织培养及快繁技术
２ ． 驯 化 与 移 栽 ４
培 养 ， 养 温度 为 （４ ２ ｃ 环 境 湿 度 ６ ％－ ５ 培 ２± ） Ｃ， ５ ８ ％，
光照 强度 １ｏ ～ ｏ ０ ， ５ ０ ２ ０ ｋ 光照 时间 １ ｈ ０。 ２ 培养过 程 ２１ 取材 与消毒 ． 取 非洲 菊花 托用 自来 水 冲洗 ｌ ｈ左 右 ，用 ７ ％ ５
１ 培 养条件
培 养材料 为 花托 ， 养 基为 ： １ 花 托诱 导 增值 培 （） 培养基 ： ＋ 一 Ａ ． ｇＬ Ｎ Ａ ． ｍ ／ （ ） ＭＳ ６ Ｂ ２５ ，＋ Ａ Ｏ２ ｇ ２ 花托分 ｍ ５ Ｌ；
化 培养基 ：／ＭＳ ６ Ｂ ０２ｍ ／；３ １ ２ ＋ 一 Ａ ．５ ｇＬ （ ）生根培 养基 ：
用无 菌水 反复 冲洗 ３ ５次 ， ～ 然后 在 超净 工作 台上 把
外 植 体 切 成 ３ ４块 接 到 预 先 准 备 好 的培 养 基 （ ） ～ １
科 宿根草本花 卉 。 花色 艳 丽多彩 ， 期长 ， 花 产花量 高 ，
是 切花和花盆兼 用 的优 良观 赏花卉 ，以其 独特 的魅 力风 扉全球 。非洲菊 传统 的生产上 常采用 播种 和分 株 繁殖 ， 由于种 子 寿命短 ， 发芽 率低 ， 自然 授粉 的种 子后代 变异大 ， 以保持 原有 品种 的特性 ， 难 而且分 株
水果 型 黄瓜 结果 性 好 ， 长 １ － ５ｍ 时应适 时 瓜 ３ １ｅ
分 批 采收 ， 减轻 植 株负 担 ， 防止植 株 早 衰 ， 高后期 提 果 实质量 。 收的黄瓜 及 时清选 分级 ， 据市场要求 采 根 包装 上市 ， 品质量应 符合 无公 害农产 品的标准 ， 产 注
非洲菊怎么养
非洲菊怎么养非洲菊怎么养非洲菊，菊科，(英文名:Barberton daisy)，别名为太阳花、猩猩菊、日头花等，是多年生草本植物，顶生花序，花色分别有红色、白色、黄色、橙色、紫色等。
以下就是小编做的整理，希望对你们有用。
非洲菊的种植方法：繁殖方式非洲菊多采用组织培养快繁，采用分株法繁殖，每个母株可分5～6小株;播种繁殖用于矮生盆栽型种苗选择苗高11-15cm、4-5片真叶的种苗定植。
优质种苗标准：种苗健壮，叶片油绿，根系发达、须根多、色白，叶片无病斑、虫咬伤缺口和机械损伤。
土壤准备1、土壤耕作和基肥：种植前深耕一次(30-40cm)，将化肥和厩肥(每亩施腐熟厩肥2000kg，5m3腐殖土，过磷酸钙65kg，复合肥50kg)施入土壤后深翻(15-25cm)。
3、土壤消毒：采用甲醛消毒和维博亩等化学药品(暂定)消毒，以40%工业甲醛消毒为例：稀释浓度为1%，均匀喷洒土壤，喷洒后迅速盖好塑料薄膜密闭闷熏，2-3天后揭膜，风干土壤两周后淋水冲洗，再过两周后方可定植。
不同的消毒药品根据使用说明和试验决定。
第一次种植的土壤不必消毒。
采用人工培养土栽培非洲菊可明显提高产量和质量，请参考配方：腐殖质5份;珍珠岩2份;泥炭3份自配培养土进行栽植，但此法生产成本相对较高。
亦可进行大田栽植，应选择至少具有25厘米以上深厚土层适合非洲菊生长的壤土进行定植;定植前应施足基肥，一般每亩施畜牧肥5吨，鸡粪600公斤，过磷酸钙100公斤，草木灰300公斤，有机肥要充分腐熟，所有肥料要和定植床的土壤充分混匀翻耕，做成一垄一沟形式，垄宽40厘米，沟宽30厘米，植株定植于垄上，双行交错栽植，株距25厘米。
栽植时应注意将根茎部位略显露于土壤，防止根基腐烂。
定植后在沟内灌水。
定植定植时间：周年均可定植，但从生产及销售的角度考虑，4-6月份为较理想。
定植方式：每畦种3行，中行与边行交错定植，株距30cm，每平方米定植9-10株，每棚可栽种1100余株。
非洲菊组培快繁技术
２０ 年 ０８
第 １卷 ８
第 １ 期 ３
收稿 日期 ：０ ８ ０ — ２ ２ ０ — ３ １
邺洲 菊 儋 供鬈 技 术
张 天 静 ， 艳 秋 ， 敏 杰 张 孙
（ 宁省经济作物科学研究所 ， 辽 辽宁辽 阳， ０ ０ Ｉ ０ ） Ｉ １ 摘 要： 以非洲菊幼嫩花托 为外植体 ， 采用 ＭＳ作 为基 本培养基 ， 添加 不同生长激素对
诱导 培养成芽丛后 ，将芽切 下进行继 代培养 ，每 ３ 天左右继代一 ０
次， 连续继代增殖至较 大数量时 ， 转至 生根培养基促其生根 。
１ ． 生根 培 养 ．５ ２
１ 材 料 与方 法
１１ 试 验 材 料 ． 供 试 非 洲 菊品 种 为 “ 金 海 岸 ” 黄 色 品 系 ）从 云 南 省 农 科 院 花 卉 所 黄 （ ，
期， 选取无病虫害 的优 良单株上未开放幼嫩花蕾作为外植体 ， 其直径约 １
Ｃ ｍ ｏ
将生根好的瓶苗逐渐开瓶炼 苗 ，使小苗逐渐适应移栽环境 。经过 ５
， 从瓶中取 出生根苗 （ 取出时要 用镊子轻取小苗 ， 注意不要 伤 根） ，置清水中漂清根系所带琼脂 。将生根后的瓶 苗移植在消毒 的草炭 土＋ 蛭石 基质 中（ 质量 比 ２１ 。 ：） 春天是移栽 的最佳季节 ， 温度适宜 ， 照充 光 足 。一星期 内控温保湿 ，白天温度控制在 ２ ℃～ ８℃，相对 湿度 ７ ％ ５ ２ ０ ～ ８ ％， ０ 每天向叶面喷雾 ２ ３ ～ 次。及时喷洒少量 ５ ０ 广谱 杀菌剂 （ ０倍 如多菌 灵 ） 防止杂菌滋生 。一星期后新根逐步生长 ， ， 幼苗基本成活 ， 可用 Ｍ 营 Ｓ
其进行组 织培 养研 究。 结果袁 明 ： 非洲 菊幼 小花托 ＭＳ Ｂ ． ／＋ Ａ ．ｍｇ ＋ Ａ３０ Ｌ Ｎ Ａ０ ／ 乔 ｍｇ ２ Ｌ培
非洲菊优质种苗工厂化快速繁殖技术
非洲菊优质种苗工厂化快速繁殖技术非洲菊（Gerbera amesonii Bolus）系菊科扶郎花属多年生草本花卉，是世界五大切花之一[1]。
近年来，随着国内花卉行业的不断发展，非洲菊种植面积迅速上升，市场需求量与日俱增。
由于规模化生产需要大量的种苗，分株繁殖和播种繁殖受自身条件限制，难以满足大规模生产的需要。
因此，利用非洲菊的优质种苗进行组织培养和快速繁殖已经成为国内相关领域研究的主题[2-7]。
基于多年的工厂化生产实践，笔者对相关问题进行研究和优化，总结了一套非洲菊快速繁殖的有效方法和配套工艺。
1外植体不定芽的诱导1.1外植体选择选择生长势强、健壮、无病虫、品种纯正的健壮植株，剪取花梗长2～5 cm、花序直径0.5～1.0 cm的花蕾作为外植体。
1.2外植体的预处理、消毒与接种采集的外植体先在5～10 ℃低温下保存预处理8～24 h，以降低褐变率，提高诱导率。
消毒：先用75%酒精浸泡30 s，再用0.1%升汞（氯化汞）溶液浸泡12～15 min，最后用无菌水清洗4～6次。
接种：无菌条件下将消毒后的花蕾切为2～4块，接种于诱导不定芽的培养基上，封口、编号。
1.3外植体组织培养将外植体放在温度25 ℃左右、光照强度2 000 lx、每日光照8 h、相对湿度70%～80%的光照培养箱或培养室内培养。
以MS为基本培养基，添加生长调节剂6-BA 7.0～10.0 mg/L+KT 0.1～0.5 mg/L+NAA 0.05～0.10 mg/L，45～60 d诱导培养出不定芽（诱导时间因不同品种而异）。
外植体在初培诱导过程中需每隔5～7 d转接1次，以降低褐变产生的物质对诱导的影响。
2增殖培养2.1增殖培养及培养基配方20～25 d后诱导产生出芽丛后，将芽丛分割进行继代增殖培养，培养基为MS+6-BA 0.3～0.6 mg/L+KT 0.1～0.3 mg/L+NAA 0.01～0.20 mg/L，7～14 d开始形成新芽，21 d新芽增加显著，28 d后芽苗很快老化，影响增殖。
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非洲菊的组织培养快速繁殖技术
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非洲菊为多年生草本植物，传统的繁殖方法为播种或分株繁殖。
但非洲菊种子寿命短、发芽率低，而且播种繁殖变异率很高，难以得到性状一致的种苗，因而不能用于规模生产；而分株繁殖则存在繁殖慢，易退化和传播病害，也不适于现代的大规模生产，因而目前国外一般都采用组织培养的方法来生产种苗。
非洲菊的组培研究在国内已有报道，但均局限于对个别或少数品种的不同外殖体、不定芽诱导率及生长方面的研究，即局限于实验室阶段的研究。
在本项目中，为配合非洲菊种质资源库的建立及在生产中迅速推广非洲菊的优良品种，尽快提高我国非洲菊切花的品质，我们不仅对多达45个非洲菊品种进行了组培快繁，做了研究、比较。
同时，也对组培快繁过程中某些因素对以后大田生产、切花品质及产量的影响进行了探索。
现将结果报告如下：
一、材料与方法
1.材料
试验材料为本所从国内外收集的所有非洲菊品种共计45个，取花梗长为1-3cm的花蕾，切取花托部位作为外殖体。
2.方法
将花梗在0.1％氯化汞溶液中消毒12分钟后取出，用无菌水冲洗7-8次。
切下花托部位并分切为3-5mm小块，放于诱导培养基上培养。
置于光照1000lux，温度25±3℃下培养。
待诱导出的不定芽长至3-4片叶，叶长约3-4cm大小时切下，置于增殖培养基上，于光照1500-2000lux，温度25±3 ℃下进行增殖培养，周期为20-25天。
将丛芽切成单株芽苗，放于生根培养基上进行诱导生根，温度、光照条件与增殖阶段相同。
经过一个月生根培养，将生根苗出瓶移栽到苗床并统计生根率。
二、试验结果
（一）非洲菊不定芽的诱导
结果表明，各品种之间产生不定芽的能力差异很大，对四种培养基的反应也不同。
其中"皇后""红粉佳人""胭脂""国王""金边红"在C培养基上不定芽诱导率最高；"红太阳""黑珍珠""蛋黄""红宝石""灿烂""紫薇"则在B培养基上诱导率最高；而"龙吐珠"则只在D培养基上才可诱导出不定芽。
（二）非洲菊的增殖培养
结果显示，各个品种之间在增殖的速度上存在显著差异。
但在试验范围内，随BA浓度的提高，增殖速度相应提高。
但在较高的BA浓度条件下芽苗会变细、变弱，且随BA浓度进一步提高，芽苗变得更加丛生、细弱。
根据这种情况，生产中在努力提高芽苗增殖率的同时，还应保证分生芽苗的健壮。
根据品种不同, 一般把增殖率控制在2.5 -5.0之间。
（三）增殖培养中BA浓度对大田栽培的影响
本项试验中，采用增殖速度中等的"红宝石"品种进行试验。
结果表明，在BA浓度为0.5ppm以下时，除增殖率随BA 浓度增加而显著提高外，其余各项指标均无显著差异。
而在BA浓度为1.0PPM及2.0PPM时，除增殖速度比BA浓度为0.25ppm时成倍增加外，试管苗还表现出细弱、矮化和脆化等现象，这些现象在BA2.0PPM时更加明显。
同时生根率及移栽成活率也随BA浓度增加略有降低。
这些在高浓度BA培养基上连续增殖15代以上的试管苗，移栽到大田后表现出旺盛的分孽力，叶短而多，同时切花产量明显降低，且花茎细而矮，花朵明显小于正常种苗。
其中在BA2.0ppm的培养基中增殖的试管苗尤为突出。
说明过高的BA 浓度不仅会影响试管苗本身的质量，还会严重影响大田生产的切花的产量和品质。
对生产中其它品种的观察也可得出同样结论。
（四）增殖代数对繁殖速度及大田栽培的影响
该项试验所用品种仍为"红宝石"。
从所示结果可以看出，增殖速度随着增殖代数的增加有明显提高。
增殖到第30代时繁殖速度分别比第20代和第10代时提高7％和20％。
这种随增殖代数增加而产生的培养材料对植物激素的依赖性减小的"驯化"现象在其它植物的组培中也有发现。
试验中，在增殖30代以内虽然增殖速度有较显著提高，但对试管苗的质量，如试管苗的健壮与否、生根率及以后的大田生产中切花的质量和产量均无显著影响。
（五）生根及移栽结果
非洲菊试管苗大部分品种均易诱导生根。
经25-30 天的生根培养，所有试验品种只有"鸿运"生根率低于70-80％，尚有待提高，其余品种的生根率均可达到90％以上，且平均每苗生根都在2.5 条以上。
将生根苗洗净根部附着物，移入苗床。
一周内保持遮光80％和适当的湿度。
一周后，适当增加光照，且每周淋一次无机液肥。
在这种条件下，一般成活率均可达到85％以上。
三、讨论
1.各品种间由花托诱导出不定芽的能力差异很大，品种间对激素种类和激素浓度的需求也有很大差异。
因此为了获得较高的不定芽诱导率，需要对激素的种类和水平作更广泛的试验。
2.由花托直接诱导出芽，同时将增殖培养基中激素水平和增殖速度控制在适当的水平，在增殖30代以内，非洲菊试管苗的总变异率均未超过2％。
此外，在保持相对低浓度的细胞分裂素水平的情况下，增殖30代以内的试管苗，移栽到大田后表现良好，没有明显的退化现象。
表明该技术既可达到快速繁殖的目的，又可保证种苗的质量，可满足现代化大规模生产的需要。
但更高代数的试管苗的相应表现还有待进一步观察。
3.组培快繁过程中植物激素特别是细胞分裂素浓度对以后大田生产的影响很大，当激素浓度过高时，会导致分孽太多，降低切花的产量和质量。
因此，在组培快繁过程中，应避免细胞分裂素浓度过高。
4.通过对非洲菊组织培养技术的研究，不但将我所所有45个品种都建立了组培快繁体系, 随时为社会提供大批量的优质种苗，创造一定的经济效益；还可配合种质资源库的建立及良种繁育，把引进及自育最新优良品种及时、快速地推广到生产中去有利于迅速提高我国非洲菊切花品质。
而组培快繁过程中的某些因素对以后大田生产的切花品质及产量的影响的研究结果，对完善非洲菊的试管苗生产技术，保证试管苗质量，促进非洲菊的规模化、产业化生产具有重要意义。