植物组织培养步骤
植物组织培养操作流程
初代培养步骤（以百合为例）
前期准备：
1、冲洗：先将百合球根掰成鳞片，之后将鳞片表面清洗干净，并筛选可用鳞片（无斑点，无霉，无腐烂）。
将清洗好的鳞片装入网袋中置于自来水下冲洗2-3小时（网袋可放于大烧杯中）。
之后根据实验操作人数分瓶，放于烧杯中（500ml烧杯）。
2、实验药剂：75%酒精，0.1%升汞，蒸馏水（4个培养瓶以上），用量均以鳞片数量为准（使液面漫过鳞片），以及若干培养基和烧杯。
3、消毒：将实验材料和药剂放入操作室中的操作台上，之后将操作台电源开启，打开高温灭菌器，并将紫外灭菌灯打开，关闭操作台的玻璃窗。
之后将储藏室玻璃门关闭，退出操作室，打开操作室紫外灭菌灯。
紫外灯光15分钟后，进入操作室将操作台通风设备开启，再打开玻璃窗（微微抬起15-20cm），通风10分钟。
实验操作：
通风结束后，开始操作。
首先将盛放鳞片的烧杯口内壁四周喷一些酒精，之后再向其倒入75%酒精（漫过鳞片），摇晃30s，再用蒸馏水洗1-2次。
废液倒入事先准备好的大烧杯（1000ml）中。
之后再倒入0.1%升汞（漫过鳞片），摇晃20min。
之后用蒸馏水洗3-4次，废液倒入大烧杯中。
之后进行鳞片处理，从烧杯中取出少量鳞片放于培养皿中操作，一般是将鳞片横切一刀，切口向下插入培养基中。
后期处理：
将装好的培养基放于暗处，定期查看。
植物的组织培养方法
植物的组织培养方法植物组织培养是一种无性繁殖技术，通过培养植物的各种器官组织，包括种子、茎、叶和根的细胞和组织，使其在适当的条件下进行生长和分化，从而产生新的植株。
这项技术已被广泛应用于农业、园艺、林业和植物学研究中。
以下是植物组织培养的一般步骤和方法：1. 材料准备：首先，选择适合的植物作为材料，常用的包括水果、蔬菜和花卉植物。
收集新鲜的种子、茎、叶或根，并进行消毒处理，以防止细菌、真菌和其他病原体的污染。
2. 植物组织的分离：将植物材料切成小块或将细胞分离开来。
对于植物的种子，可以直接将种子表面进行消毒处理后，在培养基上进行培养；对于茎、叶和根等组织，则需要进行切割处理。
3. 培养基的准备：制备适当的培养基是进行植物组织培养的重要步骤。
培养基通常由无机盐和有机添加剂组成，以提供植物生长所需的营养物质。
根据组织的不同类型，可以使用不同种类和浓度的培养基。
4. 培养基的调整：将分离的组织放入培养基上，可以将培养基涂覆在组织表面上，或者将组织植入培养基中。
然后，在无细菌的条件下，将组织培养在适当的温度、湿度和光照条件下。
5. 激素的添加：植物生长激素是控制植物生长和分化的关键因素。
在组织培养中，可以根据实验的需要添加适量的激素来促进细胞分裂和分化。
常用的激素有生长素、细胞分裂素和愈伤组织生成素等。
6. 愈伤组织的诱导：愈伤组织是植物组织培养中产生的一种可分化细胞。
通过搅拌、震荡或辐射等途径，诱导组织分化成愈伤组织，然后将其继续培养。
7. 植株的再生：通过培养基中激素的平衡调节，可以使愈伤组织再生为整个植株。
在培养基中，植株的幼苗养分丰富，需要的培养基成分和激素浓度可能与之前的不同。
8. 培养环境的控制：为了使植物组织正常生长和分化，需要控制培养环境的参数。
例如，可以调节培养基的pH值、光照强度、温度和湿度等因素。
9. 组织转化：经过培养，植物组织中可以引入外源基因，使其具有某种特定的性状，这被称为转基因。
植物组织培养流程图及注意事项
5.培养：放在合适的环境里，温度、光照、湿度都得控制好哇！
6.观察和记录：要时刻盯着，看看有没有啥异常情况，及时做好记录哟！
接下来讲讲注意事项哈！
1.无菌操作：这可是重中之重呢！任何一个环节都不能让细菌病毒钻空子呀！
2.培养基配方：哎呀呀，配方得合适，营养不均衡可不行！
9.仪器设备清洁：用完的仪器得洗干净消毒好，为ห้องสมุดไป่ตู้一次使用做好准备哦！
10.人员培训：操作人员得经过专业培训，不然容易出错哟！
怎么样，这些流程图和注意事项是不是很重要呀？希望能对您有所帮助哇！
3.外植体来源：得保证来源可靠，质量过关呀！
4.培养条件控制：温度不能高也不能低，光照时间和强度都得恰到好处，你说难不难？
5.防止污染：哇，一旦污染了，那可就前功尽弃啦！
6.定期观察：可别偷懒，要经常看看植物的生长情况，及时调整条件呢！
7.操作规范：每个步骤都得按照标准来，不能随心所欲哟！
8.材料处理：处理外植体的时候，手法要熟练，不能损伤了它们呀！
植物组织培养流程图及注意事项
嘿呀！以下就是植物组织培养的流程图及注意事项啦！
首先咱们来说说流程图哈！
1.准备阶段：哎呀呀，这可得把各种器具都准备齐全呢！像培养皿、培养基、消毒工具等等，一个都不能少呀！
2.外植体选取：哇，这可重要啦！得挑那些健康、无病害的部位，你说是不是？
3.消毒处理：这一步可不能马虎哟！要用合适的消毒剂，把外植体好好消消毒，不然细菌病毒啥的可就捣乱啦！
植物组织培养的核心步骤
植物组织培养的核心步骤
植物组织培养的核心步骤主要包括外植体的脱分化和再分化。
1. 外植体的脱分化形成愈伤组织。
在这个过程中，植物细胞会失去原有的组织结构和功能，转变为具有分生能力的细胞，进而形成愈伤组织。
2. 愈伤组织再分化形成胚状体。
在愈伤组织的基础上，通过调节培养基中的激素比例和其他环境因素，可以诱导愈伤组织分化成具有特定形态和功能的胚状体，这是植物组织培养中的关键步骤之一。
此外，植物组织培养还包括固体培养法和液体培养法等不同的培养方法。
固体培养法使用琼脂固化培养基来培养植物材料，而液体培养法则使用不加固化剂的液体培养基。
液体培养法中，通常需要通过搅动或振动培养液以确保氧气的供给。
以上信息仅供参考，如有需要，建议查阅植物组织培养相关文献或咨询植物学家。
植物组织培养流程
植物组织培养流程植物组织培养是一种现代生物技术，可以在无菌条件下培育植物细胞、组织和器官，并通过一系列的培养基、营养物质和激素的配比和控制来使其生长和分化。
植物组织培养可以用于诸如植物繁殖、育种、生物工程和医药等领域。
下面将介绍植物组织培养的流程。
1. 材料选择：选择需要进行组织培养的植物，并对其进行表面消毒。
一般使用70%的酒精或0.1%的次氯酸钠溶液进行消毒。
2. 组织切割：将刚刚消毒后的植物进行组织切割，取出需要进行培养的部分。
切割时要保证无菌状态。
3. 组织处理：将组织进行处理，一般包括细胞壁水解、组织分离、细胞质提取等步骤，使其适合于培养环境。
4. 培养基：选择适合植物生长的培养基，将其配置好并灭菌。
5. 组织培养：将处理好的组织放置到培养基上，放入培养箱或恒温摇床中进行培养。
在此期间，需要注意控制温度、光照、湿度、通气等条件，以满足植物的不同发育阶段需求。
6. 营养物质添加：在不同的培养阶段，需添加不同种类的营养物质和激素来促进植物的生长和分化。
如添加生长素可以促进根系的发育，添加脱落酸可以促进芽的形成等。
7. 器官诱导：在组织培养的过程中，不同的培养基和添加的营养物质和激素可以诱导植物形成不同的器官，如根、茎、叶、花等。
这可以用于植物繁殖、育种和生物工程等领域。
8. 转化：在植物组织培养的基础上，可以通过基因转化技术来将外源基因导入植物细胞中，从而实现基因工程和医药等领域的应用。
总之，植物组织培养是一种非常重要的生物技术，可以用于植物繁殖、育种、生物工程和医药等领域。
在进行组织培养的过程中，需要注意控制温度、光照、湿度、通气等条件，并根据植物不同的发育阶段，添加适合的营养物质和激素。
同时，还可以通过器官诱导和转化等技术来实现植物的功能扩展。
植物组织培养设计方案
植物组织培养设计方案植物组织培养是指在无菌条件下，利用植物组织的分裂与增殖能力，通过培养基的营养供应和激素的调控，使植物组织在体外生长和繁殖的技术。
其目的是快速繁殖、改良和培育优良品种的植株。
以下是一种基于组织培养的设计方案。
一、实验目的本实验旨在通过植物组织培养技术，研究植物愈伤组织的诱导和增殖条件，以期实现快速繁殖和培育优良品种的目的。
二、实验材料和仪器1.实验材料：植物组织外植体（如茎段、叶片等）；MS培养基（含植物生长素和激素）；蔗糖、琼脂、无菌水等。
2.实验仪器：无菌工作台、培养箱、显微镜、天平、恒温水浴器等。
三、实验步骤1.无菌处理：将实验材料的外植体进行无菌处理，去除外界的微生物污染。
首先，在无菌条件下，进行消毒处理，常用消毒剂为70%酒精或过氧化氢；然后，对外植体进行表面消毒，常用浸泡过氧化氢或次氯酸钠溶液进行处理；最后，在无菌条件下，进行洗涤，用干燥的无菌棉纸吸干多余的溶液。
2. 骨干培养基配制：根据原料的组成，配制适宜的骨干培养基。
常用的骨干培养基是Murashige和Skoog培养基（简称MS培养基），其中含有必需的无机盐、有机物和其他辅助物质。
3.愈伤组织诱导：将外植体放置在含有适当激素的MS培养基中，以诱导植物组织的增殖。
一般而言，气体激素如生长素（IAA）、激动素（NAA）和细胞分裂素（BA）等，能够促进植物组织的分裂与增殖。
4.愈伤组织转接：将完成诱导的愈伤组织从MS培养基中转移到新的MS培养基上，以促进组织的进一步分裂和生长。
将愈伤组织转移到含有较高激素浓度的培养基中，能够提高组织增殖的速度。
5.愈伤组织分化：在转接的培养基上，通过调节培养基的激素浓度，将愈伤组织分化为不同的细胞和组织类型，如根、茎和叶等。
6.幼苗培养：将完成分化的组织培养在不含激素的MS培养基上，使其进一步生长和发育。
在培养的过程中，观察和记录植株的生长状况。
四、实验结果分析通过上述的植物组织培养的实验过程和步骤，可以获得大量繁殖的植株，从而达到快速繁殖和培育优良品种的目的。
植物组织培养技术的过程
植物组织培养技术的过程一、材料准备在进行植物组织培养前，首先需要准备培养基、植物材料和培养器具等。
培养基是植物生长和发育所需的营养物质，通常包括无机盐、有机物、植物生长激素和固化剂等。
植物材料可以是植物的种子、茎段、叶片等，要选择健康、无病虫害的材料。
培养器具要进行高温高压灭菌，以确保无菌条件。
二、无菌处理植物组织培养必须在无菌条件下进行，以防止外来微生物的污染。
无菌处理包括无菌操作台的准备、培养器具的灭菌和植物材料的表面消毒。
无菌操作台是一个密闭的工作区域，通过高效的过滤器和紫外线杀菌灯来保持无菌环境。
培养器具可以通过高温高压灭菌或化学消毒的方式进行无菌处理。
植物材料的表面消毒可以用漂白粉或酒精进行处理。
三、外植体切割外植体是指植物体中用于培养的组织或细胞，可以是茎段、叶片、花药等。
外植体切割是将植物材料切割成适当大小的片段，以便于培养和繁殖。
切割时要注意保持无菌操作，避免污染。
四、培养基配置培养基的配制是植物组织培养的关键步骤之一。
根据不同的培养目的和植物材料的特性，可以选择不同类型的培养基配方。
常用的培养基有MS培养基、B5培养基等。
在配制培养基时，要按照一定的比例将无机盐、有机物、植物生长激素和固化剂等加入到蒸馏水中，并进行搅拌和调pH值。
五、组织培养组织培养是将外植体培养在含有适当营养物质的培养基上，通过调控培养基中植物生长激素的浓度和比例，促进外植体的生长和分化。
培养过程中要注意控制培养基的温度、光照和湿度等环境因素，以及培养器具的无菌操作。
培养时间的长短和外植体的生长状态有关，通常需要数周至数个月的时间。
六、分化和增殖在组织培养过程中，外植体会经历分化和增殖的过程。
分化是指外植体的细胞在培养基中逐渐发育成不同的组织和器官，如根、茎、叶等。
增殖是指外植体的细胞在培养基中不断分裂和增殖，形成新的植株。
分化和增殖的过程可以通过调控培养基中植物生长激素的浓度和比例来实现。
七、移栽和生根当外植体在培养基上分化和增殖到一定程度后，可以进行移栽和生根。
植物组织培养的方法
植物组织培养的方法植物组织培养（Plant tissue culture）是指利用无菌条件下培养植物细胞或组织，以实现繁殖、繁育新品种、生物合成化合物、环境污染处理等目的的技术。
其不仅可以大幅度提高植物材料的品质和数量，还可以在无限制地产生同一种植物。
方法一：赤潮法（Embryogenesis）这一方法是利用赤潮细胞发生器官（如胚性板）的细胞分化，诱导植物组织的胚胎发生，进而实现植物再生。
该方法适用于很多种植物，如玉米、大麦、水稻等。
步骤为：1. 准备培养基：含有赤潮素、氨基酸、维生素、植物激素和适当的糖类和盐类的基础培养基。
2. 处理材料：将植物的姿态板或种子材料在高温（35-40C）下进行消毒，使其无菌。
3. 材料分离：将消毒材料放入无菌条件下进行材料分离。
4. 培养细胞：将细胞或组织放入含有培养基的无菌培养皿中，保持恒定的温度、湿度和光照条件，促进发生素感应化。
5. 发生胚胎体：促进胚胎形成，通过培养发生胚胎胶囊或胚胎体。
6. 块茎冷藏：利用低温存储胚胎体或胚胎胶囊。
方法二：组织培养（Organogenesis）组织培养方法是通过培养植物的基本组织如叶片、茎尖、芽分根进而再生整个植株。
步骤为：1. 材料处理：对种子或植株进行表层消毒处理。
2. 制备组织片：将消毒好的植株切成组织片段，如茎尖、叶片等。
3. 培养基准备：准备无菌的培养基，其中含有植物的必需胰凡陈列如糖类、氨基酸、维生素、生长因子和植物激素等。
4. 组织分化：将组织片段放入含有培养基的培养皿中，使其分化成根、茎、叶等。
5. 干涸与移栽：将培养的加上适量水后，移栽到含有生长素适量的培养基中，促进植物以正常生长的形式营养。
方法三：悬浮细胞培养（Suspension Culture）在此方法中，使用悬浮培养细胞进行植物细胞或组织的生物合成和生物转化。
步骤为：1. 培养基准备：通常使用植物基础培养基加入氨基酸、维生素和植物激素等。
2. 细胞处理：将细胞分散在含有培养基的匀浆器中，使其悬浮在培养基中。
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文档素材 文档素材 植物组织培养概念〔广义〕又叫离体培养，指从植物体别离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工操纵条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。 植物组织培养概念〔狭义〕指用植物各局部组织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
组织培养的步骤 一、培养基配制 配制培养基有两种方法可以选择，一是购置培养基中全部化学药品，按照需要自己配制；二是购置商品的混合好的培养基根本成分粉剂，如MS、B5等。 自己配制可以节约费用，但浪费时间、人力、且有时由于药品的质量问题，给实验带来麻烦。就目前国内的情况看，大局部还是自己配制。为了方便起见，现以MS培养基为例介绍配置培养基的主要过程。 1、配制几种母液 〔1〕配制MS大量元素母液 一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。 分别称取 NH4NO3 165g KH2PO4 17g KNO3 190g CaCl2·2H2O 44g MgSO4·7H2O 37g 各自配成1L的母液。倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 〔2〕配制MS微量元素母液 一般将微量元素配制成100倍母液。 依次称取 KI 0.083g Na2MoO4·2H2O 0.025g H3BO3 0.62g CuSO4·5H2O 0.0025g MnSO4·H2O 1.69g CoCl2·6H2O 0.0025g ZnSO4·7H2O 0.86g 配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O 由于称取量很小，如果天平精确度没有到达万分之一，可先配成调整液。 分别称取 CuSO4·5H2O 0.05g CoCl2·6H2O 0.05g 各自配成100ml的调整液，然后取5ml就还有0.0025g的量。 〔3〕配制MS有机母液 文档素材 文档素材 一般配制成100倍MS有机母液。 依次称取 肌醇 10g 盐酸硫胺素〔VB1〕 0.01g 烟酸 0.05g 甘氨酸 0.2g 盐酸吡哆醇〔VB6〕 0.05g 配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 〔4〕配制MS铁盐母液 一般配制成100倍MS铁盐母液。 依次称取 EDTA二钠 3.73g FeSO4·7H2O 2.78g 配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 所以MS母液有5种大量元素母液，加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐母液，共8种母液。 激素母液的配制 各种生长素和细胞分裂素要单独配制，不能混合在一起，生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的NaOH溶化，细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶化，然后再加蒸馏水定容。一般取100mg配成100ml母液。 2、配制培养基 以配置1L MS培养基为例，按顺序进行如下操作： 〔1〕先在烧杯中放入一些蒸馏水。 〔2〕分别取上面八种母液10ml倒入。 〔3〕一般称取30g蔗糖倒入，搅拌溶化。 〔4〕加蒸馏水用量筒定溶至1L。 〔5〕按设计好的方案添加各种激素，由于激素的用量很小，而且激素对组培植物的生长至关重要。所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取，减少误差。 〔6〕用周密试纸或酸度计调整PH至5.7-5.8。〔有条件的话使用酸度计，比拟精确〕 可配1当量的HCL和1当量的NaOH用来调溶液PH值。 1当量HCL配制：用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。 1当量NaOH配制：称取NaOH 4g 配成100ml溶液。 〔7〕称取5g左右琼脂粉〔质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中，放在电炉上加热至沸腾，直到琼脂粉熔化。 〔8〕略微冷却后，分装入培养容器中。无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口，用橡皮筋或绳子扎紧。 〔9〕放入消毒灭菌锅灭菌，灭菌20分钟左右。 〔10〕灭菌后从灭菌锅中取出培养基，平放在实验台上令其冷却凝固。
二、灭菌 文档素材 文档素材 灭菌是组织培养重要的工作之一。初学者要清楚有菌和无菌的范畴。有菌的范畴是：但凡暴露在空气中的物体，接触自然水源的物体，至少它的外表都是有菌的。依此观点，无菌室等未处理的地方、超净台的外表、简单煮沸的培养基、我们使用的刀、剪在未处理之前、我们身体的整个外表及与外界相连的内表，如整个消化道、呼吸道，即我们呼出的气体、培养容器无论洗得多干净等等都是有菌的。 这里所指的菌，包含细菌、真菌、放线菌、藻类及其他微生物。菌的特点是：极小，肉眼看不见。无处不在，无时不有，无孔不入。在自然条件下忍耐力强，生活条件要求简单，繁殖力极强，条件适宜时便可大量滋生。 无菌的范畴是：经高温灼烧或肯定时间蒸煮过后的物体，经其他物理或化学的灭菌方法处理后的物体〔当然这些方法必须已经证明是有效的〕，高层大气、岩石内部、健康的动、植物的不与外部接触的组织内部，强酸强碱，化学元素灭菌剂等外表和内部都是无菌的。从以上可以看出：在地球外表无菌世界要比有菌世界小的多。 灭菌是指用物理或化学的方法，杀死物体外表和孔隙内的一切微生物或生物体，即把全部生命的物质全部杀死。与此相关的一个概念是消毒，它指杀死、排除或充分抑制局部微生物，使之不再发生危害作用，显然经过消毒，许多细菌芽孢、霉菌厚垣孢子等不会完全杀死，即由于在消毒后的环境里和物品上还有活着的微生物，所以通过严格灭菌的操作空间〔接种、超净台等〕和使用的器皿，以及操作者的衣着和手都不带任何活着的微生物。在这样的条件下进行的操作，就叫做无菌操作。 植物组织培养对无菌条件的要求是非常严格的，甚至超过微生物的培养要求，这是因为培养基含有丰富的营养，稍不小心就引起杂菌污染。要到达彻底灭菌的目的，必须依据不同的对象采取不同的切实有效的方法灭菌，才能保证培养时不受杂菌的影响，使试管苗能正常生长。 常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类，即：物理方法如干热〔烘烧和灼烧〕、湿热〔常压或高压蒸煮〕、射线处理〔紫外线、超声波、微波〕、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施；化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要依据工作中的不同材料不同目的适中选用。 1、培养基用湿热灭菌 培养基在制备后的24小时内完成灭菌工序。高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。 注意完全排解锅内空气，使锅内全部是水蒸气，灭菌才能彻底。高压灭菌放气有几种不同的做法，但目的都是要排净空气，使锅内均匀升温，文档素材 文档素材 保证灭菌彻底。常用方法是：关闭放气阀，通电后，待压力上升到0.05MPa时，打放开气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。 关阀再通电后，压力表上升到达0.1MPa时，开始计时，维持压力0.1-0.15MPa，20分钟。 按容器大小不同，保压时间有所不同，见表。该表所列数字是彻底灭菌很保险的数字，如果容器体积较大，但是放置的数量很少，也可以减少时间。
三、接种 接种时由于有一个敞口的过程，所以是极易引起污染的时期，这一时期主要由空气中的细菌和工作人员本身引起，接种室要严格进行空间消毒。接种室内保持定期用1%-3%的高锰酸钾溶液对设备、墙壁、地板等进行搽洗。除了使用前用紫外线和甲醛灭菌外，还可在使用期间用70%的酒精或3%的来苏儿喷雾，使空气中灰尘颗粒沉降下来。无菌操作可按以下步骤进行： 〔1〕在接种4小时前用甲醛熏蒸接种室，并翻开其内紫外线灯进行杀菌； 〔2〕在接种前20分钟，翻开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯； 〔3〕接种员先洗净双手，在缓冲间换好专用实验服，并换穿拖鞋等； 〔4〕上工作台后，用酒精棉球搽拭双手，特别是指甲处。然后搽拭工作台面； 〔5〕先用酒精棉球搽拭接种工具，再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍，然后反复过火尖端处，对培养皿要过火烤干； 〔6〕接种时，接种员双手不能离开工作台，不能说话、走动和咳嗽等； 〔7〕接种完毕后要清理干净工作台，可用紫外线灯灭菌30分钟，假设连续接种，每5天要大强度灭菌一次。 接种是将已消毒好的根、茎、叶等离体器官，经切割或剪裁成小段或小块，放入培养基的过程。现将接种前后的程序连贯地介绍。 无菌接种步骤： 〔1〕将初步洗涤及切割的材料放入烧杯，带入超净台上，用消毒剂灭菌，再用无菌水冲洗，最后沥去水分，取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上。 〔2〕材料吸干后，一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀，对材料进行适当的切割。如叶片切成0.5cm平方的小块；茎切成含有一个节的小段。微茎尖要剥成只含1-2片幼叶的茎尖大小等。在接种过程中要经常灼烧接种器械，预防交叉污染。 〔3〕用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上。具体操作过程〔以试管为例〕是：先解开包口纸，将试管几乎水平拿着，使试管口靠近酒精灯火焰，并将管口在火焰上方转动，使管口里外灼烧数