体内药物分析-生物样品与样品制备(2)
体内药物分析第2章生物样品与生物样品制备在线测试及答案
《体内药物分析》第04章在线测试《体内药物分析》第04章在线测试剩余时间：53:57答题须知：1、本卷满分20分。
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第一题、单项选择题（每题1分，5道题共5分）1、比色法虽具有快速简便、对仪器要求不高等特点。
但灵敏度不高，A、只能测定出10ug/ml浓度以上的样品B、只能测定出1ug/ml浓度以上的样品C、只能测定出5ug/ml浓度以上的样品D、只能测定出ml浓度以上的样品2、荧光分光光度法的灵敏度可达A、1g/mlB、1pg/mlC、1ng/mlD、1mg/ml3、虽具有荧光的物质数量不多但体内许多重要的生化物质、药物及其代谢物或致癌物都有荧光现象。
由于荧光衍生物试剂的使用，扩大了( )在体内药物分析和药物动力学的应用。
A、荧光分光光度法B、紫外分光光度法C、红外分光光度法D、可见分光光度法4、在规定条件下同一个均匀样品，经过多次取样测定所得结果彼此接近的程度A、精密度B、专属性C、检测限D、准确度5、多种组分共存时，分析方法能准确测定出被测物的能力A、精密度B、准确度C、检测限D、专属性第二题、多项选择题（每题2分，5道题共10分）1、光谱分析法约占应用血药浓度测定方法总数的1/3，主要有A、比色法B、紫外分光光度法C、荧光分光光度法D、远红外分光光度法E、免疫分析法2、由于受到体液中内源性杂质的干扰和影响。
故紫外分光光度法在体内药物分析中也受到（）的限制。
A、灵敏度B、准确度C、专一性D、精密度E、回收率3、紫外分光光度法常采用( )，可以提高方法的灵敏度和选择性。
A、三波长分光光度法B、差示分光光度法C、导数分光光度法、D、双波长E、红外分光光度法4、常用相关系数r表示两种分析方法A、相关系数r表示r＝0表示两法完全不相干B、一般要求两法的相关系数r≥，两法基本相干，C、相关系数r＝1两法完全吻合D、相关系数r越接近1说明两种方法越相关E、没有可比性5、体内药物分析方法设立与建立的一般步骤A、以纯品进行测定B、以处理过的空白样品进行测定C、体内实际样品测定D、体外试验E、回收率的测定第三题、判断题（每题1分，5道题共5分）1、体内药物分析方法的评价比常规的药物分析要求更严正确错误2、荧光分光光度法在体内药物分析中应用比紫外分光光度法更灵敏正确错误3、由于体内药物分析方法影响因素较多,文献报道的方法一般不易完全重现正确错误4、考察分析方法的稳定性是指药物的稳定性正确错误5、常用相关系数r＝1表示两种分析方法完全不相干正确错误交卷。
体内药物分析第三章生物样品与样品制备
建立完善的数据记录与审核制度，确保实验数据的真实性和可追溯性。
效果评价指标设定和持续改进方向
效果评价指标
根据实验目的和要求，设定合理的效果评价指标，如方法回收率、精密度、准确度等，对实验结果进 行客观评价。
持续改进方向
针对实验过程中出现的问题和不足，制定改进措施并持续改进，如优化实验条件、改进操作方法、提 高设备性能等，不断提高体内药物分析的质量和效率。同时，关注新技术、新方法的发展和应用，不 断完善和更新质量保证和质量控制体系。
质量控制样品的使用
使用质量控制样品进行方法验证和日常质量监控，确保实验结果的准 确性和可靠性。
质量控制方法选择及实施过程监控
方法学验证
在建立新的体内药物分析方法时，应进行充分的方法学验证，包括专属性、线性、精密度、准确 度、稳定性等方面的考察，确保方法的可行性和准确性。
过程监控
在实验过程中，采用定期抽查、盲样测试等方式对实验过程进行监控，确保实验操作的规范性和 结果的可靠性。
04 生物样品保存、运输和接 收标准操作流程
保存条件及时限设定原则
保存条件
生物样品应在规定的低温条件下保存，以确保样品的稳定性和防止降解。通常，血浆、血清和尿液等样品应在20°C或更低温度下保存，而一些特殊样品可能需要在-70°C或更低温度下保存。
时限设定
生物样品的保存时限应根据其稳定性和分析物的性质来确定。一般来说，长期保存的样品应在采集后尽快处理并 冻存，以避免分析物的降解或转化。同时，应定期对保存样品进行质量评估，以确保其完整性和可用性。
新型生物样品的保 存与运输
对于细胞和基因等新型生物样 品，同样需要在低温条件下保 存和运输。此外，还应避免反 复冻融和长时间存放，以确保 样品的稳定性和可靠性。
体内药物分析
第一节 体内药物分析的目的和意义
1、生物样本分析方法的建立 2、生物样本的测定
3、药物的体内研究评价
第一节 体内药物分析的目的和意义
给药方案与效应关系
给药
药代动力学
药物
ADME
药效学
药物效 应与不 良反应
药物进入机体后，产生的两种不同的效应。
体内药物分析概述
二、体内药物分析的对象
临床人体 试验
(clinical）
非临床动 物试验 (preclinical
血液
药物代 谢物
尿液
常用样 本种类
唾液
头发
粪便
体内药物分析概述
三、体内药物分析特点
➢ 干扰物质多，内源性物质多，与药物有结合、缀合，需 经过分离、纯化。
➢ 样品浓度低，测定前需浓缩、富集。 ➢ 取样量少 ➢ 工作量大 ➢ 对仪器设备要求高（如需要样本冷贮、萃取、离心、富
特点
优缺点
• 优点: 样本易得，样品量 大; 尿液中药物浓度较高， 易于检测；无需去蛋白处 理。
• 缺点: 易受食物种类、饮 水多少、排汗情况等的影 响，个体差异常常很大。
• 直接测定，萃取 分离测定
• 采用化学方法或 酶解法游离缀合 状态药物。
尿样的 尿样的 制备 采集
• 自然排尿法
• 随时尿、晨尿、白天 尿、夜间尿、及特定 时间段尿液。
阐明药物在体内ADME过程和 特点，提供药动学参数，揭示 药物在体内动态变化的规律性
阐明代谢物的结构、转化途径 及其动力学
为药效学和毒理学评价提供重 要的线索
目的
药物研发过程中的体内药物试验和分析
体外PK/PD 动物PK/PD
毒性
《体内药物分析》试题答案
《体内药物分析》试题答案一、选择题1. 下列哪种药物分析方法属于体内药物分析范畴？（D）A. 高效液相色谱法B. 气相色谱法C. 液相色谱-质谱联用法D. 生物样品分析法答案：D解析：体内药物分析主要关注生物样品中的药物及其代谢产物分析，因此生物样品分析法属于体内药物分析范畴。
2. 下列哪种生物样品最适合进行体内药物分析？（C）A. 血液B. 尿液C. 唾液D. 胃液答案：C解析：唾液中药物浓度与血液中药物浓度有一定的相关性，且取样方便、无创，因此唾液是最适合进行体内药物分析的生物样品。
二、填空题1. 体内药物分析的基本步骤包括：取样、__________、__________、__________。
答案：样品处理、药物提取、分析方法选择、数据分析2. 体内药物分析中常用的生物样品有：__________、__________、__________、__________。
答案：血液、尿液、唾液、胆汁三、判断题1. 体内药物分析中，生物样品的取样时间对分析结果有较大影响。
（√）解析：生物样品的取样时间直接关系到药物在体内的浓度，因此对分析结果有较大影响。
2. 液相色谱-质谱联用法在体内药物分析中具有较高的灵敏度和准确度。
（√）解析：液相色谱-质谱联用法结合了液相色谱的高分离效能和质谱的高灵敏度和准确度，是体内药物分析中常用的方法。
四、简答题1. 简述体内药物分析的目的和意义。
答案：体内药物分析的目的是通过分析生物样品中的药物及其代谢产物，了解药物在体内的动态变化规律，为药物研发、临床用药、药效评价和药物安全性评价提供科学依据。
其意义在于：（1）有助于了解药物的药效学和药动学特性，为药物研发提供重要依据。
（2）有助于监测临床用药过程中的药物浓度，指导合理用药。
（3）有助于评价药物的生物利用度和生物等效性。
（4）有助于发现药物不良反应和药物相互作用。
2. 简述体内药物分析中生物样品处理的方法。
答案：体内药物分析中生物样品处理的方法主要包括以下几种：（1）蛋白沉淀法：利用有机溶剂、盐析等方法使生物样品中的蛋白质沉淀，从而分离出药物。
体内药物分析重点
第一章绪论1．体内药物分析（pharmacetical analysis in biological sample）:一门研究生物体内中药物及其代谢产物和内源性物质的质与量变化规律的分析方法学科。
2、任务：（1）进行分析技术、分析方法学研究，提供最佳分析条件。
（2）为药物体内研究提供数据（3）服务于临床治疗药物监测，参与指导临床科学用药。
（4）内源性物质的测定和研究（5）滥用药物的检测。
3、特点：（1）生物样品中干扰物质多；（2）生物样品量少，不易重新获得；（3）分析方法要求高；（4）、实验室仪器设备要求高；（5）、测定目标与数据处理复杂；（6）、工作量大：个体差异；数据量大。
4、热点问题；（1）游离型血药浓度测定方法的研究（2）代谢物的监测与研究（3）对映体药物的检测与研究（4）体内微量元素的测定与研究（5）中药药物代谢动力学研究（6）方便、快捷的样品制备方法与样品直接进样分析的研究（7）分析新方法、新技术的联用研究（8）体内药物分析方法的质量控制研究（9）单克隆抗体类药物的体内过程研究。
第二章——体内药物分析相关的理论基础概述•第一节药物的体内过程一、药物的吸收（Absorption）：药物由给药部位未经化学结构变化而直接进入血液循环系统的过程。
1、吸收速率：药物理化性质（脂溶性、解离度）、药物转运类型、给药途径、药物剂型、吸收部位的血流状况、药物浓度2、药物的吸收部位：胃肠道吸收胃吸收（1）非离子扩散方式吸收——与分子状态的脂溶性相关（2）pKa相近时，脂溶性大者吸收快（3）酸性药物易吸收（4）滞留时间短(5)吸收量有限。
小肠吸收(1)停留时间长(2)吸收面积大(3)主要部位碱性药物。
影响胃肠道吸收的因素: 剂型及理化特性、食物、胃肠道的功能状态、药物的首过效应、药物相互作用。
剂型与理化特性:相同药物不同剂型，吸收速度和程度不同。
普通片、缓释片、分散片。
食物：一般可延缓药物的吸收，但不影响吸收总量不同食物的pH值、脂溶性、纤维含量以及对胃肠道的刺激程度，都将使药物的吸收增加或减少。
体内药物分析
体内药物分析体内药物分析:药物分析的的重要分支，是研究生物体中药物及其代谢物和内源性物质的质与量变化规律的分析方法学。
体内药物分析的特点◆生物样品基质复杂◆被测物浓度低◆分析方法要求高◆实验室仪器设备要求高◆测定目标与数据处理复杂体内药物分析方法的要求◆高灵敏度检测方法的应用◆建立高选择性、高专属性的分离方法◆建立的分析方法满足于分析目的相适应的精密度和准确度要求成分复杂、干扰众多——要求方法选择性高采样量小，浓度很低——要求方法灵敏度高原料药：容量分析为主制剂：仪器分析为主体内药物：高灵敏度；高选择性的方法第二章生物样品指含待测物质的生物基质最常见的生物基质为血液，最常用的生物样品是血浆或血清血样采集的时间、方式：血样的应用：血样包括全血、血浆、血清全血不能作为作用部位药物浓度的可靠指标，通常指测定血浆或血清中的药物的浓度。
当血浆中含有的抗凝剂对药物浓度有干扰时，使用血清样品血样制备的差异：尿液：尿液中必须加入防腐剂，非损伤性采样方法唾液：组织：头发：微量元素的测定生物样品的贮存：◆血浆和血清：采血后及时分离（2h），短期4℃，长期-20℃◆冷冻是最常用的生物保存方法◆生物样品总的原则：临时解冻，解冻的样品一次测完，不能反复冷冻→解冻→冷冻分析样品制备的目的：◆使药物从缀合物或结合物中释放，测定总浓度◆使样品纯化与药物组分富集◆满足测定方法对分析样品的要求◆保护仪器性能及改善分析条件有机破坏法主要应用于头发样品中金属元素的测定去除蛋白质法去除蛋白质目的：溶剂解法：◆常用溶剂——甲醇、丙醇◆原理——◆操作——盐析法：中性盐（置换蛋白结合的水，使蛋白脱水而沉淀）强酸沉淀法：10％三氯醋酸、6％高氯酸超滤法：不需加热，不需添加化学试剂、操作条件温和，没有相态变化，破坏性小，能耗少，工艺流程短。
酶水解法：避免酸碱、高温降解，改善回收率，无乳化，减少净化操作纯化与浓集应用范围：液－液提取法（LLE）大多数药物都是脂溶性，内源性物质基本上都是水溶性，当用有机溶剂萃取时，药物被萃取出来而内源性物质被除去，因此采用有机溶剂萃取法能够达到纯化目的优点：选择性；药物能与多数内源性物质分离缺点：乳化、有毒、不环保、不自动，对极性大的化合物的萃取效率低固相萃取(SPE)◆原理：根据液相萃取的原理，利用液相中溶质与吸附剂间的选择性吸附与洗脱原理。
药物分析-体内药物分析
度及专属性要求较高 (3) 分析工作量大, 数据
处理和结果阐明繁杂
第一节
常用体内样品的制备与贮藏 1 体内样品的种类
2 体内样品的采集与制备 3 体内样品的贮藏与处理
一、体内样品的种类
体液
血液; 唾液
脑脊液;胃液; 胆汁;乳汁;精 液;泪液
组织
胃;肠;肝;肾;肺 ,脑;肌肉;头发
原形,代谢物及缀合物 药物浓度较高 收集量大(1~5L) 2. 尿样的采集 自然排尿 规定时间段(6-8h)(时间尿) 3. 尿样的贮藏 加入适当防腐剂
（三）唾液 TDM测定S代替P进行临床监测 1. 唾液的组成
腮腺, 舌下腺和颌下腺 2. 唾液的采集
漱口15min, 安静状态, 自然流出的唾液 物理或化学方法刺激 3. 样品的制备 3000r/min离心10min,上清液
(二) 去活性
采样后立即终止酶的活性 常用方法: 液氮速冻, 微波照射, 匀浆/沉淀, 加酶活性 阻断剂(氟化钠)或抗氧剂(VC), 煮沸
•血液是主要样品
体液或组织 •尿液,唾液,头发和脏器
概述
特点
体内药物分析的特点 主要来自于体内样品的特点
1. 体内样品的特点 (1) 采样量少: ml~µl级;
且不易重新获得 (2) 待测物浓度低:µg/ml
~ng/ml级, 甚至pg/ml (3) 干扰物质多: 尤其是
血样和组织中的蛋白质
2. 体内药物分析的特点 (1) 样品需经纯化浓集,
概述
体内药物分析
分析方法 样品制备 存在形式
体内样品
指体内样品（生物体液、器官或 组织）中药物及其代谢物或内源 性生物活性物质的定量分析。
体内药物分析简介——样品的采集(血液)
10/8/2020
体内药物分析
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体内药物分析简介
二、样品的采集
（一）血液（blood） 3. 全血的制备
将采集的血液置含有抗凝剂的试管中，但不经离心操作， 保持血浆和血细胞均相状态，即为“全血” （whole blood）
体内药物分析简介
二、样品的采集
（一）血液（blood） 4. 血样的应用
血样主要应用于： 药物动力学 生物利用度 临床治疗药物浓度监测
体内药物分析简介
二、样品的采集
（一）血液（blood） 2. 血样的制备 （2）血清的制备
采集的静脉血液置试管中，于37℃或室温放置30min~1h。 血液凝固后，用细竹棒或玻璃棒轻轻剥去试管壁上的血饼，再 在2500~3000 r/min离心5~10min，上层淡黄色液体即为血 清（serum）。
体内药物分析简介
样品的采集
制作单位：沧州医学高等专科学校
体内药物分析简介
二、样品的采集
（一）血液（blood）
因血液中药物浓度可以较好地体现药物浓度和治疗作用之 间的关系，是最为常用的生物样品—分为全血、血浆和血清 1. 血样的采集 一般用注射器直接采集静脉血，每次1~5ml； 动物实验时，采血量不宜超过动物总血量的十分之一。 2. 血样的制备 测定血中药物的浓度，通常是指测定血浆或血 清中的药物浓度，尤其是血浆，并非指全血。
体内药物分析简介
二、样品的采集
（一）血液（blood） 3. 全血的制备
成
血浆
分
红细胞
有形物质
白细胞 血小板
体内药物分析简介
二、样品的采集
（一）血液（blood） 3. 全血的制备
某些情况血浆内药物浓度波动大，或血浆浓度低，可用全 血（全血净化较血浆和血清麻烦）
体内药物分析 (2)
体内药物分析题单选题1、以下关于生物药剂学的描述，正确的是：C药物效应包括药物的疗效，副作用和毒性。
2、以下关于生物药剂学，错误的是; D从药物生物利用度的高低就可以判断药物制剂在体内是否有效3、对于生物膜结构描述错误的是;C饱和性4、K+，单糖，氨基酸等生命必需物质通过生物膜转运方式：C主动转运5、红霉素的生物有效性可因下列哪种因素明显增加：B肠溶衣6、下列哪些项不属于外排转运器：D有机离子转运器7、以下哪些不是主动转运的特点：B无结构特异性和部位特异性8、胞饮作用的特点：A有部位特异性9、以下哪些药物不是P糖蛋白的底物：B 甲氨蝶呤10、药物的主要吸收部位是 B小肠11、关于影响胃空速率生理因素不正确的;D 药物的理化性质12、在溶出为限速过程吸收中，溶解了的药物立即被吸收即为 A漏槽状态13、为避免药物的首过效应，常不应采取的给药途径 :D口服14、淋巴系统对 A脂溶性药物的吸收起重要作用15、以下说法正确的是： B对难溶性药物进行微粉化或制成固体分散物，可以增加体内溶解度或体内吸收16、被动扩散具有以下特征：A需要存在浓度差17、主动转运具有以下特征中的：D存在饱和现象18、胆汁中的胆盐一般能增加难溶性药物的吸收，因为其具有 A表面活性作用19、直接关系到药物的脂溶性，形象药物穿透生物膜的理化性质是 A PKa20、以下不属于药物通过细胞膜被吸收的机理的是：D离子对转运21、以下不属于细胞膜的主要成分的是 C 氨基酸22、通常胃液的PH为：B1-3.523、以下说法不正确的是：D生物药剂学研究必须要以药理实验为基础，其研究范畴不能代替其他医药学科24、全身作用的栓剂在直肠中最佳的用药部位：B应距肛门口约2cm处25、肺部给药的主要吸收机理是：C被动扩散26、以下吸收机理中需要载体蛋白参与的是：C异化扩散27、以下说法正确的是;A乳糖可以加速，延缓或阻碍某些药物的吸收28、下列药物中宜空腹服用的是：B在胃中不稳定的药物29、药物从给药部位进入体循环的过程称为A吸收30、大多数药物吸收的机制顺浓度差 D 进行的不消耗能量的转运31、药物的转运机制不耗能的有 B 被动转运，促进扩散32、药物经口腔粘膜给药可发挥：C局部作用或全身作用33、药物渗透皮肤的主要屏障：B角质层34、药物理化性质对于药物在胃肠道的吸收影响显著，下列叙述错误的是;D酸性药物在酸性条件下一定有利于吸收，碱性药物在碱性条件一定有利于吸收35、影响片剂中药物吸收的剂型和制剂工艺不包括 A片重差异36、下列叙述错误的是 C被动扩散需要载体参与37、一般认为在口服剂型中药物吸收的大致顺序为（由大到小）A水溶液混悬液散剂胶囊剂片剂38、关于药物间及药物与辅料间的相互作用描述错误的是A 药物引起胃肠道PH的改变会明显防碍药物的吸收39、根据药物生物药剂学分类系统，以下哪项为II型药物;B低的溶解度，高的通透性40、下列关于药物转运描述正确的是 B异化扩散的速度一般比主动转运快41对低溶解度，高通透性的药物，提高其吸收的方法错误的是D增加细胞膜的流动性42、弱碱性药物的溶出速率大小与PH大小的关系是D随PH增加而降低43、在溶剂化物中，药物的溶解度和溶解速度顺序为C水合物、无水物、有机溶剂化物44、关于肠道灌流法描述正确的是A小肠有效渗透系数是决定药物在小肠吸收速度和程度的一个重要参数45、研究药物吸收时，生理状态更接近自然情形的研究方法是B肠襻法46、寡肽转运体PEPT1的底物包括C头孢菌素类47、多肽类药物以A结肠作为口服的吸收部位48、多晶型中以C亚稳定型有利于制剂的制备，因为其溶解度、稳定性较适宜49、血流量可显著影响药物在D胃中的吸收速度50、下列有关药物在胃肠道的吸收描述错误的是D弱碱性药物宜在胃中吸收51、下列各种因素中除A吗啡外，均能加快胃的排空52、关于胃肠道吸收的叙述错误的是C一般情况下，弱碱性药物在胃中容易吸收53、膜孔转运有利于B水溶性小分子药物的吸收54、影响被动扩散的主要因素是B药物的脂溶性55、各类食物中，A碳水化合物胃排空最快56、某有机酸类药物在小肠中吸收良好，主要因为C小肠的有效面积大57、以下关于氯霉素的叙述错误的是D棕榈氯霉素有ABC三种晶形和无定型，其中A晶形是有效晶形58、细胞旁路通路的转运屏障是A紧密连接59、消化液中C胆酸盐能增加难溶性药物的溶解度，从而影响药物的吸收60、胃肠道中影响高脂溶性药物透膜吸收的屏障是B不流动水层61、下列关于经皮给药吸收的论述不正确的是C脂溶性药物的软膏剂，应以脂溶性材料为基质，才能更好地促进药物的经皮吸收62、关于注射给药正确的表述是C混悬形注射剂可于注射部位形成药物贮库，药物吸收过程较长63、、药物和血浆蛋白结合的特点有A结合型与游离型存在动态平衡64、药物的表观分布容积是指D体内药量与血药浓度之比65、下列有关药物表观分布容积的叙述中，正确的是A表观分布容积大，表明药物在血浆中的浓度小66、药物与蛋白结合后，D不能透过胎盘屏障67、5-氟尿嘧啶不同乳剂给药后，转运进入淋巴的量依次为A WOW型、WO型、OW型68、体内细胞对微粒的作用及摄取主要有以下几种方式D膜间作用、吸附、融合、内吞69、以下关于蛋白结合的叙述正确的是A蛋白结合率越高，由于竞争结合现象，容易引起不良反应70、以下关于药物向中枢神经系统转运的叙述正确的是B药物的脂溶性越低，向脑内转运越慢71、有关表观分布容积的描述正确的是B指在药物充分分布的假设前提下，体内全部药物按血中同样浓度溶解时所需的体液总体积72、当药物与蛋白结合率较大时，则B药物难以透过血管壁向组织分布73、有关药物的组织分布下列叙述正确的是C当药物对某些组织具有特殊亲和性时，该组织往往起到药物贮库的作用74、一般药物由血向体内各组织器官分布的速度为B肝、肾、肌肉、皮肤、脂肪组织、结缔组织75、药物代谢1相反应不包括D结合反应76、药物在体内以原型不可逆消失的过程，该过程是D排泄77、药物除了肾排泄以外的最主要排泄途径是A胆汁78、可以用来测定肾小球滤过率的药物是C 菊粉、79、药物的脂溶性是影响下列哪一步骤的最重要因素C肾小管重吸收80、酸化尿液可能对下列药物中的哪一种肾排泄不利A水杨酸81盐类可从哪一途径排泄（D）A乳汁 B唾液 C肺 D汗腺82分子量增加可能会促进下列过程中的哪一项（B）A肾小球过滤 B胆汁排泄 C重吸收 D肾小管分泌83下列过程中哪一过程不存在竞争抑制（A） A肾小球过滤 B胆汁排泄 C肾小管分泌D肾小管重吸收84肝肠循环发生在哪一排泄中（B）A肾排泄 B胆汁排泄 C乳汁排泄 D肺部排泄85下列药物中哪一种最有可能从肺排泄（A） A乙醚 B青霉素 C磺胺嘧啶 D二甲双胍86最常用的药物动力学模型是（A）A隔室模型 B药动-药效结合模型 C非线性药物动力学模型D统计距模型87药物动力学是研究药物在体内的哪一种变化规律（D）A药物排泄随时间的变化 B药物药效随时间的变化C药物毒性随时间的变化 D体内药物随时间的变化88关于药物动力学的叙述，错误的是（A）A药物动力学只能定性地描述药物的体内过程，要达到定量的目标还需很长的路要走B药物动力学在探讨人体生理及病理状态对药物体内过程的影响中具有重要的作用C药物动力学对指导新药设计、优化给药方案、改进剂型等都发挥了重大作用D药物动力学是采用动力学的原理和数学的处理方法，推测体内药物浓度随时间的变化89反映药物朱云速率快慢的参数是（C）A肾小球滤过率 B肾清除率 C速率常数D分布容积90关于药物生物半衰期的叙述，正确的是（B）A具一级动力学特征的药物，其生物半衰期与剂量有关B代谢快、排泄快的药物，生物半衰期短C药物的生物半衰期与给药途径有关91通常情况下与药理效应关系最为密切的指标是（C）A给药剂量 B尿药浓度 C血药浓度 D唾液中药物浓度92关于表观分布容积的叙述，正确的有（B）A表观分布容积最大不能超过总体液 B无生理学意义C表观分布容积是指体内药物的真实容积D可用来评价药物的靶向分布93某药物的组织结合率很高，因此该药物（D）A半衰期长 B半衰期短 C表观分布容积小D 表观分布容积大94某药物口服后肝脏首过作用大，改为机头注射后（D）A半衰期增加，生物利用度也增加B半衰期减少，生物利用度也减少C半衰期不变，生物利用度减少 D半衰期不变，生物利用度增加95能够反映药物在体内分布的某些特定和程度的是（D）A分布速度常数 B半衰期 C肝清除率 D 表观分布容积96体内药物分析中，最常用的体内样品是（A）A血浆 B尿液 C唾液 D胃97血浆站全血量的比例（D）A20-30% B30-40% C40-50% D50-60% 98常用的去蛋白质的试剂是（C）A醋酸 B冰醋酸 C甲醇 D盐酸99使用唾液作为治疗药物检测样本，应满足的条件是（C）A血浆中药物浓度足够大 B唾液中药物浓度够大C S/P恒定D P/S足够大100下列研究目的中，体内分析使用毛发样品的是（D）A生物利用度 B药物剂量回收 C药物清除率 D体内微量元素测定101当采用液液萃取法测定血浆中碱性药物时，血浆最佳pH是（D）A 4B 6C 8D 10102临床治疗药物检测适宜选用的体内样品是（A）A血清 B尿液 C头发 D心脏103药物体内代谢类型研究适宜选用的体内样品是（B）A血清 B尿液 C头发 D心脏104体内药物分析中最难、最繁琐，而且也最中意的一个环节是（D）A样品的采集 B蛋白质的去除 C样品的分析 D样品的制备105体内药物分析中去除蛋白质的方法为（A）A加入强酸法 B酶水解法 C液液萃取法D化学衍生化法106可作为体内药物浓度可靠指标的是（C）A尿药浓度 B血清药物浓度 C血浆药物浓度 D唾液药物浓度107药理作用强度与下列哪一项最相关（C）A血液浓度 B摄入量 C血液中游离药物的浓度D与蛋白结合药物的浓度108欲提取尿中某一碱性药物，其pKa为7.8，要使99.9%的药物能被有机溶剂提取，尿液pH应调节到（D）A 5.8B 9.8C 4.8以上D 10.8或10.8以上109测定药物的血浆蛋白结合率是应注意什么问题（A）A测定治疗量时的结合率 B采用超滤法测定 C体内外测定相结合D测定高中低浓度的结合率110在去除蛋白的方法中，哪一种方法的上清液偏碱性（A）A溶剂沉淀法 B中性盐析法 C强酸沉淀法 D热凝固法111以下哪项不是液液提取法的优点（C）A低廉的运行成本 B选择性较好 C大大缩短了分析时间D LC-MS测定是被广泛应用112以下哪个不是影响液液提取的因素（D）A水相pH B提取溶剂 C离子强度 D流速113使用溶剂沉淀法中，含药血清或血浆与有机溶剂的比例为（B）时，可将90%以上的蛋白质去除A 1:1B 1：(2~3)C 1:(4~5)D 1：0.5114液液萃取中，挥去提取溶剂的常用方法是直接通入（A）吹干A氮气流 B氦气流 C氢气流 D氧气流115体液样品（如血浆等）通过固相萃取柱的流速每分钟应控制在（C）A 0.1~0.5mLB 0.5~1.0mLC 1.0~2.0mLD 3.0~4.0mL116在较短时间内，在相同条件下，由统一分析人员连续测定所得结果的RSD称为（A）A重复性 B中间精密度 C耐用性 D稳定性117检测限要求的信噪比限度为（C）A 1.5B 2C 3D 10118定量限要求的信噪比限度为（D）A 1.5B 2C 3D 10119定量分析时要求色谱峰分离度应大于（A）A 1.5B 2C 3D 10120定量分析时色谱峰面积的重复性要求RSD（%）不大于（B）A 1.5B 2C 3D 10121.在体内药物分析方法的建立过程中，实际生物样品试验主要考察的项目是（D）A.方法的定量限B.方法的检测限C.方法的定量范围 D.代谢产物的干扰122.用加权最小二乘法计算回归方程时，权重因子一般选用的是（A）A.1/C<sub>i</sub><sup>2</sup>B.1/C<sub>i</sub>C.<sub>i</sub>D.1123.在体内药物分析方法的建立过程中，用空白生物基质试验进行验证的指标是（C）A.方法的定量范围 B.方法定量下限 C.方法的特异性 D.方法的精密度124.用于评价样品处理方法将体内样品中待测物从生物介质中提取出来的能力（D）A.准确度 B.精密度 C.QC样品 D.提取回收率125.在分析过程中，对分析方法进行质量监控（C）A.准确度B.精密度C.QC样品D.提取回收率126.是指在确定的分析条件下测得的体内样品浓度与真实浓度的接近程度（A）A.准确度B.精密度C.QC样品D.提取回收率127.常用相对标准差RSD来表示（B）A.纯度B.精密度C.准确度D.相对误差128.相对误差表示（B）A.测量值与真实值之差B.误差在测量值所占比例C.最大的测量值与最小的测量值之差D.测量值与均值之差129.在测量条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度是（D）A.准确度B.精密度C.专属性D.耐用性130.体内样品测定方法要求，建立标准曲线所用浓度至少应为（D）A.2B.3C.4D.6131、在体内药物分析中，定量下限其准确度应在真实浓度的 CA.<15％B.85％～115％C.80％～120％D.<20％132、体内药物分析中的准确度一般应在 B A.<15％ B.85％～115％ C.80％～120％ D.<20％133、在体内药物分析中，质控样品测定结果的偏差一般应 AA.<15％B.85％～115％C.80％～120％D.<20％134、在体内药物分析中，质控样品测定结果的低浓度点偏差应 DA.<15％B.85％～115％C.80％～120％D.<20％135、在色谱定量分析中，采用内标法的目的是 CA.提高灵敏度B.改善分离度C改善精密度D增加稳定性136，表示生物介质中药物最低可测度的是AＡ．检测限Ｂ．定量限Ｃ．线性范围Ｄ．最低检测浓度137体内药物分析方法学研究要求考察稳定性，以下内容中哪一项不属于稳定性实验内容 BＡ．长期贮存稳定性Ｂ流动相稳定性Ｃ。
体内药物分析
体内药物分析第二章生物样品与样品制备1.体内药分的对象：人体和动物体液、组织、器官、排泄物 2．体内药物分析的特点：样品量少，不易重新获得；样品复杂，干扰杂质多；供临床用药监护的检测分析方法要求简便、快速、准确，以便迅速为临床提供设计合理的用药方案及中毒解救措施；实验室拥有多种仪器设备，可进行多项分析工作；工作量大，测定数据的处理和阐明有时不太容易。
需相关学科参与。
3．体内药物分析样品的种类：最常用且易获得的分析样品有：血样、尿样、唾液和粪便。
特殊情况下：乳汁、泪液、脊髓液、胆汁、羊水、各种组织4．血清：血清是由血液中纤维蛋白原等的影响引起血液凝结而析出的澄清黄色液体，约为全血的30%?50%5．尿液：尿液的主要成分：水、含氮化合物、盐类；体内药物清除主要通过尿液排出，药物以其原型或代谢物及其缀合物等形式排出；尿药测定主要用于药物剂量回收、尿清除率、生物利用度、药物代谢率的研究，并可推断患者是否按医嘱用药。
6．生物样品分析的前处理：是指测定生物样品中的药物及其代谢物时，对样品进行分离、纯化、浓集，必要时对待测组分进行衍生化，为测定创造良好的条件。
7．为何进行前处理？1）药物进入体内除原药外还有多种形式存在2）生物样品的介质组成比较复杂，尤其蛋白质严重影响分离效果，必须进行前处理3）除去介质中含有的大量内源性物质等杂质，提取出低浓度的被测药物，同时浓集药物或代谢物的浓度，使其在所用分析技术的检测范围内。
8．生物样品处理方法选择的一般原则：待测药物的理化性质；待测药物测定的目的与浓度范围。
9．去除蛋白质的方法：加与水相混溶的有机溶剂；加入中性盐；加入强酸；加入含锌盐及铜盐的沉淀剂；酶解法。
10．生物样品的分析由两步组成：样品的前处理（分离、纯化与浓集）和对提取物的仪器分析；提取法是应用最多的分离、纯化方法；提取的目的：从大量共存物中分离出所需要的微量组分药物及其代谢物，并通过溶剂的蒸发使样品得到浓集，以供测定；提取法分为液 -液提取法和液 - 固提取法。
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饼→以2000r/min～3000r/min离心5min～ 10min →分取上清液即为血清
当血浆中含有的抗凝剂对药物浓度有干扰时，使用血清样品 4
肝素的加入： 1ml血液/需要肝素0.1～0.2mg，通常不需 准确加入，在取血前可取少量肝素钠溶液（ 1～2滴）置于试管内，旋转试管，使肝素溶 液均匀分布于试管壁上，干燥后加入血样后 立即轻轻振摇即可。
体积比：1：0.6 90％去除 方法：超速离心（10000r/min）
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其他去除蛋白的一些方法 1、加入含锌盐及铜盐的沉淀剂 2、超滤法 3、酶水解法 4、加热法
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（三） 分离、纯化与浓集
1、液－液提取法（LLE） 2、固相萃取（SPE） 3、自动化SPE技术 4、固相微萃取（SPME） 5、膜萃取（ME） 6、微透析技术（MD） 7、超临界流体萃取（SFE）
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三、样品的预处理技术
（一）经有机破坏的方法
1、湿法破坏
2、干法破坏
硝酸－高氯酸法
高温电阻炉灰化法
电热消化器法
低温等离子灰化法
电热板消化法
烘箱消化法
3、氧瓶燃烧法
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（二） 去除蛋白质
1、溶剂解法
常用溶剂（与水相混溶的有机溶剂）： 乙腈、甲醇、乙醇、丙醇、 丙酮、四氢呋喃 体积比：1：1～3 90％去除 方法：超速离心（10000r/min）
5、SDS洗涤
6、甲醇
都需要反复清 洗2～3次
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毛发样品的制备
1、直接甲醇提取 2、酸水解 3、碱水解 4、酶水解 5、超临界流体萃取 6、有机破坏
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二、生物样品的贮存与处理
（一）冷藏或冷冻 1、血浆和血清：采血后及时分离（2h），短期4℃，
长期-20℃ 2、尿样：应立即测定，否则需加防腐剂置冰箱保存 3、唾液：在4℃下保存，往往需要在取样时测定pH值 4、生物样品总的原则：临时解冻，解冻的样品一次测
第三章 生物样品与样品制备
1
【大纲要求】
1、掌握生物样品的种类及其特点 2、掌握生物样品的各种预处理方法的原
理及其应用
2
第一节 生物样品的种类、采集、 制备与贮存
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一、种类、采集和制备
(一) 血液(Whole blood, Plasma, Serum) 1、血样采集 2、血样制备 不能作为作用部位药物浓度的可靠指标 血浆的制备 血液→含有抗凝剂的试管→混合→ 2500r／min
缺点：样品的预处理繁琐、干扰多、药物的含量低 、需要精密仪器
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特点： 广谱性 积累性 稳定性 依时性 相关性 指纹性
一般在枕部采取样本，国外一般 在靠近头皮处剪取，分别于6～10 处取10个样本，从根部剪断，超 过12cm的均按照12cm处剪断
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头发洗涤
1、丙酮－水－丙酮
2、丙酮预洗→洗洁精洗涤 头 发 3、洗衣粉浸泡 的 预 4、二氯甲烷 洗
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（二） 去除蛋白质
2、加入中性盐
常用中性盐（置换蛋白结合的水，使蛋白 脱水而沉淀）：
饱和硫酸铵、硫酸钠、镁盐、磷酸盐、枸 橼酸盐
比例：1：2 90％去除 方法：超速离心（10000r/min）
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（二） 去除蛋白质
3、加入强酸
常用溶剂（与蛋白质阳离子形成不溶性盐沉淀）： 10％三氯醋酸、6％高氯酸、硫酸－钨酸混合液 、5％偏磷酸
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全血：血液置于抗凝管中，不经离心操作，冷冻储存 或直接分析 需要测定分布于血细胞内、外的药物浓度 如果血浆内药物浓度波动较大并难以控制 血浆药物浓度很低凝影响测定
血样的特点： 缺点：损伤性采样方式、样品量受限、抽血比较麻烦 优点：可用于药物动力学、生物利用度、临床治疗药
物监测 大多数测定的时原型药物总量
2、唾液的保存与处理：取样后，除去泡沫，分层后离心，取上清 液冻存或直接分析。
3、优点：（1）非损伤性取样，（2）可用于药代动力学研究， （3）不受采血时间和地点限制，（4）样品易收集，病人易接 受
4、应用：（1）在TDM中的应用
根据S/P分类，S/P＜1.0表示药物在唾液中的浓度很低；S/P
＝1.0表示适合药物的监测；S/P不固定表示数药物都是脂溶性的，内源性物质 基本上都是水溶性的，当用有机溶剂萃取 时，药物被萃取出来而内源性物质被除去 ，因此采用有机溶剂萃取法能够达到纯化 的目的。
完，不能反复冷冻→解冻→冷冻(FTC)；样品应以小 体积分装存放。
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第二节 生物样品的预处理与制备
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一、预处理目的
（一）药物从缀合物中释放，测定总浓度 （二）纯化、富集药物 （三）适应和满足测定方法要求的灵敏度 （四）防止对分析仪器的污染和劣化
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二、样品制备时应考虑的问题
（一）药物的理化性质、存在形式和浓度范围 （二）药物测定的目的 （三）生物样品种类和杂质干扰类型 （四）样品的化学组成 （五）药物的蛋白结合率 （六）被测组分在预处理过程中的稳定性 （七）样品在收集、储存等过程中容器的污染 （八）样品的预处理过程要求简便 （九）预处理的最后一步应富集被测组分 （十）对分析方法的要求
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(二) 尿液
1、尿药测定用途：药物剂量回收研究、药物尿清 除率、生物利用度、判断患者用药是否遵医嘱、 预测药物的代谢过程和代谢类型
2、尿的采集：非损伤性采样方式、药物浓度较高 、收集量较大、收集方便，易受食物、饮水等影 响。
3、尿样的保存与处理：
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(三)唾液
1、唾液的采集：漱口后15min进行，采集时间为10min，采用 一些物理或化学方法刺激唾液分泌；（1）缩短采样时间，（2 ）减小唾液pH变化范围，（3）刺激后得到的唾液其唾液－血 浆分布比例的个体差异较小。
唾液中；S/P很大表示药物的离子化程度很低
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组织
（1）匀浆化法：组织→加入水或缓冲液→匀浆→上清液 （2）沉淀蛋白法：组织→加入蛋白沉淀剂→上清液 （3）水解：组织→加入酸或碱→加热使组织液化→上清
液 （4）酶水解：组织→加入酶和缓冲液→加热使组织液化
→上清液
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头发
优点：取样方便、无损伤性、检样的掺伪的可能性 低、能对某些特定的代谢物进行测定、能了解数 月至数年用药的情况、可用于体内微量元素含量 测定、可用于临床用药、滥用药物和毒性药物的 检测