实验五、GUS染色检讲义测基因瞬时表达
利用GUS基因表达观察启动子功能b
GUS染液的配制 母液 20mM X-gluc in dimethyformamide 0.2mM Na2HPO4 0.2mM NaH2PO4 100mM EDTA 10mM 高铁氰化钾 1% Triton-X100 最终反应液(100ul) 0.2mM Na2HPO 430.5ul 0.2mM NaH2PO4 19.5ul 100mM EDTA 10ul 10mM高铁氰化钾 10ul 1% Triton-X100 10ul X-gluc 母液 5ul ddH2O 15ul
实验步骤
育苗:拟南芥 (IAA2::uidA )种子经表面消毒后接 种于无菌的B5琼脂培养基. 生长素处理:将拟南芥小苗转接至含有生长素 (0.1M IAA)的新鲜培养基中处理1天. GUS染色:染色0.5-1.5h,叶子部分需80%酒精 中脱色30min后观察. 镜检:观察GUS表达的组织特异性,IAA对GUS表达 的影响.
Figure 1. Analysis of IAA accumulation in wild-type and aux1 Arabidopsis root apices. (A) High resolution IAA quantitation in Arabidopsis wild-type () and aux1 () root segments. (B) DIC image of whole-mount GUS-stained wild-type IAA2::uidA root apex. (C) DIC image of whole-mount GUS-stained aux1 IAA2::uidA root apex. (D) Radial section of GUS-stained wild-type IAA2::uidA root apex. Scale bars, 50 m.
含GUS报告基因的转
含GUS报告基因的转GUS染色一、原理Gus (b-glucuronidase)基因作为一种报告基因，在植物遗传转化研究中有广泛的用途。
Gus基因来自于大肠杆菌，编码b,葡聚糖苷酶(一种水解酶)，可催化底物5,溴,4,氯,3,吲哚葡聚糖醛酸苷(5,bromo-4-chloro-3-indolyl-glucronide，缩写为X,Gluc)分解，产生肉眼可见的深兰色化合物，借此用来观察转基因植物中外源基因的表达情况，鉴定转基因植株。
二、目的了解转基因植物中基因表达的器官、组织和细胞的特异性，掌握Gus报告基因表达的组织化学定位的方法。
三、材料与试剂1、转基因植物的组织、器官、种胚或幼苗。
t2、同种非转化植物的组织、器官、种胚或幼苗。
3、50mM磷酸缓冲液(pH 7.0)。
4、染色液:100mM K3[Fe(CN)6], 100mM K4[Fe(CN)6] 10mMNa2EDTA, 0.001% (v/v) triton X-100, 20%甲醇，0.5mg/ml X-Gluc, 磷酸缓冲液(50mM, pH 7.0)。
5、70,乙醇。
四、操作步骤1、将准备好的材料冲洗干净，用吸水纸吸干，浸在上述染色液中37?恒温条件下保温过夜。
2、转入70,乙醇中脱色2,3次，去除叶绿素，至阴性对照材料呈白色时为止。
3、肉眼或显微镜下观察，白色背景上的兰小点即为Gus基因表达的位点。
4、83,、95,、100,乙醇中脱水，二甲苯透明，石蜡包埋。
5、常规石蜡切片法切片，番红染色。
6、显微镜下观察、拍照。
五、说明1、要设立严格的阴性对照，即用同样的未转化的材料按相同的方法同时进行染色。
如阴性对照显示兰色，其原因可能是:A)材料和试剂被细菌感染;B)保温时间过长。
2、染色液中的甲醇可抑制细菌生长，长时间染色可加入0.02% NaN3或100mg/ml的氯霉素，短时间染色也可以不加。
3、叶绿体含量高的材料染色后要进行脱色。
gus染色原理
gus染色原理
Gus染色原理。
Gus染色是一种用于检测β-葡萄糖苷酶活性的方法，它是以β-葡萄糖苷酶的
底物5-氯-4-溴-3-吲哚基葡萄糖（X-葡萄糖）为基础的染色方法。
在染色过程中，
X-葡萄糖会被β-葡萄糖苷酶水解，产生游离的5-氯-4-溴-3-吲哚基（X-吲哚），然后X-吲哚会与染色底物中的氧化剂氧化反应，生成可见的蓝色产物，从而实现对
β-葡萄糖苷酶活性的检测。
Gus染色的原理可以分为以下几个步骤：
1. 底物水解，X-葡萄糖是β-葡萄糖苷酶的底物，当β-葡萄糖苷酶存在时，它
会催化X-葡萄糖的水解反应，将其分解为X-吲哚和葡萄糖。
2. 氧化反应，X-吲哚与染色底物中的氧化剂（如溴化4-溴-3-吲哚苯）发生氧
化反应，生成可见的蓝色产物。
3. 结果观察，通过观察样品的颜色变化，可以判断β-葡萄糖苷酶的活性水平。
活性高的样品会呈现深蓝色，活性低的样品则会呈现浅蓝色或无色。
Gus染色方法具有操作简便、结果直观、灵敏度高的特点，因此被广泛应用于
细菌、植物和动物细胞等生物体系中对β-葡萄糖苷酶活性的检测。
同时，Gus染
色还可以在组织学研究中用于检测β-葡萄糖苷酶的表达情况，为研究者提供重要
的实验数据。
总的来说，Gus染色是一种简单而有效的β-葡萄糖苷酶活性检测方法，其原理清晰，操作方便，结果可靠。
在生物学研究中具有重要的应用价值，为科研工作者提供了有力的实验手段。
通过对Gus染色原理的深入了解，可以更好地应用和优
化这一方法，为科学研究提供更加可靠的数据支持。
GUS报告基因范文
GUS报告基因范文GUS报告基因是一种用于筛选转基因植物的报告基因。
它在植物细胞内表达的酵素β-葡萄糖苷酶（β-Glucuronidase，GUS），能够将葡萄糖醛酸（X-Gluc）转化为蓝色产物。
通过观察和分析植物组织的GUS活性，可以判断是否发生了基因转化。
下面将详细介绍GUS报告基因的特点、应用以及实验方法。
1.GUS报告基因的特点（1）GUS基因来自于大肠杆菌，它很少在真核生物中表达，因此不会对植物正常生长发育产生影响。
（2）GUS基因编码的酵素活性能够方便、快速地用染色剂标记出来，实验结果直观可见。
（3）转GUS基因的步骤相对简单，转化率较高，且不需要使用昂贵的设备。
2.GUS报告基因的应用（1）植物转基因筛选：通过观察和分析转基因植物的GUS活性，可以确定哪些植株成功地转化了外源基因。
（2）基因调控研究：GUS报告基因可以用来研究目的基因的表达调控机制，例如在转基因植物中瞬时表达GUS基因，观察其在各种组织和发育阶段的表达情况，可以推测目的基因的启动子活性。
（3）信号传导途径研究：通过构建GUS基因的操纵，可以研究植物信号传导途径中特定基因的表达情况，进而了解信号传导途径的效率和调节机制。
3.实验方法以下是GUS报告基因实验的一般步骤：（1）构建GUS载体：将GUS基因与适合的植物表达载体进行连接，形成GUS转化载体。
（2）遗传转化：将GUS转化载体导入要进行转基因植物研究的植物细胞中，使用适当的生物技术方法（如冲击法、农杆菌介导法）实现遗传转化。
（3）植物筛选：选择经过转化的植株进行分析，通常可以通过PCR、Southern blot、Western blot等技术检测GUS基因的存在。
（4）组织切片染色：收集不同部位的植物组织，例如叶片、根、花等，制作切片。
使用X-Gluc作为底物加入切片中，观察蓝色染色产物的形成。
（5）定量分析：通过测定GUS活性，使用亲合素、含有底物的液体培养基等方法，可以 quantitatively 地测定GUS酶活性。
gus染色原理
gus染色原理Gus染色原理。
Gus染色是一种用于研究植物组织中β-葡萄糖苷酶活性的常用方法。
这种染色方法利用了β-葡萄糖苷酶对X-葡萄糖苷基苯基酚的水解作用，使得组织中含有该酶的部分在染色后呈现出蓝色的颜色。
下面将介绍Gus染色的原理及其应用。
Gus染色的原理主要是利用了β-葡萄糖苷酶对X-葡萄糖苷基苯基酚的水解作用。
X-葡萄糖苷基苯基酚是一种无色底物，在β-葡萄糖苷酶的作用下，会被水解成苯基酚和葡萄糖。
而苯基酚在碱性条件下会发生氧化反应，生成蓝色产物。
因此，含有β-葡萄糖苷酶的组织在Gus染色后会呈现出蓝色，从而可以直观地观察到该酶的活性分布情况。
Gus染色在植物学研究中有着广泛的应用。
首先，它可以用于研究植物生长发育过程中β-葡萄糖苷酶的活性分布情况。
通过对不同发育阶段的植物组织进行Gus染色，可以清晰地观察到该酶在不同组织中的表达情况，从而揭示其在植物生长发育中的作用。
其次，Gus染色还可以用于研究植物对逆境的响应机制。
在逆境条件下，植物体内的β-葡萄糖苷酶活性可能会发生变化，通过Gus染色可以对其进行快速、直观的检测，从而揭示植物对逆境的生理响应。
除了在植物学研究中的应用，Gus染色还可以用于转基因植物的筛选。
在转基因植物中，外源基因通常会与Gus基因进行融合，从而使得转基因植物组织中具有Gus活性。
通过对转基因植物进行Gus染色，可以快速、准确地筛选出具有外源基因表达的植物组织，为转基因植物育种提供了重要的技术手段。
总之，Gus染色作为一种常用的酶活性检测方法，在植物学研究中发挥着重要作用。
它不仅可以用于研究植物生长发育过程中酶活性的分布情况，还可以用于研究植物对逆境的响应机制，以及转基因植物的筛选。
相信随着技术的不断进步，Gus染色方法将在植物学研究中发挥更大的作用。
GUS 组织化学染色-拟南芥
幼苗GUS染色实验GUS洗液配方：0.1 M PBS, pH 7.010mM EDTA2mM 亚铁氰化钾potassium ferrocyanide2mM 六氰合铁酸钾potassium ferricyanide300mL中加0.254 g亚铁氰化钾，0.198 g六氰合铁酸钾，EDTA 6 mL（10 mM）GUS染色液(1mM)就是把5 mg X-Glus（5 mg加100µL DMSO助溶，X-Glus用前离心3min）加到5 mL洗液里即成染色液。
一次配5 mL染色液，1.5 mL离心管每管分装200 µL，锡纸包住-20℃保存。
步骤：一般5d幼苗可进行试验，早上做以方便白天随时观察幼苗着色情况。
1.90%丙酮固定20min；(丙酮(acetone)渗透力很强，能使蛋白质沉淀凝固，但不影响蛋白质的功能基团而保存酶的活性，用于固定磷酸酶和氧化酶效果较好，因此可用于GUS染色前的固定，可防止GUS信号的扩散。
缺点是固定快、渗透力强，易使组织细胞收缩，保持细胞结构欠佳。
一般4℃下20分钟为宜)2. 加1 mL GUS洗液洗去丙酮，洗2遍；3. 加GUS染色液，冰上抽真空15-20 min；4. 37℃放置，隔一阵观察一下，染上色了就进行下面步骤；5. 吸出染色液，加入1 mL 70%乙醇，停止染色反应及脱色；6. 更换几次乙醇直到脱色完全；7. 解剖镜及显微镜拍照观察载玻片上加适量HCG透明液，用镊子取出幼苗在透明液中铺平，盖上盖玻片，解剖镜观察整株，显微镜观察细节并拍照。
实验原理：GUS基因编码β-葡萄糖苷酸酶，相当稳定而不易降解。
根据GUS基因检测所用的底物不同，可以选择三种检测方法：组织化学法、分光光度法和荧光法（灵感度为分光光度检测法最高）。
其中最为常用的是组织化学法。
组织化学法检测以5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸（X-Gluc）作为反应底物，将被检材料用含有底物的缓冲液浸泡。
GUS染色液配制
GUS染色液配制2篇【文章一】GUS染色液配制原理及方法GUS染色液是一种用于检测植物细胞中β-葡萄糖苷酸酯酶（GUS）活性的染色液。
本篇将介绍GUS染色液配制的原理及方法。
一、原理GUS染色液配制的原理是基于GUS酶催化水合酶活性，使含有1-甲基-β-吡喃糖苷（X-Gluc）的染色底物在酶的作用下发生蓝色沉淀反应。
该底物被GUS酶水解后可产生自由的5,5’-二溴-4,4’-二氯-3’-靛酚（X）和5-溴-4-氯-3-（2,6-二甲基-4-氧代酰基苯氨基）苯甲醇（Gal）。
这两种产物在碱性条件下进行聚合反应，生成可见的蓝色沉淀。
二、方法1. 准备所需材料：pH 5.0缓冲液、10% Triton X-100、X-Gluc染色底物（20mg/ml），甲醇，硫酸铵，硼酸，氢氧化钠，孵育液。
2. 配制pH 5.0的缓冲液：取适量的硼酸和氢氧化钠，配制一定浓度的缓冲液，并将溶液调至pH值为5.0。
3. 配制10%的Triton X-100：取适量的Triton X-100，加入适量蒸馏水溶解，使其浓度为10%。
4. 配制X-Gluc染色底物溶液：取适量X-Gluc，加入适量甲醇溶解，制成浓度为20mg/ml的X-Gluc溶液。
5. 配制孵育液：将硫酸铵和甲醇按一定比例混合，制成适量的孵育液。
配制步骤：1. 取适量的pH 5.0缓冲液，加入10% Triton X-100，并充分混合。
2. 加入适量的X-Gluc染色底物溶液，再次充分混合。
3. 加入适量的甲醇和孵育液，并充分混合。
4. 将配制好的GUS染色液过滤，以去除杂质颗粒，得到高纯度的染色液。
5. 将GUS染色液储存于4℃的冰箱中，避光保存。
三、注意事项1. 在配制GUS染色液时，应注意避免阳光直射和长时间的暴露。
2. 染色底物X-Gluc是一种易燃物质，使用时应注意安全操作。
3. 配制过程中的工具和容器应干净无杂质，以防止污染。
4. 孵育液的制备要按照所需配比进行，过量或不足都会影响染色效果。
实验八转基因生物的GUS检测PPT优选
实验步骤
• 将准备好的拟南芥植株放入小EP管中，加 入染色液浸没试材，封好盖子；
• 37℃培养箱中温育1小时至过夜； • 将浸染过的试材转入70%或95%乙醇中脱
色2-3次（除去叶绿素），至阴性对照材料 呈白色为止。
• 观察结果。
K3 [Fe(CN) 6] （铁氰化钾）； 其源5N报1T染其源NT5标(报其肉种其叶K利(将g3利1在把达第有基K肉 报K11其1(5其源肉把达TK第有基其 1利标其源N肉g其T配其源TK材其(K实(常氯fK将K第有基其1111报(5N1材实1常第有基标1常氯fT1适可(利 材NK相源K第有基报(1把达报gK1其源 将第有基把达1(K把达利(K1标利染其源T材5g(报肉((在非染常氯 f适可非肉利g葡M报11NKlll1121143313332uuuuuuuu0m0mm％ ％ ％ ％ ％ ％ ％ ） ％ ％ ％ ％ ％ ％ ％ ％ ％ ％ ％ ％7rrrrrrr33333333443443--aaaaU)))))))))))))iiiiiii一性告色一性记告检眼子检片用浸用植它产二些因眼告检一性眼它产二些因检用记一性眼检制一性料检验用霉浸二些因检告料验用二些因记用霉宜用用料关一性二些因告它产告一性浸二些因它产它产用记用色一性料告眼植转色用霉宜用转眼用萄告NNooosssssmm℃ttttttt已 表 已已 已 已 表2222gggooooooo[[[[[[[[[[[[[[细 报 报 报 报 报GX，，，，，，，，，，，，，，，，，，，基基基基基rrr--FFFFFFFFFFFFFFEEEE）））MMeeennnnnnn， 基 基 液 ， 基 基 基 测 或 的 测 等 报 染 报 物 的 物 ， 基 表 或基 测 ， 基 或 的 物 表 测报 基 ， 基 或 测 方 ， 基 ： 测 八 的 素 染 表 测 ： 八 的 ， 基 表 基 的 素 的 肉 报： 知 ， 基 ， 基 表 基 的 物 基 ， 基染 ， 表 的 物 的 物 报 基 报 液 ， 基 ： 基 或 物 化 液 的 素的 肉 化 或 报 糖二二培－被达被 被被被达)eeeeeeeeeeeeee胞告告告告告DDDDsss-------1111111111111111111因因因因因分1111111((((((((((((((KKK避因因：避因因因方显胚方绿告过告基编来易因达显 因方避因显编来易达方 告因避因显方法避因方转报乙过易达方转选易因达因报乙反眼告 识避因易因达因编来因避因 过易达编来编来告因告：避因因显基的：报乙 反眼的显告苷cccNN甲甲0000000000000000000养G克产克 克克克产TTTT转转转转CCCCCCCCCCCCCC0000000内基基基基基eee的的的的是444解0000000000000000000aaAAAA0000000NNNNNNNNNNNNlNN开表是5开表通是法微及法色基的基因码标于的的微 必法开表微码标于的的法 基是开表微法：开表法基告酰的于的的法是择于的是告酰应或基 链开表于的的是码标是开表 的于的码标码标基通基5开表是微因相5告酰 应或相微基酸是nnn基 基箱u隆物隆 隆隆隆物μμμμμμμμμμμμμμμμμμμ化化化化22[[[其因因因因因；；；；；；；000最最最最目ccc（ （（（为FFF))))))))))))))clllllllllllllllllllHH内达一内达常一简镜萌简材因试因工序定检表检镜 须简内达镜序定检表检简 因帮内达镜简5内达简因基转试检表检简一标检表检帮基转条显因 接内达检表检一序定一内达 试检表检序定序定因常因内达研镜工同基转 条显同镜因一）））））））））））））））））））甲甲eeeμμμ中和在和 和和和在的的的的母，666666666666eee66它编编编编编0PP大大大大前1111蓝lll]]]]]]]]]]]](((]]ppp源产种源产与种单下发单料表材表程列目测达测下 具单源产下列目测达测单 表助源产下单源产单生因移材测达测单种生记测达测助因移件微表 源产测达测种列目种源产 材测达测列目列目表与表源产究下程材因移 件微材下表种—,,,,,,,,,,,,,,,,,,,酰酰m温XXX0000CCC全受全 全全全受OO植植植植液它（（（（（（（ （（（ （（（（rrr的码码码码码KKKKKKKKKKKKKKKKKKK优优优优常色mmmmooo---NNNM和物编和物目编、观的、转达转达研和的：产技观 备、和物观和的：产技、 达对和物观、和物、物包酶转：产技、编物基：产技对包酶下镜达 和物：产技编和的编和物 转：产技的和的达目达和基观研料包酶 下镜料观达编—44胺胺育GGG序体序 序序序体3333333333333333333物物物物：可ttt铁铁铁铁铁铁铁 亚亚铁 铁亚亚铁基的的的的的MMMM点点点点用eee)))物11lll外水码外水的码快察幼快入载入载究基基如物术察 的快外水察基基如物术快 载转外水察快外水快的括基入如物术快码的因如物术转括基，观载 外水如物术码基基码外水 入如物术基基基基载的载外水因察究（括基 ，观（察载码标N[[[[[[[[[[[[[[[[[[[((1uuuiii列细列 列列列细666组组组组X以FFFFFFFFFFFFFFFFFFF..， ，，，DDnnn氰氰氰氰氰氰氰 铁铁氰 氰铁铁氰因产产产产产是是是是的质小ccca]]]-eeeeeeeeeeeeeeeeeee)))源平可源平基可速，苗速体体领因因果的就， 条速源平，因因果的就速 体基源平，速源平速因果的就速可包果的就基因察体 源平果的就可因因可源平 果的就因因因因体基体源平调，领阴因 察阴，体可77Gβ7Gββ记7ββMM已胞已 已已已胞母 母 母G织织织织将H等 等 等（（（3333化化化化化化化 氰氰化 化氰氰化产物物物物物(((((((((((((((((((0000— — -— -它它它它一。时UUCCCCCCCCCCCCCCCCCCCFF7777基的被基的因被、白等、的的域表的研检可白件、基的白表的研检可、的因基的白、基的、研检可、被括研检可因到的基的研检可被表的被基的研检可表表的的因的基的控白域性到性白被((基(l2%%%%葡葡测中测 测测测中液液液u、、、、亚亚亚钾钾钾钾钾钾钾 化化钾 钾化化钾物的的的的的SS2222NNNNNNNNNNNNNNNNNNN葡葡葡))能能能能种P至caaa-因影检因影构检灵色。灵研研，达表究测以色 灵因影色达表究测以灵 研生因影色灵因影灵究测以灵检有究测以生。研 因影究测以检达表检因影 究测以达表达表研构研因影的色，对。对色研检因乙或或或mmmm检检溴萄萄定不定 定定定不；；＋＋＋O器器器器)))))))))))))))))))，ttt铁铁铁））））））） 钾钾） ）钾钾）不检检检检检萄萄萄测测测测报)))过6666666666666666666gggg表响测表响建测敏背敏究究已调达不技用背 敏表响背调达不技用敏 究物表响背敏表响敏不技用敏测抗不技用物究 表响不技用测调达测表响 不技用调达调达究建究表响有背已照照背究测、、、醇9994测测-糖糖存存;;;;;444官官官官用氰氰氰；；；；；；； ））； ；））；]]]]]]]]]]]]]]]]]]]） ）））会测测测测测4555糖糖糖定定定定告·夜5550达的达在的、景、技技使节调同术于景 、达景节调同术于、 技体达景、达、同术于、的生同术于体技 达同术于的节调的达同术于节调节调技在技达力景使））景技的.....ββ...β（中（（（（（（（（（（（（（（（（（（-%%%苷苷在在、、、、N000化化化氯， ，，，干应应应应应.苷-苷-苷-外外外外基；半半半μμμ水蛋水同蛋稳上稳术术用序控基还不上 稳水上序控基还不稳 术进水上稳水稳基还不稳蛋素基还不进术 水基还不蛋序控蛋水基还不序控序控术同术水工上用。。上术蛋铁脱乙铁铁铁铁铁乙铁铁铁铁铁铁铁铁铁乙铁铁铁铁-酸酸，，原原原原N钾钾钾-TTTTlll扰该该该该该酸酸酸源源源源因基基基3乳乳乳平白平一白定的定的的的列，因不同的 定平的列，因不同定 的行平的定平定因不同定白抗因不同行平因不同白列，白平因不同列，列，的一的平具的的的白氰色醇氰氰氰氰氰醇氰氰氰氰氰氰氰氰氰醇氰氰氰氰rrrr-酶酶即即生生生生-i）））iii二报快快快快快酶酶酶基基基基，tt吲tt液液液oooo糖糖糖的质的表质，蓝，优优报相筛启具基蓝 ，的蓝相筛启具基， 优筛的蓝，的，启具基，质性启具基筛优 的启具基质相筛质的启具基相筛相筛优表优的，蓝报蓝优质化2中化化化化化中化化化化化化化化化中化化化化（（无无质质质质（（（甲nnnn告速速速速速—报报报因因因因是哚苷苷苷影或影达或且色且点点告融选动备因色 且影色融选动备因且 点选影色且影且动备因且或基动备因选点 影动备因或融选或影动备因融选融选点达点影常色告色点或----钾脱钾钾钾钾钾脱钾钾钾钾钾钾钾钾钾脱钾钾钾钾GG背背体体体体1111000基基、、、、、3告告告表表表表β-0000酶酶酶β...UU响酶响载酶背小背：：基合得子，启小 背响小合得子，启背 ：和响小背响背子，启背酶因子，启和： 响子，启酶合得酶响子，启合得合得：载：响用小基小：酶）色）））））色）））））））））色））））次－景景、、、、酰0000因简简简简简-基基基达达达达SS葡(((（ （（（：的：体的景点景因形到的或动点 景：点形到的或动景 鉴：点景：景的或动景的和的或动鉴：的或动的形到的：的或动形到形到体：于点因点的（（（（（（（（（（（（（（（（（（222，D，，βββ））胺产便便便便便---因因因的的的的---萄333－0000对基对上基活即活有成转转者子即 活对即成转转者子活 定对即活对活转者子活基除转者子定对转者子基成转基对转者子成转成转上对判即有即基000000000000000000至ggg在 在可可(次次次物、、、、、......................(((具具具具aaaD糖ggg于因于，因性为性以嵌化录很转为 性于为嵌化录很转性 的于为性于性录很转性因草录很转的于录很转因嵌化因于录很转嵌化嵌化，于断为以为因阴葡被被lll将将（（（uuu，M，，的灵灵灵灵灵体体体体苷报，报一，低低下合体活难录低报合体活难录低 一报低报低活难录低，剂活难录一报活难录，合体，报活难录合体合体一报试下，GGGGGGsss性萄转转FXX除除除βββ敏敏敏敏敏)))细细细细uuuuuu酸,,,)告也告起也。。几基。性建活。告基。性建活。 类告。告。性建活。也抗性建活类告性建活也基。也告性建活基。基。起告验几也－－---对糖染染配ssssssggg胭胭胭去去去度度度度度胞胞胞胞表表 表表表表酯aaa基就基转就种因，立性基因，立性外基基，立性就性，立性外基，立性就因就基，立性因因转基基种就GG照苷的的成脂脂脂叶叶叶高高高高高lll和和和和aaall达达 达达达达（因是因入是：，采，的因，采，的源因因采，的是基采，的源因采，的是，是因采，的，，入因因：是uu材酸细细2ccc碱碱碱绿绿绿而而而而而cc组组组组ttt0位位 位位位位X编一编生一或取而检编或取而检基编编取而检一因取而检基编取而检一或一编取而检或或生编的一ooo水水料酶胞胞m合合合素素素且且且且且－织织织织sss点点 点点点点码个码物个与本采测码与本采测因码码本采测个（本采测因码本采测个与个码本采测与与物码转个解解iii呈(M中中ddd成成成）））重重重重重gG部部部部。。 。。。。aaa产其产，其其身用和产其身用和，产产身用和其身用和，产身用和其其�
GUS染色液使用说明
GUS染色液使用说明货号：G3061有效期：6个月产品内容:名称规格贮存X-gluc粉末20℃X-gluc溶解液1ml RTGUS染色缓冲液50ml4℃产品说明:Gus(β-glucuronidase，β-D-葡萄糖苷酸酶)基因是目前常用的一种报告基因，其表达产物β-葡萄糖苷酸酶(GUS)是一种水解酶，能催化许多β-葡萄糖苷酯类物质的水解，它可以将5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（x-gluc）分解为蓝色的物质，其检测方法简单、快速、灵敏、稳定，且背景活性低。
因为绝大多数植物细胞内不存在内源的GUS活性，因此gus 基因广泛用作转基因植物的报告基因，尤其是在研究外源基因瞬时表达的转化实验中广泛应用。
GUS染色试剂盒包含GUS染色的全部试剂，使用方便，只需将配制好的X-gluc溶液和缓冲液按照比例混合即配成GUS染色液。
该试剂盒可以配制50ml GUS染色液。
操作步骤：一、X-gluc溶液(50×)配制：吸取1ml X-gluc溶解液加入到X-gluc管中，彻底混匀，至粉末完全溶解，即配成X-gluc 溶液(50×)，该溶液-20℃避光保存。
注：正常的X-gluc溶液颜色为无色，如果溶液变为红色或棕色，表明溶液失效。
二、GUS染色工作液配制：GUS染色工作液配制量1ml5ml10mlX-gluc溶液(50×)20μl100μl200μlGUS染色缓冲液1ml5ml10ml注：GUS染色工作液最好现用现配，短期贮存可以-20℃保存2-3天。
三、GUS染色步骤：1.预处理：将叶片、花瓣、根茎等组织剪成小片，放于1.5ml离心管中，加入预冷的90%丙酮完全覆盖材料，常温处理20-30分钟。
此步骤可以预固定组织并且可以去除部分叶绿素。
注：用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和器官的不同而异。
例如，拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。
gus报告基因作用原理
gus报告基因作用原理
Gus报告基因作用原理
基因是生命的基本单位，它们控制着生物体的生长、发育和功能。
基因作用原理是指基因在生物体内的作用方式和机制。
Gus报告基因是一种常用的基因标记技术，它可以用来研究基因的表达和调控。
Gus报告基因是一种β-葡萄糖苷酶（β-glucuronidase）基因，它可以将X-葡萄糖苷（X-Gluc）转化为蓝色产物。
Gus报告基因可以被插入到其他基因的上游或下游区域，从而形成Gus报告基因转录本。
当这些转录本被转录和翻译时，Gus报告基因就会被表达出来，从而产生蓝色染色。
Gus报告基因的作用原理是基于基因表达的调控机制。
基因表达是指基因转录和翻译的过程，它受到许多因素的调控，包括转录因子、启动子、增强子、剪接和RNA降解等。
Gus报告基因可以被插入到这些调控元件的上游或下游区域，从而研究它们对基因表达的影响。
Gus报告基因可以用来研究基因的表达模式、组织特异性和响应信号等。
例如，可以将Gus报告基因插入到一个特定的基因的上游或下游区域，从而研究它在不同组织和发育阶段的表达模式。
此外，还可以将Gus报告基因插入到一个响应信号的基因的上游或下游区域，从而研究它对该信号的响应机制。
Gus报告基因是一种常用的基因标记技术，它可以用来研究基因的
表达和调控。
它的作用原理是基于基因表达的调控机制，通过插入到调控元件的上游或下游区域，从而研究它们对基因表达的影响。
Gus报告基因的应用可以帮助我们更好地理解基因的功能和调控机制，为生命科学研究提供重要的工具和方法。