微生物学实验全套最新PPT课件

一、目的要求 1.学习显微镜的结构、功能和使用方法。 2.学习并掌握油镜的原理和使用方法。
二、显微镜的基本结构及油镜的 工作原理
1. 普通生物显微镜 由3部分构成： ? ①照明系统：包括光源和聚光器。 ? ②光学放大系统：由物镜和目镜组
成，是显微镜的主体。 ? ③机械装置：用于固定材料和观察
方便，包括镜台 (载物台) 、调节器 和、物镜转换器 (旋转器)。
二、 微生物与实际应用
微生物与发酵工程 微生物与环境工程 微生物与农业 微生物与医学领域 微生物与食品工业
三、微生物学与Nobel奖
到目前为止，几十项Nobel生理学和医 学奖，化学奖都与微生物学有关 参考：沈萍教授《微生物学》绪论部分
Nobel获奖者全书
四、如何进行微生物学实验
严肃认真 科学态度 分析问题 搞清原理
(3)转到高倍镜，并调焦到看清标本，然后去掉标本，拔出目 镜，眼睛直接向镜筒观察，并把可变 光栏关小，看其亮点是否在 视野中心，如果不是，就要转动聚光器的调节螺旋，把亮点调到 视野中 央，再慢慢开启可变光栏，使视野看到光栏边缘和聚光镜 的边缘相接为止。
3. 观察操作
(1) 低、高倍镜的使用: 先把低倍的物镜用粗调焦螺旋下降至离盖玻片 0.5cm处，然后一边观察视野一边上升物镜，直至看到图像，再将标本移 到视野中心，用细调焦螺旋把物镜调至最清晰处，若要用高倍镜观察时， 把所要进一步放大观察的部位移至视野中央，直接顺时针转换成高倍物镜， 然后用细调焦螺旋调焦，至看清物像。
无菌操作台的使用
实验九 培养基的配制和灭菌 实验十 芽孢杆菌的分离纯化及观察 实验十一 抗稻瘟霉的芽孢杆菌的分离及筛选 实验十二 食品或水中大肠菌群的检测 实验十三 微生物生长曲线的测定 实验十四 细菌质粒的接合转移与检测 实验十五 微生物菌种保藏技术
实验一 显微镜使用及 微生物形态观察
显微镜概述
尼康 E-600显微镜 基础知识
与其他物镜不同，油镜需在载玻片与镜头之间 加滴镜油，原因有二：
1. 增加照明亮度 油镜的放大倍数可达100x，教具很短，直 径很小，但所需要的光照强度却最大。为 了不使通过的光线有所损失，必须造又精 于加入与玻璃的折射率（n=1.55）相仿的 镜油。通常用香柏油（n=1.52）.
微生物学实验
生物与制药工程学院
一、课 程 简 介
微生物学实验课是微生物学课程教学中的一个重要环节。 本课程总计48学时，使用教材是沈萍主编的《微生物学实验》 （第三版）。通过本课程的学习，使学生了解微生物学的基 本知识；巩固和加深所学理论知识；掌握微生物学最基本的 操作技能。同时，通过实验，培养学生培养学生独立思考和 理论联系实际能力；养成实事求是、严肃认真的科学态度， 以及敢于创新的开拓精神；并在实验中进一步提高学生的科 学素质修养。
③ 视场 光栏
孔径光栏调节
N.A聚=(0.6-0.8)N.A物
操作步骤如下 :
(1）可变光栏的中心对准聚光镜的中心。如果可变光栏的水平 是固定的，则装配时已保证它与聚光镜合轴，不必调整 ;如果可变 光栏的水平位置可以移动，则应把可变光栏关到最小，使它的中 心孔对准聚光镜下方的透镜中心。
(2)载物台上放置观察标本，把聚光器上升到它上端透镜平面 稍低于载物台平面的高度，并将它的可变光栏开到最大，用低倍 物镜，进行调焦到能看见标本，可调反射镜使视野得到最亮和最 均匀 的照明，或把光栏关小，最亮的照明区正处在视野的中央。
? 焦点深度: 显微镜调焦到看清标本某一点 时，不仅是这一物点，而且它的上下两侧也 能看清楚两侧的厚度叫做焦点深度。看到标 本的全厚度，必须调节螺旋仔细地从上到下 进行观察。
三、 实验步骤
? (一) 显微镜的使用 ? 1. 观察前的准备工作 ? (1)观察者要养成显微镜镜检的工作习惯，观察时要
双眼同时睁开，一边观察一边进行记录或描绘。 ? (2)观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备
微生物的个体微小，必须借助显微镜才能观察到。因此， 显微镜就成为微生物学研究工作者不可缺少的基本工具。 所以，了解显微镜的种类、结构、功能和正确地掌握不同 显微镜的使用方法是很有必要的。
显微镜可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。光学显 微镜有普通光学显微镜、相差显微镜、微分干涉差显微镜、 暗视野显微镜、紫外光显微镜、偏光显微镜和荧光显微镜。 下面主要介绍普通光学显微镜。
2. 增加显微镜的分辨率 油镜的分辨率可达到 0.2μm左右。
2. 显微操作技术
尼康NT-88NE显微操作/注射 仪
显微镜的分辨率: 也称为分辨力，它是指能把两个物点辨清的最小距离， 分辨距离越大，则分辨率越低。所以，分辨率是以分辨 距离来表示的。
其计算公式为: D=0.61入/N·A N·A·=n ·sina/2 式中D为分辨率，A为光波波长，N·A·为物镜的数值孔径(镜口率)。
好。 ? (3)显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否
完整和正常，并对载物台、目镜、物镜以及聚光器上 端透镜进行必要的清洁工作。然后进行合轴调节。
2. 显微镜的调节
瞳距调节
屈光度调节
调节
粗调松紧调节旋钮
②10X物 镜
聚光镜中心调节
①标 本
④ 聚光镜升降 旋钮
③ 孔径 光栏
⑤ 光轴中心调节 螺钉
?卫生 每次实验需留下6位同学值日，协助保 持实验室清洁
实验内容
实验一 显微镜使用及简单染色 实验二 细菌革兰氏染色 实验三 荚膜与芽孢染色 实验四 放线菌和蓝细菌的形态观察 实验五 霉菌形态特征 实验六 酵母菌形态观察、死活细胞鉴别
及细胞大小测定 实验七 微生物的数量测定 实验八 玻璃器皿的洗涤、包扎、灭菌及
在物镜上，有镜口率 (N.A.)的标志，它反应该镜头分 辨力的大小，其数字越大，表示分辨率越高，各物镜
的镜口率如下表：
物镜 镜口率(N.A.) 工作距离(mm)
10× 0.25
5.40
40× 0.65
0.39
100× 1.30
0.11
? 显微镜的总放大倍数等于目镜和物镜放大倍 数的乘积，
? 公式为: M = K1xK2
五、微生物实验安排与考核
基础实验：80%，12次，一次考试 自主设计实验：20%
设计实验方案 实验操作 总结 汇报
课堂纪律
? 严格遵守实验室规章制度 ? 严肃课堂纪律
不允许无故旷课、早退（1次） 迟到（3次） 工作服
实验室安全和和仪器