转基因油脂检测方法

转基因油脂检测方法

近年来，中国进口的制油原料中，有相当数量的转基因产品，尤其是转基因大豆，中国进口的大豆几乎100%为转基因大豆。由于世界上已经有很多国家规定了转基因食品是必须加贴标签或禁止进口，因此，对食用油脂进行转基因成分的检测，显得尤为重要。如何鉴别食用油脂是否为转基因食品，除了检测原料以外，更多的是需要从成品食用油中直接进行检测，而从食用油脂中提取出可用于核酸检测的DNA，是进行检验的关键。目前尚未有从食用油脂中提取DNA的报道。现介绍一种稳定有效且简便操作的从大豆油、玉米胚芽油等食用油脂中提取DNA的方法。用该方法提取的DNA，可以用于转基因成分以及其他核酸成分的检测。针对已经已经商品化的转基因大豆、玉米中的外源基因，采用聚合酶链式反应（PCR）以及基因片段扫描（Gene Scan）技术进行检测。

食用油脂中DNA的提取：在2ml离心管中加入1ml食用油及400μl的TE（Tris-EDTA），颠倒混匀5min，1300r/min 室温离心5min，去掉上层油脂层，将离心管中余下的约400μl水相溶液按照Wizard Genomic DNA Purification Kit 仪器说明书操作步骤提取DNA，沉淀DNA以前，向离心管中加入≥1μg植物基因组DNA作为担体，并加入600μl室温异丙醇，颠倒摇匀2~5次后，室温静置45~60min沉淀DNA，沉淀的DNA经离心、70%乙醇洗涤并干燥后，加入TE溶液溶

解DNA，置于4℃下保存备用。从DNA提取开始，所有实验均应有空白对照、阴性对照以及阳性对照。同时，还应用荧光实时定量PCR技术，对PCR结果进行验证。