实验染色方法
细菌一般染色方法
细菌一般染色方法细菌染色是一种常用的实验技术，通过染色使细菌在显微镜下能够更清晰地观察和分析。
细菌染色通常分为简单染色、阴性染色和阳性染色三种方法。
一、简单染色方法：简单染色是最基础的细菌染色方法，主要是用一种染色剂来染色所有类型的细菌。
常用的染色剂有墨汁、甲基蓝、伊红等。
简单染色的步骤如下：1.取一片细菌涂片，将其干燥。
2.在涂片上滴加染色剂，覆盖整个片面。
3.将染色剂置于片上一分钟，用水冲洗。
4.用纸巾将涂片上的多余水份吸干。
5.镶片并观察。
简单染色可以使细菌呈现出斑点或条纹状，并能够区分一些基本形态和结构，但不能提供更多细菌信息。
二、阴性染色方法：阴性染色可使细菌显现为透明，而背景呈色的方法。
常用的阴性染色剂有阿里兹红、印度墨等。
阴性染色的步骤如下：1.将涂片上的细菌涂片均匀涂抹于载玻片上，使其成薄层。
2.滴加阴性染色剂到涂片上，使其均匀覆盖涂片表面。
3.用水冲洗染色液，并用纸巾擦干涂片。
4.镶片并观察。
阴性染色使背景呈色，使细菌透明，从而可以更清晰地观察其形态特征。
三、阳性染色方法：阳性染色可以使细菌显现为有色的圆点或杆状，常用的阳性染色剂有甲基蓝、伊红等。
阳性染色的步骤如下：1.将涂片上的细菌涂片均匀涂抹于载玻片上。
2.将染色剂滴加到涂片上，使其完全覆盖涂片。
3.置片5-10分钟，然后用水冲洗染色剂。
4.用纸巾将涂片上的多余水份吸干。
5.镶片并观察。
阳性染色可以染色细菌，使其呈现有色的形态，便于观察和鉴定。
此外，还有一些特殊染色方法，如革兰氏染色法、氢酒精酸快速染色法等。
革兰氏染色是一种经典的细菌染色方法，通过不同细菌细胞壁的染色性质来将其分为革兰阳性细菌和革兰阴性细菌。
该方法使用革兰紫染色剂和碘液，以及酒精和碳酸盐条件溶液进行染色处理。
氢酒精酸快速染色法是一种常用的快速染色方法，将细菌用甲基蓝染色液处理一段时间后，用酒精和酸性酒精进行洗涤和脱色，最后用伊红染色液着色。
这种方法可以快速地将细菌分为两种主要类型：革兰阳性细菌和革兰阴性细菌。
各种物品染色实验报告
各种物品染色实验报告实验一：布料染色实验实验目的：探究不同颜色染料对布料的染色效果，并比较不同水温下染色的影响。
实验材料：1. 白色布料2. 红色染料3. 蓝色染料4. 黄色染料5. 盐6. 温水7. 水槽实验步骤：1. 将白色布料分成三块。
2. 将一块布料放入水槽中。
3. 在水槽中加入适量红色染料，搅拌均匀。
4. 将布料浸泡在红色染料中，搅拌使染料均匀分布。
5. 取出染色后的布料，用清水冲洗几次，直到水清为止。
6. 重复步骤2-5，分别使用蓝色和黄色染料进行染色。
实验结果：经过实验，我们可以观察到不同颜色染料对白布料的染色效果。
红色染料使布料呈现鲜艳的红色，蓝色染料使布料呈现深蓝色，黄色染料使布料呈现亮黄色。
染色后的布料颜色均匀且具有良好的色彩饱和度。
实验二：木材染色实验实验目的：评估不同颜色染料对木材染色效果的影响，并比较不同染料处理后的木材质地和色泽差异。
实验材料：1. 未经处理的木材样本2. 红木染料3. 橙色染料4. 深棕染料5. 粗砂纸实验步骤：1. 将木材样本分成三组，确保它们具有相同的尺寸和纹理。
2. 在每组中，选取一块木材样本作为对照组，不进行染色处理。
3. 选取另外两块木材样本，分别在染料槽中进行浸泡和涂刷处理。
注意，在处理前，将木材样本使用粗砂纸砂磨表面，以增强染料的渗透性。
4. 将一块木材样本浸泡在红木染料中，搅拌均匀。
5. 将另一块木材样本涂刷上橙色染料，确保涂刷均匀。
6. 将处理过的木材样本放置在通风处晾干。
实验结果：观察到通过浸泡和涂刷不同颜色染料后，木材样本的颜色明显改变。
红木染料使木材颜色变得红褐色，而橙色染料使木材呈现橙色。
与对照组相比，染色后的木材样本具有更加饱满的色泽和质感。
简单染色法步骤
简单染色法步骤一、引言染色是一种常见的实验方法，广泛应用于生物学、化学、医学等领域。
其中，简单染色法是最基础、最常用的染色方法之一。
本文将介绍简单染色法的步骤及其应用。
二、准备实验材料和设备1. 实验材料：待染色的样本（如细胞、组织切片等）、染色剂（如甲苯胺染料、嗜酸性染料等）、脱水、透明和固定剂（如乙醇、木质醋酸等）。
2. 实验设备：玻璃片、显微镜、显微镜镜头、显微镜载玻片、显微镜载玻片盖片、显微镜载玻片夹。
三、固定样本1. 取一小片待染色的样本，放置在玻璃片上。
2. 用透明剂和固定剂依次浸泡样本，使其固定在玻璃片上。
3. 将固定后的样本置于通风处晾干。
四、脱水处理1. 取一盛有乙醇的容器，将固定的样本放入其中。
2. 逐渐增加乙醇浓度，例如从浓度较低的乙醇（如70%）开始，逐渐转移到浓度较高的乙醇（如95%）中，最后转移到绝对乙醇中。
3. 每次转移样本之前，需在乙醇中浸泡一段时间，使其充分脱水。
五、染色处理1. 取一盛有染色剂的容器，将脱水后的样本放入其中。
2. 根据染色目的选择适当的染色剂，如甲苯胺染料用于碱性染色，嗜酸性染料用于酸性染色。
3. 将样本在染色剂中浸泡一段时间，使其充分染色。
六、清洗和封片1. 用脱离剂清洗染色后的样本，去除多余的染色剂。
2. 取一片干净的玻璃片，将样本置于其上。
3. 滴加一滴显微镜载玻片夹中的透明剂，将玻璃片盖在样本上。
4. 轻轻压平，使样本均匀分布在玻璃片上。
七、观察和分析1. 将封好的玻璃片放置在显微镜载玻片上。
2. 装上显微镜载玻片盖片，并用夹子夹紧。
3. 将载玻片放入显微镜镜头下，调节放大倍率和焦距，观察样本的染色情况。
4. 根据观察结果，进行分析和记录。
八、实验注意事项1. 在实验过程中，需佩戴手套和口罩，做好个人防护。
2. 实验材料和设备要保持清洁，避免污染。
3. 染色剂的选择要根据不同样本和染色目的来确定。
4. 染色时间和温度要控制适当，避免过度染色或不足染色。
布染色实验报告
布染色实验报告布染色实验报告一、引言布染色是一种常见的染色方法，通过将染料与布料接触，使染料分子渗透到布料纤维中，从而实现染色效果。
本实验旨在通过对布料进行不同染料的染色实验，观察并比较不同染料对布料的染色效果。
二、实验材料和方法1. 实验材料：- 白色棉布- 不同颜色的染料（红色、蓝色、黄色等）- 盐- 水2. 实验方法：- 将白色棉布切割成相同大小的小块。
- 准备不同颜色的染料溶液，每种染料溶液的浓度相同。
- 在不同的容器中分别加入染料溶液，每个容器中放入一块棉布。
- 加入适量的盐，促进染料渗透。
- 将容器放置在温暖通风的地方静置一段时间，观察染料在布料上的染色效果。
三、实验结果和讨论1. 红色染料实验将红色染料溶液与棉布接触后，棉布逐渐呈现出鲜艳的红色。
红色染料在布料上的染色效果较好，染色均匀且颜色饱和度高。
这可能是因为红色染料分子较小，能够更容易渗透到布料纤维中。
2. 蓝色染料实验与红色染料相比，蓝色染料在布料上的染色效果稍逊一筹。
蓝色染料的颜色较为淡雅，染色均匀度也较好。
蓝色染料分子相对较大，可能需要更长的时间才能充分渗透到布料纤维中。
3. 黄色染料实验黄色染料在布料上的染色效果较为明显，颜色鲜艳。
与红色染料相似，黄色染料分子较小，能够较快地渗透到布料纤维中。
然而，与蓝色染料相比，黄色染料的颜色饱和度稍低。
4. 染色混合实验将红色、蓝色和黄色染料溶液混合后，与棉布接触，观察到混合染料在布料上形成了新的颜色。
这表明不同颜色的染料可以混合产生新的颜色效果。
然而，混合染料的染色效果可能会受到染料浓度和混合比例的影响。
四、实验结论通过对不同染料的布染色实验，我们得出以下结论：- 红色染料在布料上的染色效果较好，颜色饱和度高。
- 蓝色染料的染色效果稍逊一筹，颜色较为淡雅。
- 黄色染料的染色效果明显，颜色鲜艳。
- 不同颜色的染料可以混合产生新的颜色效果。
五、实验改进和展望本实验可以进一步改进和扩展，例如：- 添加不同浓度的染料溶液，以观察染色效果的变化。
HE染色实验步骤
HE染色实验步骤染色实验是生物学中常用的染色技术，用于观察细胞结构、细胞器和染色体等生物学特征。
在这个实验中，我们将使用HE染色法来染色细胞和组织切片。
HE染色法是最常用的组织染色方法之一，用于观察组织结构和组织细胞的形态。
以下是HE染色实验的步骤：1.准备组织标本在进行染色实验之前，首先需要准备好需要染色的组织标本。
组织标本可以是新鲜的组织样本，也可以是已固定和包埋的组织切片。
在准备组织标本时，需要确保组织标本的质量和完整性，以保证染色结果的准确性。
2.制备切片将组织标本切割成薄片，通常厚度在5-10微米之间。
为了获得更好的染色效果，切片应该尽可能薄且均匀。
切片可以使用切片刀或者切片机进行切割。
切片完成后，将切片放在载玻片上，待干燥。
3.脱脂和脱水将切片放入甲醇中脱脂，去除切片中的脂肪物质。
脱脂时间一般为1-2分钟。
脱脂完成后，将切片依次浸入95%乙醇、70%乙醇和蒸馏水中进行脱水处理，时间每次均为1-2分钟。
脱水处理的目的是去除切片中的水分，以便后续染色。
4.染色处理将脱水后的切片依次浸入hematoxylin染料、蒸馏水、酸性洗涤剂和eosin染料中进行染色处理。
hematoxylin染料用于染色细胞核，eosin染料用于染色胞质。
染色时间根据实验需要，通常为1-10分钟。
染色完成后，将切片洗净并进行脱水处理。
5.脱水和封片将染色后的切片依次浸入70%乙醇、95%乙醇和透明剂中进行脱水处理。
脱水完成后，将切片放入透明剂中进行透明化处理，以使组织切片更加透明。
最后，将切片放入显微镜载玻片上，加入透明胶封片，并静置干燥。
6.观察和记录将封片好的切片放入显微镜中，用适当的倍数镜头观察组织结构和细胞形态。
观察时，可以记录下细胞核的形态、胞质的颜色和组织结构等信息。
通过观察和记录，可以得到关于组织和细胞的详细信息，为后续研究和分析提供参考。
7.结果分析根据观察和记录的结果，对染色切片进行分析和比较。
各种染色方法及应用
各种染色方法及应用染色方法是将其中一种溶液或固体直接或间接地涂在物体表面，使物体表面发生染色变化的方法。
不同的染色方法具有不同的应用。
下面将介绍几种常见的染色方法及其应用。
1.偶氮染色法：这是一种常见的染色方法，其特点是染色剂会通过偶氮键与物体表面发生共价键结合，形成稳定的染色物质。
这种染色方法应用广泛，常用于纺织品、皮革、画布等材料的染色。
2.免疫染色法：免疫染色法是一种基于抗原抗体反应的染色方法，常用于细胞与组织学研究中。
它利用抗体与目标抗原特异性结合的原理，通过标记抗体的染色剂对目标抗原进行染色，从而实现对细胞或组织中其中一种蛋白质的定位和检测。
3.基础性染色法：这种染色方法基于酸碱中心的化学反应，常用酸性染料和碱性染料进行染色。
酸性染料主要用于染色细胞核和酸性细胞组分，碱性染料主要用于染色细胞质和碱性细胞组分。
基础性染色法在细胞学和组织学研究中有着广泛的应用。
4.荧光染色法：荧光染色法是利用荧光染料的特性进行染色的方法。
荧光染料在受到特定波长的激发光后，能够发射出可见光。
这种染色方法常用于细胞与组织的荧光显微镜观察、标记和分析。
5.铅盐染色法：这种染色方法利用铅盐与一些物质产生沉淀反应，从而在物体表面生成一层颜色。
铅盐染色法常用于建筑材料（如石膏、水泥等）的染色，同时也可用于鉴定纤维、纤维素素质等。
6.显色剂染色法：显色剂染色法是利用显色剂与一些物质在化学反应中产生颜色的原理进行染色的方法。
这种染色方法常用于病理学、组织学等领域的染色技术，用于显示细胞和组织中特定化学物质的分布和含量。
7.包裹染色法：这种染色方法是指将其中一种物质（如蜡、树脂等）包裹在物体表面，然后通过对包裹物进行染色的方法。
包裹染色法常用于生物学实验中对载玻片进行固化、染色和显微观察，以便进行组织学研究。
以上是几种常见的染色方法及其应用。
不同的染色方法在不同领域具有特定的优势和适用范围，选择合适的染色方法对于研究和应用具有重要的意义。
实验四其他染色法
结核分枝杆菌镜下形态
抗酸染色法
涂片：
用接种环直接挑取标本中脓性涂片。自然 枯燥后火焰固定。
抗酸染色法
1、初染：将涂片用夹子夹住，外表覆盖一层吸水纸，滴加 石碳酸复红，并在载玻片下方用弱火加热至出现蒸汽〔勿 煮干或煮沸〕，随时补充染料以防干涸，持续5分钟，水 洗。
2、脱色：用3%盐酸酒精脱色，直至无红色染液脱下，水洗。
3、复染：用美兰染1分钟，水洗，吸干，在油镜下观察。
结果观察：淡蓝的背景下可见染成红色的细 长或略带弯曲的杆菌，有分枝生长 趋向，此即为抗酸阳性杆菌，其他 细菌或细胞被染成蓝色，根据各 实验室的标准报告：-，+，+， ++，+++，++++。
实验四其他染色法
墨汁负染
• 方法：滴1-2滴墨汁在载玻片上，挑少许新 型隐球菌混匀，盖上盖玻片，直接镜检。
新型隐球菌墨汁负染
趋向，此即为抗酸阳性杆菌，其他 用趋接向种 ，环此直即接为挑抗取酸标阳本性中杆脓菌性，或其干他酪样局部痰，制成20MMX25MM大小的均匀薄涂片，或经屡次薄涂片制成厚涂片。 抗细酸菌染 或色细法胞被染成蓝色，根据各 2趋、向脱，色此：即用为3抗%酸盐阳酸性酒杆精菌脱，色其，他直至无红色染液脱下，水洗。 结用果接观 种察环：直淡接蓝挑的取背标景本下中可脓见性染或成干红酪色样的局细部痰，制成20MMX25MM大小的均匀薄涂片，或经屡次薄涂片制成厚涂片。 长2、或脱略色带：弯用曲3的%杆盐菌酸，酒有精分脱枝色生，长直至无红色染液脱下，水洗。 长 趋或向略，带 此弯 即曲 为的 抗杆 酸菌 阳， 性有杆分 菌枝 ，生 其长 他 用方接法种 ：环滴直1-2接滴挑墨取汁标在本载中玻脓片性上或，干挑酪少样许局新部型痰隐，球制菌成混2匀0M，M盖X2上5盖MM玻大片小，的直均接匀镜薄检涂。片，或经屡次薄涂片制成厚涂片。 结实果验观 室察的：标淡准蓝报的告背：景-，下+，可+见，染成红色的细 细菌或细胞被染成蓝色，根据各 3抗、酸复染染色：法用美兰染1分钟，水洗，吸干，在油镜下观察。 抗实酸验染 室色的法标准报告：-，+，+， 方长法或： 略滴带1弯-2曲滴的墨杆汁菌在，载有玻分片枝上生，长挑少许新型隐球菌混匀，盖上盖玻片，直接镜检。 趋 结向果，观此 察即 ：为 淡抗 蓝酸 的阳 背性 景杆下菌 可， 见其 染他 成红色的细 趋向，此即为抗酸阳性杆菌，其他
碘液染色法的操作步骤
碘液染色法的操作步骤碘液染色法是一种常用于生物学实验室中的染色方法，可用于观察细胞和组织的结构及某些细胞器的位置。
下面将介绍碘液染色法的操作步骤。
一、准备工作1. 确保实验室环境整洁，操作台面干净无尘。
2. 根据实验需要，准备好所需的试剂和器材，包括碘液、载玻片、显微镜等。
二、制备碘液1. 取一小瓶，加入适量的碘酒和碘化钾。
根据实验需要，可根据需求量的比例混合这两种试剂，使其溶液浓度适中。
2. 用去离子水或蒸馏水将溶液稀释至适当浓度，使其呈现深棕色或深橙色。
三、标本制备1. 选择要观察的标本，可以是细胞培养物、动植物组织切片等。
确保标本保存完整并无污染。
2. 将标本放置在载玻片上，用显微镊子轻轻铺平。
注意不要弄坏标本。
3. 用酒精棉球轻轻擦拭载玻片，以去除表面的污垢和油脂。
四、染色处理1. 将制备好的碘液均匀地滴在标本上，使标本完全覆盖。
注意不要滴过多碘液，以免溢出。
2. 将滴有碘液的载玻片放入湿润的皿中，用盖玻片或盖子盖好，避免蒸发。
3. 将标本在碘液中浸泡一段时间，具体时间根据需要而定。
通常情况下，细胞染色需要5-10分钟，组织切片染色需要15-30分钟。
4. 注意观察标本的染色程度，染色时间过长会导致染色过度，影响观察结果。
五、洗涤1. 将载玻片取出，用流动的水轻轻冲洗标本，直至水清。
2. 注意不要用力冲洗，以免标本脱落或损坏。
六、干燥1. 将洗净的载玻片放置在干燥的环境中，让标本自然晾干。
可以使用吹风机低温吹干，但要注意距离和温度，避免过热。
七、封片1. 使用显微镊子将晾干的载玻片取出，放在显微镜盖玻片上。
2. 在载玻片上滴一滴封片剂，然后将盖玻片轻轻压在载玻片上，使标本紧密贴合。
3. 将载玻片放置在平坦的表面上，待封片剂干燥后，即可进行观察。
八、观察和记录1. 将封好的载玻片放在显微镜上，调节倍镜和焦距，观察标本的细胞结构和染色情况。
2. 使用显微镜下的目镜和物镜，观察细胞核、细胞质和细胞器的形态和位置。
涂片染色常用的方法
涂片染色常用的方法涂片染色是一种常用的细胞学技术，用于观察和研究细胞的形态、结构和功能。
涂片染色的方法有多种，下面将介绍几种常用的涂片染色方法。
1. 哈里斯涂片染色法哈里斯涂片染色法是最常用的涂片染色方法之一。
该方法使用的染色剂是吉姆萨精和伊红，可以染出细胞核和细胞质的不同部分。
首先，将待染细胞制备成涂片。
然后，用吉姆萨精染色液涂在涂片上，使细胞核呈蓝色。
接着，用伊红染色液涂在涂片上，使细胞质呈粉红色。
最后，用水洗净并使其干燥，即可观察到染色后的细胞。
2. Giemsa染色法Giemsa染色法是涂片染色中常用的一种方法。
该方法使用的染色剂是吉姆萨染色液，可以染出细胞核和细胞质的不同部分。
该方法的步骤与哈里斯涂片染色法类似，但染色液的配方和处理时间有所不同。
Giemsa染色法染出的细胞呈紫色，细胞质呈粉红色，可以清晰地观察到细胞的形态和结构。
3. Wright染色法Wright染色法是一种常用的涂片染色方法，适用于骨髓细胞和血液细胞的染色。
该方法使用的染色剂是Wright染色液，可以染出细胞核和细胞质的不同部分。
首先，将待染细胞制备成涂片。
然后，将Wright染色液滴在涂片上，使细胞呈深紫色。
接着，用水洗净并使其干燥，即可观察到染色后的细胞。
4. 原位杂交染色法原位杂交染色法是一种用于检测DNA序列的涂片染色方法。
该方法使用的染色剂是荧光标记的探针，可以与待检测的DNA序列特异性结合。
首先，将待染细胞制备成涂片。
然后，将荧光标记的探针加在涂片上，使其与目标DNA序列发生杂交。
接着，用荧光显微镜观察涂片，可以看到荧光信号，从而确定目标DNA序列的存在与分布。
5. PAS染色法PAS染色法是一种用于检测糖原和多糖的涂片染色方法。
该方法使用的染色剂是Periodic Acid-Schiff（PAS）反应液，可以将糖原和多糖染成紫红色。
首先，将待染细胞制备成涂片。
然后，将PAS反应液滴在涂片上，使其与糖原和多糖发生反应。
各种染色方法及应用
各种染色方法及应用染色是一种常见的化学实验和工艺，在许多领域都有广泛的应用。
本文将介绍各种染色方法及其应用。
1.染料染色：染料染色是最常见的染色方法之一、染料是一种可溶于水或溶剂的有色化合物，通常由有机合成得到。
染料染色适用于各种材料，如纺织品、纸张、皮革等。
染料染色的优点是色彩鲜艳、染色均匀，并且染色过程简单方便。
2.染色质染色：染色质染色是用希望染色质的颜料染色，常用于生物学实验中。
染色质是一种存在于染色体中的蛋白质-核酸复合物，通过染色质染色可以观察和研究染色质的变化和分布。
常见的染色剂有吉姆萨染料、吉姆萨绿、DAPI等。
3.免疫组化染色：免疫组化染色是一种常用于检测蛋白质分布和定位的方法。
它基于免疫反应原理，通过将特异性抗体与酶、荧光物质或金粒等标记结合，使特定蛋白质在组织切片或细胞中显示出颜色或荧光。
免疫组化染色广泛应用于生物医学研究、病理学诊断和新药开发等领域。
4.电镀染色：电镀染色是一种将金属基材表面镀上一层具有颜色的金属膜的方法。
电镀染色可以改变金属基材的外观和增加表面涂层的耐腐蚀性能。
常见的电镀染色方法有阳极氧化染色和阳离子染色等。
5.实验室染色：实验室染色是一种在实验室中进行的标记方法，常用于细胞和组织的观察和研究。
实验室染色使用特定的染料或标记物，如荧光染料、酶染色剂等，可以使目标细胞或组织在显微镜下更容易观察和分析。
6.化学反应染色：化学反应染色是通过染色剂与待染物发生化学反应而得到颜色变化的方法。
常见的化学反应染色方法有铁氰化钾染色法、酚酞试剂染色法等。
化学反应染色主要用于分析化学、生物化学和医学等领域。
7.DNA染色：DNA染色是将DNA分子染色以便观察和分析的方法。
DNA 染色可以通过荧光染料、酶染色剂和银染法等方法实现。
DNA染色在基因检测、DNA分子分析和遗传学研究等领域有重要应用。
总之，不同的染色方法在各种领域都有广泛应用。
它们不仅丰富了我们对材料、细胞、组织、分子等的观察和研究，而且在医学、生物学、化学等领域中起到了重要作用。
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一．番红—苯胺蓝（或固绿）二重染色法
《福建农林大学生物学实验教学中心
生物学实验讲义》
(十) 脱蜡和染色
将已干的玻片标本，插人盛有二甲苯的染色缸中，先脱蜡10～15 分钟，然后进行染色。
高等植物的根、茎、叶组织切片，常用番红—固绿二重染色法。
染色结果是木质化的细胞壁和细胞核被染成红色，薄而具有纤维素的细胞壁及细胞质被染成绿色。
1．染色液的配方：
番红：番红(safranino) 1g 70％酒精100ml
固绿：固绿(pastgreen) 1g 95％酒精100ml
2．二重染色步骤：
经脱蜡的玻片标本→1／2 二甲苯+1／2 纯酒精(3～5min)→纯酒精(3～5min)→95％酒精(3～5min)→85％酒精(3～5min)→70％酒精(3～5min)→番红(2～24h)→85％酒精(约0.5～1min)→95％酒精(约0.5～1min)→固绿(约0.5～1 min)→无水酒精(约1min)→1／2 无水酒精+l／2二甲苯(约2min)→二甲苯(约3min)→二甲苯(约5～30min)。
固绿着色很快，当玻片材料刚刚全面转绿，立即停止染色，并迅速通过纯酒精冲洗分色，最后进人二甲苯中。
二、PAS染色方法
《PAS染色方法及应用》付银锋 2008
1 材料与方法
1．1 实验材料新鲜小白鼠肝脏、肾脏标本各30例
1．2 主要试剂
1．2．1 AAF固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液，其配方：无水乙醇80 mL，冰醋酸5 mL、甲醛10 mL。
1．2．2 Carnoy固定液氯仿300 mL，冰醋酸100mL，95％酒精600 mL。
1．2．3 过碘酸溶液 0．5 g过碘酸(HIO )溶于100mL蒸馏水或者70％酒精溶液中，或者按如下配方配制：过碘酸0．8 g，95％乙醇70 mL，醋酸钠0．27 g，水20 mL。
待溶解后置于4~C冰箱避光保存。
1．2．4 无色品红液(Sehif氏液) 在三角烧内加入蒸馏水500 mL，煮沸后，在保持微沸的情况下，加入碱性品红2．5 g，并不断摇动约5 min(勿使之沸腾)，使碱性品红彻底溶解(溶解液为深红色)。
冷却到50℃时，过滤，加入1N盐酸50 mL，再待冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠2．5 g，塞住瓶口，摇动容器以充分混合(此时颜色明显变淡)，然后避光放置或冰箱内24 h，溶液为淡黄或淡红色，再加入活性炭5 g，混合后振荡数分钟，静置1 h，再用双层滤纸过滤，此时溶液应完全无色、清澈透明，为无色品红。
封口，贮存于棕色瓶中(最好外包黑纸避光)存放人4~C冰
箱备用¨。
1．2．5 1N盐酸浓盐酸(比重1．19含量22％)8．5mL加蒸水91．5 mL或者98．3 mL比重1．16盐酸，
加入蒸馏水成1 000 mL。
1．2．6 偏重亚硫酸钠 1N盐酸7．5 mL加10％偏重亚硫酸钠(钾)7．5 mL，再加130 mL蒸馏水混合而成。
1．3 染色方法新鲜组织编号取材后，投入AAF液、Camoy固定液或者放人冰箱内低温固定。
人无水酒精中脱水、二甲苯透明、浸蜡、包埋。
常规切片厚
5urn，脱蜡至水；人0．5％一1％高碘酸氧化5—10min，环境温度以不高于
20~C为宜，室温高时氧化时间适当缩短。
流水冲洗5 rain，再用蒸馏水浸洗2次；Schif氏液(Schif氏液从冰箱取出升至室温使用)避光染色l0—30 min；0．5％偏重亚硫酸钠(钾)浸洗2次，每次1—2 min，以达到分化的目的；流水冲洗5—10 min，蒸馏水洗；Harris苏木精染2—5min，自来水洗；l％盐酸酒精分化，再用自来水充分冲洗；温水(或者1％氨水)返蓝，核染色稍浅为好；流水冲洗，常规脱水、二甲苯透明，中性树胶封固。
三、汞-溴酚蓝法
《组织细胞分子学实验原理与方法》赵宗江。