特殊染色的基本知识
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法Mallory三色染色法可用于胶原和网状纤维的染色，其中蓝色代表胶原和网状纤维，淡蓝色代表软骨、粘液和淀粉样变物质，红色代表神经胶原纤维、肌纤维和酸性颗粒，橘红色代表髓鞘和红细胞。
图表A1.1展示了Mallory三色染色法的效果，其中A组排列规则。
1.2 Masson三色染色法Masson三色染色法可用于胶原纤维和肌纤维的染色，其中绿色代表胶原纤维，红色代表肌纤维，橘红色代表红细胞。
图表B1.2和C1.2展示了Masson三色染色法在胃癌组织和血管平滑肌中的应用。
1.3 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法三联染色法可用于显示胶原、网状和弹性纤维，其中红色代表胶原纤维，黑色代表网状纤维，绿色代表弹性纤维，淡黄色代表肌肉和红细胞。
图表D展示了Weigert间苯二酚法的效果。
胶原纤维染色法2.1 天狼星红苦味酸染色法天狼星红苦味酸染色法可用于胶原纤维的染色，其中红色代表胶原纤维，绿色代表细胞核，黄色代表其他物质。
天狼星红苦味酸染色法在偏光显微镜下观察，Ⅰ型呈强双折光性，呈黄色或红色纤维，Ⅱ型呈弱双折光，呈多种色彩疏网状分布，Ⅲ型呈弱双折光，呈绿色的细纤维，Ⅳ型呈弱双折光的基膜，呈淡黄色。
图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。
2.2 Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法可用于胶原纤维的染色，其中鲜红色代表胶原纤维，黄色代表肌纤维、细胞质和红细胞，蓝褐色代表胞核。
图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。
三、网状纤维染色3.1 XXX-Sweets银氨染色法XXX-Sweets银氨染色法可用于网状纤维的染色，其中黑色代表网状纤维，红色代表胞核（核固红复染），黄棕色代表胶原纤维，淡红色代表细胞质（红液复染）。
病理学技术—特殊染色最最全总结
病理学技术—特殊染色最最全总结病理学技术是医学研究领域中的一个重要分支，它利用各种不同的方法和技术，对组织和细胞进行分析和研究。
其中，特殊染色技术是病理学技术中的一个重要组成部分，通过使用不同的染色剂，有助于观察并区分不同的细胞和组织结构，以辅助诊断和研究。
以下是对特殊染色技术的最全总结。
1. PAS染色（Periodic Acid-Schiff染色）：PAS染色可以用于检测细胞和组织中的多糖物质，如糖原、粘多糖和黏多糖等。
PAS染色通过一系列的化学反应，将含有醛基的物质氧化，然后与PAS染料反应生成染色物质。
2. 铁染色：铁染色可用于检测细胞和组织中的铁含量，它可以帮助鉴别铁负荷过多或过少的情况。
常用的铁染色方法包括Perls染色和Prussian blue染色。
3.去脂酸和酶染色：去脂酸和酶染色用于检测细胞和组织中的脂质和酶活性。
去脂酸染色通过将组织切片浸泡在油酸中，然后用溴化黄染色，观察脂质的分布情况。
酶染色通过使用特定的染色剂来观察细胞中的酶活性，如碘化物染色用于检测过氧化物酶活性。
4.免疫组织化学染色：免疫组织化学染色是通过使用特异性抗体来检测细胞和组织中的蛋白质和其他分子。
常见的免疫组织化学染色方法包括免疫荧光染色和酶联免疫组化染色。
这些染色技术可以用于确定特定抗原的存在和定位，从而帮助确定疾病的诊断和预后。
5.组织切片染色：组织切片染色是一种常见的特殊染色技术，它可以用于检测细胞和组织中的结构和细胞器。
常用的组织切片染色方法包括伊红染色、苏木素-伊红染色和单色染色等。
6.核酸染色：核酸染色用于检测细胞和组织中的核酸结构和功能，其中最常用的核酸染色方法是荧光原位杂交（FISH）和DAPI染色。
荧光原位杂交可以用来检测染色体异常和基因重排等。
7.肉眼可见染色：肉眼可见染色是一种用于检测显微镜下不易观察到的细胞和组织结构的染色技术。
常见的肉眼可见染色方法包括钙化染色和淀粉样变染色等。
总结以上所述，特殊染色技术在病理学领域中具有重要的应用意义，通过使用不同的染色剂，可以对细胞和组织进行全面和准确的分析和研究。
病理学技术——特殊染色最全总结
病理学技术——特殊染色最全总结特殊染色是病理学中常用的一种技术手段，用于染色并可视化细胞、组织或病理标本中特定的结构、细胞成分或病理损伤，从而帮助诊断人员更准确地判断疾病类型和病理变化程度。
特殊染色的种类繁多，下面将对一些常见的特殊染色进行全面总结。
一、银染色法银染色法是通过化学反应使待染物质与银盐结合，生成黑色或褐色沉淀，并在显微镜下观察变化。
常见的银染色方法有：Reticulin（網狀纖維）染色、Gomori银染色、Grocott-Methenamine银染色。
二、PAS染色PAS染色（Periodic Acid-Schiff染色）是一种常见的特殊染色技术，用于检测糖原以及其他多糖类物质。
通常使用的PAS染色是将待染物标本与过氧化铬酸溶液（Periodic Acid）处理后再使用Schiff试剂进行染色的方法。
PAS染色为酸性物质染成红色，大多为胞浆染色。
常见的应用包括鉴别肝细胞变性、神经纤维、肾小管等结构。
三、 Masson三色染色法Masson三色染色法是一种多彩染色方法，通过染色剂的组合可染出细胞核、胶原纤维和细胞质等不同组织成分。
Masson三色染色方法包括酸性区域以绿色染色显示胶原纤维，细胞核以黑色或暗蓝色染色显示，胞质以红色染色显示。
该染色法在组织纤维化、炎症反应等病变的检测中应用广泛。
四、Mallory三色染色法Mallory三色染色法和Masson三色染色法类似，可以用于显示胶原纤维、细胞核和胞质等组织成分。
其区别在于Mallory三色染色法标本在染色前需用盐酸处理，使染色剂更易于沉积在纤维上，能更清晰地显示组织纤维结构。
五、Giemsa染色Giemsa染色通常用于血液和骨髓涂片的染色，并可以显示细胞核、染色质和胞质等成分。
Giemsa染色法有多种方法，如Giemsa-Eosin染色法、Giemsa-Wright染色法等，可根据需要选用。
六、von Kossa染色法von Kossa染色法用于检测组织中的钙盐沉积，如血管壁的钙化、尿路结石等。
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)资料讲解
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则1.2. Masson三色染色法绿色：胶原纤维红色：肌纤维橘红色：红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维黑色：网状纤维绿色：弹性纤维淡黄色：肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2. Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法鲜红色：胶原纤维黄色：肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色：胞核图表 E 2.胶原纤维，Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞 myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。
2.1 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图)红色：胶原纤维绿色：细胞核黄色：其他三、网状纤维染色3.1 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维红色：胞核（核固红复染）黄棕色：胶原纤维淡红色：细胞质（红液复染）图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori氏银氨液配制法图表 G Gomori氏银氨液配制法四、弹性纤维染色Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表 H 4.GOMORI醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色：弹性纤维红色：胶原纤维黄色：背景图表 I 4.Weigert间苯二酚法六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH）蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色：粗弹性纤维（有时）紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌图表 J 6.1.磷钨酸苏木素法图表 K 6.1.磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法（1974年）红色：缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色：正常心肌蓝色：细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色（光学显微镜, ×200）2.Poley显示缺氧心肌染色法（1964年）红色：缺氧心肌紫色：胞核绿色：其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff（PAS）染色法红色：糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色：细胞核图表 L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质（黏多糖）染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（ABPAS）染色法（1956）红色：中性黏液物质蓝色：酸性黏液物质紫红色：混合性黏液物质图表 M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表 N 8.1.胃粘膜组织 AB-PAS染色 40×：2.爱先蓝（PH2.5）法蓝色：唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色：胞核不着色：强硫酸化黏液物质图表 O 8.2.爱先蓝（PH2.5）染色液图表 P 8.2.爱先蓝法图表 Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝（PH1.0）法蓝色：含硫酸黏液物质不着色：非硫酸化酸性黏液物质红色：复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色：黑色素及嗜银细胞颗粒红色：胶原纤维浅黄色：背景图表 R 9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色：黑色素浅绿或不着色：背景黄色：肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue（普鲁士蓝）反应显示三价铁蓝色：含铁血黄素浅红色：其他组织图表 S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞内。
规培考试笔记｜特殊染色技术总结
规培考试笔记｜特殊染色技术总结【常用染色方法】•各类间叶组织染色1、结缔组织多色染色：Masson三色染色法。
2、胶原纤维染色：Van Gieson苦味酸酸性品红染色法。
3、网状纤维染色：醋酸氨银染色法。
4、弹力纤维染色：Verhoeff铁苏木素染色法。
5、横纹肌染色：Mallory磷钨酸-苏木素（PTAH）染色法。
•神经组织染色1、尼氏小体染色：硫堇染色法。
2、神经元和神经纤维染色：Bielschowsky改良法。
3、神经髓鞘染色：Weil染色法。
4、神经胶质细胞染色：Cajal神经胶质细胞染色。
5、能同时显示髓鞘和尼氏小体的染色方法是Luxolfastblue染色法。
•各类聚集物质染色1、脂类物质染色：苏丹Ⅲ染色法。
2、黏液物质染色：过碘酸雪夫染色（PAS染色），又称糖原染色。
3、黑色素染色：氨银染色法（Masson-Fontana染色法）。
4、淀粉样物质染色：刚果红特殊染色法。
•病原菌染色1、抗酸杆菌染色：改良的Ziehl-Neelsen染色法。
2、真菌染色：Grocott六胺银染色法。
3、螺旋体染色：Warthin-Starry染色法。
【染色结果及用途】•各类间叶组织染色1、结缔组织多色染色用苯胺蓝复染时，胶原纤维、软骨、黏液呈蓝色；用亮绿色复染时，胶原纤维、软骨、黏液呈绿色。
肌纤维、红细胞、神经胶质呈红色，胞核呈清晰的蓝黑色。
主要用于肝脏和肾脏穿刺病理的诊断和鉴别。
2、胶原纤维染色镜下胶原纤维呈鲜红色，肌纤维胞质、神经胶质及红细胞呈黄色。
主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别诊断。
3、网状纤维染色镜下网状纤维呈黑色。
在免疫组化开展前用于癌与肉瘤、血管内皮肿瘤与血管外皮肿瘤的鉴别诊断，目前用于观察病变组织纤维化程度。
4、弹力纤维染色镜下弹力纤维呈黑蓝色。
用于显示真皮弹力纤维增生和变性等多种皮肤疾病，观察心内膜和血管壁中弹力纤维增生程度，显示肿瘤组织中的弹力纤维等。
5、横纹肌染色横纹肌纤维呈紫蓝色，胶原纤维和网状纤维呈棕红色。
(上课用)特殊染色和组织化学分析
所谓特殊染色的相对性，就是一种方 法可以显示多种目的物，一种目的物 可以用多种方法显示，其中有些方法 可能呈阳性，而有些方法则呈阴性， 这就需要我们拿捏多种方法，因为有 时只有依靠多种方法才能确定所要确 认的目标。
2.特殊染色的分类
特殊染色方法按照所染目的物进行
分类，有结缔组织、肌肉组织、神经组织、 脂类物质、糖类、色素、病理的内源性沉 着物、病原微生物、内分泌物质、骨、血 液及造血组织、核酸、酶类等。
特殊染色及组织化学
赣南医学院病理学教研室
第一节 特殊染色及组织化学的基本知识
一、染色方法
1863年由waldeyer率先倡导用苏木素染 液染细胞核，后来Mallory、Mayer等也阐述过 苏木素的应用。近年来特殊染色和组织化学方 法也屡有创新。Shikata(1973)，Tanka等 (1981年)分别介绍了用地依红和维多利亚蓝混 合液显示乙型肝炎表面抗原的方法；1987年 Crocker J等推出了核仁组成区嗜银蛋白染色 的技术方法以及1991年进行的乳腺肿瘤核仁组 成区的研究方法等。
四、染色的分类
(一)普通染色
最广泛应用于常规制片的苏木素和伊
红染色，又称为常规染色。
(二)特殊染色
1．定义 专门用于显示某些特定目的物的染色 方法称为“特殊染色”，它又可以理解为 “选择性染色”。 特殊染色对目的物的选择性是相对的。有 些方法具有相对的特异性，如油红O等脂质 染色，显阳性者可以肯定为脂质；有些则显 示的是一类物质，如PAS呈阳性反应者有糖 原、粘蛋白、网织纤维、软骨、阿米巴原虫、 霉菌等许多物质和组织结构，并不能确定是 哪一种具体成分。
五、组织化学的基本概念
组织化学是在形态学基础上研究细胞 或组织中物质的化学组成、定位、定量及 代谢状态的学科，是组织学与生物学及生 物化学等的边缘科学，其目的是联系形态， 化学成分和功能来了解组织或细胞的代谢 变化。 目前有许多组织化学方法已划入特殊 染色，划分特殊染色和组织化学无绝对界 限。
细菌特殊的染色方法
细菌特殊的染色方法摘要：一、细菌染色的基本原理二、常见细菌染色方法1.单染色法2.双染色法3.荧光染色法4.免疫染色法三、特殊染色方法的应用1.染色对细菌的识别和分类2.染色在疾病诊断中的应用3.染色在科学研究中的作用四、染色方法的优缺点对比五、未来细菌染色技术的发展趋势正文：细菌在生物学、医学和微生物学等领域具有重要的研究价值。
为了更好地观察和研究细菌，染色技术在细菌检测、识别和分类中起到了关键作用。
本文将介绍细菌的特殊染色方法，包括基本原理、常见染色方法、应用领域、优缺点对比以及未来发展趋势。
一、细菌染色的基本原理细菌染色是通过染色剂与细菌细胞成分发生特定的化学反应，使细菌呈现出不同颜色，从而便于观察和识别。
染色的基本原理包括吸附、渗透、吸附与渗透相结合等。
染色过程中，染料与细菌细胞成分结合，使细菌具有特定的颜色。
二、常见细菌染色方法1.单染色法：使用一种染料对细菌进行染色，如革兰氏染色、鞭毛染色等。
这种方法简单、快速，但对细菌的形态和结构观察不够详细。
2.双染色法：使用两种染料对细菌进行染色，如荧光染色法、相差染色法等。
这种方法可以同时显示细菌的两种不同属性，如形态和生理功能。
3.荧光染色法：利用荧光染料对细菌进行染色，通过荧光显微镜观察细菌的形态和分布。
这种方法具有高灵敏度和特异性，适用于活细胞染色。
4.免疫染色法：利用特异性抗体与细菌表面抗原结合，再通过染色剂显色。
这种方法可对细菌进行准确识别和分类，适用于病原菌检测和研究。
三、特殊染色方法的应用1.染色对细菌的识别和分类：染色方法有助于鉴别不同种类的细菌，如革兰氏阳性菌和阴性菌，以及观察细菌的形态和结构。
2.染色在疾病诊断中的应用：免疫染色法可用于检测病原菌，有助于临床诊断和治疗感染性疾病。
3.染色在科学研究中的作用：特殊染色方法可应用于细菌的生理、生化和分子生物学研究，揭示细菌的生长、繁殖和代谢等机制。
四、染色方法的优缺点对比1.优点：染色方法操作简便，结果直观，适用于各类细菌的观察和研究。
-特殊染色
（二）网状纤维染色的原理
网状纤维的染色方法很多，但是染色原理 基本相同，有以下方面。 （1）氧化 使网状纤维具有选择性，不经氧化的切片，常 用的氧化剂是高锰酸钾。 （2）漂白 一般采用2%草酸，漂白后无色
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（3）媒染 多用2%硫酸铁氨（俗称铁明矾）。 这些试剂可增加网状纤维对银氨液的选择性。 （4）浸银 也称镀银，使银氨配位化合物与网状纤维结合， 带正电荷的二氨合银Ag（NH3）+2被具有嗜银性 物质的网状纤维吸附。 （5）还原 甲醛液是还原剂，能把与网状纤维结合的银氨配 位化合物还原成棕黑色的金属银。
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操作方法：
(1)切片常规脱蜡至水，蒸馏水洗； (2)Weigent氏苏木素液染核5分钟； (3)自来水洗； (4)1%盐酸分化 (5)自来水洗； (6)丽春红--酸性品红溶液染5-8分钟；
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(7)1%醋酸水溶液洗； (8)1%磷钼酸分化（1-3分钟）直到各种成分被
染清晰（胶原纤维呈淡红色，肌纤维、纤维素 呈鲜红色） (9)2%亮绿液染2-5分钟（或用2%苯胺蓝水溶液 替代） (10)水洗（快速） (11)常规脱水、透明、封片。
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【结果】 胶元纤维呈红色，肌纤维、胞质及
红细胞黄色。
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㈡ 胶元纤维染色应用
胶原纤维染色在病理诊断上主要用于鉴定梭 形、纤维形细胞肿瘤的组织来源；
常常要在纤维、平滑肌和神经三者之中作出 选择。
观察动脉硬化的心脏，在HＥ切片中，心肌 内散在的小疤痕灶和心肌均被染作红色，而作胶 原纤维染色可将胶原组织和肌肉上明显地区分开 来。
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【染色结果】
胶原纤维绿色(亮绿)（或苯胺蓝,蓝色） 肌肉、纤维素红色，红细胞橘黄色，核蓝 黑色。
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特殊染色的基本知识
一、染色方法
1863年由waldeyer率先倡导用苏木素染液染细胞核，后来Mallory、Mayer等也阐述过苏木素的应用。
近年来特殊染色和组织化学方法也屡有创新。
Shikata(1973)，Tanka 等(1981年)分别介绍了用地依红和维多利亚蓝混合液显示乙型肝炎表面抗原的方法；1987年Crocker J等推出了核仁组成区嗜银蛋白染色的技术方法以及1991年进行的乳腺肿瘤核仁组成区的研究方法等。
特殊染色的分类：
特殊染色方法按照所染目的物进行分类，有结缔组织、肌肉组织、神经组织、脂类物质、糖类、色素、病理的内源性沉着物、病原微生物、内分泌物质、单种细胞和性染色质、骨、血液及造血组织、核酸、酶类等。
特殊染色的命名：
对于特染的命名至今尚无统一的规定，多数均按发明者的姓名命名，如van Geison 染色等；有的则按所用染色液命名，如甲基绿一派若宁染色、苏丹Ⅲ染色等；有的按目的物命名，如网织纤维染色；还有的采用混合命名，如试剂十人名等。
二、染色目的
未加染色的任何组织切片在镜下只能辨认细胞和胞核的轮廓，看不清楚其他任何结构。
染色的目的就是将组织切片浸入染色剂内，经过一定的时间，将组织或细胞及其他异常成分染上不同深浅的颜色，便于在光学显微镜下进行观察。
三、染色原理
染色过程是染色剂和组织细胞相结合的过程。
其机理尚未完全清楚。
1、有学者认为从物理学角度看，染色剂和组织细胞的结合是“溶解”或“吸收”。
例如苏丹类染色剂使脂质着色，就是利用染色剂在脂质中的溶解度大于在洒精等溶剂中的溶解度这一特性。
有些染色剂是染色剂分子通过渗透和毛细血管作用而被吸收或沉淀到组织、细肋的小孔中去而着色的‘这种机制的染色是很少的。
2、另有学者认为染色是染色剂相组织、细胞之间的化学性结合。
如显示含铁血黄素的普鲁士反应是最典型的例子。
但是，大量染色的化学反应并不象铁反应那样明确。
大多数染色的原理至今仍未搞清楚，有些可能是物理性的，有些可能是化学性的，有些则可能2种机制都起作用。
正因为人们对染色的原理还没有完全掌握，所以还不能很好地运用原理来控制它，在相当程度上需凭工作经验。
四、染色的分类
(一)普通染色
最广泛应用于常规制片的苏木素和伊红染色，又称为常规染色。
(二)特殊染色
1．定义专门用于显示某些特定目的物的染色方法称为“特殊染色”，它又可以理解为“选择性染色”。
特殊染色对目的物的选择性是相对的。
有些方法具有相对的特异性，加油红O等脂质染色，显阳性者可以肯定为脂质；有些则显示的是一类物质，如PAS呈阳性反应者有糖原、粘蛋白、网织纤维、软骨、阿米巴原虫、霉菌等许多物质和组织结构，并不能确定是哪一种具体成分。
所谓特殊染色的相对性，就是一种方法可以显示多种目的物，一种目的物可以用多种方法显示，其中有些方法可能呈阳性，而有些方法则呈阴性，这就需要我们拿捏多种方法，因为有时只有依靠多种方法才能确定所要确认的目标。
2．特殊染色的意义
1)可以显示在常规HE染色切片中不明显的目的物,例如当病变中霉菌数量较少时，应用Gridley染色就容易发现。
2)可以区别胶原纤维和平滑肌，苏丹染色可区别脑浆内的脂肪变和水池变。
3)可以显示某些HE染色中不能看到的目的物。
如网织纤维、星形细胞的突起、结核杆菌、螺旋茵等，都可用相应的特殊染色法显示。
因此，特殊染色是常规染色的必要补允，也是染色技术中不可缺少的组成部分。
它在病理诊断中起着辅助作用。