培养基适用性验证方案-wm
培养基适用性验证方案
编制人：________________ 日期：_________________ 审核人：________________ 日期：_________________
批准人：________________ 日期：_________________
目录
1. 概述
2. 验证目的
3. 验证依据
4. 验证项目
5. 验证小组成员及职责
6. 验证时间
7. 验证材料
8. 验证内容
8.1.无菌检查用培养基适用性验证
8.2.计数用培养基适用性验证
9. 验证方案的评定与建议
10. 验证方案的最终审核意见
培养基适用性验证报告
1.概述
培养基是无菌检查和微生物限度检查的关键物品之一，培养基的是否符合检验要求，影响着检验结果的准确性、有效性。
2.验证目的
验证培养基是否符合检验要求
3.验证依据
《中国药典》2015版通则1101生物检查法
4.验证项目
无菌检查用培养基：硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基、营养肉汤；
计数用培养基：胰酪大豆胨琼脂培养基、沙式葡萄糖琼脂培养基、R2A琼脂培养基、大
豆酪蛋白琼脂培养基
5.验证小组成员
6.验证时间
本次验证于2016年1月18日开始进行，将于2016年1月22日完成
7.验证材料
7.1.仪器设备
手提式压力蒸汽灭菌器、生物安全柜、生化培养箱、霉菌培养箱、电热鼓风干燥箱、
净化工作台
7.2.对照培养基
胰酪大豆胨琼脂对照培养基、沙式葡萄糖琼脂对照培养基、R2A琼脂对照培养基、大豆
酪蛋白琼脂对照培养基
7.3.其他器具
酒精灯、试管、75%乙醇、灭菌刻度吸量管(1ml)、灭菌硼硅酸玻璃培养皿(© 90mr K 15mm)、
锥形瓶，移液器，无菌吸头等。
7.4. 菌种
金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌、黑曲霉、白色念珠菌；
8. 验证内容
8.1.无菌检查用培养基适用性验证
8.1.1. 无菌性验证
随机选取灭菌后硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基各5 瓶，并对培养基分别编号。
将硫乙醇酸盐流体培养基置30〜35°C培养14天；将改良马丁培养基置23〜28°C培养14天，逐日观察。
8.1.2. 灵敏度验证
取每管装量为12ml的硫乙醇酸盐流体培养基9支，分别接种小于100cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2支，并分别编号为1、2号，另取一支不接种作为空白对照，置30〜5C培养3天，逐日观察结果；取每管装量为9ml的改良马丁培养基5支，分别接种小于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉各2支，并分别编号为1、2号，另一支不接种作为空白对照，置23〜28C培养5天，逐日观察结果。
8.1.3. 结果判定
无菌性检查，应无菌生长；灵敏度检查，空白对照管应无菌生长，加菌的培养基管均生长良好，判无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基符合培养基的无菌性检查及灵敏度检查的要求。
8.2.计数用培养基适用性检查
8.2.1.取铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽抱杆菌各50〜100cfu/ml各1ml，分别注入
无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置30〜35C培养72小时，计数；取白色念珠菌、黑曲霉菌各50〜100cfu/ml各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙式葡萄糖琼脂培养基，每株试验菌平行制备 2 个平皿，混匀，凝固，置23〜28 C培养120小时，计数。
8.2.2.取铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽抱杆菌各50〜100cfu/ml各1ml，分别注入
无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置30〜35C培养72小时，计数；取白色念珠菌、黑曲霉菌各50〜100cfu/ml 各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙式葡萄糖琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置23〜28C培养120小时，计数。
8.2.3.大豆酪蛋白琼脂培养基适用性检查同胰酪大豆胨琼脂培养基。
8.2.4.取铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌各50〜100cfu/ml各1ml，分别注入无菌平皿中，立即
培养基适用性验证方案
倾注R2A琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置30〜35C培养72小时，计数；同法接种于R2A琼脂对照培养基。
8.2.5. 结果判定
若被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70％，且菌落形态大
小与对照培养基上的菌落一致，判该培养基的适用性检查符合规定。
9. 验证方案的评定和建议
10. 验证方案的最终审核意见
培养基适用性验证方案
培养基适用性验证报告1.被验证培养基
2.对照培养基
3.仪器设备
4.菌种
5.验证结果
5.1.无菌检查用培养基适用性验证
结果见附件；确认结果：□符合规定□不符合规定
5.2.计数用培养基适用性验证结果
结果见附件；确认结果：□符合规定□不符合规定
6.验证结论
按《中国药典》2015版通则1100生物检查法中规定的方法进行相应的培养基的适用性验证，结果
无菌检查用培养基适用性验证结果
注：记录时，“ + "表示生长良好，“-”表示无生长，“±表示生长微弱，“ /”表示不涉及，“J 勾选项
检验人/日期:
附件:
复核人/日期:
计数用培养基适用性验证结果
注：不涉及项用“ /”表示，选择项用“表示
检验人/日期: 复核人/日期:。
培养基适用性检查方法的验证
. 培养基适用性检查方法的验证验证目的：确认所采用的方法适合于供试品的无菌检查。
即确认供试品在该检验量、该检验条件下无抑菌活性或其抑菌活性已被充分消除到可以忽略不计，以保证检验结果的准确、可靠及检验方法的完整性。
KHCa23ypw2. 验证时机[4SP | AFz2.1. 建立药品的无菌检查法时D 3jPp4h2.2. 修订检验方法时^y B:+ -S42.3. 供试品的组分或原检验条件发生改变可能影响检验结果时9C~R3. 验证要求17|Y l3.1. 验证时，按“供试品的无菌检查”的规定要求进行操作试验。
agi; @ PI3.2. 对每一试验菌应逐一进行验证。
*^kczYifAK3.3. 硫乙醇酸盐流体培养基—金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌。
V20@ m@+OD3.4. 改良马丁琼脂培养基—白色念珠菌、黑曲霉。
WuQ} >^BQ*3.5. 验证试验所用的菌株传代次数不得超过5代，并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物学特性。
3#~20 I/3.6. 验证试验可在供试品的无菌检查之前或与供试品的无菌检查同时进行。
当同时进行时，若验证试验失败，则供试品的无菌检查结果是不成立的。
+ 9 bN7=4. 验证程序=y 5Q|v ;4.1. 验证准备：准备验证所需的供试品、培养基、试药试剂、仪器设备和菌种。
` ;2/Gh* N4.1.1. 培养基gj$/ B-_E<硫乙醇酸盐流体培养基；改良马丁琼脂培养基；营养琼脂培养基；血琼脂培养基1~H/4^ }备注：1c1W _X Wa) 培养基应注明来源；如采用市售干粉培养基，应按说明配制。
q4X"U! 9b) 配制后的培养基应按照中国药典附录“无菌检查法”中“培养基的适用性检查”项下检验无菌性和灵敏度。
q;k b .]k4.1.2. 仪器设备 44.1.2.1. 净化工作台U:Z`At9Z2_4.1.2.2. 生物洁净安全柜2Z: 7y0+ m4.1.2.3. 集菌仪=HwM H 0j4.1.2.4. 生化培养箱W &-B51w^4.1.2.5. 霉菌培养箱y _\ - *4.1.2.6. 高温试验箱_t0a`Y T9y4.1.2.7. 台式灭菌器O Plk%5=8~4.1.2.8. 医药品冷藏柜A[ Qj:^v4.1.2.9. 微波炉&:3 T备注：以上仪器设备需要验证的均应已按要求验证过。
纯化水需氧菌总数计数用培养基适用性检查验证方案
1.概述:培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。
适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制是提供优质培养基的保证。
供试品微生物限度检查中所使用的培养基应进行适用性检查。
2.验证目的：本次验证的目的是确认纯化水微生物限度检查中需氧菌总数计数用用的R2A琼脂培养基的质量，以及其制备程序、保存条件等是否满足微生物限度检查用要求。
3.验证依据：《中国药典》2015年版四部“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法”、“《中国药典》2015年版二部纯化水质量标准”。
4.验证项目：R2A琼脂培养基的适用性检查。
5.适用范围：成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基适用性检查。
6.验证周期：除另有规定外，在实验室中，若采用已验证的配制和灭菌程序制备培养基且过程受控，那么同一批脱水培养基的适用性检查试验可以只进行一次。
如果培养基的制备过程未经验证，那么每一灭菌批培养基均要进行适用性检查试验。
7.验证小组人员及职责：7.1验证小组人员:小组人员职务姓名签字所在部门职务组长质量部质量总监组员质量控制实验室QC主任组员质量控制实验室微生物QC7.2验证人员职责及要求7.2.1按验证方案及相关文件实施验证。
7.2.2认真观察并做好验证原始记录。
7.2.3对实施验证的结果负责。
7.3验证中各部门的职责7.3.1验证领导组职责7.3.1.1制订验证总计划，负责全公司验证工作的管理。
7.3.1.2确定验证项目及验证项目负责人。
.7.3.1.3负责验证方案的批准工作。
7.3.1.4负责验证资料及结果的审核工作。
7.3.1.5负责验证报告的批准工作。
7.3.2验证项目小组职责7.3.2.1负责验证方案的起草工作。
7.3.2.2参与验证方案的讨论、确认工作。
7.3.2.3负责验证方案的实施。
7.3.2.4负责验证结果的分析、统计、报告工作。
7.3.2.5参与验证结果的评价工作。
7.3.3质量部职责7.3.3.1负责公司验证日常管理工作。
7.铜绿假单胞菌检查用培养基适用性检查验证方案
1.概述:培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。
适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制是提供优质培养基的保证。
供试品微生物限度检查中所使用的培养基应进行适用性检查。
2.验证目的：本次验证的目的是确认铜绿假单胞菌检查用培养基适用性检查用的溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基的质量，以及其制备程序、保存条件等是否满足微生物限度检查用要求。
3.验证依据：《中国药典》2015年版四部“1106非无菌产品微生物限度检查：微生物控制菌检查”、“9203药品微生物实验室质量管理指导原则”。
4.验证项目：溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基的适用性检查。
5.适用范围：成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基适用性检查。
6.验证周期：除另有规定外，在实验室中，若采用已验证的配制和灭菌程序制备培养基且过程受控，那么同一批脱水培养基的适用性检查试验可以只进行一次。
如果培养基的制备过程未经验证，那么每一灭菌批培养基均要进行适用性检查试验。
7.验证小组人员及职责：7.1验证小组人员:7.2验证人员职责及要求7.2.1按验证方案及相关文件实施验证。
7.2.2认真观察并做好验证原始记录。
7.2.3对实施验证的结果负责。
7.3验证中各部门的职责7.3.1验证领导组职责7.3.1.1制订验证总计划，负责全公司验证工作的管理。
7.3.1.2确定验证项目及验证项目负责人。
7.3.1.3负责验证方案的批准工作。
7.3.1.4负责验证资料及结果的审核工作。
7.3.1.5负责验证报告的批准工作。
7.3.2验证项目小组职责7.3.2.1负责验证方案的起草工作。
7.3.2.2参与验证方案的讨论、确认工作。
7.3.2.3负责验证方案的实施。
7.3.2.4负责验证结果的分析、统计、报告工作。
7.3.2.5参与验证结果的评价工作。
7.3.3质量部职责7.3.3.1负责公司验证日常管理工作。
7.3.3.2负责验证方案的审核工作。
7.3.3.3负责验证过程中仪器、仪表、计量器具的校验工作。
胰酪大豆胨琼脂培养基培养基适用性验证方案
胰酪大豆胨琼脂培养基适用性验证方案目的：验证胰酪大豆胨琼脂培养基适合需氧菌计数的测定；验证同一厂家，不同批号，对培养基适用性无明显差异。
范围：胰酪大豆胨琼脂培养基。
内容：1. 概述培养基质量是影响微生物检验结果的重要环节。
计数测定用培养基的促生长能力是微生物限度检查结果判断的重要影响因素，对菌落颜色、形态等指标存在较大差异，从而影响结果判断的客观性。
培养基适用性检查是通过检验用培养基与对照培养基的比较，以阳性菌的生长状态或特征来评价判断检验用培养基是否符合检验要求。
2. 验证原因按2015版《中国药典》微生物限度检验要求。
3. 验证过程3.1 验证人员：组长：组员：3.2 验证时间年月日至年月日3.3 验证用仪器3.4 验证用培养基及试剂3.5 验证用菌种3.6 菌液制备接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至10ml 胰酪大豆胨液体培养基中，在32℃培养24小时，然后用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至每1ml 含菌数小于100cfu 的菌悬液。
3.7 适用性检查3.7.1 取上述金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌菌液各2ml ，分别注入6个无菌平皿内（每皿1ml 菌液），加入菌液后立即倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，同时制备1个胰酪大豆胨琼脂培养基平皿加入0.9%无菌氯化钠溶液，做无菌性检查，混匀，凝固，置32℃下倒置培养72小时，计数；3.7.2. 取上述金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌菌液各2ml ，分别注入6个无菌平皿内（每皿1ml 菌液），加入菌液后立即倾注胰酪大豆胨琼脂对照培养基，同时制备1个胰酪大豆胨琼脂培养基平皿加入0.9%无菌氯化钠溶液，做无菌性检查，混匀，凝固，置32℃下培养72小时，计数。
3.8 检查结果胰酪大豆胨琼脂培养基的适用性检查结果如下4. 结果判定根据上面的数据，可以看出胰酪大豆胨琼脂培养基平皿上的菌落数与胰酪大豆胨琼脂对照培养基平皿上的菌落数的比值为（应在0.5-2范围内），而且菌落形态大少与对照培养基平皿上的菌落，判定R2A琼脂培养基的适用性检查。
控制菌检查培养基适用性检查方案
XXXXXXX有限公司控制菌检查培养基适用性检查方案文件编号：YZF-QC-001-01起草人：（QC）年月日审核人：（QA）年月日批准人：（质量负责人）年月日目录１.验证目的2.验证人员3.相关文件4.验证内容5.验证周期6.验证综合结论1. 验证目的建立微生物限度检查控制菌检查培养基适用性检查方案，通过验证确认检测所使用的培养基适合于本公司所用原料及产品的微生物限度的测定。
2.验证人员职位姓名负责内容QC检验员负责验证方案的起草和实施，并对所测数据准确性负责。
QC负责人负责验证方案的审核及按照规定的取样计划对标准检验操作程序的准确执行，负责组织实施。
QA负责人负责验证实施过程中的监督检查，取样，确保结果的可靠性。
审核人负责验证方案及报告的审核和批准。
3. 相关文件《中国药典》2015版四部《通则1105、通则1106》4. 验证内容通过验证以确认所使用的培养基适合于该产品大肠埃希菌、沙门菌的测定，对被检培养基上菌落与对照培养基上的菌落进行比较，以确认方法的可行性。
4.1 验证用菌种大肠埃希菌CMCC（B）44102（第一代）乙型副伤寒沙门菌CMCC（B）50094（第一代）4.2验证依据：中国药典2015版四部通则11064.3菌液制备4.3.1分别接种大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中，经30~35℃培养18~24小时后，分别取大肠埃希菌、乙型付伤寒沙门菌的培养物1ml+9ml 0.9%无菌氯化钠溶液，10倍稀释至10-6~10-7，细菌数不大于100cuf/ml，做活菌计数备用。
4.3.2 阴性对照为确认试验条件是否符合要求，应进行阴性对照试验。
4.4培养基适用性检查分别接种不大于100cfu的试验菌于被检培养基和对照培养基（麦康凯液体培养基、RV沙门菌增菌液体培养基）中，在相应控制菌检查规定的培养温度及不大于规定的最短培养时间下培养，与对照培养基管比较，被检培养基管试验菌应生长良好。
纯化水需氧菌总数计数用培养基适用性检查验证方案
1. 概述:培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。
适宜的培养基制备法、贮藏条件和质量控制是提供优质培养基的保证。
供试品微生物限度检查中所使用的培养基应进行适用性检查。
2. 验证目的：本次验证的目的是确认纯化水微生物限度检查中需氧菌总数计数用用的R2A琼脂培养基的质量，以及其制备程序、保存条件等是否满足微生物限度检查用要求。
3. 验证依据：《中国药典》2015年版四部“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法”、“《中国药典》2015年版二部纯化水质量标准”。
4. 验证项目：R2A琼脂培养基的适用性检查。
5. 适用围：成品培养基、由脱水培养基或按处配制的培养基均应进行培养基适用性检查。
6. 验证期：除另有规定外，在实验室中，若采用已验证的配制和灭菌程序制备培养基且过程受控，那么同一批脱水培养基的适用性检查试验可以只进行一次。
如果培养基的制备过程未经验证，那么每一灭菌批培养基均要进行适用性检查试验。
7.验证小组人员及职责:7.2验证人员职责及要求7.2.1按验证案及相关文件实施验证。
7.2.2认真观察并做好验证原始记录。
7.2.3对实施验证的结果负责。
7.3验证中各部门的职责7.3.1验证领导组职责z731.2确定验证项目及验证项目负责人731.3负责验证案的批准工作。
731.4负责验证资料及结果的审核工作。
7.3.1.5负责验证报告的批准工作。
7.3.2验证项目小组职责7.3.2.1负责验证案的起草工作。
7.3.2.2参与验证案的讨论、确认工作。
7.3.2.3负责验证案的实施。
7.3.2.4负责验证结果的分析、统计、报告工作。
7.3.2.5参与验证结果的评价工作。
7.3.3质量部职责7.3.3.1负责公司验证日常管理工作。
7.3.3.2负责验证案的审核工作。
7.3.3.3负责验证过程中仪器、仪表、计量器具的校验工作。
7.3.3.4负责检验仪器及检验法的验证。
7.3.3.5负责验证中各项检测工作，提供验证的检验记录、检验报告，对验证过程中的各项检验工作负责。
控制菌检查用培养基的适用性检查方案
培养基适用性验证方案控制菌培养基控制菌检查用培养基的适用性检查方案目录1. 概述 (2)2. 验证目的 (2)3. 参照标准 (2)4. 验证项目 (2)5. 验证小组人员及职责 (2)6. 试验材料 (3)7. 控制菌检查用培养基适用性检查项目、菌株及判断指标 (4)8. 菌液制备 (4)9. 验证步骤 (4)10 .附表 (6)1.概述：培养基质量是影响微生物检验结果的重要环节。
控制菌检查用培养基可能由于其促生长能力、指示能力、抑制能力的差异，从而对菌落颜色、形态等指标存在较大差异，影响结果判断的客观性。
培养基适用性检查是通过检验用培养基与对照培养基的比较，以阳性菌的生长状态或特征来评价检验用培养基是否符合检验要求。
2.验证目的：2010版《中国药典》规定微生物限度检查中成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基适用性检查。
本次验证的目的是确认胆盐乳糖培养基（BL）、4-甲基伞形酮葡萄糖苷酸培养基（MUG）、营养肉汤培养基和四硫磺酸钠亮绿培养基（TTB）是否符合检验要求。
3.参照标准：2010版中国药典二部附录XI J微生物限度检查法。
4.验证项目：胆盐乳糖培养基（BL）、4-甲基伞形酮葡萄糖苷酸培养基（MUG）、营养肉汤培养基和四硫磺酸钠亮绿培养基（TTB）。
5.验证小组人员职责及要求：5.15.2验证人员职责及要求：5.2.1按验证方案及相关文件实施验证。
5.2.2认真观察并做好验证原始记录。
5.2.3对实施验证的结果负责。
5.3验证中各部门的职责：5.3.1验证领导组职责：5.3.1.1制订验证总计划，负责全公司验证工作的管理。
5.3.1.2确定验证项目及验证项目负责人。
5.3.1.3负责验证方案的批准工作。
5.3.1.4负责验证资料及结果的审核工作。
5.3.1.5负责验证报告的批准工作。
5.3.2验证工作小组职责：5.3.2.1负责验证方案的起草工作。
5.3.2.2参与验证方案的讨论、确认工作。
7.铜绿假单胞菌检查用培养基适用性检查验证方案
1.概述:培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。
适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制是提供优质培养基的保证。
供试品微生物限度检查中所使用的培养基应进行适用性检查。
2.验证目的：本次验证的目的是确认铜绿假单胞菌检查用培养基适用性检查用的溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基的质量，以及其制备程序、保存条件等是否满足微生物限度检查用要求。
3.验证依据：《中国药典》2015年版四部“1106非无菌产品微生物限度检查：微生物控制菌检查”、“9203药品微生物实验室质量管理指导原则”。
4.验证项目：溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基的适用性检查。
5.适用范围：成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基适用性检查。
6.验证周期：除另有规定外，在实验室中，若采用已验证的配制和灭菌程序制备培养基且过程受控，那么同一批脱水培养基的适用性检查试验可以只进行一次。
如果培养基的制备过程未经验证，那么每一灭菌批培养基均要进行适用性检查试验。
7.验证小组人员及职责：7.2验证人员职责及要求7.3验证中各部门的职责，负责全公司验证工作的管理。
，提供验证的检验记录、检验报告，对验证过程中的各项检验工作负责。
8.合格标准：被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应0.5-2范围内，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致。
9.验证实施条件9.1验证方案培训：在验证实施前，应对参与验证的人员进行验证方案以及与验证相关的文件进行培训，确保相关人员掌握了验证的相关要求与知识。
9.2微生物限度检测室：检验所使用的检测室应经过HVAC系统确认，并符合要求。
9.3检验用水：验证过程使用的纯化水其制备系统应经过确认并符合要求，纯化水质量应经过检验并符合《中国药典》2015年版二部的要求。
9.4检验仪器设备：验证涉及的检验仪器（设备）与检验方法，应经过技术监督局校验合格或者公司确认/验证合格。
9.5验证菌种：验证所使用的菌种，其种类与传代次数应符合《中国药典》的相关要求。