丙氨酸氨基转移酶(ALT GPT)测定试剂盒(丙氨酸底物-丙酮酸氧化酶比色法)产品技术要求瑞尔达
比色法赖氏单位 ALT说明书200912.05新版
丙氨酸氨基转移酶(ALT/GPT)检测试剂盒说明书【产品名称】丙氨酸氨基转移酶（ALT/GPT）试剂盒【包装规格】2000人份，1000人份，500人份，200人份【预期用途】本试剂用于体外在酶标仪，生化分析仪上测定血清中丙氨酸氨基转移酶活性。
【检验原理】L-丙氨酸+α-酮戊二酸ALT 丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+P+O2 PO H2O2+乙酰磷酸H2O2+色原剂POD 红色化合物【主要组成成份】R150m l×1瓶L-丙氨酸、a-酮戊二酸、TBHBA、低铁氰化钾。
R2 2.5m l×1瓶丙酮酸氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林。
R3 50m l×1瓶终止剂校准血清0.75ml×1瓶(校准值请参见校准血清包装标签）质控血清0.75ml×1瓶(质控值请参见质控血清包装标签）【条件及有效期储存】1．储存条件：试剂在2-8ºC密封保存。
若试剂出现颗粒物质、浑浊或在492nm处用蒸馏水调零，试剂吸光度值≥0.150时，请不要使用。
校准血清和质控血清于-15ºC以下冰室内保存。
2．有效期：自生产日期起2~8℃保存，有效期为半年。
工作液存放于2~8℃可稳定一周。
【适用仪器】酶标仪：HT3；MK3；ZS-3；Spectra系列Ⅲ；BioRad系列680 【样本要求】血清1. 由于标本中红、白细胞糖酵解作用而产生丙酮酸，造成ALT假性增高，如8小时内不测定，将标本在2~8℃冰箱内保存。
2. 血清ALT>100 KarU的标本，用生理盐水将标本按1：9稀释后再测定，将结果乘以10。
【检验方法】1.工作液配制根据自己实验室工作量可任意选择下列一种方法配制工作液。
（1）用前取R2瓶试剂倒入R1瓶内混匀，然后小心地将少量R1再倒入R2瓶内，最后再倒入R1瓶内，混匀待用。
（2）用前分别取R1试剂2.0份与R2试剂0.1份（20比1）比例混匀待用。
丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒(丙氨酸底物法)产品技术要求lepu
丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒（丙氨酸底物法）适用范围：用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。
1.1 规格试剂1:3×60 mL，试剂2:1×45 mL；试剂1:1×60 mL，试剂2:1×20 mL；试剂1:1×60 mL，试剂2:1×12 mL；试剂1:4×60 mL，试剂2:4×15 mL；试剂1:2×40 mL，试剂2:2×10 mL；试剂1:3×28 mL，试剂2:3×7 mL；试剂1: 1×4L，试剂2: 1×1L；试剂1: 2×4L，试剂2: 1×2L。
1.2 主要组成成分试剂1主要组分：试剂2主要组分：2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂1：无色或淡黄色透明溶液；试剂2：无色或淡黄色透明溶液。
外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度应不小于1.0（波长340nm，光径1cm）。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率（△A/min）应不大于0.004。
2.4 分析灵敏度测试100U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.0025。
2.5 准确度用参考物质(GBW09177)定值的血清测定，实测值与标示值的偏差不超过±12.0％。
2.6 重复性批内变异系数（CV）应不大于5%。
2.7 线性2.7.1在[0.5，800]U/L区间内，线性相关系数r应不低于0.9900；2.7.2[0.5，96）U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±11.52U/L；[96，800]U/L 区间内，线性相对偏差应不超过±12%。
2.8 批间差批间差应不大于10％。
2.9 稳定性取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测，检测结果应符合2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7的要求。
丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒(单试剂速率法)
丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒(单试剂速率法)简介：Leagene 丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒(单试剂速率法)其检测原理是丙氨酸氨基转移酶催化丙氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移反应，丙酮酸与NADH 经LDH 催化生成NAD +，上述方法实际为ALT 速率法，其反应公式如下：L-丙氨酸+α-酮戊二酸→丙酮酸+L-谷氨酸。
丙酮酸+NADH+H +→L-乳酸+NAD +。
在上述偶联反应中，NADPH 的氧化速率与样本中酶活性呈正比。
对于单试剂速率法，血清与试剂完整成分的底物溶液混匀，ALT 催化反应立即启动，通过分光光度计或自动分析仪检测在340nm 处吸光度下降速率(-ΔA /min)，下降速率(-ΔA /min)与ALT 活性呈正比，比色杯光径1.0cm ，进而计算酶的活性单位。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 准备样品：①_x0001_ 血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃保存1个月有效，用于ALT/GPT 的检测。
②_x0001_ 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存1个月有效，用于ALT/GPT 的检测。
③_x0001_ (选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的ALT/GPT 含量。
编号 名称TE0125 100TTE0125 200TStorageALT 检测液(R)成分 终浓度 2×50ml 2×100ml 4℃ 避光Tris 缓冲液 100mM L-丙氨酸 500mM 酮戊二酸 15mM NADH 0.18mM LDH 1700U/L 防腐剂 15mM使用说明书1份分光光度计检测：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。
丙氨酸氨基转移酶检测方法
丙氨酸氨基转移酶检测方法丙氨酸氨基转移酶(ALT)是一种重要的肝脏酶,也是一种常见的生化指标。
检测方法通常用于判断肝脏功能的健康程度和疾病的演变趋势。
下面，我们将对丙氨酸氨基转移酶检测方法进行详细的阐述。
一、常规检测方法常规检测方法是指采用血清学方法检测ALT水平。
具体步骤如下：1.患者空腹4～8小时。
2.采集3～5ml静脉血标本，禁止吸烟和饮酒。
3.将血样放于离心管中，进行离心处理，得到血清样本。
4.通过检测仪器检测血清ALT酶的含量。
二、生物传感器检测方法生物传感器检测方法可以检测非常低的ALT水平，可以提供更加精确的测试结果。
具体步骤如下：1.准备含有具有高选择性的生物传感器的电极。
2.采集患者的静脉血标本。
3.将血样与生物传感器电极接触并依据特定的工艺条件进行分析。
4.通过仪器获得ALT的浓度明确的结果。
三、免疫学方法免疫学方法采用免疫学技术分析ALT特定抗体的含量。
具体步骤如下：1.准备特定的抗ALT抗体试剂。
2.采集患者的静脉血标本。
3.加入抗ALT抗体图谱，进行特异性反应，每个抗原对应一个抗体。
4.使用适当的试剂盒，对空白对照样品和样品进行ELISA测定。
5.通过光学振荡仪读取ALT特定抗体的含量并获得浓度明确的结果。
综上所述，以上列出的三种方法都是常用的丙氨酸氨基转移酶检测方法。
针对不同的病情和检测需求选择不同的检测方法非常重要。
总之，如果您的ALT测试结果不正常，医生会建议您进一步进行了解。
您可以向医生咨询，了解其他可能涉及的测试方法和预防方法。
血清丙氨酸氨基转移酶测定
血清丙氨酸氨基转移酶测定1.实验原理国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。
ALTL-丙氨酸+ -酮戊二酸丙酮LDH（乳酸脱氢酶）酸+ L-谷氨酸丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸+ NAD++ H2O 上述偶联反应中，NADH的氧化速率与`样品中ALT的活力成正比,在340nm处NADH呈现特性吸收峰，而NAD+则没有。
因此，可在340nm监测吸光度的下降速率（-△A/min）,计算出ALT的活性单位。
2. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂欧泰克ALT测定试剂盒6.1.1 试剂组成Tris缓冲液pH 7.4 80mmol/LL-丙氨酸800mmol/LLDH（乳酸脱氢酶）≥1200U/La-酮戊二酸18mmol/LNADH 0.18mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品：使用罗氏公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
7. 仪器：日立7060生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验日立7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验日立7060生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
丙氨酸氨基转移酶检测操作程序
丙氨酸氨基转移酶检测操作程序丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase ，ALT ）属于转氨酶类，主要存在于肝细胞内，参与肝细胞内的新陈代谢，在血液中不发挥催化作用。
采用速率法测定，能有效地降低内源性物质的干扰，使测定结果较为准确。
主要用于肝脏等疾病的诊断。
实验原理L-丙氨酸和a-酮戊二酸在ALT 作用下，生成丙酮酸和L-谷氨酸。
丙酮酸被试剂中的LDH 还原为L-乳酸，同时NADH 被氧化为NAD +，通过监测340nm 处吸光度值下降的速率，可以测定ALT 活力。
样本中内源性丙酮酸的干扰可由试剂中LDH 在初始孵育期内快速、完全地消除，不会干扰测定。
反应如下：L-丙氨酸 + a-酮戊二酸丙酮酸 + L-谷氨酸丙酮酸 + NADH L-乳酸 + NAD+样本中丙酮酸 + NADH L-乳酸 + NAD+试剂与仪器1. 试剂1.1.丙氨酸氨基转移酶试剂盒（由上海复兴长征医学科学有限公司提供）化学组成：R1: L-丙氨酸600mmol/L 乳酸脱氢酶 ＞1820U/L NADH 0.26mmol/L Tris 缓冲液 80mmol/L R2: Tris 缓冲液 80mmol/L a-酮戊二酸 36mmol/LEDTA5.0mmol/L在开展项目之前或更换试剂品牌时，将以上工作参数输入到仪器内，并按要求进行调整后，方可进行实验。
技术性能指标:试剂空白起始吸光度（340nm37℃）≤1.60A 。
线性范围：450U/L ±10%。
准确度：相对偏差(RE%)≤±10%。
精密度：批内精密度变异系数(CV%)≤5%；批间精密度相对极差(%)≤5%。
储存条件、有效期：储存于2～8℃，避光可稳定12个月。
启用后可稳定30天。
混浊或以蒸馏水为空白在340nm 处光吸收值高于1.0A 时，则不能使用。
ALTLDH LDH计算公式： ALT(U/L )= K= ——————————式中 TV=总反应体积(mL )SV=样本体积(mL )6.3=NADH 在340nm 处的毫摩尔吸光系数P=比色杯光径(cm )K 为工作参数表中的【K Factor 】以上是依据化学实验计算测试结果的公式，全自动分析时将工作参数（K 值）输入仪器即可。
ALT丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒(速率法)产品说明书
丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒（速率法）说明书[产品名称] 通用名称: 丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒（速率法）英文名称:L-Alanine Aminotransferase Assay Kit（ALT）[包装规格]2×200Tests；2×400Tests；R1:4×60ml、R2:4×15ml；R1:4×80ml、R2:4×20 ml；R1:4×120ml、R2:2×60ml；R1:8×40ml、R2:2×40ml；R1:4×50ml、R2:2×25 ml；R1:2×40ml、R2:2×10ml；R1:4×50ml、R2:4×25ml。
[预期用途] 用于体外定量检测人血清中的丙氨酸氨基转移酶的活力。
[检验原理]ALTL-丙氨酸 +α-酮戊二酸丙酮酸+ L-谷氨酸LDH丙酮酸 + NADH + H+ L-乳酸 + NAD+ + H2O[主要组成成份]由试剂R1和试剂R2组成。
试剂R1：三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液、乳酸脱氢酶（LDH）、L-丙氨酸、α-酮戊二酸；试剂R2：三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液、还原型辅酶（NADH）。
[储存条件及有效期] 试剂在2℃～8℃无腐蚀性气体中避光储存，若无污染，可稳定至失效期。
有效期12个月。
开瓶后2℃～8℃可稳定30天。
备注：生产日期及失效日期见外盒或瓶标签。
[适用仪器]日立7170、奥林巴斯AU640、贝克曼LX-20全自动生化分析仪。
[样本要求]使用新鲜的无溶血血清，血清不宜反复冻融，以免影响酶活性。
[检验方法]（1）双试剂无需配制，直接使用。
（2）试验条件：样本（S）：15 µl试剂1(R1) ：200 µl 试剂2（R2）：50 µl温度：37 ℃测定类型：速率法主波长：340 nm 副波长：405 nm 反应方向：下降方法：先将样本与R1混合，37 ℃5分钟后加入R2试剂，然后测定加入R2后2分钟至4分钟之△A/min 。
生化试剂sop
丙氨酸氨基转移酶测定试剂（ALT）（酶法）1. 检测原理本试剂采用国际临床化学联合会（IFCC）推荐方法：丙氨酸+α-酮戊二酸−−→−ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+−−→−LDH L-乳酸+NAD++H2ONADH氧化成NAD+引起340nm处吸光度的下降，下降速率与样品中ALT活性成正比。
2．标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：血浆使用肝素或EDTA（1mg/mL）作为抗凝剂2.4 标本的处理和储存：1血标本室温放置30min～45min后离心分离血清，置洁净试管加盖低温保存。
2标本在2-8℃可稳定3天，避免溶血。
3．试剂3.1 试剂及配套品：3.1.1试剂：本科使用重庆中元生物技术有限公司ALT试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂R1：Tris缓冲液NADH 100mmol/L 0.3mmol/L试剂R2：Tris缓冲液100mmol/Lα-酮戊二酸85mmol/LL-丙氨酸 800mmol/LLDH ≥8.5kU/L不同批号试剂盒中各组份不能互换。
3.1.2配套品：无配套品。
3.2 试剂的稳定性：1.原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。
试剂的有效期为12个月。
2.试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天4：校准4.1校准血清：朗道复合校准品4.2校准方式：使用去离子水与校准血清两点定标。
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丙氨酸氨基转移酶(ALT/GPT)测定试剂盒（丙氨酸底物-丙酮酸氧化酶比色法）适用范围：该试剂用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。
1.1型号
试剂1（R1）：50ml×1，试剂2（R2）： 2.5ml×1，试剂3（R3）：50ml×1 (500测试)；
试剂1（R1）：25ml×1，试剂2（R2）：1.25ml×1，试剂3（R3）：25ml×1 (250测试)。
1. 产品型号/规格及其划分说明
1.1试剂1（R1）：50ml×1，试剂2（R2）：
2.5ml×1，试剂3（R3）：50ml ×1 (500测试)；
试剂1（R1）：25ml×1，试剂2（R2）：1.25ml×1，试剂3（R3）：25ml×1 (250测试)。
2. 性能指标
【产品性能指标】
1、试剂空白：用蒸馏水调零，试剂空白吸光度值≤0.15。
2、线性区间
a)测量范围[10,100]KarU,相关系数r≥0.99；
b)[10,20）KarU,测量浓度值绝对线性偏差不超过±5KarU；
3、准确度：回收率90%～110%
4、分析灵敏度：丙氨酸氨基转移酶25KarU时测定吸光度差值（△A）≥0.200。
5、精密度
a）重复性：变异系数≤10%。
b）批间差
1. 产品型号/ 规格及其划分说明
1.1 试剂 1（R1）：50ml×1，试剂 2（R2）：
2.5ml×1，试剂 3（R3）：50ml ×1 (500 测试)；
试剂 1（R1）：25ml×1，试剂 2（R2）：1.25ml×1，试剂 3（R3）：25ml ×1 (250 测试)。
校准
品：1ml×1（选配）；质控品：1ml×1（选配）
1.2 组成成份：
试剂 1（R1）：缓冲液 0.1mol/L 磷酸盐、色原剂 10 mmol/L
试剂 2（R2）：酶试剂(丙酮酸氧化酶 10KU、过氧化物酶 5.0KU)、稳定剂 100 mmol/L
试剂 3（R3）：硫柳汞钠 0.6g/L
校准品：血清基质，丙氨酸氨基转移酶浓度为 25 KarU（目标浓度）。
质控品：血清基质，丙氨酸氨基转移酶浓度为 25 KarU。
注：校准品、质控品浓度具有批差异性，详见标签。
2. 性能指标
2.1 外观
R1、R3 为无色透明溶液；R2 为淡黄色溶液，无沉淀
及絮状浮物。
校准品、质控品为淡黄色液体。
2.2 装量
试剂净含量不少于标示值。
2.3 试剂空白
试剂空白吸光度值≤0.15。
2.4 线性区间
a)测量范围[10,100]KarU,相关系数 r≥0.99；
b)[10,20）KarU,测量浓度值绝对线性偏差不超过±5KarU；
[20,100]KarU 测量浓度值相对线性偏差不超过12%。
2.5 准确度
回收率 90%～110%
2.6 分析灵敏度
丙氨酸氨基转移酶 25KarU 时测定吸光度差值（△A）≥0.200。
2.7 精密度
2.7.1 重复性
变异系数≤10%。
2.7.2 批间差
连续三批试剂盒测定同份血清样本，其测定值的批间差≤12%。
2.8 校准品溯源性
按照 GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》要求，丙氨酸氨基转移酶校准品溯源至国家标准物质GBW(E)090352 ALT 校准品。
2.9 校准品准确度
丙氨酸氨基转移酶校准品：检测国家标准物质 GBW(E)090352 ALT 校准品，测量值与标示值的相对偏差应不超过±10%。
2.10 质控品赋值有效性：
质控品测值应在靶值范围内。
2.11 稳定性
效期稳定性：试剂(盒) 贮存 2℃～8℃，有效期为十二个月，取到效期后的样品检测试剂空白吸光度、分析灵敏度、线性区间、重复性、批间差、准确度，结果符合 2.3，2.4，2.5，2.6,2.7，2.8,2.9 的要求。
技术要求中试验方法变更。
产品说明书中
【包装规格】
试剂 1（R1）：50ml×1，试剂 2（R2）： 2.5ml×1，试剂 3（R3）：
50ml×1 (500 测试)；
试剂 1（R1）：25ml×1，试剂 2（R2）：1.25ml×1，试剂 3（R3）：
25ml×1 (250 测试)。
校准品：1ml×1（选配）；质控品：1ml×1（选配）
【主要组成成分】
试剂 1（R1） 50ml×1 瓶缓冲液 0.1mol/L 磷酸盐、色原剂 10 mmol/L
试剂 2（R2）2.5ml×1 瓶酶试剂(丙酮酸氧化酶 10KU、过氧化物酶
5.0KU)、稳定剂 100 mmol/L
试剂 3（R3）50ml×1 瓶硫柳汞钠 0.6g/L
校准品：血清基质，丙氨酸氨基转移酶浓度为25 KarU（目标浓度）。
质控品：血清基质，丙氨酸氨基转移酶浓度为 25 KarU。
注：校准品、质控品浓度具有批差异性，详见标签。
【产品性能指标】
1．试剂空白：用蒸馏水调零，试剂空白吸光度值≤0.15。
2．线性区间：
a) 测量范围[10,100]KarU,相关系数 r≥0.99；
b)[10,20）KarU,测量浓度值绝对线性偏差不超过±5KarU；
[20,100]KarU 测量浓度值相对线性偏差不超过 12%。
3．准确度：回收率 90%～110%
4．分析灵敏度：丙氨酸氨基转移酶 25KarU 时，测定吸光度（△A）≥0.200。
5. 精密度
a) 重复性：变异系数≤10%。
b) 批间差：连续三批丙氨酸氨基转移酶试剂盒测定同份血清样本，其
测定值的批间差≤12%。
6. 校准品溯源性
按照 GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》要求，丙氨酸氨基转移酶校准品溯源至国家标准物质GBW(E)090352 ALT 校准品。
7.校准品准确度
丙氨酸氨基转移酶校准品：检测国家标准物质 GBW(E)090352 ALT 校准品，测量值与标示值的相对偏差应不超过±10%。
8.质控品赋值有效性：
质控品测值应在靶值范围内。