Aβ在两种阿尔茨海默病转基因小鼠模型脑杏仁核分布的比较研究

２０１４年１０月第３７卷第５期

湖南师范大学自然科学学报

ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｏｆＨｕｎａｎＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ

Ｖｏｌ．３７　Ｎｏ．５

Ｏｃｔ．，２０１４Ａβ在两种阿尔茨海默病转基因小鼠

模型脑杏仁核分布的比较研究

周　奕１，邓志伟１，艾卫敏２，朱耀峰３，张剑峰４，卢　璨４，雷德亮５倡

（１．长沙卫生职业学院基础学科部，中国长沙　４１０１００；２．湘潭职业技术学院护理学院，中国湘潭　４１１０１２；

３．吉首大学医学院，中国吉首　４１６０００；４．中南大学湘雅医学院，中国长沙　４１００１３；

５．中南大学基础医学院，中国长沙　４１００１３）

摘　要　目的：比较研究Ａβ在两种ＡＤ转基因小鼠模型脑杏仁核分布的差异．方法：采用１８月龄雄性ＡＰＰ／ＰＳｌ双转基因（２×Ｔｇ－ＡＤ）小鼠与同龄同性别ＡＰＰ／ＰＳｌ／ｔａｕ三转基因（３×Ｔｇ－ＡＤ）小鼠，分别进行６Ｅ１０单克隆抗体免疫组化染色等方法显示Ａβ阳性神经元及斑块，观察其分布与形态等的差异，图像分析系统定量比较其量的变化．结果：在杏仁核２×Ｔｇ－ＡＤ组Ａβ阳性产物主要位于细胞外成为细胞外Ａβ（ｅＡβ），形成大量的Ａβ阳性斑，Ａβ阳性神经元少；而３×Ｔｇ－ＡＤ组Ａβ阳性产物主要位于神经元细胞内，成为细胞内Ａβ（ｉＡβ），但Ａβ阳性斑少见．结论：２×Ｔｇ－ＡＤ组与３×Ｔｇ－ＡＤ组Ａβ阳性产物在杏仁核分布的差异可能反映了两种ＡＤ小鼠模型神经病理等改变的

不同．

关键词　阿尔茨海默病；转基因小鼠；β淀粉样蛋白；杏仁核

中图分类号　Ｒ７４９畅１６ 文献标识码　Ａ 文章编号　１０００－２５３７（２０１４）０５－００２６－０５

ＣｏｍｐａｒａｔｉｖｅＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＤｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆＡβｉｎＡｍｙｇｄａｌｅｏｆ

ＴｗｏＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＭｉｃｅＭｏｄｅｌｓｏｆＡｌｚｈｅｉｍｅｒ摧ｓＤｉｓｅａｓｅ

ＺＨＯＵＹｉ１，ＤＥＮＧＺｈｉ－ｗｅｉ１，ＡＩＷｅｉ－ｍｉｎ２，ＺＨＵＹａｏ－ｆｅｎｇ３，ＺＨＡＮＧＪｉａｎ－ｆｅｎｇ４，ＬＵＣａｎ４，ＬＥＩＤｅ－ｌｉａｎｇ５倡（１．ＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ，ＣｈａｎｇｓｈａＨｅａｌｔｈＶｏｃａｔｉｏｎａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０１００，Ｃｈｉｎａ；

２．ＳｃｈｏｏｌｏｆＮｕｒｓｉｎｇ，ＸｉａｎｇｔａｎＶｏｃａｔｉｏｎａｌａｎｄＴｅｃｈｎｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｘｉａｎｇｔａｎ４１１０１２，Ｃｈｉｎａ；

３．ＭｅｄｉｃｉｎｅＳｃｈｏｏｌｏｆＪｉｓｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｓｈｏｕ４１６０００，Ｃｈｉｎａ；

４．ＸｉａｎｇｙａＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１００１３，Ｃｈｉｎａ；

５．ＢａｓｉｃＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１００１３，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎａｎｄｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｆｅａｔｕｒｅｓｏｆＡβｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｄｕｃｔｓｉｎｔｈｅａｍｙｇｄａｌｅｏｆｔｗｏｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅｍｏｄｅｌｓｏｆＡｌｚｈｅｉｍｅｒ摧ｓｄｉｓｅａｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：１８－ｍｏｎｔｈ－ｏｌｄＡＰＰ／ＰＳｌ（２×Ｔｇ－ＡＤ）ａｎｄｔｈｅａｇｅ－ｍａｔｃｈｅｄｍａｌｅｍｉｃｅｏｆＡＰＰ／ＰＳｌ／ｔａｕ（３×Ｔｇ－ＡＤ）ｗｅｒｅｕｓｅｄｉｎｔｈｉｓｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．６Ｅ１０ｉｍｍｕｎｏｈｉｓ－ｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｔａｉｎｉｎｇｗａｓｕｓｅｄｔｏｓｈｏｗｔｈｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎａｎｄｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｆｅａｔｕｒｅｓｏｆＡβｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｄｕｃｔｓ，ａｎｄｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｗｅｒｅｍａｄｅｏｎｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｏｆｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｓｂｙａｎｉｍａｇｅａｎａｌｙｓｉｓｓｙｓｔｅｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆＡβｉｎｔｈｅａｍｙｇｄａｌａｏｆ２×Ｔｇ－ＡＤｗａｓｍａｉｎｌｙｓｅｅｎａｓｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒＡβ（ｅＡβ），ａｎｄｆｏｒｍｅｄａｌｏｔｏｆｐｏｓｉｔｉｖｅｐｌａｑｕｅｓ；ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｐｒｏｄｕｃｔｓｗｅｒｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄａｓｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｌｙＡβ（ｉＡβ）ｆｏｒｔｈｅ３×Ｔｇ－ＡＤ，ｂｕｔｔｈｅＡβｐｏｓｉｔｉｖｅｐｌａｑｕｅｓｗｅｒｅｒａｒｅｌｙｓｅｅｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｏｆＡβｐｏｓｉｔｉｖｅｐｒｏｄｕｃｔｓｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅ２×Ｔｇ－ＡＤａｎｄ３×Ｔｇ－ＡＤｉｓｌｉｋｅｌｙｔｏｂｅｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｏｆｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｔｈｅｓｅｔｗｏＡＤｍｏｄｅｌｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ　ＡＤ；ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅ；Ａβ；ａｍｙｇｄａｌｅ

倡　收稿日期：２０１４－０５－０８

　基金项目：湖南省卫生厅科研基金课题资助项目（Ｂ２０１４－１５１）；湖南省教育厅科学研究资助项目（１４Ｃ００９１）；米塔尔学生创新资助项目（１０ＭＸ１９）；长沙市２０１３年度指导性科技计划资助项目（Ｋ１３ＺＤ０４６－３３）倡通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｄｅｌｉａｎｇｌｅｉ＠ｃｓｕ．ｅｄｕ．ｃｎ

周　奕等：Ａβ在两种阿尔茨海默病转基因小鼠模型脑杏仁核分布的比较研究阿尔茨海默病（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ摧ｓｄｉｓｅａｓｅ，ＡＤ）临床上表现为：起病隐袭、进行性发展的记忆、言语、视空间、认知功能减退及人格的异常等［１－２］．其主要病变为：Ａβ异常聚集和沉积形成老年斑（ｓｅｎｉｌｅｐｌａｑｕｅｓ，ＳＰｓ）；颞叶、海马、杏仁核等部位神经元及突触丢失；ｔａｕ异常磷酸化导致的神经纤维缠结（ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｉｌｌａｒｙｔａｎｇｌｅｓ，ＮＦＴｓ）和颗粒空泡变性（ｇｒａｎｕｌｏｖａｃｕｏｌａｒｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ，ＧＤ）等［３－５］．ＡＤ的病因及发病机制复杂，有多种学说，至今仍未阐明．Ａβ学说是目前普遍认同的ＡＤ主要发病机制之一：Ａβ在脑内异常聚集并纤维化形成ＳＰｓ，其神经毒性作用可破坏钙离子平衡、诱发氧化应激、激活小胶质细胞产生炎症反应、激活凋亡相关蛋白等启动凋亡程序并导致广泛的神经元丢失，进而形成认知功能损害，出现相应的痴呆症状［６－８］．用于ＡＤ研究的动物模型有很多种，且各具特点．其中过度表达人类家族性突变的ＡＰＰ基因和ＰＳ１基因的２×Ｔｇ－ＡＤ小鼠，以及过度表达ＡＰＰ、ＰＳ１和ｔａｕ基因的３×Ｔｇ－ＡＤ小鼠均能模拟出ＡＤ的某些神经生物学特征性改变，然而针对这两种动物模型脑内重要区域Ａβ分布的比较还未见报道．本研究通过Ａβ单克隆抗体（６Ｅ１０）免疫组化染色结合形态学分析等方法，比较１８月龄２×Ｔｇ－ＡＤ与３×Ｔｇ－ＡＤ小鼠杏仁核中Ａβ分布的差异，探讨两种ＡＤ小鼠模型病理形态等的不同．

１　材料与方法１．１　实验动物

１８月龄健康雄性２×Ｔｇ－ＡＤ小鼠８只，含有突变的ＡＰＰＳｗｅ／ＰＳ１△Ｅ９，由北京利昊生物科技有限公司提供．同龄雄性３×Ｔｇ－ＡＤ小鼠８只，含突变的ＡＰＰＳｗｅ／ＰＳ１Ｍ１４６Ｖ／ｔａｕＰ３０１Ｌ，由美国国立卫生研究院Ｉｎｇｒａｍ博士资助．实验动物在ＳＰＦ（ＳｐｅｃｉｆｉｃｐａｔｈｏｇｅｎＦｒｅｅ）级环境下饲养，严格控制温度、湿度、光照、换气条件等．高压灭菌的普通膳食喂养，定时称体质量，了解小鼠生长发育情况．１．２　实验方法

１．２．１　组织制备　小鼠用质量分数为４％的水合氯醛按１０μＬ／ｇ腹腔注射麻醉，仰卧位固定于实验台上．于上腹部剪开腹壁，向上紧贴剑突左侧剪破胸壁与膈肌，暴露心脏．在心尖剪一小口，迅速将灌注针经心尖送至升主动脉根部，随后剪开右心耳，可见血液快速流出．先用２０～３０℃０．９％的氯化钠溶液２０～３０ｍＬ快灌，可见肝脏颜色迅速变白，再用４℃的４％多聚甲醛磷酸缓冲液（Ｐａｒａｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ，ＰＦＡ）（０．１ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ＝７．４）５０～１００ｍＬ灌注，前１／３快灌，后２／３慢灌，使ＰＦＡ充分渗透，维持３０～４０ｍｉｎ．灌注过程中可见小鼠尾巴抖动，四肢颤抖，并逐渐变硬．灌注完成后取脑，在４℃的４％ＰＦＡ中固定１２ｈ，然后沉于３０％的蔗糖溶液４ｈ．在－２０℃条件下作连续冠状切片，片厚３０μｍ，收集杏仁核层面切片，待用．

１．２．２　免疫组化　Ａβ单克隆抗体（６Ｅ１０）进行ＡＢＣ法免疫组织化学染色，主要过程如下：８０％的甲酸修复抗原３０ｍｉｎ；１％Ｈ２Ｏ２１５ｍｉｎ去除内源性过氧化酶干扰；０．５％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００１５ｍｉｎ以增加细胞膜通透性；５％的正常山羊血清封闭１ｈ；小鼠抗人６Ｅ１０单克隆抗体（１∶４００）置４℃摇床１２ｈ；生物素化山羊抗鼠ＩｇＧ（１∶２００），室温摇床２ｈ；亲和素－生物素化酶（ＡＢＣ）复合物（１∶１５０），室温摇床上孵育１．５ｈ；二氨基联苯胺（ＤＡＢ）显色５ｍｉｎ，镜下观察并控制染色的强度．以上各步骤之间均用０．０１ｍｏｌ／ＬＰＢＳ漂洗３次，每次５ｍｉｎ；明胶玻片贴片；自然干燥后，０．１％尼氏染液复染，梯度酒精脱水，二甲苯脱脂，明胶封片．阴性对照：用０．０１ｍｏｌ／ＬＰＢＳ代替一抗，排除二抗的非特异性染色，结果为阴性．１．３　数据收集和统计学处理Ｍｏｔｉｃ－Ｋ４００Ｌ显微镜在高倍视野（×６０）下使用ＩＰＰ软件计数杏仁核的相似视野中能够分清细胞轮廓的阳性细胞数，并取其均值．染色深度达到足以区分细胞周界的神经元被计数，全部计数均由一人采用盲法操作完成．每只小鼠脑组织检测３张切片，每张切片检测３个视野．ＨＰＩＡＳ－１０００Ｈ高清晰度彩色图像检测系统测定杏仁核区阳性表达产物的平均灰度值，同时测量各切片背景灰度值．免疫阳性灰度值＝背景灰度值－免疫阳性产物平均灰度值．实验数据以均数±标准差表示．样本均数的比较采用完全随机设计的单因素方差分析并用ＳＰＳＳＶ２０．０统计软件进行统计处理．Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义．

２　结果

２．１　形态学观察

２．１．１　Ａβ阳性神经元　Ａβ阳性神经元轮廓较清晰，细胞胞体较大呈圆形，胞浆中可见灰褐色的免疫阳性７２第５期

产物（即细胞内Ａβ）．２×Ｔｇ－ＡＤ组Ａβ阳性的神经元数量极少，呈稀疏无规则散在分布；３×Ｔｇ－ＡＤ组可见大量密集分布的Ａβ阳性神经元，且杏仁核中心区相对数目较多（Ｆｉｇ．１Ａ－Ｄ）．

２．１．２　Ａβ阳性斑块　２×Ｔｇ－ＡＤ、３×Ｔｇ－ＡＤ小鼠脑内均可见Ａβ阳性的黑褐色斑块（即老年斑ＳＰｓ）．２×Ｔｇ－ＡＤ组Ａβ阳性斑块染色较深呈散在分布，数量多、面积大；３×Ｔｇ－ＡＤ组斑块染色较淡，仅在杏仁核中心区呈点状分布（Ｆｉｇ．１Ａ－Ｄ）．２．２　定量分析

２．２．１　Ａβ阳性神经元　杏仁核２×Ｔｇ－ＡＤ组Ａβ阳性细胞计数（个／视野）１２±３．４２与３×Ｔｇ－ＡＤ组Ａβ阳性细胞计数２８±６．３８比较，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）．２×Ｔｇ－ＡＤ组Ａβ阳性细胞平均灰度值（ＭＯＤ）１７９．１２±３．９８与３×Ｔｇ－ＡＤ组Ａβ阳性细胞平均灰度值１０４．２１±５．６３比较，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）（表１）．

２．２．２　Ａβ阳性斑块　杏仁核２×Ｔｇ－ＡＤ组Ａβ斑占总面积（２．８±０．４７）％；３×Ｔｇ－ＡＤ组Ａβ斑占总面积（１畅１±０．６５）％．二者相比差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）（表１）．

表１　Ａβ阳性神经元数、平均灰度值及Ａβ斑在两种动物杏仁核的比较（倡，Ｐ＜０．０５）

Ｔａｂ．１　ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＡβｐｏｓｉｔｉｖｅｎｅｕｒｏｎｓ，ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｇｒａｙｖａｌｕｅａｎｄＡβｐｌａｑｕｅｓｉｎａｍｙｇｄａｌｅｏｆｔｗｏｋｉｎｄｓｏｆａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｓ（倡，Ｐ＜０．０５）动物

动物数Ａβ阳性神经元数／（个?视野－１）Ａβ阳性神经元平均灰度值／ＭＯＤＡβ阳性斑块所占比／％２×Ｔｇ－ＡＤ

８１２±３．４２倡１７９．１２±３．９８倡２．８±０．４７倡３×Ｔｇ－ＡＤ８２８±６．３８１０４．２１±５．６３１．１±

０．６５

图１　６Ｅ１０免疫阳性产物在杏仁核的分布

Ａ、Ｂ为２×Ｔｇ－ＡＤ组，Ｃ、Ｄ为３×Ｔｇ－ＡＤ组．图Ｂ、Ｄ（标尺＝２０μｍ）取自于图Ａ、Ｃ（标尺＝１００μｍ）Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆ６Ｅ１０ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｄｕｃｔｓｉｎｔｈｅａｍｙｇｄａｌｅ

ＡａｎｄＢｆｏｒ２×Ｔｇ－ＡＤ，ＣａｎｄＤｆｏｒ３×Ｔｇ－ＡＤ．ＢａｎｄＤ（ｓｃａｌｅｂａｒ＝２０μｍ）ｗｅｒｅｔａｋｅｎｆｒｏｍＡａｎｄＣ（ｓｃａｌｅｂａｒ＝１００μｍ）３　讨论

本研究观察到２×Ｔｇ－ＡＤ组杏仁核可见大量６Ｅ１０免疫阳性斑，这与其他研究者的报道是一致的［９－１１］

．说明在这类转基因ＡＤ小鼠模型中，细胞外Ａβ（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕａｒβ－ａｍｙｌｏｉｄ，ｅＡβ）的沉积是其主要的病变．ｅＡβ在ＡＤ８２ 湖南师范大学自然科学学报 第３７卷

周　奕等：Ａβ在两种阿尔茨海默病转基因小鼠模型脑杏仁核分布的比较研究病理过程中的作用有较多研究报道，主要表现在以下几方面：（１）ｅＡβ可诱发脑内免疫炎症反应．ｅＡβ可激活

小胶质细胞和补体系统，释放促炎因子，诱导炎症反应发生，从而导致神经元退行性变［１２］．人们在ＡＤ患者

脑中发现，在ＳＰｓ的核心周围可见聚集的小胶质细胞并与ＳＰｓ相互交错，小胶质细胞的异常激活同ＡＤ的神经病理改变有一定的联系，据此推测ｅＡβ可能是通过免疫炎症反应促进ＡＤ的发生．临床流行病学调查表明，长期服用抗炎药物后ＡＤ发病率减低，并对认知功能具有保护作用．（２）Ｎｅｌｓｏｎ等发现ｅＡβ可使某些抗氧

化酶活性降低从而导致氧自由基的浓度异常升高，其可能是诱发ＡＤ的机理之一［１３］．ｅＡβ也可通过其它多种

途径诱导蛋白质过氧化物、脂质过氧化物大量产生．这些产物的增加可导致神经元产能障碍，最终启动细胞的凋亡过程．（３）异常增加的ｅＡβ的作用曾经被认为还通过多种方式尤其是诱发细胞凋亡的途径，从而引起神经元退行性变．支持该观点的依据有：与早期家族性ＡＤ相关的ＰＳ１、ＰＳ２、ＡＰＰ基因突变可使ｅＡβ含量增加；Ａβ降解酶基因的多态性，其中包括编码人胰岛素降解酶的基因，可能导致ＡＤ的发生；实验动物治疗研究发现抗－Ａβ治疗有一定疗效．因此，清除ｅＡβ及ｅＡβ神经毒性，曾经是ＡＤ治疗的主要研究方向．然而，Ａβ

免疫实验仅起到轻微延缓ＡＤ进程的作用并出现了无菌性脑炎的严重副作用而被迫中断［１４－１６］．近年来，人们

通过对ＡＤ转基因小鼠及ＡＤ病人的脑组织的研究，发现存在细胞内Ａβ，并对ＡＤ病理的发展起重要作用．

作者在对３×Ｔｇ－ＡＤ组的研究中发现，ｅＡβ阳性斑块小且少，而神经元内有很多６Ｅ１０阳性产物即细胞内Ａβ（ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕａｒβ－ａｍｙｌｏｉｄ，ｉＡβ），这种现象还少见报道．近年来，神经元ｉＡβ的存在与作用越来越受到人们

的重视，其在ＡＤ中的作用也是多方面的：（１）ｉＡβ可影响突触功能［１７］．Ｍｅｎｇ等通过尸体解剖发现在ＡＤ的

早期即出现明显的突触可塑性的改变［１８］．Ｇｉｍｅｎｅｚ等发现３×Ｔｇ－ＡＤ转基因小鼠１到４个月时，皮质、杏仁核

等部位的突触间传递丧失了近４０％，而通过免疫组化等方式仅能检测到ｉＡβ［１９］．提示：ＡＤ早期在无细胞外

斑块形成的情况下ｉＡβ积聚，导致突触的损害．这可以解释老年斑形成和认知障碍之间的不一致性．（２）ｉＡβ

可导致线粒体受损［２０］．线粒体通过氧化磷酸化作用产生能量物质ＡＴＰ，同时参与维持正常的细胞内钙离子

平衡．此外，线粒体在控制细胞凋亡中担当重要角色．线粒体的功能障碍会导致ＲＯＳ产生过度和细胞色素Ｃ的释放，并将促使凋亡肽酶激活因子与细胞凋亡蛋白酶９－前原蛋白结合，启动凋亡过程．（３）ＺＨＡＮＧ等通过

对原代培养的人类神经元细胞内显微注射Ａβ可出现Ｐ５３和Ｂａｘ蛋白介导的选择性杀伤作用［２１－２２］．（４）ｉＡβ

多肽与细胞内载脂蛋白Ｅ的聚集密切相关，而后者与ＤＮＡ断裂和细胞溶解有紧密联系．（５）ｉＡβ还可通过减低特异的蛋白磷酸酶活性和（或）增强糖原合成酶活性诱导ｔａｕ蛋白的异常磷酸化，从而损伤神经元．此外，在自然衰老的恒河猴脑中，Ａβ同样被发现于神经元和非神经元细胞内，早于淀粉样斑块的形成；同时证明

Ａβ寡聚体可以引发神经元退行性变［２３］．

杏仁核（ａｍｙｇｄａｌｅ）是大脑边缘系统的重要组成部分，其具有调节内脏活动、处理情感反应及记忆等功能［２４－２５］．Ｈｏｒíｎｅｋ等通过ＭＲＩ研究发现在ＡＤ的早期诊断中杏仁核与海马有着相同的诊断价值，并且认为两者在短期记忆过程中都担当着重要的角色；当ＡＤ出现轻微的精神症状时，杏仁核普遍发生了早期的损害［２４］．Ｈａｍｐｅｌ等研究表明杏仁核不仅是ＡＤ脑内重要的病变部位之一，而且其Ａβ异常沉积发生的时间可

能比海马、皮质等区域更早［２５］．上述研究表明杏仁核与ＡＤ有密切的关系．

作者比较了１８月龄时２×Ｔｇ－ＡＤ与３×Ｔｇ－ＡＤ小鼠模型杏仁核Ａβ分布特点．结果发现：２×Ｔｇ－ＡＤ组Ａβ沉积主要发生在细胞外，３×Ｔｇ－ＡＤ组Ａβ沉积主要发生在细胞内．在其他脑区也存在类似的表达差异．造成这种差异的原因目前还不清楚，有待深入研究．Ａβ与ＡＤ的神经病理改变有着密切的关系，但Ａβ如何引起神经元退行性变，其最初的作用位点是在细胞外还是细胞内，至今仍存在争议．由于３×Ｔｇ－ＡＤ小鼠过度表达的ｔａｕ基因可能影响Ａβ聚集的部位，并且３×Ｔｇ－ＡＤ小鼠早期即有明显的神经元死亡、突触丢失及学习

记忆行为的改变［２６］，据此作者推测ｉＡβ的神经毒性可能在神经元退行性改变并导致ＡＤ发生的过程中发挥

重要作用．

参考文献：

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９２第５期

０３ 湖南师范大学自然科学学报 第３７卷

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（编辑　王　健）

Aβ在两种阿尔茨海默病转基因小鼠模型脑杏仁核分布的比较

研究

作者：周奕， 邓志伟， 艾卫敏， 朱耀峰， 张剑峰， 卢璨， 雷德亮， ZHOU Yi， DENG Zhi-wei， AI Wei-min， ZHU Yao-feng， ZHANG Jian-feng， LU Can， LEI De-liang

作者单位：周奕,邓志伟,ZHOU Yi,DENG Zhi-wei(长沙卫生职业学院基础学科部,中国长沙,410100)，艾卫敏,AI Wei-min(湘潭职业技术学院护理学院,中国湘潭,411012)， 朱耀峰,ZHU Yao-

feng(吉首大学医学院,中国吉首,416000)， 张剑峰,卢璨,ZHANG Jian-feng,LU Can(中南大

学湘雅医学院,中国长沙,410013)， 雷德亮,LEI De-liang(中南大学基础医学院,中国长沙

,410013)

刊名：

湖南师范大学自然科学学报

英文刊名：Journal of Natural Science of Hunan Normal University

年，卷(期)：2014(5)

本文链接：https://www.360docs.net/doc/a813059399.html,/Periodical_hnsfdx-zr201405005.aspx