不规则抗体筛查【范本模板】
不规则抗体筛查在临床输血患者中的检出结果及分析

不规则抗体筛查在临床输血患者中的检出结果及分析摘要目的探討并分析不规则抗体筛查在临床输血患者中的检出结果,为保证临床输血安全减少输血反应及临床疑难输血提供依据。
方法17521例住院患者,应用微柱凝胶抗球蛋白法筛查其血清中不规则抗体,对阳性患者进行抗体特异性检测并分析。
结果17521例受血者不规则抗体阳性率为0.35%(61/17521),检出血型同种不规则抗体61例。
男性阳性检出率为0.30%(21/6952),女性阳性检出率为0.38%(40/10569)。
结论输血前不规则抗体筛检能发现有临床意义的不规则抗体,特别是对血液病、肿瘤、多次输血及有多次妊娠史患者可提前预警,以保证患者输血安全。
关键词不规则抗体;筛查;微柱凝胶法;输血安全不规则抗体是指ABO 血型系统以外所有红细胞血型抗体,包括红细胞同种抗体和自身抗体,可导致血型鉴定及交叉配血困难,引起溶血性输血反应(HTR)及新生儿溶血病(HDN),自身抗体还可导致自身免疫溶血性疾病(AIHA)[1]。
输血前对受血者进行不规则抗体的筛查和鉴定,尤其对有输血史、妊娠史及短期内有多次输血患者筛检具有临床意义的抗体,选择相应抗原阴性、交叉配血相合的红细胞输注,对有效减少或避免溶血性输血反应的发生,保证临床输血安全具有重要意义。
现报告如下。
1 资料与方法1. 1 一般资料选取2013年1月~2015年9月住院申请输(备)血的17521例患者,其中男6952例,女10569例。
输血前1~3 d常规采集患者静脉血3 ml EDTA-K2 抗凝,充分离心分离血浆待查。
1. 2 试剂与仪器Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ0.8%标准抗体筛查细胞、谱细胞由上海市血液生物医药有限公司提供并在有效期使用,抗人球蛋白微柱凝胶卡(含抗-IgG + C3d)、微柱孵育器、离心机由长春博讯生物制品有限公司提供,并严格按说明书进行操作。
1. 3 检测方法[2] 不规则抗体筛查及特异性鉴定:使用抗人球蛋白微柱凝胶卡,离心患者血液标本分离血浆与红细胞,吸取分别被检者血浆50 μl和抗体筛查细胞50 μl加入抗球蛋白检测卡Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号中,置37℃孵育15 min, 1 000 r/min 离心10 min,肉眼观察结果。
600例输血患者的血型不规则抗体筛

600例输血患者的血型不规则抗体筛目的探究并分析600例输血患者的血型不规则抗体的筛查和鉴定情况,提高患者输血的安全性。
方法随机选取我院烧伤创伤科300例患者和综合内科神经外科300例患者作为本次研究对象,采取患者血清样本进行不规则抗体筛查和鉴定。
结果600例患者经不规则抗体筛查和鉴定分析后,发现不规则抗体呈阳性患者占5例,阳性率为0.83%,将这5例不规则抗体呈阳性患者的血液送至该市血液中心进行抗体特异性鉴定结果提示:对这5例患者可以考虑不输血或者是少输血,确保患者输血的安全性。
结论为了确保患者输血的安全性,在输血前对其进行血清样本检测,经不规则抗体筛查和鉴定后,确保血型和输血量科学、合理,避免出现溶血性输血发生,保证患者的生命安全。
标签:输血;血型;不规则抗体;筛查;安全性相关研究表明:在同型输血和配合性输血情况下,当患者体内产生的不规则抗体与红细胞上相应的血型抗原结合后,容易产生溶血反应,因此,探究、分析不规则抗体筛查和鉴定对于确保患者输血安全性具有十分重要的意义[1]。
本文随机选取我院烧伤创伤科300例患者和综合内科神经外科300例患者作为本次研究对象,采取患者血清样本进行不规则抗体筛查和鉴定,避免和防治溶血性输血现象的发生,提高对受血者的有效性和安全性,降低和减少输血并发症的发生率,现将具体不规则抗体筛查和鉴定报道作如下分析。
1 资料与方法1.1一般资料本次研究中,随机选取我院烧伤创伤科300例患者和综合内科神经外科300例患者作为本次研究对象,采取患者血清样本为抗凝静脉血进行不规则抗体筛查和鉴定。
患者当中男性患者占453例,女性患者占147例,患者年龄为4~80岁,患者平均年龄为(46.8±2.2)岁,分析研究所有输血患者的血型不规则抗体筛查情况。
1.2方法对所有输血患者采用卡式离心机进行不规则抗体筛查和鉴定,具体检测原理是:经微小的凝胶颗粒构成滤网后,在系统内控制离心的条件下,对采集到的血清样本将凝集的红细胞和游离状态的红细胞分离出来,从中观察其不同反应图谱,最终得到筛查结果。
不规则抗体筛查及其阳性患者的应对策略

添加了特异性的抗体,如抗A抗B 抗D等
ABO和Rh血型鉴定
添加了抗人球蛋白。 多特异性:抗IgG + C3D 单特异性:抗IgG或C3D
直接抗人球蛋白 交叉配血实验 不规则抗体筛查 抗体鉴定 抗体效价 新生儿溶血病检测
抗人球蛋白检测卡
不同厂家产品存在差异,在操作时一定要原厂试剂 配套使用,严格按照说明书进行操作,否则,可能 出现假阴性或者假阳性。
《临床输血技术规范》明确规定:“凡遇以下情况 必须做抗体筛选试验: 交叉配血不合的;有输血史、妊娠史或短期内需接受多次输血者。”
检测不规则抗体有利于早期发现对于输血有意义的抗体,让我们有充足的 时间选择配合的血,避免由于寻找不到相合的血液而造成延误治疗。
不规则抗体检测
不规则抗体的定义
通常把ABO血型以外的所有红细胞血型抗体称为不规则抗体。如抗D、抗 N、抗M、jk-抗体等。
凝胶微柱技术原理
微柱凝胶技术是通过对凝胶种类的选择和凝胶浓度的调节来控制分子 筛孔径大小,使分子筛只允许游离红细胞通过,从而达到分辨凝集红 细胞和非凝集红细胞的目的。微柱凝胶技术是目前最易大规模推广、 最适于常规试验的血型血清学试验技术。
种类 中性胶 特异性胶
抗人球蛋白胶
凝胶中添加的抗体
适用范围
不含抗体,相当于试管的作用 反定型
红细胞沉降所需离心力<100g 而血清蛋白沉降离心力>3000g
反应腔
加 入 了 抗 球 蛋 白 的 凝 胶
不规则抗体阳性如何配血?
输注血液的选择:选择红细胞表面不含有对应抗原的血输 注
实验室具体操作: 如果有条件可以鉴定出具体是哪一种不 规则抗体,然后选择不含有对应抗原的血发给病人。如果 没有条件可进行盲配,使用能够检测出IgG类抗体的方法 交叉配血相合即可输注。
不规则抗体筛查方法

不规则抗体筛查方法
嘿,朋友们!今天咱就来讲讲不规则抗体筛查方法。
你说这不规则抗体筛查啊,就好比是我们身体里的一个小侦探,专门去寻找那些可能捣乱的“坏家伙”。
咱先来说说盐水法。
这就像是个直接干脆的小卫士,能快速地初步判断有没有问题。
就好像你去一个地方找东西,先大致看一眼有没有明显的目标。
虽然简单,但有时候也能发现一些大问题呢!
还有凝聚胺法,这可是个厉害的角色!它就像是个敏锐的神探,能把那些隐藏得比较深的不规则抗体给揪出来。
你想想看,就像是在一堆杂物里找出那个特别的小物件,需要更仔细、更用心地去分辨。
酶法呢,就有点特别啦!它就像一个有特殊技能的高手,对于一些特定情况特别在行。
好比你有个专门对付某种难题的法宝,一用就能解决。
抗球蛋白法更是不能小瞧。
它就如同一个超级严谨的检查员,不放过任何一个蛛丝马迹。
可以说,它是给不规则抗体筛查上了一道保险,确保万无一失。
咱为啥要这么重视不规则抗体筛查呢?你想想啊,如果不把这些可能捣乱的家伙找出来,那万一在关键时刻给咱来个“突然袭击”,那不就麻烦啦!这就好像家里有个小隐患,你不及时发现处理,哪天说不定就酿成大祸了呢!
所以啊,大家可别小看了这不规则抗体筛查。
它就像是我们健康的守护者,默默地为我们保驾护航呢!我们要积极配合医生,该做检查就做检查,这样才能让自己心里踏实呀!这难道不是很重要的事情吗?难道你不想给自己的身体多一份保障吗?别等到出了问题才后悔莫及呀!总之,不规则抗体筛查真的很关键,大家一定要重视起来哟!。
实验四不规则抗体筛选与鉴定、效价测定

2.鉴定 2.鉴定
标管: ⑴标管:11支1-10、自c 加样: ⑵加样:Ps2滴+谱细胞1滴 离心、观察结果: ⑶离心、观察结果: ①直接观察 ②4℃10min观察 ③恢复室温观察,有格局为IgM ④37℃观察有无凝集 ⑤凝聚胺法或抗人球法(上谱细胞),观 察格局可判断有无IgG抗体 测效价: ⑷测效价:若有抗体,测效价
操 作
1.筛选 1.筛选
(聚凝胺法 聚凝胺法) 聚凝胺法 (抗人球法 抗人球法) 抗人球法
⑴标管8支:S1、S2、S3、S1’、S2’、S3’、K、自c 标管8 ⑵加样:受检血清2滴+上述细胞1滴检测 加样 ⑶观察结果:阳性进行不规则抗体鉴定 观察结果: ⑷测抗体效价(室温、4℃10min、恢复室温 测抗体效价 10min、37℃3min )
注意事项 1.更换滴管, 1.更换滴管,防止干扰 更换滴管 2.防止前带现象, 2.防止前带现象,看结果从高稀释度开始 防止前带现象 3.试剂细胞 3.试剂细胞 4.稀释液体积越小, 4.稀释液体积越小,产生误差越大 稀释液体积越小
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
思考题
1.为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水、 1.为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水、 为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水 聚凝胺、抗人球介质中进行。 聚凝胺、抗人球介质中进行。 2.抗体效价检测的临床应用 2.抗体效价检测的临床应用
目的 掌握抗体效价的测定方法 原理 Ab经过倍比稀释加入悬浮红细胞,以肉眼可 见“±”凝集的最高稀释倍数为抗体效价。 器材 试剂 小试管、记号笔、滴管、离心机 悬浮红细胞、血清、生理盐水
实验步骤 1.标记管号 标记管号:1、2、4、8、16、32…… 标记管号 2.从2号开始各管分别加生理盐水50ul 从 号开始各管分别加生理盐水50ul 3.加血清 加血清:1、2管各加血清 加血清 4.倍比稀释 倍比稀释:将2号管混匀,从中吸出50ul移入 倍比稀释 第3管,混匀;再从第3管吸出50ul移入第4 管,以此类推,至最后一管,吸出50ul弃去。 5.加悬红 加悬红:每管各加50ul ,混匀。 加悬红 6.3000r/min离心 离心15秒,直接观察结果 观察结果、 离心 观察结果 4℃10min、室温10min、37℃3min观察结果。
不规则抗体筛查试验操作规程

XXX医院不规则抗体筛查试验操作规程1.目的为规范红细胞不规则抗体筛选、鉴定的技术操作,保证检查结果准确和临床输血安全、有效,依据《输血实验室管理程序》有关条款的要求制定本规程。
2.适用范围本规程适用于本院红细胞不规则抗体的筛查。
3.职责输血科具有专业技术资格的人员负责红细胞不规则抗体的筛选和鉴定,但只对所筛选或鉴定的标本负责。
4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理采用盐水介质法、凝聚胺法或抗球蛋白法等试验使受检者血清(血浆)与筛选红细胞反应,检测受检者血清(血浆)中是否存在红细胞不规则抗体,红细胞不规则抗体阳性者进一步与谱红细胞反应,根据反应格局鉴定抗体特异性。
7.仪器设备和检测环境7.1.仪器设备等:玻璃试管(75X12mm)、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱。
7.2. 检测环境:室温应控制在18~27℃,湿度应保持在30~70%。
8.试剂①生理盐水、凝聚胺试剂、直接抗人球蛋白试剂(抗IgG,C3d),均为有合格证件的正品。
②市售O型筛选红细胞:为三支以上不同人份的3%筛选红细胞,均为有合格证件的正品。
或自制O型筛选红细胞:选择已确认ABO血型为O型的健康者,采集EDTAK抗凝血2标本离心,取少许红细胞置于试管中,用生理盐水离心洗涤3次得压积红细胞[3400转/分钟(1000g),每次离心1分钟,离心后将上清液全部倒出],再取30µl游离红细胞加入到标记为Ⅰ号的试管中,然后加入1ml生理盐水混匀,即得Ⅰ号O型3%的筛选红细胞;依同样方法分别制备不同人份的Ⅱ号和Ⅲ号O型3%的筛选红细胞。
不规则抗体筛查与分析(1)

02抗体的筛查与 分析
03抗体的鉴定与 分析
01凡遇有下列情况必须按《全国临床检验操 作规程》有关规定作抗体筛选实验:交叉 配血不合时;对有输血史、妊娠史或短期 内需要接收多次输血者。
02不做抗筛直接盲配有风险,对于弱抗体, 若供血者为杂合子(剂量效应)则有可能 为阴性结果。所以筛选(鉴定)对抗体的 检测比交叉配血更敏感和可靠。
抗筛的目的是通过受检的血清和已知的带有
不同抗原的三人份O型筛选红细胞反应,来 测定血清中有无抗A和抗B以外的意外抗体 (也称不规则抗体)
对疑难交叉配血有重要的指导意义,降低盲 配风险
补体依赖性抗体 补体非依赖性抗
体
完全抗体 不完全抗体
天然抗体 免疫抗体
冷抗体 温抗体
自身抗体 同种抗体
临床有意义抗体:一般为免疫性抗体,在体 温条件(37度)具有反应性的同种抗体。
+ (抗-E/-cE约占1/3,此类患者筛选相合的血液 是很容易的)
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性,且强度一致;自c阳 性:结合病情,优先考虑自身抗体
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性,自c阴性:考虑同种 抗体,如病人血型为Rh阴性,优先考虑抗-D
+
+ 抗筛结果排除假阴性,一定是阴性结果吗?
+ 解答:“抗筛阴性”并不能代表“同种抗体阴性”。 + 筛选细胞和谱细胞有人种差异,如Mia,
+ 抗人球蛋白试剂:IgG抗体通过抗人IgG类免 疫球蛋白抗体(简称抗人球)“搭桥”,使已 致敏了不完全抗体的RBC发生凝集。
+ 抗筛要求用抗IgG+C3的多特异性抗人球蛋白 试剂,若用单抗IgG的单特异性抗人球蛋白 试剂,可能对某些抗体造成漏检。
不规则抗体检测操作规程14-22

红细胞不规则抗体检测操作规程1.0 目的规范红细胞血型抗体筛选、鉴定操作,保证临床用血的安全性及有效性。
2.0 适用范围适用于输血科(血库)抗体筛选血标本、疑难血型标本及疑难配血标本。
3.0 材料抗球蛋白试剂、筛选细胞、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管。
4.0 设备普通离心机、血型血清专用离心机、电热恒温水浴箱、显微镜。
5.0 抗体筛选操作步骤5.1 取试管3支,分别标记Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,各加入患者血清2滴,再分别加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号筛选细胞2滴。
5.2 混匀,37℃孵育1h。
5.3 1300g离心15s。
5.4 轻轻悬浮细胞,肉眼观察凝集结果并记录。
若肉眼不见凝集,以显微镜检查。
5.5 对没有凝集的试管,用盐水充分洗涤3次。
5.6 最后一次洗涤后,离心去上清,将试管边缘盐水用滤纸吸干。
5.7 按试剂说明书加最适释度抗球蛋白试剂1滴,充分混合。
5.8 1300g离心15s。
轻轻悬浮细胞,肉眼观察凝集反应,记录结果。
6.0 抗体鉴定步骤6.1 抗体筛选阳性,应作抗体鉴定试验以确定其特异性。
6.2 依据谱细胞数量的多少(一般由8~16个单人份的已知血型表型的O型红细胞组成)取相应数目的试管,分别标记序号,各加入患者血清2滴,再分别加入谱细胞2滴。
6.3 混匀,37℃孵育1h。
6.4 1300g离心15s。
6.5 轻轻悬浮细胞,肉眼观察凝集结果并记录。
若肉眼不见凝集,以显微镜检查。
6.6 对没有凝集的试管,用盐水充分洗涤3次。
6.7 最后一次洗涤后,离心去上清,将试管边缘盐水用滤纸吸干。
6.8 按试剂说明书加最适稀释度抗球蛋白试剂1滴,充分混合。
6.9 1300g离心15s。
轻轻悬浮细胞,肉眼观察凝集反应,记录结果。
7.0 注意事项7.1 按《临床输血技术规范》第十七条要求,必须对交叉配血不合时,对有输血史、妊娠史或短期内接受多次输血者进行抗体筛选试验。
7.2 抗体筛选有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体,并可在配血前有足够的时间来选择缺乏相应抗原的相配合的血液,避免由于寻找不到相合的血液而造成患者不能及时输血。
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不规则抗体检查
不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。
不规则抗体是指抗A、抗B以外的血型抗体。
ABO系中的亚型,变异型抗A1或某种抗B等抗体,也称为不规则抗体。
其多为IgG抗体。
主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。
临床上通常所称的“同型血”实际上是指ABO血型系统和Rh血型系统相同,其它红细胞血型系统未必相同。
如果交叉配血不仔细,或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ABO血型系统之外的不规则抗体,而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生.
红细胞血型抗体检查适用于下列情况:1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时;2、供血者血清抗体筛检;3、输血前受者血清抗体检查;4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时;5、孕妇血清的抗体检查;6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查;7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。
1. 原理
利用筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应,如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体。
2. 试剂
2。
1 5%筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)
2.2 凝聚胺试剂
2.3 直接抗人球试剂
外周血或静脉血
3. 操作步骤
3。
1 取试管三支,标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清(血浆)2滴,加5%筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)各1滴。
3.2 各加LIM0。
7ml,混合均匀后,再各加Polybrene 溶液2滴,并混合均匀。
3.3 用BASO专用离心机1000G离心力,离心10秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约0。
1ml液体。
3.4 轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重作。
3.5 最后加入Resuspending 2滴,轻轻转动试管混合并同时观察结果。
如果凝集散开,表示是由Polybrene引起的非特异性聚集,抗体筛检结果为阴性;如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,抗体筛检结果为阳性,应进一步作抗体鉴定。
4. 筛选Ⅰ号细胞,筛选Ⅱ号细胞,筛选Ⅲ号细胞。
对应的细胞反应格局表一张。
红细胞血型抗体筛选细胞反应格局表
4. 临床意义
虽然不规则抗体筛选阳性率仅为0.37%,但是该项阳性的患者一旦输入具有相应抗原的红细胞,抗原、抗体发生免疫性结合,在补体的参与下,使输入的红细胞发生溶解,即发生溶血性输血反应.患者出现发热、贫血、黄疸和血红蛋白尿,严重时甚至危及其生命.因此,在输血中要经常警惕这种输血反应发生的可能性.当不规则抗体筛选阳性时,必须进一步作抗体鉴定,确定其特异性后,再输入无相应抗原的红细胞,才能达到安全输血之目的。
新生儿溶血病(HDN)也是由于母亲体内存在着与其胎儿红细胞不配合的IgG性质的不规则抗体,引起的同种被动免疫性疾病.凡是以IgG性质出现的不规则抗体,理论上都可以引起HDN,因为IgG性质抗体能通过胎盘进入胎儿血循环,破坏胎儿红细胞,引发胎儿水肿、黄疸、贫血和肝脾肿大,甚至并发核黄疸。
因此对有输血史或妊娠史的孕妇也应作不规则抗体筛选,若检测出不规则抗体,应作出相应的预防和治疗。
Rh血型中D抗原的抗原性强于E抗原的抗原性,因此产生抗D抗体的几率大于抗—E抗体.抗A1抗体为A亚型中不规则抗体,它的存在提示我们在注意ABO血型以外的不规则抗体的同时,也应高度重视ABO亚型中的不规则抗体,因为它也是引起溶血性输血反应的一个因素。
抗M抗体为冷凝集素,很少在37℃有活性,一般在体内不能引起溶血反应,但患者处于低温麻醉状态下手术时应注意,因为此类抗体可激活补体。
当机体的体温在冷抗体最适反应温度范围内(4~20℃)时,可发生溶血反应。
不规则抗体产生大多为Rh血型系统,除抗D外,其他如抗E,抗Ec,抗Ce检出率占Rh系统67。
8%,提示Rh阳性患者输血也可引起溶血反应,且机率较高。
根据我国汉族人群Rh抗原分布特点,E抗原阳性比D抗原阳性低,产生抗E抗体的机率高于抗D抗体,故Rh血型系统D抗原阳性E抗原阴性者输血不容忽视。
Rh阴性个体免疫后产生抗D的机率为70。
9%,产生的抗体其效价在体内会逐渐下降,甚至常规试验会漏检,若以后作为受血者输入Rh(D)阳性血刺激时,会很快出现免疫性回忆反应。
抗体效价会在1~2wk内达到高峰,引起迟发性血管外溶血,且发生在输血后几天.造成的输血无效以及溶血,易被临床忽视.溶血反应的强度与抗体效价成正比关系,抗体产生的强度增加溶血反应愈严重.抗M、抗Lea、抗P1均较少见,但抗Lea抗体可引起严重的溶血性输血反应,所以不能作为供血者,如
为受血者时应给Le(a—b—)血液输入。
抗M抗体只有37℃或抗球蛋白试验出现阳性时才具有临床意义。
抗P1最理想的反应温度为4℃,偶可在37℃查出.抗P1抗体很少在体内造成溶血,几乎总是IgM型抗体,所以不能通过胎盘,不会造成HDN。
冷凝集素在配血时可忽略.自身抗体在自身溶血性贫血时出现较多,一直以来是输血的一大难题,我们仍遵循一般输血原则.
综上所述,不规则抗体是引起溶血性输血反应和新生儿溶血病的主要因素之一,对输血发生溶血性反应所引起肾衰、死亡病例的诊断有临床意义。
因此为了保证输血安全,提高输血疗效,减少或杜绝溶血性输血反应的发生,不规则抗体检查必须作为输血前检查的重要项目之一。