不规则抗体筛查与鉴定
思考题
1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行？
2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介 质法一种方法进行不规则抗体的筛查？
参考资料
1.临床输血与检验 人民卫生出版社
2.人类血型 科学出版社
3.免疫血液学
4.中
22
抗人球蛋白法
不规则抗体筛查方法
盐水介质法 聚凝胺介质法（最常用）
抗人球蛋白介质法（经典）
不规则抗体检测原理 图 62 ：红细胞表面电荷及其相互之间的距离
自由移动的 正电荷 内层正电荷 随红细胞移动 表面负电荷 红细胞
红细胞间由静电维 持最小距离约 24nm
不规则抗体检测原理
35.7nm
产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少
IgM抗体
多以五聚体形式存在，分子最大 在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
IgG 抗体
单体形式存在，分子量较小 盐水介质中只能致敏相应抗原的红细胞，而不能 使之凝集，又称为不完全抗体 必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集 聚凝胺法
受伤严重，需要 立即输血！！！
教学目标
1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价 及临床意义
不规则抗体
概念：不符合ABO血型系Landsteiner 法 则的血型抗体，即抗-A、抗-B 以外的血 型抗体
Landsteiner法则
不规则抗体
概念：不符合ABO 血型系Landsteiner法则的血 型抗体，也就是抗-A、抗-B 以外的血型抗体
步骤繁琐，耗时较多
临床意义
献血者：防止含有不规则抗体的血液输注给病 人，避免溶血性输血反应
受血者：有助于血液选择，充分的时间选择相合 的血液
孕妇：早发现，孕期进行新生儿溶血病的预防和 治疗，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤 害
小结
1.不规则抗体两类：IgG型、 IgM型
2.不规则抗体筛查方法：先盐水介质法，后聚凝胺 介质法或抗人球蛋白法 3.盐水介质法只能检测IgM型不规则抗体； IgG型抗 体需要选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白法
不规则抗体检测原理
14nm
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全 抗体致敏
2.加入聚凝胺，缩短红细 胞之间的距离，不完全抗 体同时与两个红细胞结合 使其特异性凝集
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
聚凝胺 枸橼酸钠 不完全抗体
抗人球蛋白介质法
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表 面,但是不能和两个红细胞同 时结合（致敏）
3.加入抗人球蛋白
4.抗人球蛋白同时和两个 不完全抗体的Fc段结合， 从而把红细胞连接在一起
方法学评价
盐水介质法：最基本，检测IgM型血型抗体
聚凝胺介质法：速度快，实验时间5分钟左右 ； 不适合于Kell系统抗体的检测，但汉
族人群至今无Kell系统抗体检出报道 抗人球蛋白介质法：检测IgG型血型抗体最为经典方法，
ABO血型鉴定不规则抗体筛选
为什么这次试验没有安排玻片法 的反定型？
因为存在于病人或献血者血清中的抗 Ａ及抗Ｂ，个体差异很大，如果效价较 弱，在玻片上不足以凝集大量抗原阳性 的红细胞，造成假阴牲的结果所以采用 玻片法作反定型的结果常不可靠。而用 试管离心法作反定型，则促进抗原抗体 反应，形成肉眼可见的凝块，使结果更 为可靠
谢谢
ＡＢＯ正反定型结果不一致的常 见原因有哪些？
（１）人为因素：①试剂不标准、失效或污染； ③操作中加错样本或试剂、离心速度不足或过 度、细胞与血清比例不当、结果判断错误等。 （２）客观因素：①因某些疾病导致抗原减弱 如：白血病，MDS（骨髓增生异常综合征）患 者血型抗原减弱导致误定血型。②受检者抗体 效价低（如婴幼儿、老年人、大量输液的患者， 血浆蛋白低下等）③某些药物干扰如输注右旋 糖酐后会干扰血型检定。
四 实验步骤.swf
1. 玻片法
（1） 取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端 用记号笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。 （2） 用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清 上，注意勿使滴管与血清相接触。 （3） 竹签两头分别混合，搅匀。用两根 分别用来混合A型和B型标准
二 实验原理
血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在 ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种 抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。血型 鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清 （含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗 体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者 红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系 统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、 B、AB、O四型。 见下表
A标准血清 B标准血清 2滴 受试者的红细胞悬液 1滴 1滴 混匀后1000rpm离心1min或3000rpm离心15秒。 。 取出观察结果。完全凝集的管底部有红细胞的凝块， 管底细胞边缘呈花边状，轻弹试管凝块不散；完全不 凝的试管，血细胞均匀的沉到管底，边缘整齐，用手 轻弹试管，红细胞像一缕烟似的立即上升，随即成为 均匀的悬液;轻微凝集的，必须将液体转到载玻片上镜 检后判定凝集程度。
不规则抗体筛查的判断和意义
不规则抗体筛查的判断和意义摘要：目的：探讨分析不规则抗体筛查的判断和意义。
方法：选择我院2013年10月到2014年10月期间所接受的350例输血治疗患者来进行研究，并把他们设为实验组，其中女157例，男98例，然后选取我院相同的年月份内接受的95名血型鉴定患者，他们都是没有接受过异体血液，女65例，男30例，设为对照组。
结果：实验组不规则抗体阳性率为3.84 %，对照组不规则抗体阳性率为0.96%，两组间具有统计学差异（P<0.05）。
结论：在输血之前，进行相应的血液不规则抗体的检查是非常有必要的，可以有效降低不相容性血液的输血反应，对于有过输血历史或曾经接受过血液方面有关的治疗的患者，或者是有过妊娠经历的女士，在对其输血前筛查不规则抗体变得更为重要，能够有效的避免阳性不规则抗体对人身的威胁。
关键词：不规则抗体；筛查；判断；意义不规则抗体就是指除了正常血型ABO意外的其他的血型与身体内的血液发生反应而产生的抗体，这类抗体与自身是不匹配的。
不规则抗体不能和血细胞抗原相结合，不然会对我们的健康产生极大的危害，甚至危及生命。
要想为受血者选择合适的供血者血液成份，确保临床输血安全有效的进行，就需要对需要输血的患者进行输血前不规则抗体筛查。
因此，在输血之前对不规则抗体进行筛查十分必要。
1 研究对象选择我院2013年10月到2014年10月期间所接受的350例输血治疗患者来进行研究，并把他们设为实验组，其中女157例，男98例，然后选取我院相同的年月份内接受的95名血型鉴定患者，他们都是没有接受过异体血液，女65例，男30例，设为对照组。
2 方法2.1 一般方法输血前空腹采集患者静脉血3ml，离心后收集血浆，随后用微柱凝胶法筛查收集到的血浆，严格按照说明书操作，微柱凝胶法的详细内容可以参考下面的参考文献。
根据红细胞所在的柱体位置来判断红细胞为阴性还是阳性，也以此判断红细胞是否与预支相应的抗体发生凝聚作用。
不规则抗体筛查和鉴定培训课件
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
不完全抗体
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抗人球蛋白介质法 处，请联系网站或本人删除。
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表
产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少
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IgM抗体处，请联系网站或本人删除。
多以五聚体形式存在，分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
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1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行？ 2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介 质法一种方法进行不规则抗体的筛查？
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1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价
及临床意义
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不规则抗体 处，请联系网站或本人删除。
输血前检查中不规则抗体筛选
筛选红细胞
试剂红细胞是保存在保存液中，一旦用生 理盐水或 Liss液洗涤后则应该在２４小时 内使用，否则会因污染、抗原（Lewis系 统抗原）丢失导致试验错误。
抗人球蛋白试剂
抗人球蛋白分类：单特异性的抗-IgG，抗C3d，多特异 性的抗IgG+C3d。 抗-IgG、抗IgG+C3d的多特异性抗球蛋白试剂都可用于 抗体检测。 抗IgG+C3d可增加一些补体依赖稀有抗体的检出，如 Kidd血型系统的一些抗体; 与单纯的抗IgG相比，抗 IgG+C3d 与这些需要补体参与反应的抗体可产生更强的 反应。 多特异性抗球蛋白试剂的缺点是容易产生假阳性反应。 使用抗IgG可以避免补体引起的非特异反应，但降低了 补体依赖抗体的检测灵敏度。
微柱凝胶法抗体筛选程序（3）
置抗IgG凝胶卡于37 ±1 ℃孵育箱中孵育15分钟 。 取出凝胶卡，用凝胶卡专用离心机离心： 将卡放入离心机转子上的卡槽中，注意要保持转 子的平衡。 扣上离心机盖板。启动运行按钮。 检查倒计时时间及离心转速符合试验要求。 离心机运转停止且盖板自动打开后取出凝胶卡。
微柱凝胶法抗体筛选程序（4）
凝胶卡试验的缺点
要精确调节红细胞浓度至0.8-1％，这较为麻烦。 将试剂瓶中的细胞加入试管要比加入如此小的凝 胶孔中要容易的多。 缗钱状凝集与不完全的小血块样本也可造成假阳 性。 可以检出大量临床无意义的抗体。
自身对照试验必要性
自身对照：即使用病人自己的血清和自 己红细胞进行抗体检测。 有助于确定抗体筛选阳性结果是同种抗 体还是自身抗体、或是缗钱引起。
抗体筛选技术（酶试验）
原理：蛋白水解酶可破坏红细胞表面的带负电荷的唾液酸 基团，使红细胞表面负电荷减少，降低了红细胞之间的排 斥力，缩短了相邻红细胞之间的距离，使IgG抗体凝集红 细胞。 程序：2滴血清、1滴2-4%红细胞，加入2滴酶，37℃孵育 15分钟，离心看结果。
血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤.doc
血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤一.1. 血型鉴定排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO正定型试管、患者ABO反定型试管、患者RhD定型试管。
2.标本准备分离患者的血浆，取一滴压积红细胞，三次洗涤，制备患者 2%-5%红细胞悬液。
3.加样ABO正定型： 1 滴（ 50ul ）抗 A、抗 B 试剂加 1 滴（ 50ul ）患者红细胞悬液。
ABO反定型： 1 滴（ 50ul ）患者血清加 1 滴（ 50ul ）反定型试剂红细胞。
RhD定型： 1 滴（ 50ul ）抗 D 血清加 1 滴（ 50ul ）患者红细胞悬液。
4.二. 结果判断离心（ 2 档）：轻摇试管，肉眼观察有无凝集，记录ABO、RhD血型结果。
不规则抗体筛查（生理盐水法+凝聚胺法）1.排管标记 01、 02、 03 及自身对照管2. 加样各试管分别加入相应的患者血清 2 滴（ 100ul ）及筛选细胞 1 滴（ 50ul ）。
3.结果观察离心（ 2 档），观察结果先看上清液有无溶血，轻轻混匀，肉眼观察有无凝集，结果判断并记录。
各试管分别加入低离子介质，轻轻混匀（参照试剂说明书）各试管再分别加凝聚胺溶液 2 滴（ 100ul ）混匀，离心先观察上清液有无溶血弃去上清液，留约，轻轻混匀肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）各试管分别加入重悬液 2 滴（ 100ul ），轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min 内消失显微镜检查三. 交叉配血试验（生理盐水法+凝聚胺法）1.标本准备分离供血者血浆与红细胞三次洗涤，制备供血者 2%-5%红细胞悬液2.排管标记排管，主侧、次侧及自身对照管3.加样各试管分别加入相应的备检血清 2 滴（ 100ul ）及 2%-5%备检红细胞悬液 1 滴（ 50ul ）4.结果观察离心（ 2 档），观察结果先看上清液有无溶血轻轻混匀，肉眼观察有无凝集结果判断并记录各试管分别加入低离子介质，轻轻混匀（参照试剂说明书）各试管再分别加凝聚胺溶液 2 滴（ 100ul ）混匀，离心先观察上清液有无溶血弃去上清液，留，轻轻混匀肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）各试管分别加入重悬液 2 滴（ 100ul ），轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min 内消失肉眼观察阴性者，显微镜检查记录交叉配血结果A、 B、O试验红细胞悬液的制备1.分别采取已知A、 B、O 三种血型的红细胞，经盐水洗涤 3 次，以压紧红细胞配成不同浓度的红细胞悬液（见表格）红细胞悬液的配置悬液浓度（ %）压实红细胞（滴）盐水（滴）2 1 （ 40）5 1 （ 16）10 1 （ 8）20 1 （ 4）2.为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取 3 个以上健康成人血液，按A、B、O 型分别混合后，按上法制备。
实验四不规则抗体筛选与鉴定、效价测定
2.鉴定 2.鉴定
标管： ⑴标管：11支1-10、自c 加样： ⑵加样：Ps2滴+谱细胞1滴 离心、观察结果： ⑶离心、观察结果： ①直接观察 ②4℃10min观察 ③恢复室温观察，有格局为IgM ④37℃观察有无凝集 ⑤凝聚胺法或抗人球法（上谱细胞），观 察格局可判断有无IgG抗体 测效价： ⑷测效价：若有抗体，测效价
操 作
1.筛选 1.筛选
(聚凝胺法 聚凝胺法) 聚凝胺法 (抗人球法 抗人球法) 抗人球法
⑴标管8支:S1、S2、S3、S1’、S2’、S3’、K、自c 标管8 ⑵加样：受检血清2滴+上述细胞1滴检测 加样 ⑶观察结果:阳性进行不规则抗体鉴定 观察结果: ⑷测抗体效价（室温、4℃10min、恢复室温 测抗体效价 10min、37℃3min ）
注意事项 1.更换滴管， 1.更换滴管，防止干扰 更换滴管 2.防止前带现象， 2.防止前带现象，看结果从高稀释度开始 防止前带现象 3.试剂细胞 3.试剂细胞 4.稀释液体积越小， 4.稀释液体积越小，产生误差越大 稀释液体积越小
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
思考题
1.为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水、 1.为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水、 为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水 聚凝胺、抗人球介质中进行。 聚凝胺、抗人球介质中进行。 2.抗体效价检测的临床应用 2.抗体效价检测的临床应用
目的 掌握抗体效价的测定方法 原理 Ab经过倍比稀释加入悬浮红细胞，以肉眼可 见“±”凝集的最高稀释倍数为抗体效价。 器材 试剂 小试管、记号笔、滴管、离心机 悬浮红细胞、血清、生理盐水
实验步骤 1.标记管号 标记管号：1、2、4、8、16、32…… 标记管号 2.从2号开始各管分别加生理盐水50ul 从 号开始各管分别加生理盐水50ul 3.加血清 加血清：1、2管各加血清 加血清 4.倍比稀释 倍比稀释：将2号管混匀，从中吸出50ul移入 倍比稀释 第3管，混匀；再从第3管吸出50ul移入第4 管，以此类推，至最后一管，吸出50ul弃去。 5.加悬红 加悬红：每管各加50ul ，混匀。 加悬红 6.3000r／min离心 离心15秒，直接观察结果 观察结果、 离心 观察结果 4℃10min、室温10min、37℃3min观察结果。
不规则抗体筛选和鉴定标准操作规程
不规则抗体筛选和鉴定标准操作规程1.检验目的不规则抗体筛选和鉴定可在交叉配合之前进行或一起进行，这样有利于患者抗体的早期确认及鉴定，发现临床上有意义的抗体，避免一些可能的情况而造成病情的延误。
2.检验方法分盐水介质法、抗球蛋白法和微柱凝胶法。
3.检验原理让待检者的血清与已知血型的试剂红细胞即筛选红细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套）起反应，以发现在37℃中有反应活性的抗体。
这种抗体可引起新生儿溶血病、溶血性输血反应、或使输入的红细胞存活期缩短等。
当不规则抗体筛选试验阳性后，再进行不规则抗体鉴定，即利用谱红细胞（11套鉴定细胞）与待检者的血清反应，根据反应结果判断机体所产生的同种抗体类别。
4.标本要求受检者不抗凝静脉血4.0ml，分离血清，48小时内使用5.试剂5.1.筛选红细胞：由2或3人份的O型红细胞组成为一套试剂，每套试剂筛选红细胞中至少有以下常见的抗原：D、C、E、c、e、M、N、S、s、P、Le a、Le b、K、k、Fy a、Fy b、Jk a、Jk b等。
每次用3套试剂（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）进行抗体筛选，见表1005-1。
5.2.鉴定谱细胞：除包括常见的抗原以外还有：C w、Kp a、Kp b、Js a、Js b、Lu a、Lu b、Xr/min a等。
每次用11套试剂进行抗体鉴定，见表1005-2。
5.3.抗球蛋白试剂：多特异性抗球蛋白血清（IgG、C3d）。
5.4.致敏红细胞（质控细胞）。
5.5.0.9%生理盐水。
5.6.Coombs微柱凝胶卡。
6.器材试管、吸管、37℃水浴箱、台式离心机、滤纸、微量加样器等。
7.操作程序7.1.盐水介质法7.1.1．取受检者血清2滴于标记有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的3支小试管中。
7.1.2．对应加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套2%～5%筛选红细胞生理盐水悬液1滴，37℃孵育30分钟。
7.1.3.以3000r/min离心10秒，观察凝集和溶血情况，并记录反应情况于表1005-1中。
如果抗体筛选试验阳性，继续做以下试验。
不规则抗体鉴定注意事项
不规则抗体鉴定注意事项
1. 嘿，一定要记得采集血液样本的时候可不能马虎哟！就像给宝宝冲奶粉，水多了少了都不行呀！一定要严格按照要求来操作，不然检测结果可就不准确啦。
比如你采血量不够，那不就跟做饭盐放少了没味道一样嘛。
2. 哇哦，在进行抗体筛查时，要仔细再仔细呀！这可不是玩游戏，不能随随便便的。
就好比你搭积木，一块没搭好，整个就可能垮掉啦。
你说要是没认真做好筛查，那不就得重新来过，多麻烦呀。
3. 哎呀呀，试剂的选择可太重要啦！可不是什么试剂都能用的哦。
这就跟你挑衣服似的，得挑合适的呀。
要是随便选个不合适的试剂，那不就跟穿了双不合脚的鞋一样别扭嘛。
4. 嘿，实验操作的环境也不能忽视呀！要保持干净整洁呢。
这就好像你住的房间，要是乱糟糟脏兮兮的，你能舒服嘛？如果实验环境不好，那对结果也可能有影响呀。
5. 哇，对检测结果的判读可不能大意哟！这就像读书看字，得一个一个仔细看清楚呀。
如果判读错了，那不就跟认错人一样尴尬嘛。
6. 哎哟喂，结果的记录和保存可得做好呢！这就跟你写日记一样，要好好记下来呀。
要不然回头想找都找不到，那不就白做啦。
7. 记住啦，要是遇到不确定的情况，一定要去请教专业人员呀！别自己瞎捉摸哟。
这就好像你迷路了，不去问警察，自己瞎转悠，能找到路嘛？
我的观点结论就是：不规则抗体鉴定的每一个步骤都很关键，都要认真对待，一点都不能马虎，这样才能保证鉴定的准确性和可靠性呀！。
不规则抗体筛查及鉴定培训7.27
情况一：抗筛阳性反应强度不一，自身对照阴性
表型与抗体互相验证
情况二：抗筛全部呈阳性反应，反应强度大致相同， 自身对照阳性
情况二：抗筛全部呈阳性反应，反应强度大致相同， 自身对照阳性
3 抗筛阳性输血原则
抗筛阳性患者输血
确认只有不规则抗体
自身（-）、抗体筛选（+）
配血时患者血清中的同种抗体与供 者红细胞上相应抗原起反应。
P 血型 系统抗体
最常见的表型 ：P1、P2 P1 红细胞上有两种不同的 抗原：P1 和 P；P2 红细胞 上只有 P 抗原，可以产生 抗-P1。
不规则抗体种类（其他）
Lewis血型系统抗体： 多为IgM类，属自然产生的抗体，37℃一般不发生反应
Lutheran 血型系统抗体： LU抗原剂量效应，导致混合凝集、临床意义一般不大
结果判读：根据谱细胞的反应格局一般可以鉴定常见的抗体,但有 一定的局限性，有可能漏检常见的组合抗体
排除法：纯合子表达抗原无反应则直接排 除对应的抗体（举例：与5号细胞dCCee、11 号细胞DCCEe、12号细胞DCcEE反应均为阴性， 表明不存在单特异性抗-C）
情况一：抗筛阳性反应强度不一，自身对照阴性
操作:抗体鉴定谱细胞分别与被检血清进行间接抗球 蛋白试验，同时做自身对照
自身细胞检查：确定患者血清内是否有自身抗体或自身抗体与同 种抗体并存，只有是阴性时，才能排除自身抗体或其他凝集素导 致的谱细胞凝集；
使用试剂谱细胞：谱细胞一般是由8～16单人份的已知血型表型的O 型红细胞配套组成，具有各种不同的抗原成分；
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全抗体致敏
2.加入聚凝胺，缩短红细胞之间的距离，不完全 抗体同时与两个红细胞结合使其特异性凝集
不规则抗体筛查试验操作规程
XXX医院不规则抗体筛查试验操作规程1.目的为规范红细胞不规则抗体筛选、鉴定的技术操作，保证检查结果准确和临床输血安全、有效，依据《输血实验室管理程序》有关条款的要求制定本规程。
2.适用范围本规程适用于本院红细胞不规则抗体的筛查。
3.职责输血科具有专业技术资格的人员负责红细胞不规则抗体的筛选和鉴定，但只对所筛选或鉴定的标本负责。
4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理采用盐水介质法、凝聚胺法或抗球蛋白法等试验使受检者血清（血浆）与筛选红细胞反应，检测受检者血清（血浆）中是否存在红细胞不规则抗体，红细胞不规则抗体阳性者进一步与谱红细胞反应，根据反应格局鉴定抗体特异性。
7.仪器设备和检测环境7.1.仪器设备等：玻璃试管(75X12mm)、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱。
7.2. 检测环境：室温应控制在18~27℃，湿度应保持在30~70%。
8.试剂①生理盐水、凝聚胺试剂、直接抗人球蛋白试剂（抗IgG,C3d），均为有合格证件的正品。
②市售O型筛选红细胞：为三支以上不同人份的3%筛选红细胞，均为有合格证件的正品。
或自制O型筛选红细胞：选择已确认ABO血型为O型的健康者，采集EDTAK抗凝血2标本离心，取少许红细胞置于试管中，用生理盐水离心洗涤3次得压积红细胞[3400转/分钟（1000g），每次离心1分钟，离心后将上清液全部倒出]，再取30µl游离红细胞加入到标记为Ⅰ号的试管中，然后加入1ml生理盐水混匀，即得Ⅰ号O型3%的筛选红细胞；依同样方法分别制备不同人份的Ⅱ号和Ⅲ号O型3%的筛选红细胞。