2020年不规则抗体筛查
不规则抗体筛查流程步骤

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不规则抗体筛查方法

不规则抗体筛查方法
嘿,朋友们!今天咱就来讲讲不规则抗体筛查方法。
你说这不规则抗体筛查啊,就好比是我们身体里的一个小侦探,专门去寻找那些可能捣乱的“坏家伙”。
咱先来说说盐水法。
这就像是个直接干脆的小卫士,能快速地初步判断有没有问题。
就好像你去一个地方找东西,先大致看一眼有没有明显的目标。
虽然简单,但有时候也能发现一些大问题呢!
还有凝聚胺法,这可是个厉害的角色!它就像是个敏锐的神探,能把那些隐藏得比较深的不规则抗体给揪出来。
你想想看,就像是在一堆杂物里找出那个特别的小物件,需要更仔细、更用心地去分辨。
酶法呢,就有点特别啦!它就像一个有特殊技能的高手,对于一些特定情况特别在行。
好比你有个专门对付某种难题的法宝,一用就能解决。
抗球蛋白法更是不能小瞧。
它就如同一个超级严谨的检查员,不放过任何一个蛛丝马迹。
可以说,它是给不规则抗体筛查上了一道保险,确保万无一失。
咱为啥要这么重视不规则抗体筛查呢?你想想啊,如果不把这些可能捣乱的家伙找出来,那万一在关键时刻给咱来个“突然袭击”,那不就麻烦啦!这就好像家里有个小隐患,你不及时发现处理,哪天说不定就酿成大祸了呢!
所以啊,大家可别小看了这不规则抗体筛查。
它就像是我们健康的守护者,默默地为我们保驾护航呢!我们要积极配合医生,该做检查就做检查,这样才能让自己心里踏实呀!这难道不是很重要的事情吗?难道你不想给自己的身体多一份保障吗?别等到出了问题才后悔莫及呀!总之,不规则抗体筛查真的很关键,大家一定要重视起来哟!。
不规则抗体筛查卡式法

不规则抗体筛查卡式法不规则抗体筛查卡式法,听起来有点复杂对吧?别担心,我们今天就来聊聊这个话题,让它变得简单又有趣!大家都知道抗体是什么。
就像是身体里的小卫士,保护我们免受各种病菌的侵害。
不过,有些人呢,身体里会出现一些“不听话”的抗体,或者说是不规则抗体。
这些家伙就像是那种在球场上不守规矩的球员,时不时给你带来点麻烦。
没错,这就是我们要筛查的对象了。
什么是筛查卡式法呢?嘿,这个听起来可就像个科学实验室的高科技产品了。
其实吧,它就是一种简便、快速的检测方法。
想象一下,你在家里做实验,不需要太多的仪器,也不需要太复杂的步骤,简单易懂。
你只需要一张小卡片,加上一点样本,等待一段时间,就可以看到结果,轻轻松松。
就像在煮泡面,等个几分钟就可以吃上一碗热腾腾的美食,谁不爱呢?再说到这些不规则抗体,为什么要筛查它们呢?想想,身体里有个“小坏蛋”在作乱,肯定得赶紧找出来啊。
那些不规则抗体可能会导致各种疾病,像过敏反应、免疫系统紊乱,甚至更严重的病情。
筛查就像是医生的“侦探工作”,帮助找到潜在的健康隐患。
相信我,早发现早治疗,才是王道!这就好比在海里钓鱼,提前知道哪儿有鱼,绝对能大获全胜。
说到检测的过程,其实也没那么复杂。
你只需要用小针扎一下,取一点血液,像是在做一个小实验。
然后,把这点血液放到那张神奇的卡片上,等待个十几分钟,期间你可以喝杯茶,看看电视,完全不影响你的生活。
等到时间到了,看看卡片上的结果。
如果出现了一条线,那恭喜你,没问题!如果有两条线,哎呀,可能就得去医院进一步检查了。
这卡式法还有个大优点,操作方便,结果直观。
就像是考试成绩一样,分数高低一目了然,谁也不用再去揣测。
很多人都害怕去医院抽血,想象中都是一阵紧张,结果搞得自己心慌慌的。
可这卡式法,简直就是解放双手,既省时又省力,真是给人一种“轻松搞定”的感觉。
这个方法也不是万能的。
有些复杂的情况,可能还得通过其他的检测手段来进一步确认。
不过,作为初步筛查,卡式法无疑是个好选择。
不规则抗体筛查

不规则抗体检查不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。
不规则抗体是指抗A、抗B以外的血型抗体。
ABO系中的亚型,变异型抗A1或某种抗B等抗体,也称为不规则抗体。
其多为IgG抗体。
主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。
临床上通常所称的“同型血”实际上是指ABO血型系统和Rh血型系统相同,其它红细胞血型系统未必相同。
如果交叉配血不仔细,或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ABO血型系统之外的不规则抗体,而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生。
红细胞血型抗体检查适用于下列情况:1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时;2、供血者血清抗体筛检;3、输血前受者血清抗体检查;4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时;5、孕妇血清的抗体检查;6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查;7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。
1. 原理利用筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应,如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体。
2. 试剂2.1 5%筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)2.2 凝聚胺试剂2.3 直接抗人球试剂外周血或静脉血3. 操作步骤3.1 取试管三支,标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清(血浆)2滴,加5%筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)各1滴。
3.2 各加LIM0.7ml,混合均匀后,再各加Polybrene 溶液2滴,并混合均匀。
3.3 用BASO专用离心机1000G离心力,离心10秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约0.1ml液体。
3.4 轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重作。
3.5 最后加入Resuspending 2滴,轻轻转动试管混合并同时观察结果。
如果凝集散开,表示是由Polybrene引起的非特异性聚集,抗体筛检结果为阴性;如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,抗体筛检结果为阳性,应进一步作抗体鉴定。
不规则抗体筛查

不规矩抗体检讨不规矩抗体检讨也称红细胞抗体检讨.不规矩抗体是指抗A.抗B以外的血型抗体.ABO系中的亚型,变异型抗A1或某种抗B等抗体,也称为不规矩抗体.其多为IgG抗体.主如果经输血或怀胎等免疫刺激产生,在盐水介质中不克不及凝集而只能致敏响应抗原的红细胞,必须经由过程特别介质才干使致敏红细胞消失凝集反响.临床上平日所称的“同型血”现实上是指ABO血型体系和Rh血型体系雷同,其它红细胞血型体系未必雷同.假如交叉配血不细心,或者只用盐水介质配血,则有可能检讨不出ABO血型体系之外的不规矩抗体,而此抗体与响应抗原产生免疫反响,可导致溶血性输血反响的产生.红细胞血型抗体检讨实用于下列情形:1.ABO血型判定发明受检者血清中有不测抗体时;2.供血者血清抗体筛检;3.输血前受者血清抗体检讨;4.输血后溶血反响疑为由同种抗体引起时;5.妊妇血清的抗体检讨;6.新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检讨;7.直接抗球蛋白实验阳性红细胞上抗体的检讨.1. 道理应用筛选细胞(Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ)上消失的多种红细胞抗原与被检血清在凝集胺介质中反响,假如消失凝集暗示血清中消失不规矩抗体. 2. 试剂2.1 5%筛选细胞(Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ)2.2 凝集胺试剂2.3 直接抗人球试剂外周血或静脉血3. 操纵步调3.1 取试管三支,标明Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ并往各管加病人血清(血浆)2滴,加5%筛选细胞(Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ)各1滴.3.2 各加LIM0.7ml,混杂平均后,再各加Polybrene 溶液2滴,并混杂平均.3.3 用BASO专用离心计心情1000G离心力,离心10秒,然后把上清液倒失落,不要沥干,让管底残留约0.1ml液体.3.4 轻轻动摇试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重作.3.5 最后参加Resuspending 2滴,轻轻迁移转变试管混归并同时不雅察成果.假如凝集散开,暗示是由Polybrene引起的非特异性集合,抗体筛检成果为阴性;如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体联合的特异性反响,抗体筛检成果为阳性,应进一步作抗体判定.4. 筛选Ⅰ号细胞,筛选Ⅱ号细胞,筛选Ⅲ号细胞.对应的细胞反响格式表一张.红细胞血型抗体筛选细胞反响格式表4. 临床意义固然不规矩抗体筛选阳性率仅为0.37%,但是该项阳性的患者一旦输入具有响应抗原的红细胞,抗原.抗体产生免疫性联合,在补体的介入下,使输入的红细胞产生消融,即产生溶血性输血反响.患者消失发烧.贫血.黄疸和血红蛋白尿,轻微时甚至危及其性命.是以,在输血中要经常小心这种输血反响产生的可能性.当不规矩抗体筛选阳性时,必须进一步作抗体判定,肯定其特异性后,再输入无响应抗原的红细胞,才干达到安然输血之目标.新生儿溶血病(HDN)也是因为母亲体内消失着与其胎儿红细胞不合营的IgG性质的不规矩抗体,引起的同种自动免疫性疾病.凡是以IgG性质消失的不规矩抗体,理论上都可以引起HDN,因为IgG性质抗体能经由过程胎盘进入胎儿血轮回,损坏胎儿红细胞,激发胎儿水肿.黄疸.贫血和肝脾肿大,甚至并发核黄疸.是以对有输血史或怀胎史的妊妇也应作不规矩抗体筛选,若检测出不规矩抗体,应作出响应的预防和治疗.Rh血型中D抗原的抗原性强于E抗原的抗原性,是以产生抗D抗体的几率大于抗-E抗体.抗A1抗体为A亚型中不规矩抗体,它的消失提醒我们在留意ABO血型以外的不规矩抗体的同时,也应高度看重ABO亚型中的不规矩抗体,因为它也是引起溶血性输血反响的一个身分.抗M抗体为冷凝集素,很少在37℃有活性,一般在体内不克不及引起溶血反响,但患者处于低温麻醉状况下手术时应留意,因为此类抗体可激活补体.当机体的体温在冷抗体最适反响温度规模内(4~20℃)时,可产生溶血反响.37℃4℃,偶可在37℃查出.抗P1抗体很少在体内造成溶血,几乎老是IgM型抗体,所以不克不及经由过程胎盘,不会造成HDN.冷凝集素在配血时可疏忽.自身抗体在自身溶血性贫血时消失较多,一向以来是输血的一大难题,我们仍遵守一般输血原则.综上所述,不规矩抗体是引起溶血性输血反响和新生儿溶血病的重要身分之一, 对输血产生溶血性反响所引起肾衰.逝世亡病例的诊断有临床意义.是以为了包管输血安然,进步输血疗效,削减或杜绝溶血性输血反响的产生,不规矩抗体检讨必须作为输血前检讨的重要项目之一.。
不规则抗体筛查试验操作规程

XXX医院不规则抗体筛查试验操作规程1.目的为规范红细胞不规则抗体筛选、鉴定的技术操作,保证检查结果准确和临床输血安全、有效,依据输血实验室管理程序有关条款的要求制定本规程;2.适用范围本规程适用于本院红细胞不规则抗体的筛查;3.职责输血科具有专业技术资格的人员负责红细胞不规则抗体的筛选和鉴定,但只对所筛选或鉴定的标本负责;4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理采用盐水介质法、凝聚胺法或抗球蛋白法等试验使受检者血清血浆与筛选红细胞反应,检测受检者血清血浆中是否存在红细胞不规则抗体,红细胞不规则抗体阳性者进一步与谱红细胞反应,根据反应格局鉴定抗体特异性;7.仪器设备和检测环境7.1.仪器设备等:玻璃试管75X12mm、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱;7.2. 检测环境:室温应控制在18~27℃,湿度应保持在30~70%;8.试剂①生理盐水、凝聚胺试剂、直接抗人球蛋白试剂抗IgG,C3d,均为有合格证件的正品;②市售O型筛选红细胞:为三支以上不同人份的3%筛选红细胞,均为有合格证件的正品;抗凝血标或自制O型筛选红细胞:选择已确认ABO血型为O型的健康者,采集EDTAK2本离心,取少许红细胞置于试管中,用生理盐水离心洗涤3次得压积红细胞3400转/分钟1000g,每次离心1分钟,离心后将上清液全部倒出,再取30µl游离红细胞加入到标记为Ⅰ号的试管中,然后加入1ml生理盐水混匀,即得Ⅰ号O型3%的筛选红细胞;依同样方法分别制备不同人份的Ⅱ号和Ⅲ号O型3%的筛选红细胞;9.血标本的处理将受检者血标本离心分离出血清血浆和压积红细胞,血清血浆备用;再吸取30µl压积红细胞中的游离红细胞,加入1ml生理盐水中,混匀配成3%的自身对照红细胞悬液备用;10.实验方法与步骤10.1.盐水介质法①取4支干净试管,分别标记为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和自身对照;②每管中先各加入2滴受检者血清血浆;③再分别加入1滴对应的3%的Ⅰ号、Ⅱ号、Ⅲ号筛选红细胞和自身对照红细胞悬液;④混匀后,用交叉配血专用离心机120 g离心1分钟;⑤先肉眼观察溶血情况,再轻轻充分混匀后,用肉眼或光学显微镜观察凝集情况,并记录;⑥结果判读:自身对照管和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管均无凝集者,为不规则抗体筛查阴性,表明未检出红细胞不规则抗体;自身对照管和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管均凝集者,为不规则抗体筛查阳性,表明受检者血清血浆中含冷自身抗体或同时伴有同种免疫性红细胞不规则抗体;自身对照管无凝集,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管中至少有1管出现凝集,为不规则抗体筛查阳性,表明受检者血清血浆中含IgM同种免疫性红细胞不规则抗体;10.2.凝聚胺法①盐水介质法筛选红细胞不规则抗体试验结束后转做凝聚胺法试验,具体执行凝聚胺法交叉配血试验操作规程;②结果判读:自身对照管和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管均无凝集者,为不规则抗体筛查阴性,表明未检出红细胞不规则抗体;自身对照管和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管均凝集者,为不规则抗体筛查阳性,表明受检者血清血浆中含IgG自身抗体或同时伴有IgG同种免疫性红细胞不规则抗体;自身对照管无凝集,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管中至少有1管出现凝集,为不规则抗体筛查阳性,表明受检者血清血浆中含IgG同种免疫性红细胞不规则抗体;10.3.直接抗人球蛋白法①盐水介质法筛选红细胞不规则抗体试验结束后转做直接抗人球蛋白试验,具体执行直接抗人球蛋白试验操作规程;②结果判读:同10.2. ②;10.4.红细胞不规则抗体特异性鉴定对红细胞不规则抗体筛选试验阳性的血标本,建议受检者到省级以上三甲医院作进一步的红细胞不规则抗体特异性鉴定;11.质量控制11.1.进行红细胞不规则抗体筛选试验时,应至少选择1种可检出IgG抗体的方法;11.2.所有试剂均应在有效期内使用,每批试剂使用前均应对试剂进行质量控制,以确保质量符合要求;11.3.操作时,应同步设置必要的阴性、阳性和自身对照;12.注意事项12.1.多数IgG类红细胞不规则抗体比IgM类红细胞不规则抗体更有临床意义,盐水介质法通常只能检出IgM类红细胞不规则抗体,不宜单独采用盐水介质法检测红细胞不规则抗体,可结合凝聚胺法或抗球蛋白法;12.2.理论上,凝聚胺法除不能检出抗-K外,其它红细胞血型抗体均可检出,但实际工作中许多红细胞血型弱抗体包括IgM和IgG类不能被凝聚胺法检出,对部分IgM类血型抗体的检测,凝聚胺法甚至没有盐水介质法敏感;12.3.抗球蛋白法对有临床意义的IgG类抗体检测敏感,且可鉴别多数无临床意义的抗体,但本方法操作复杂、费时,目前尚不能实现自动化,不适合批量血标本的检测;12.4.红细胞不规则抗体筛选试验检出自身抗体时,应采用自身吸收试验后,再检测血清血浆中是否还有同种不规则抗体;12.5.用于红细胞不规则抗体筛选试验的筛选细胞,应尽可能多地表达有临床意义的抗体对应的抗原,而且纯合子基因所表达的抗原更有利于相应抗体的检出;要求筛选细胞必须表达D、C、E、c、e、M、N、S、s、P、Le a、Le b、K、k、Fy a、Fy b、Jk a和Jk b18种抗原;12.6.由于用于红细胞不规则抗体筛选试验的筛选细胞很难表达所有有临床意义的抗体对应的抗原,以往免疫所产生的抗体也可降至难以检出的水平,故无论采用何种方法进行红细胞不规则抗体筛选试验,都有漏检由临床意义抗体的可能;12.7.自身抗体和同种抗体可同时存在,也可能有多种同种抗体同时存在,还可能有联合抗体存在,故实际工作中常会遇到难以鉴定红细胞不规则抗体特异性,可送有条件的实验室进行鉴定;。
不规则抗体筛查试验操作规程

XXX医院不规则抗体筛查试验操作规程1.目的为规范红细胞不规则抗体筛选、鉴定的技术操作,保证检查结果准确和临床输血安全、有效,依据《输血实验室管理程序》有关条款的要求制定本规程。
2.适用范围本规程适用于本院红细胞不规则抗体的筛查。
3.职责输血科具有专业技术资格的人员负责红细胞不规则抗体的筛选和鉴定,但只对所筛选或鉴定的标本负责。
4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理采用盐水介质法、凝聚胺法或抗球蛋白法等试验使受检者血清(血浆)与筛选红细胞反应,检测受检者血清(血浆)中是否存在红细胞不规则抗体,红细胞不规则抗体阳性者进一步与谱红细胞反应,根据反应格局鉴定抗体特异性。
7.仪器设备和检测环境7.1.仪器设备等:玻璃试管(75X12mm)、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱。
7.2. 检测环境:室温应控制在18~27℃,湿度应保持在30~70%。
8.试剂①生理盐水、凝聚胺试剂、直接抗人球蛋白试剂(抗IgG,C3d),均为有合格证件的正品。
②市售O型筛选红细胞:为三支以上不同人份的3%筛选红细胞,均为有合格证件的正品。
或自制O型筛选红细胞:选择已确认ABO血型为O型的健康者,采集EDTAK抗凝血2标本离心,取少许红细胞置于试管中,用生理盐水离心洗涤3次得压积红细胞[3400转/分钟(1000g),每次离心1分钟,离心后将上清液全部倒出],再取30µl游离红细胞加入到标记为Ⅰ号的试管中,然后加入1ml生理盐水混匀,即得Ⅰ号O型3%的筛选红细胞;依同样方法分别制备不同人份的Ⅱ号和Ⅲ号O型3%的筛选红细胞。
不规则抗体筛查操作方法

不规则抗体筛查操作方法抗体筛查是一种常用的实验技术,用于检测人体中是否存在某种特定的抗体。
不规则抗体指的是那些不符合正常免疫反应模式的抗体,其产生可能与某些疾病或异常情况相关。
本文将介绍一种不规则抗体筛查的操作方法,包括前处理、抗原标记、试剂制备、试管操作等环节。
1. 前处理:首先,需要准备样本,通常是血液或血浆样本。
将样本离心分离血细胞和血浆,取出血浆备用。
如果需要检测特定器官或组织的抗原,还需进行相应的前处理,如组织细胞抗原的制备。
2. 抗原标记:将待检测的抗原标记。
标记可采用放射性同位素、酶标记、荧光标记、金标记等方法。
标记时需要注意选择合适的标记物,以确保标记效果稳定和信号强度足够。
3. 试剂制备:制备抗体和其他试剂。
抗体可通过动物免疫、杂交瘤细胞技术等方法获得,然后纯化和浓缩。
其他试剂包括缓冲液、辅助试剂等。
制备试剂时需要严格控制操作条件,避免交叉污染和分装误差。
4. 试管操作:a. 将样本和标记的抗原加入试管中,混匀,使抗原与抗体充分结合。
b. 对于各类试管进行不同的操作,如剥夺试验、沉淀试验、凝集试验、间接荧光试验等。
具体操作时需要根据试管类型选择合适的剂量和条件。
c. 通过观察试管内的反应情况,判断是否存在不规则抗体。
不规则抗体的存在可通过沉淀、荧光、凝集等形式观察到,如试管内有沉淀物形成、荧光强度异常高或低、凝集抗体间距不均匀等。
5. 结果分析:根据试管内的反应结果,可判断是否存在不规则抗体。
如果需要进一步确认,还可进行其他检测方法,如免疫组织化学、免疫电镜等。
同时,还需要将结果与临床资料结合,分析不规则抗体是否与某种疾病或异常情况相关。
总结:不规则抗体筛查操作方法主要包括前处理、抗原标记、试剂制备和试管操作等环节。
通过对样本和标记抗原进行混合、加热、冷却等处理,观察试管内的反应情况,可以判断是否存在不规则抗体。
这项技术在疾病诊断和研究中具有重要意义,能够帮助医生确定病情和制定合适的治疗方案。
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作者:非成败
作品编号:92032155GZ5702241547853215475102
时间:2020.12.13
不规则抗体检查
不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。
不规则抗体是指抗A、抗B以外的血型抗体。
ABO系中的亚型,变异型抗A1或某种抗B等抗体,也称为不规则抗体。
其多为IgG抗体。
主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。
临床上通常所称的“同型血”实际上是指ABO血型系统和Rh血型系统相同,其它红细胞血型系统未必相同。
如果交叉配血不仔细,或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ABO血型系统之外的不规则抗体,而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生。
红细胞血型抗体检查适用于下列情况:1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时;2、供血者血清抗体筛检;3、输血前受者血清抗体检查;4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时;5、孕妇血清的抗体检查;6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查;7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。
1. 原理
利用筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应,如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体。
2. 试剂
2.1 5%筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)
2.2 凝聚胺试剂
2.3 直接抗人球试剂
外周血或静脉血
3. 操作步骤
3.1 取试管三支,标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清(血浆)2滴,加5%筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)各1滴。
3.2 各加LIM0.7ml,混合均匀后,再各加Polybrene 溶液2滴,并混合均匀。
3.3 用BASO专用离心机1000G离心力,离心10秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约0.1ml液体。
3.4 轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重作。
3.5 最后加入Resuspending 2滴,轻轻转动试管混合并同时观察结果。
如果凝集散开,表示是由Polybrene引起的非特异性聚集,抗体筛检结果为阴性;如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,抗体筛检结果为阳性,应进一步作抗体鉴定。
4. 筛选Ⅰ号细胞,筛选Ⅱ号细胞,筛选Ⅲ号细胞。
对应的细胞反应格局表一张。
红细胞血型抗体筛选细胞反应格局表
4. 临床意义
虽然不规则抗体筛选阳性率仅为0.37%,但是该项阳性的患者一旦输入具有相应抗原的红细胞,抗原、抗体发生免疫性结合,在补体的参与下,使输入的红细胞发生溶解,即发生溶血性输血反应。
患者出现发热、贫血、黄疸和血红蛋白尿,严重时甚至危及其生命。
因此,在输血中要经常警惕这种输血反应发生的可能性。
当不规则抗体筛选阳性时,必须进一步作抗体鉴定,确定其特异性后,再输入无相应抗原的红细胞,才能达到安全输血之目的。
新生儿溶血病(HDN)也是由于母亲体内存在着与其胎儿红细胞不配合的IgG性质的不规则抗体,引起的同种被动免疫性疾病。
凡是以IgG性质出现的不规则抗体,理论上都可以引起HDN,因为IgG性质抗体能通过胎盘进入胎儿血循环,破坏胎儿红细胞,引发胎儿水肿、黄疸、贫血和肝脾肿大,甚至并发核黄疸。
因此对有输血史或妊娠史的孕妇也应作不规则抗体筛选,若检测出不规则抗体,应作出相应的预防和治疗。
Rh血型中D抗原的抗原性强于E抗原的抗原性,因此产生抗D抗体的几率大于抗-E抗体。
抗A1抗体为A亚型中不规则抗体,它的存在提示我们在注意ABO血型以外的不规则抗体的同时,也应高度重视ABO亚型中的不规则抗体,因为它也是引起溶血性输血反应的一个因素。
抗M抗体为冷凝集素,很少在37℃有活性,一般在体内不能引起溶血反应,但患者处于低温麻醉状态下手术时应注意,因为此类抗体可激活补体。
当机体的体温在冷抗体最适反应温度范围内(4~20℃)时,可发生溶血反应。
不规则抗体产生大多为Rh血型系统,除抗D外,其他如抗E,抗Ec,抗Ce检出率占Rh系统67.8%,提示Rh阳性患者输血也可引起溶血反应,且机率较高.根据我国汉族人群Rh抗原分布特点,E抗
原阳性比D抗原阳性低,产生抗E抗体的机率高于抗D抗体,故Rh血型系统D抗原阳性E抗原阴性者输血不容忽视.Rh阴性个体免疫后产生抗D的机率为70.9%,产生的抗体其效价在体内会逐渐下降,甚至常规试验会漏检,若以后作为受血者输入Rh(D)阳性血刺激时,会很快出现免疫性回忆反应.抗体效价会在1~2wk内达到高峰,引起迟发性血管外溶血,且发生在输血后几天.造成的输血无效以及溶血,易被临床忽视.溶血反应的强度与抗体效价成正比关系,抗体产生的强度增加溶血反应愈严重.抗M、抗Lea、抗P1均较少见,但抗Lea抗体可引起严重的溶血性输血反应,所以不能作为供血者,如为受血者时应给Le(a-b-)血液输入.抗M抗体只有37℃或抗球蛋白试验出现阳性时才具有临床意义.抗P1最理想的反应温度为4℃,偶可在37℃查出.抗P1抗体很少在体内造成溶血,几乎总是IgM型抗体,所以不能通过胎盘,不会造成HDN.冷凝集素在配血时可忽略.自身抗体在自身溶血性贫血时出现较多,一直以来是输血的一大难题,我们仍遵循一般输血原则.
综上所述,不规则抗体是引起溶血性输血反应和新生儿溶血病的主要因素之一, 对输血发生溶血性反应所引起肾衰、死亡病例的诊断有临床意义。
因此为了保证输血安全,提高输血疗效,减少或杜绝溶血性输血反应的发生,不规则抗体检查必须作为输血前检查的重要项目之一。
作者:非成败
作品编号:92032155GZ5702241547853215475102
时间:2020.12.13。