不规则抗体筛查与鉴定 PPT

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不规则抗体筛选红细胞试剂简介.ppt

不规则抗体筛选红细胞试剂简介.ppt

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血红蛋白试剂盒(硫酸铜比重法)
• 【检验结果的解释】 • 1. 若待检全血标本比重大于试剂比重,则15秒
内下沉于瓶底,表明血红蛋白初筛检测合格; 2. 若待检全血标本比重等于试剂比重,则在试 剂液面或中段悬浮15秒后下沉,表明血红蛋白 初筛检测合格; 3. 若待检全血样本比重小于试剂比重,则上浮 且15秒内不下沉,为血红蛋白初筛检测合格不 合格。
50µl)滴于瓶内, 1瓶试剂筛检血滴不能多于50滴。 • 2.打开女用试剂2(蓝色)瓶盖,将女性受检者新鲜全血标本一滴(约
50µl)滴于瓶内, 1瓶试剂筛检血滴不能多于50滴。
• 3. 滴加标本时应距试剂液面1cm并将其垂直滴入,15秒内观察血滴 下沉情况。
• 【参考值(参考范围)】 • 成年男性全血比重≥1.052 (相当于血红蛋白含量≥120 g/L) • 成年女性全血比重≥1.050(相当于血红蛋白含量≥110 g/L)
• 【储存条件及有效期】 • Hb试剂盒贮存于10℃-40℃的干燥环境
中,有效期为12个月,有效期为12个月。 • 【适用仪器】 • 本试剂为独立使用的筛查试剂,无需与
仪器配合使用。 • 【样本要求】 • 样本要求:应为人新鲜全血标本。
血红蛋白试剂盒(硫酸铜比重法)
• 【检验方法】 • 1.打开男用试剂1(绿色)瓶盖,将男性受检者新鲜全血标本一滴(约
• 【预期用途】 • 本试剂盒主要用于采供血机构对献血者全血中
血红蛋白(Hb)含量范围的筛检。 • 【检验原理】 • 血红蛋白能与硫酸铜形成蛋白质的铜盐,人体
新鲜全血标本滴入硫酸铜溶液后在其外表面形 成一层铜盐包膜,能在10-15秒内保持外形完 整而不改变比重。因此比较全血与一定浓度的 硫酸铜溶液的比重来判断全血的比重,进而筛 查出全血血红蛋白含量的范围。

不规则抗体筛查和鉴定培训课件

不规则抗体筛查和鉴定培训课件
2.加入聚凝胺,缩短红细 胞之间的距离,不完全抗 体同时与两个红细胞结合 使其特异性凝集
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合, 特异性凝集不消失
不完全抗体
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抗人球蛋白介质法 处,请联系网站或本人删除。
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表
产生:免疫刺激; 免疫抗体 分类:IgG类抗体为主; IgM类抗体少
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IgM抗体处,请联系网站或本人删除。
多以五聚体形式存在,分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞, 使之发生肉眼可见的凝集反应,又称为完全 抗体
IgG 抗体 本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之 处,请联系网站或本人删除。
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1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行? 2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介 质法一种方法进行不规则抗体的筛查?
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1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价
及临床意义
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不规则抗体 处,请联系网站或本人删除。

不规则抗体筛选

不规则抗体筛选

取4支小试管,按表标记及加入相应试剂。

1#
2# 3# 自 身
受检者血清
2滴 2滴 2滴 2滴
筛选用红细胞悬液1# 1滴
筛选用红细胞悬液2#
1滴
筛选用红细胞悬液3#
1滴
受检者5%红细胞悬液
1滴
混匀后3400rpm离心15秒,立即观察结果 同前
注意事项
标本编号清楚!! 试剂红细胞是保存在保存液中,一旦用生理盐
低离子聚凝胺法(LIP-IAT):所需试验时间 少(3~5分钟)、方法灵敏度高,准确性高, 但无法排除无临床意义抗体的干扰。
间接抗人球方法:是很灵敏且有效的检测抗 体的方法,同时此方法可以有效的避免无临 床意义抗体的干扰。缺点:耗时间长,步骤多。
试剂
抗体筛选用红细胞悬液(1#、2#、3#) 试剂红细胞必须含有下列抗原:
3、有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体,获得充足的时间来 选择相配合的血,避免由于寻找不到相合的血液而造成患者病情 的延误。
抗体筛选检查
一、什么叫“抗体筛选”检查 1、不规则抗体的含义:通常把抗A、抗B以
外的所有红细胞血型抗体称为不规则抗体。如 抗D、抗N、抗M、jk-抗体。
2、“抗体筛选”的含义:用具备有临床意 义的血型抗原的O型红细胞,检测病人血清 (含多种抗体);如果出现聚集现象,则提示 病人有不规则抗体存在,可判为“抗体筛选” 阳性。
水或Liss液洗涤后则应该在24小时内使用,否 则会因污染、抗原丢失导致试验错误。 加血清和红细胞悬液的量必须准确不能多加, 少加,以免引起前带和后带效应 转速不能太快或太慢、时间不能过长或过短, 以免引起假阳性或假阴性。
Polybrene法

不规则抗体筛查与分析(1)

不规则抗体筛查与分析(1)
01抗筛的基本问 题
02抗体的筛查与 分析
03抗体的鉴定与 分析
01凡遇有下列情况必须按《全国临床检验操 作规程》有关规定作抗体筛选实验:交叉 配血不合时;对有输血史、妊娠史或短期 内需要接收多次输血者。
02不做抗筛直接盲配有风险,对于弱抗体, 若供血者为杂合子(剂量效应)则有可能 为阴性结果。所以筛选(鉴定)对抗体的 检测比交叉配血更敏感和可靠。
抗筛的目的是通过受检的血清和已知的带有
不同抗原的三人份O型筛选红细胞反应,来 测定血清中有无抗A和抗B以外的意外抗体 (也称不规则抗体)
对疑难交叉配血有重要的指导意义,降低盲 配风险
补体依赖性抗体 补体非依赖性抗

完全抗体 不完全抗体
天然抗体 免疫抗体
冷抗体 温抗体
自身抗体 同种抗体
临床有意义抗体:一般为免疫性抗体,在体 温条件(37度)具有反应性的同种抗体。
+ (抗-E/-cE约占1/3,此类患者筛选相合的血液 是很容易的)
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性,且强度一致;自c阳 性:结合病情,优先考虑自身抗体
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性,自c阴性:考虑同种 抗体,如病人血型为Rh阴性,优先考虑抗-D
+
+ 抗筛结果排除假阴性,一定是阴性结果吗?
+ 解答:“抗筛阴性”并不能代表“同种抗体阴性”。 + 筛选细胞和谱细胞有人种差异,如Mia,
+ 抗人球蛋白试剂:IgG抗体通过抗人IgG类免 疫球蛋白抗体(简称抗人球)“搭桥”,使已 致敏了不完全抗体的RBC发生凝集。
+ 抗筛要求用抗IgG+C3的多特异性抗人球蛋白 试剂,若用单抗IgG的单特异性抗人球蛋白 试剂,可能对某些抗体造成漏检。

不规则抗体筛查及鉴定培训7.27

不规则抗体筛查及鉴定培训7.27

情况一:抗筛阳性反应强度不一,自身对照阴性
表型与抗体互相验证
情况二:抗筛全部呈阳性反应,反应强度大致相同, 自身对照阳性
情况二:抗筛全部呈阳性反应,反应强度大致相同, 自身对照阳性
3 抗筛阳性输血原则
抗筛阳性患者输血
确认只有不规则抗体
自身(-)、抗体筛选(+)
配血时患者血清中的同种抗体与供 者红细胞上相应抗原起反应。
P 血型 系统抗体
最常见的表型 :P1、P2 P1 红细胞上有两种不同的 抗原:P1 和 P;P2 红细胞 上只有 P 抗原,可以产生 抗-P1。
不规则抗体种类(其他)
Lewis血型系统抗体: 多为IgM类,属自然产生的抗体,37℃一般不发生反应
Lutheran 血型系统抗体: LU抗原剂量效应,导致混合凝集、临床意义一般不大
结果判读:根据谱细胞的反应格局一般可以鉴定常见的抗体,但有 一定的局限性,有可能漏检常见的组合抗体
排除法:纯合子表达抗原无反应则直接排 除对应的抗体(举例:与5号细胞dCCee、11 号细胞DCCEe、12号细胞DCcEE反应均为阴性, 表明不存在单特异性抗-C)
情况一:抗筛阳性反应强度不一,自身对照阴性
操作:抗体鉴定谱细胞分别与被检血清进行间接抗球 蛋白试验,同时做自身对照
自身细胞检查:确定患者血清内是否有自身抗体或自身抗体与同 种抗体并存,只有是阴性时,才能排除自身抗体或其他凝集素导 致的谱细胞凝集;
使用试剂谱细胞:谱细胞一般是由8~16单人份的已知血型表型的O 型红细胞配套组成,具有各种不同的抗原成分;
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全抗体致敏
2.加入聚凝胺,缩短红细胞之间的距离,不完全 抗体同时与两个红细胞结合使其特异性凝集

最新不规则抗体及抗体效价PPT课件

最新不规则抗体及抗体效价PPT课件
分娩后10天复查 • 有不良产史,抗体效价(-) 28周复查1次/月
分娩后10天复查 • 抗体效价(+) 治疗中动态监测 1次/月
分娩后10天复查
Rh抗体效价临床意义
• 由于Rh血型抗体只能由人类红细胞产生,故测
定Rh抗体对诊断围产儿溶血症意义较大 • 一般抗体效价在1:32-1:64说明胎儿有溶血危 险
抗体特异性鉴定(了解)
• 使用谱细胞确定抗体的特异性,谱细胞一 般由8-16种含有不同抗原的O型红细胞配 套组成,根据谱细胞的反应格局一般可以 鉴定常见的抗体。
• 实验方法和抗体筛选实验相同
抗球蛋白试验
• 原理:抗体分子和补体成分都是球蛋白, 用这些球蛋白免疫动物使之产生抗体即抗 人球蛋白,抗球蛋白试剂可以和致敏在红 细胞上的人球蛋白(抗体分子和补体分子 )反应,通过架桥作用使致敏红细胞出现 凝集。见图
每种方法都有自己的特点,适应于不同范围及情况
• 盐水法:可以用于检测干扰ABO定型的盐水反应活性
抗体,如:MN、P血型抗体。但此方法会检查出无临 床意义的抗体,如冷凝集素抗-I及抗-IH等,而且 会漏检IgG性质的抗体。 • 低离子聚凝胺法(LIP-IAT):所需试验时间少(3~ 5分钟)、方法灵敏度高,准确性高,但无法排除无 临床意义抗体的干扰。 • 间接抗人球方法:是很灵敏且有效的检测抗体的方法 ,同时此方法可以有效的避免无临床意义抗体的干扰 。缺点:耗时间长,步骤多。
2、“抗体筛选”的含义: 用具备有临床意义的血型抗原的O型 红细胞,检测病人血清(含多种抗 体);如果出现聚集现象,
则提示病人有不规则抗体存在,可 判为“抗体筛选”阳性。
抗体筛选技术要求
• 尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 • 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 • 尽可能快的完成抗体检测

《不规则抗体筛选》课件

《不规则抗体筛选》课件
பைடு நூலகம்
需要不断改进和创新不规 则抗体筛选技术,以适应 不同的研究需求和应用场 景。
希望本课件能够为不规则 抗体筛选领域的研究者提 供参考和思路,推动该领 域的进一步发展。
参考文献
- 引用的文献列表
当前的研究现状
不规则抗体筛选技术在科学研究 和工业应用中取得了显著的进展 和创新。
未来的发展方向
加强对不规则抗体筛选技术的研 究,进一步完善技术方法,推动 其在更多领域的应用。
结论
1 不规则抗体筛选的重 2 筛选技术的进一步完 3 期望对不规则抗体筛
要性
善和创新的必要性
选研究的贡献
不规则抗体筛选在生物医 学领域和生物技术领域具 有重要的理论意义和实际 应用价值。
《不规则抗体筛选》PPT 课件
本课件介绍了不规则抗体筛选的重要性和筛选技术的发展。通过丰富的内容 和精美的布局,旨在提供易于理解和引人入胜的知识。
不规则抗体筛选介绍
不规则抗体是指形态、结构、性质上与普通抗体不完全一致的抗体,有着独特的特征和优势。了解不规则抗体 及筛选意义。
不规则抗体筛选的基本原理
不规则抗体筛选的基本原理是通过特定的方法,从混合溶液或反应体系中筛 选出目标抗体,以获得纯化和高亲和力的抗体。
直接筛选法
1 亲和层析法
利用不规则抗体与目标分子的特异性相互作用进行层析分离。
2 免疫法
通过不规则抗体与目标分子的特异性反应来检测和筛选抗体。
间接筛选法
吸附剂法
通过将目标抗原吸附在固相载体上,间接筛选出与抗原特异结合的不规则抗体。
非吸附剂法
利用可溶性载体或晶体结合剂介导的间接筛选方法,实现不规则抗体的高效筛选。
应用举例
1

不规则抗体及抗体效价 PPT

不规则抗体及抗体效价 PPT

微柱凝集
• 灵敏度高 • 操作简便,时间较少 • 准确性较高 • 成本较高
上海市血液中心 朱自严
• 抗体筛选是无法检测出血清中的所有抗体 ,比如抗体是针对低频抗原的,而筛选细 胞中并不含低频抗原
• 如果抗体在37℃或抗球蛋白介质中不反应 ,单用间接抗球蛋白方法的抗体筛选也会 漏检这些抗体。
上海市血液中心 朱自严
0型产妇是发生溶血症的独立危险因子!!
其他血型的孕妇需要检测抗体效价吗?
ABO血型不合系统
➢A型人的抗B 和B 型人的抗A主要由IgM分 子组成,只有少量IgG分子,故A型或B型母亲 所生婴儿很少因母子血型不合引起新生儿 溶血病。
ABO抗体效价临床意义
• 由于ABO血型有天然抗体,故母亲血中的抗体效价 需很高才对新生儿溶血症的诊断有意义
为什么要开展输血前的“抗体筛选”检查
3、有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体, 获得充足的时间来选择相配合的血,避免由于 寻找不到相合的血液而造成患者病情的延误。
抗体筛选检查
一、什么叫“抗体筛选”检查 1、不规则抗体的含义:通常把抗A、抗B以外的所有红
细胞血型抗体称为不规则抗体。如抗D、抗N、抗M、jk-抗 体。
• 一般抗体效价在1:128-1:256要警惕胎儿可能有 溶血,抗体效价≥1:512说明胎儿有溶血危险
• 有学者报告观察几例抗体效价≥1:512的孕妇产后 无新生儿溶血发生。所以母体血中有ABO抗体临床 意义较小,但结合其它检验结果综合分析,仍有一 定的临床意义。
ห้องสมุดไป่ตู้
Rh抗体效价测定
• 妊娠20周测抗体效价 • 无不良产史,抗体效价(-)32-34周复查
为什么要开展输血前的“抗体筛选”检查
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抗人球蛋白介质法:检测IgG型血型抗体最为经典方法, 步骤繁琐,耗时较多
临床意义
献血者:防止含有不规则抗体的血液输注给病 人,避免溶血性输血反应
受血者:有助于血液选择,充分的时间选择相合 的血液
孕妇:早发现,孕期进行新生儿溶血病的预防和 治疗,减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤 害
小结
1.不规则抗体两类:IgG型、 IgM型
不规则抗体筛查
受伤严重,需要 立即输血!!!
教学目标
1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价
及临床意义
不规则抗体
概念:不符合ABO血型系Landsteiner 法 则的血型抗体,即抗-A、抗-B 以外的血 型抗体
Landsteiner法则
ห้องสมุดไป่ตู้ 不规则抗体
概念:不符合ABO 血型系Landsteiner法则的血 型抗体,也就是抗-A、抗-B 以外的血型抗体
聚凝胺法 抗人球蛋白法
不规则抗体筛查方法
盐水介质法 聚凝胺介质法(最常用) 抗人球蛋白介质法(经典)
不规则抗图 体6-2 检:红细测胞表原面电理荷及其相互之间的距离
自由移动的 正电荷 内层正电荷 随红细胞移动 表面负电荷 红细胞
红细胞间由静电维 持最小距离约 24nm
不规则抗体检测原理
产生:免疫刺激; 免疫抗体 分类:IgG类抗体为主; IgM类抗体少
IgM抗体
多以五聚体形式存在,分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞, 使之发生肉眼可见的凝集反应,又称为完全 抗体
IgG 抗体
单体形式存在,分子量较小 盐水介质中只能致敏相应抗原的红细胞,而不能
使之凝集,又称为不完全抗体 必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集
面,但是不能和两个红细胞同 时结合(致敏) 3.加入抗人球蛋白
4.抗人球蛋白同时和两个 不完全抗体的Fc段结合, 从而把红细胞连接在一起
方法学评价
盐水介质法:最基本,检测IgM型血型抗体
聚凝胺介质法:速度快,实验时间5分钟左右 ; 不适合于Kell系统抗体的检测,但汉 族人群至今无Kell系统抗体检出报道
2.不规则抗体筛查方法:先盐水介质法,后聚凝胺 介质法或抗人球蛋白法 3.盐水介质法只能检测IgM型不规则抗体; IgG型抗 体需要选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白法
思考题
1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行? 2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介 质法一种方法进行不规则抗体的筛查?
参考资料
1.临床输血与检验 人民卫生出版社 2.人类血型 科学出版社 3.免疫血液学 上海科学技术出版社 4.中国输血协会
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Thank you
35.7nm
不规则抗体检测原理
14nm
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全 抗体致敏
2.加入聚凝胺,缩短红细 胞之间的距离,不完全抗 体同时与两个红细胞结合 使其特异性凝集
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合, 特异性凝集不消失
不完全抗体
抗人球蛋白介质法
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表
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