色谱分析总复习
经典液相色谱法平面色谱分析
18.6 纸色谱法
18.6.1 纸色谱法的分离原理 paper chromatography
～是以纸为载体的色谱法，分离原理
属于分配色谱的范畴。
固定相：纸纤维上吸附的水分。(或甲酰胺、 缓冲液等滤纸可以吸留的物质。) 流动相：不与水相混溶的有机溶剂。或可与 水混溶的溶剂。
l2、l1分别为原点至两斑点中 心的距离， d为两斑点中心间的距离 ，W1、W2为斑 点的宽度。
分离数 定义在相邻斑点分离度为1.177时，在
Rf 0和Rf 1两种组分斑点之间能容纳的 色谱斑点数。
SN l0 /b0 b1 1
其中，b0、b1为Rf 0和1时组分的半峰宽， 二者由外推法获得。
c.点样方法 吸取一定量的样液，轻轻接触于薄层的
点样线上，点样线一般距薄层底边 1.5~2cm， 点间距约0.8~1.5cm(新药典规定为1.5~2.0 cm)。点样后形成的原点面积越小越好，一 般原点直径不超过2~4mm为宜。
展开和展开剂的流速
展开
先预饱和。展开前，将薄层板置于盛有展 开剂的色谱缸内饱和15～30min,此时薄板不与 展开剂直接接触，当色谱缸内展开剂蒸汽、薄 层与缸内大气达到动态平衡时，即饱和时，再 将薄层板浸入展开剂中，称预饱和。
常用展开剂：水饱和的正丁醇、正戊醇、 酚等，即含水的有机溶剂。
为了防止弱酸、弱碱的离解，加入少量 的酸或碱。如甲酸、醋酸、吡啶等。
纸色谱的操作步骤有点样、展开、显色、 定性定量分析几个步骤。
复习题
1、在硅胶薄层板A上，以苯－甲苯（1:3）为 展开剂，某物质的Rf值为0.50，在硅胶板B 上，用相同的展开剂，此物质的Rf值为0.40， 问哪块板的活度大？
仪器分析第十二章复习
沈昊宇， haoyushen2000@
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（二） 按分离机理分
吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同，用 溶剂或气体洗脱，以使组分分离。 分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同， 以使组分分离。其中一相为液体，涂布或使之键合在固体 载体上，称固定相；另一相为液体或气体，称流动相。 离子交换色谱是利用被分离物质在离子交换树脂上的离子 交换作用不同而使组分分离。常用的有不同强度的阳、阴 离子交换树脂，流动相一般为水或含有有机溶剂的缓冲液。 排阻色谱又称凝胶色谱或凝胶渗透色谱，是利用被分离物 质分子量大小的不同和在填料上渗透程度的不同，以使组 分分离。常用的填料有分子筛、凝胶、微孔聚合物、微孔 硅胶等，可根据载体和试样的性质，选用水或有机溶剂为 流动相。
k
分配比也称：
组分在固定相中的质量 ms 组分在流动相中的质量 mM
容量因子(capacity factor)；容量比(capacity factor)；通过调整保 留值可以计算。
1. 分配系数与分配比都是与组分及固定相的热力学性质有关的常数，随分离 柱温度、柱压的改变而变化。
2.分配系数与分配比都是衡量色谱柱对组分保留能力的参数，数值越大，该
1957年Martin & Golay 发明毛细管色谱
1959年Porath & Flodin 发明凝胶色谱 1960年液相色谱技术完善 1954年我国研究成功第一台色谱仪
沈昊宇， haoyushen2000@
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三、 色谱法的分类
（一） 按两相状态分
气相色谱法(GC) 液相色谱法(LC) 超临界流体色谱法(SFC) 电色谱
半(高)峰宽W1/2(Peak Width at Half Height)
仪器分析复习资料整理
仪器分析复习资料整理第⼆章⽓相⾊谱分析1、⽓相⾊谱仪的基本设备包括哪⼏部分?各有什么作⽤?载⽓系统（⽓路系统）进样系统：⾊谱柱和柱箱（分离系统）包括温度控制系统（温控系统）：检测系统：记录及数据处理系统（检测和记录系统）：2、当下列参数改变时，是否会引起分配系数的改变?为什么?(1)柱长缩短, 不会（分配⽐，分配系数都不变）(2)固定相改变, 会(3)流动相流速增加, 不会(4)相⽐减少, 不会当下列参数改变时:，是否会引起分配⽐的变化?为什么?(1)柱长增加, 不会(2)固定相量增加, 变⼤(3)流动相流速减⼩, 不会(4)相⽐增⼤, 变⼩答: k=K/b（b记为相⽐）,⽽b=VM/VS ,分配⽐除了与组分,两相的性质,柱温,柱压有关外,还与相⽐有关,⽽与流动相流速,柱长⽆关.3、试述速率⽅程中A, B, C三项的物理意义. H-u曲线有何⽤途?曲线的形状主要受那些因素的影响?A、涡流扩散项：⽓体碰到填充物颗粒时，不断地改变流动⽅向，使试样组分在⽓相中形成类似“涡流”的流动，因⽽引起⾊谱的扩张。
由于 A=2λdp ，表明 A 与填充物的平均颗粒直径 dp 的⼤⼩和填充的不均匀性λ有关，⽽与载⽓性质、线速度和组分⽆关，因此使⽤适当细粒度和颗粒均匀的担体，并尽量填充均匀，是减少涡流扩散，提⾼柱效的有效途径。
B、分⼦扩散项：由于试样组分被载⽓带⼊⾊谱柱后，是以“塞⼦”的形式存在于柱的很⼩⼀段空间中，在“塞⼦”的前后 ( 纵向 ) 存在着浓差⽽形成浓度梯度，因此使运动着的分⼦产⽣纵向扩散。
⽽ B=2rDgr 是因载体填充在柱内⽽引起⽓体扩散路径弯曲的因数 ( 弯曲因⼦ ) ， D g 为组分在⽓相中的扩散系数。
分⼦扩散项与 D g 的⼤⼩成正⽐，⽽ D g 与组分及载⽓的性质有关：相对分⼦质量⼤的组分，其 D g ⼩ , 反⽐于载⽓密度的平⽅根或载⽓相对分⼦质量的平⽅根，所以采⽤相对分⼦质量较⼤的载⽓( 如氮⽓ ) ，可使 B 项降低， D g 随柱温增⾼⽽增加，但反⽐于柱压。
气相色谱仪进样口温度、柱温、检测器温度如何设置
气相色谱仪进样口温度、柱温、检测器温度如何设置1、进样口的温度要高于被分析物的沸点，确保所有分析物经过进样口进样后能够完全气化。
2、在其他条件都不变的情况下，柱箱温度越高，峰高越高，峰宽越窄，但是峰与峰之间的间距会越小。
反之温度越低，峰高越低，峰宽越宽，峰之间的间距越大。
所以不一定温度越低分离越好。
他们之间有一个临界温度，将会使峰宽与分离度达到一个个最合适的效果。
3、检测器温度一般等于或者高于进样器20℃左右。
气相色谱分析复习题及参考答案（46题）一、填空题1、气相色谱柱的老化温度要高于分析时最高柱温℃，并低于的最高使用温度，老化时，色谱柱要与断开。
答：5—10 固定液检测器《气相色谱分析原理与技术》，P302、气相色谱法分析非极性组分时应首先选用固定液，组分基本按顺序出峰，如为烃和非烃混合物，同沸点的组分中大的组分先流出色谱柱。
答：非极性沸点极性《气相色谱分析原理与技术》，P1923、气相色谱分析中等极性组分首先选用固定液，组分基本按顺序流出色谱柱。
答：中极性沸点《气相色谱分析原理与技术》，P1924、一般说，沸点差别越小、极性越相近的组分其保留值的差别就，而保留值差别最小的一对组分就是物质对。
答：越小难分离《气相色谱分析原理与技术》，P785、气相色谱法所测组分和固定液分子间的氢键力实际上也是一种力，氢键力在气液色谱中占有地位。
答：定向重要《气相色谱分析原理与技术》，P1796、分配系数也叫，是指在一定温度和压力下，气液两相间达到时，组分分配在气相中的与其分配在液相中的的比值。
答：平衡常数平衡平均浓度平均浓度《气相色谱分析原理与技术》，P457、分配系数只随、变化，与柱中两相无关。
答：柱温柱压体积《气相色谱分析原理与技术》，P468、分配比是指在一定温度和压力下，组分在间达到平衡时，分配在液相中的与分配在气相中的之比值。
答：气液重量重量《气相色谱分析原理与技术》，P469、气相色谱分析中，把纯载气通过检测器时，给出信号的不稳定程度称为。
分析化学复习题一答案
分析化学复习题一答案1. 什么是分析化学？分析化学是研究物质的组成、含量、结构和性质的科学，它通过测量物质的物理和化学性质来获取信息。
分析化学在化学、生物学、医学、环境科学等领域都有广泛的应用。
答案：分析化学是研究物质的组成、含量、结构和性质的科学，通过测量物质的物理和化学性质来获取信息。
2. 分析化学的主要任务是什么？分析化学的主要任务包括定性分析和定量分析。
定性分析旨在确定物质的成分，而定量分析则旨在测量物质中各组分的含量。
答案：分析化学的主要任务是定性分析和定量分析，分别用于确定物质的成分和测量物质中各组分的含量。
3. 什么是滴定分析？滴定分析是一种将已知浓度的标准溶液滴加到待测溶液中，直到反应完全进行，通过测量滴加的体积来确定待测物质浓度的方法。
答案：滴定分析是一种通过将已知浓度的标准溶液滴加到待测溶液中，直到反应完全进行，并测量滴加的体积来确定待测物质浓度的方法。
4. 什么是色谱分析？色谱分析是一种基于不同组分在固定相和流动相之间分配系数的差异，通过分离混合物中的各个组分来进行分析的方法。
答案：色谱分析是一种基于不同组分在固定相和流动相之间分配系数的差异，通过分离混合物中的各个组分来进行分析的方法。
5. 什么是光谱分析？光谱分析是一种通过测量物质对光的吸收、发射或散射特性来获取物质信息的分析方法。
它包括紫外-可见光谱分析、红外光谱分析、原子吸收光谱分析等。
答案：光谱分析是通过测量物质对光的吸收、发射或散射特性来获取物质信息的分析方法，包括紫外-可见光谱分析、红外光谱分析、原子吸收光谱分析等。
6. 如何选择分析方法？选择分析方法时，需要考虑待测物质的性质、所需分析的灵敏度和准确度、成本和操作的简便性等因素。
答案：选择分析方法时，需要考虑待测物质的性质、所需分析的灵敏度和准确度、成本和操作的简便性等因素。
7. 什么是校准曲线？校准曲线是通过测量一系列已知浓度的标准溶液的响应信号，绘制响应信号与浓度之间的关系曲线，用于定量分析中确定未知样品浓度的方法。
仪器分析及实验复习题
精选题及其解(一)填空题1在气液色谱中，被分离组分分子与固定液分子的性质越相近，则它们之间的作用力越，该组分在柱中停留的时问越，流出越。
2气液色谱法即流动相是，固定相是的色谱法。
样品与固定相间的作用机理是。
3气固色谱法即流动相是，固定相是的色谱法。
样品与固定相的作用机理是。
4气相色谱仪中气化室的作用是保证样品气化。
气化室温度一般要比柱温高℃，但不能太高，否则会引起样品。
5气相色谱分析的基本程序是从进样，气化了的样品在分离，分离后的各组分依次流经，它将各组分的物理或化学性质的变化转换成电量变化。
输给记录仪，描绘成色谱图。
6色谱柱的分离效率用α表示。
α越大，则在色谱图上两峰的距离，表明这两个组分分离，通常当α大于时，即可在填充柱上获得满意的分离。
7分配系数K用固定液和载气中的溶质浓度之比表示。
待分离组分的K值越大，则它在色谱柱中停留的时间，其保留值。
各组分的K值相差越大，则它们分离。
8一般地说，为了获得较高的柱效率，在制备色谱柱时，固定液用量宜，载体粒度宜，柱管直径宜。
9色谱定性的依据是，定量的依据是。
10为制备一根高性能的填充柱，除选择适当的固定液并确定其用量外，涂渍固定液时力求涂得．装柱时要。
（二)问答题．1 色谱内标法是一种准确度较高的定量方法。
它有何优点?2分离度R是柱分离性能的综合指标。
R怎样计算?在一般定量、定性或3 什么是最佳载气流速?实际分析中是否一定要选用最佳流速?为什么?4在色谱分析中对进样量和进样操作有何要求?5色谱归一化定量法有何优点?在哪些情况下不能采用归一化法?6色谱分析中，气化室密封垫片常要更换。
如果采用的是热导检测器，在操作过程中更换垫片时要注意什么?试说明理由。
7柱温是最重要的色谱操作条件之一。
柱温对色谱分析有何影响?实际分析中应如何选择柱温?8色谱柱的分离性能可用分离效率的大小来描述。
分离效率怎样表示?其大小说明什么问题?要提高分离效率应当怎么办?9制备完的色谱柱还需要进行老化处理后才能使用。
气相色谱仪进样口温度、柱温、检测器温度如何设置
气相色谱仪进样口温度、柱温、检测器温度如何设置1、进样口的温度要高于被分析物的沸点，确保所有分析物经过进样口进样后能够完全气化。
2、在其他条件都不变的情况下，柱箱温度越高，峰高越高，峰宽越窄，但是峰与峰之间的间距会越小。
反之温度越低，峰高越低，峰宽越宽，峰之间的间距越大。
所以不一定温度越低分离越好。
他们之间有一个临界温度，将会使峰宽与分离度达到一个个最合适的效果。
3、检测器温度一般等于或者高于进样器20℃左右。
气相色谱分析复习题及参考答案（46题）一、填空题1、气相色谱柱的老化温度要高于分析时最高柱温℃，并低于的最高使用温度，老化时，色谱柱要与断开。
答：5—10 固定液检测器《气相色谱分析原理与技术》，P302、气相色谱法分析非极性组分时应首先选用固定液，组分基本按顺序出峰，如为烃和非烃混合物，同沸点的组分中大的组分先流出色谱柱。
答：非极性沸点极性《气相色谱分析原理与技术》，P1923、气相色谱分析中等极性组分首先选用固定液，组分基本按顺序流出色谱柱。
答：中极性沸点《气相色谱分析原理与技术》，P1924、一般说，沸点差别越小、极性越相近的组分其保留值的差别就，而保留值差别最小的一对组分就是物质对。
答：越小难分离《气相色谱分析原理与技术》，P785、气相色谱法所测组分和固定液分子间的氢键力实际上也是一种力，氢键力在气液色谱中占有地位。
答：定向重要《气相色谱分析原理与技术》，P1796、分配系数也叫，是指在一定温度和压力下，气液两相间达到时，组分分配在气相中的与其分配在液相中的的比值。
答：平衡常数平衡平均浓度平均浓度《气相色谱分析原理与技术》，P457、分配系数只随、变化，与柱中两相无关。
答：柱温柱压体积《气相色谱分析原理与技术》，P468、分配比是指在一定温度和压力下，组分在间达到平衡时，分配在液相中的与分配在气相中的之比值。
答：气液重量重量《气相色谱分析原理与技术》，P469、气相色谱分析中，把纯载气通过检测器时，给出信号的不稳定程度称为。
仪器分析复习题
仪器分析复习题填空题1、气固色谱、气液色谱中，其样品与固定相间的作用机理。
气-固色谱分析中的固定相是一种具有多孔性及较大表面积的吸附剂颗粒，试样由载气携带进入柱子时，立即被吸附剂所吸附。
气-液色谱分析中的固定相是在化学情性的固体微粒（此固体是用来支持固定液的，称为担体）表面，涂上一层高沸点有机化合物的液膜，当载气携带被测物质进人色谱柱，和固定液接触时，气相中的被测组分就溶解到固定液中去。
2、分配系数与停留时间的关系。
分配系数越大，保留时间越长3、色谱法定性、定量分析的依据。
定性依据是：标准物质进行对照定性。
（在一定色谱系统和操作条件下，每种物质都有确定的保留值，比较样品组分与已知组分的保留值，即可鉴定每个色谱峰各代表何种物质）。
定量依据是：在实验条件一定时，峰面积或峰高与组分的含量成正比，因此可以利用峰面积或峰高定量4、气相色谱法、液相色谱法检测器的类型，各自的特点及应用气相色谱法:①热导检测器（TCD):特点:浓度型检测器，灵敏度低，适用范围广，几乎所有气体都能检测，价格便宜，通用性好。
应用:填充柱气相色谱仪常用检测器，只对样品浓度高时有响应，在毛细管气相色谱中应用有限。
②氢火焰离子化检测器:特点:检出限低，适用范围广，质量型，对含碳有机物有高灵敏度，死体积小，响应速度快，线性范围广，结构简单。
应用:能检测大多数含碳有机物，不能检测惰性气体，水，二氧化碳，氮的氧化物，二氧化硫，硫化氢等无机物。
③电子捕获检测器（ECD）:特点:浓度型检测器，对电负性元素灵敏度高，线性范围窄，重现性差。
应用:分析痕量电负性有机物最有效的检测器。
1、④火焰光度检测器（FPD）:特点:质量型检测器。
应用:可测有机物，对含硫含磷的有机化合物灵敏度高，选择性高。
液相:①紫外光度检测器:特点:灵敏度高，检出限低，对温度，流速不敏感，可用于梯度洗脱。
应用:适用于对紫外光有吸收的试样。
②荧光检测器:特点:选择性强（适用于稠环芳烃，甾族化合物、酶、氨基酸、蛋白质、等荧光物质）对温度、流速不敏感，可梯度洗脱。
仪器分析复习题4
仪器分析计算题1. 在一个3m 长的色谱柱上，分离一试样，得到如下的色谱图及数据： （1）求组份1和组份2的调整保留时间；（2）用组份2计算色谱柱的有效理论塔板数和有效理论塔板高度； （3）若需达到分离度R=1.5，所需的最短柱长为几米？21.解:(1) t ′R1 = t R1 - t M =14-1 = 13min t ′R2 = t R2 – t M = 17-1 = 16min (2) n 有 = 16(t′R2/W b2)2 = 16×162 = 4096H 有 = L /n 有 = 300/4096 = 0.0732 (cm) (3) 相对保留值 r 21 = t′R2/t′R1 = 16/13 = 1.231根据公式：L = 16R 2[(r 21 /( r 21 - 1)]2 H 有 得 L = 16×1.52[(1.231/(1.231-1)]2 ×0.0732L = 74.84 cm = 0.75 m2. 用原子吸收法测锑，用铅作内标。
取5.00mL 未知锑溶液，加入2.00mL 4.13 mg.mL -1的铅溶液并稀释至10.0mL ，测得A Sb /A Pb = 0.808。
另取相同浓度的锑和铅溶液，测得A Sb /A Pb = 1.31, 计算未知液中锑的质量浓度。
解:设试液中锑浓度为c x ，为了方便，将混合溶液吸光度之比计为[A sb /A pb ]1 ， 而将分别测定的标准溶液吸光度之比计为[A sb /A pb ]2由于: A Sb = K Sb c Sb ， A Pb =K Pb c Pb ， 若 c Sb = c Pb则 K Sb /K Pb = [A sb /A pb ]2 = 1.31[A sb /A pb ]1 = (K Sb ×5 × c x /10)/(K Pb × 2 × 4.13/10) = 0.808故 c x = 1.02mg.mL -1 即未知液中锑的质量浓度为1.02mg.mL -1。
仪器分析期末考试重点及习题答案
1、指示电极、参比电极的定义 指示电极、 2、什么是电位分析法 电位法测量常以待测溶液作为电池的电解 质溶液, 浸入两个电极, 一个是指示电极, 质溶液, 浸入两个电极, 一个是指示电极, 另 一个是参比电极, 在零电流条件下, 通过测量 一个是参比电极, 在零电流条件下, 两电极间的电位差， 两电极间的电位差，对组分进行分析的一种电 化学分析方法。 化学分析方法。 3、电位测定法的依据 能斯特方程
仪器分析
期 复习
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
第一章 色谱法分离原理
1、色谱流出曲线及相关术语。 色谱流出曲线及相关术语。 保留时间t 调整保留时间t 保留时间tR、调整保留时间tR’ 相对保留值(r 相对保留值(r21/α） 分配比、 2、分配比、分配系数的概念 k=tR’/tM 色谱分离的基本理论： 3、色谱分离的基本理论：塔板理论 描述色谱柱的柱效能,塔板数越大， 描述色谱柱的柱效能,塔板数越大，柱效越高 =16（ =16（ n理论=16（tR/Y)2, n有效=16（tR’/Y)2 , H=L/n
2、AAS中干扰的类型 AAS中干扰的类型 3、引起原子吸收线变宽的主要因素 4、原子吸收的定量分析 定量依据： 定量依据：A=kC 相关计算 定量方法： 定量方法： 标准曲线法 标准加入法(消除基体效应） 标准加入法(消除基体效应）
UV第九章 UV-Vis
1、紫外可见光的波长范围 2、紫外可见吸收光谱的产生(由分子中价电子的跃
第二章 GC
1、气相色谱仪的流程及各个部件的主要作用 2、气相色谱的类型 气固色谱（原理） 气固色谱（原理） 气液色谱（原理） 气液色谱（原理） 2、气相色谱的定性和定量方法 定性：保留值、 定性：保留值、与其它仪器分析方法连用 定量： 定量：峰面积或峰高定量 3、从一张色谱流出曲线上可以得到哪些有用的信息？ 从一张色谱流出曲线上可以得到哪些有用的信息？