H5N1亚型重组禽流感病毒灭活疫苗_Re_6株_田间试验效果观察

群 7 580 只， 注射疫苗后连续 2 周观察鸡只的精神状态、 采食量、 粪 苗注射前后采血， 按照 《高致病性禽流感免疫技术规范》 （NYT769-2004 血凝抑制 （HI） 试验操 作进行 HI 抗体效价测定。结果显示， 第 1、 2 群疫苗免疫后 15、 21、 30、 45、 60、 75 d 的免疫抗体合
在家禽业生产中， 目前应用的禽流感疫苗主要 是鸡胚源灭活疫苗， 这类疫苗存在批间抗原差异大、 同源疫病病原污染危险性和免疫应急大等缺点。 研究显示当前理想禽流感疫苗的要求之一是寻 找新方法来代替蛋内制备禽流感疫苗的方法 。而 利用国际先进的细胞悬浮培养技术生产的重组禽 克服了鸡胚源疫苗的缺点， 是我国禽流感疫苗生 产的发展趋势。为了验证重组禽流感病毒 （H5N1 亚型） 灭活疫苗 （细胞源， Re-6 株） 对家禽的安全 流感病毒 （H5N1 亚型） 灭活疫苗 （细胞源， Re-6 株） ，
采食量、 粪便， 以及鸡群的死亡率， 按照说明注射 剂量注射的 3 个鸡群均无异常情况发生， 疫苗对肉 的副反应较小。 2.2
起至 75 d， 两期试验的抗体合格率均超过农业部
用和蛋用雏鸡群免疫都是安全的， 而且疫苗引起 母源抗体测定结果
测， 结果显示禽流感抗体合格率均为 0， 表明 2 鸡 群为禽流感非免疫鸡群， 而且已无母源抗体。 2.3 免疫效果测定结果
45、 60、 75 d 各采血 1 次。翅下静脉采血， 1~2 mL/只， 分离血清， 冷藏或冷冻备用。 1.2.3 HI 抗体效价测定
［2］
的免疫抗体合格率分别为 24% 、 100.0% 、 97.92% 、 100.0% 、 95.38% ， 平均抗体滴度分别为 2.52 log2、 7.74 log2、 7.31 log2、 7.15 log2、 6.6 log2。免疫后 75 d 养殖中， 35 日龄时使用该疫苗免疫， 一次即可。 的抗体滴度仍分别为 4.50 log2、 6.60 log2， 说明疫苗
免疫后抗体滴度上升快， 维持时间长， 在土杂肉鸡 免疫后 30 d 抗体合格率分别为 84.21%、 100%，
平均为 92.1% ， 监测到免疫后 75 d， 抗体合格率仍 分别为 75% 、 95.38% ， 平均为 85.19% ， 从免疫 30 d 重大动物疫病强制免疫抗体合格率应保持在 70% 以上的要求。 3 结论与讨论
［ 1 ］
源， Re-6 株） ， 由某动物疫苗有限公司提供， 批准文 2013002， 哈尔滨维科生物技术开发公司生产； SPF 2013001， 哈尔滨维科生物技术开发公司生产。 1.1.3 主要试剂 1.2 护液） 、 1%红细胞悬液现用现配。 1.2.1 疫苗接种 1.2.2 采血 方法
号： 兽药生字 （2013） 153122206， 批号： 20130401； 禽流感 （H5N1） HI 抗原， 血凝效价 ≥7 log2， 批号： 鸡感染禽流感 H5 亚型高免血清， HI≥7 log2， 批号： 0.01 mol/L 的 PBS 液 （pH 7.2） 、 阿氏液 （血球保
性和免疫效果， 于 2013 年 6~10 月对蛋用雏鸡和凤 术生产的高致病性禽流感疫苗提供参考。 1 1.1 材料与方法 材料
翔麻鸡进行了免疫试验， 研究为推广应用最新技
1.1.1 试验动物
甸县由旺镇周正蛋鸡专业合作社 60 日龄蛋用雏鸡
收稿日期： 2014-05-10
用于试验观察疫苗免疫安全性的蛋鸡群为施
免疫抗体合格率分别为 18.64%、 51.02%、 84.21%、 91.07% 、 88.68% 、 75.00% ， 平均抗体滴度分别为 4.5 log2； 第 2 群疫苗免疫后 15、 21、 30、 45、 60、 75 d （上接第 64 页） 2.2 2.3 1.63 log2、 3.78 log2、 5.21 log2、 5.39 log2、 5.13 log2、
（NYT769-2004） 血凝抑制 （HI） 试验操作进行， HI 效价 ≥4 log2 判定为阳性， HI 效价 <4 log2 判定为 2 2.1 试验结果 经注射疫苗后， 连续观察 2 周， 鸡的精神状态、 安全性试验结果 阴性， 以阳性数占检测数的比例计算抗体合格率。
按 照《高 致 病 性 禽 流 感 免 疫 技 术 规 范》
摘
要： 为验证重组禽流感病毒 （H5N1 亚型） 灭活疫苗 （细胞源， Re-6 株） 对家禽的安全性
便及鸡群死亡率， 均未发生异常情况， 与注射之前无明显差异。对其中 2 群 35 日龄凤翔麻鸡疫 格率分别为 18.64%、 51.02%、 84.21%、 91.07%、 88.68%、 75.00%与 24%、 100.0%、 97.92%、 100.0%、 95.38%。表明在田间试验条件下， 重组禽流感病毒 （H5N1 亚型） 灭活疫苗 （细胞源， Re-6 株） 安 全性高、 副反应小， 免疫效果相对较好。 关键词： 禽流感； Re-6 株； 细胞源灭活疫苗； 田间试验； 免疫效果观察 免疫安全性和免疫效果测定的两个鸡群为施甸县 仁和镇贾爱萍育雏户的 35 日龄凤翔麻鸡， 第1群 流感非免疫鸡群。 1.1.2 疫苗、 血凝抑制用抗原及阴性血清 780 只、 第 2 群 800 只， 鸡群健康、 生长良好， 均为禽 重组禽流感病毒 （H5N1 亚型） 灭活疫苗 （细胞
机吹干整形， 此灰鹤标本即制作完成。 3 局部骨骼标本制作 骨骼上残存的肌肉、 筋腱剔除， 用流水冲洗
放入填充物
将备好的聚丙乙烯树脂填入放好支撑架的皮桶 缝合 用缝合针线仔细将腹部切口均匀缝合， 缝线
内， 颈部、 四肢部要用木棍协助填充， 以填实为宜。
10~15 d 后捞出， 在阴凉通风处晾干， 可将管状骨 在串制时准备打孔的部位先行打孔后用 5%~8% 的热食用碱水浸制 2~3 d， 用清水冲洗 2 遍， 再用 通风处沥干， 再行串制， 支于底架上。 参考文献：
NYT769-2004. 高致病性禽流感免疫技术规范 ［S］ .
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经对 2 群 35 日龄凤翔麻鸡采血进行抗体检
现免疫副反应， 说明重组禽流感病毒 （H5N1 亚型）
本次免疫试验的 3 个鸡群共 7 580 只， 均未出
灭活疫苗 （细胞源， Re-6 株） 安全性高、 副反应小， 在基层推广具有可行性。本次试验受条件限制， 仅用一批疫苗两期试验鸡进行免疫效果测定， 要 更全面、 更准确验证显示该疫苗的免疫效果， 还需 进行两批以上疫苗和试验鸡重复试验， 并与传统 鸡胚源灭活疫苗进行比较试验， 将有待以后的试 验得出更全面、 更切合实际的结论。 参考文献：
3% 过氧化氢 （双氧水） 漂白， 用清水冲洗， 于阴凉
王景德. 解剖标本制作技术 ［M］ . 长春： 白求恩医科大学出版，
上， 待标本外表干后用脱落收藏的羽毛将掉毛处 皮肤进行扎粘、 修补， 再行全身羽毛喷水后用吹风
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1 2 望 ［C］ //第三届中国水禽发展大会会刊， 2011， 189. 沈志强， 王金良， 管宇， 等.禽流感疫苗的研究进展与挑战及展
血进行抗体测定， 发现疫苗免疫前禽流感抗体合格 率为 0， 第 1 群疫苗免疫后 15、 21、 30、 45、 60、 75 d 的
通过对 2 群 35 日龄凤翔麻鸡疫苗注射前后采
2014 年第 36 卷第 14 期
技术交流
China Poultry Vol.36， No.14.2014
H5N1 亚型重组禽流感病毒灭活疫苗 （Re-6 株） 田间试验效果观察
濮永华 1， 龚兴建 1， 钏有科 1， 黄 杰 2， 周开艳 1， 李玉静 2， 杨 （1.保山市动物疫病预防控制中心， 云南保山 678000； 2.施甸县动物疫病预防控制中心， 云南保山 678200） 芳 1， 段 宁1
6 000 只， 鸡群健康、 生长良好； 用于试验观察疫苗
射， 每只 0.5 mL， 免疫 1 次。
将试验用疫苗恢复到常温后， 鸡颈部皮下注
第 1、 2 群疫苗免疫之前当天及免疫后 15、 21、 30、
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2014 年第 36 卷第 14 期
技术交流
China Poultry Vol.36， No.14.2014
1 2 京： 中国农业出版社， 1977， 10： 17-41. 1980， 10： 3-13. 山西农学院， 内蒙古农牧学院. 家畜解剖标本制作法 ［M］ .北
松紧要适度， 缝隙处不应夹杂羽毛。将缝口两侧 羽毛略向缝处梳理， 以掩盖缝口。 2.4 2.5 放置艺眼 将备好的艺眼植入眼眶内， 调好位置。 修整 将填充好的标本按灰鹤原貌整形后置于底盘