调脂积冲剂对脂肪肝大鼠胰岛素抵抗_省略_R_及游离脂肪酸_FFA_的研究_潘智敏

9 中华中医药学刊调脂积冲剂对脂肪肝大鼠胰岛素抵抗(I R)及游离脂肪酸(FFA )的研究潘智敏1,申京哲2(1.浙江省中医院,浙江杭州310000;2.浙江中医药大学,浙江杭州310053)摘 要:目的:讨论调脂积冲剂对脂肪肝大鼠胰岛素抵抗(I R )及游离脂肪酸(FFA )的影响。

方法:将SD 大鼠49只,随机分4组,空白对照组、模型对照组、易复善治疗组、中药调脂积冲剂治疗组。

采用高脂乳剂建立大鼠脂肪肝模型,以易善复为阳性对照,检测大鼠血清A LT 、FFA 、FBG,肝组织TC 、TG,并采用放免法测定血清胰岛素含量。

采用稳态模式评估法(HOMA )评价胰岛B 细胞功能。

结果:与模型组比较调脂积冲剂治疗组ALT 、TG 显著改善(P <0.01),FFA 有改善(P <0.05)。

结论:调脂积冲剂能改善脂肪肝大鼠的A LT 水平,以改善大鼠肝功能,该冲剂同时作用于TG 、FFA 以改善血脂水平。

关键词:脂肪肝;胰岛素抵抗;游离脂肪酸中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1673-7717(2011)01-0009-03The Effect of T i a ozhiJi Em ul s i o n on Insuli n Resi s t a nce and FFA of t h e Fatty Li v er RatPAN Zh-im i n 1,S H E N Ji ng -zhe 2(1.The Firs tH osp i talA ffili ated to Zh eji ang Ch i neseM ed i calUn i versit y ,H angz hou 310000,Zh eji ang ,C h i na ;2.Zhejiang C h i neseM edicalUn ivers i ty ,H angzhou 310053,Zheji ang ,Ch i na)A bstrac t :O bjecti ve :T o investi gate the e ffect o f ti aozh iji e m ulsion on i nsu li n resistance and FFA o f t he f a tty liver ra t .M ethods :49SD ma le rats ,a w eek a fter the laboratory feeding adaptation ,rando m ized d i v i ded i nto f our groups ,the con -tro l g roup ,the contro l g roup mode l o f fa tty liver ,fatty li ver mode l o f good easy -treat m ent group ,fatty li ver M ode lm ed-i c i ne T iaozhiJi Emu l s i on treat ment g roup .H i gh -fat e mu lsi on used fatty liver rat m ode l to Essen tia l e to as a positi ve con -tro ,l the use o f autom ati c bioche m ical ana l yzer detected TC,TG,,ALT and A S T,FBG,R adi o i m munoassay for dete r m -i na ti on o f se ru m i nsuli n leve ls .B isl e t ce ll functi on eva l uati on by ho m eostas i s model assess ment (HO M A ).R esults :The ALT 、TG w ere lo w er than those of t he fatty li v er mode l group(P <0.01).T iaozhiJi E m ulsion can reduce FFA (P <0.05).Conclusion :T iao zhiJi Emu l sion can i m prove b l ood and t he liver li p i d m etabo li s m diso rde rs ,preventi on and trea-t m ent o f hype rlipi de m ia ,still i m prove li ver function .K ey w ords :Fatty L i ver ;Insuli n R esistance ;FFA 收稿日期:2010-08-25基金项目:浙江省自然科学基金资助项目(Y2080541)作者简介:潘智敏(1952-),女,上海人,教授、主任中医师,博士研究生导师,研究方向:中医药防治老年性疾病。

脂肪肝是肝脏对各种代谢异常改变产生应激反应引起的肝实质细胞脂肪变。

影响脂肪肝发病的因素里面有脂肪肝脂质代谢障碍、胰岛素抵抗(I R )、C Y P 2E1和C Y P4A 的作用、氧应激和脂质过氧化反应、免疫反应、遗传因素等。

越来越多的证据证明脂肪肝的发病机制可以用/二次打击0[1]学说来解释。

其初次打击(first hit)诱发脂肪肝,起最主要作用的因素就是I R 。

作为脂肪代谢的中间产物,游离脂肪酸(FFA )增多可以降低胰岛素的敏感性,从而导致或加重I R 。

祖国医学对脂肪肝的病因病机的认识大部分围绕着/痰、瘀、湿、积0阐述,在治疗中运用祖国医学的化痰、祛瘀、祛湿、行滞、解郁等治则以起到中医所提倡的/防未病、治已病0的作用。

本实验研究采用与临床脂肪肝相关性较强的高脂乳剂致大鼠脂肪肝模型,以具有祛瘀化浊、消导行滞、疏理解郁作用的调脂积冲剂为干预药物,观察调脂积冲剂对脂肪肝大鼠I R 及FFA 的影响,以现代医学的发病机制里的两个重要作用因素为观察点,为临床脂肪肝的防治提供参考。

现报道如下。

1材料与方法1.1 分组雄性S D 大鼠49只,由浙江省中医药大学实验动物中心提供。

体重(200?20)g ,于实验室适应性喂养1周后,随机分组共分4组,其中空白对照组10只;脂肪肝模型对照组15只;脂肪肝模型易复善治疗组12只;脂肪肝模型中药调脂积冲剂治疗组12只。

以苦味酸标记。

1.2造模及给药 每天上午给模型组、易善复治疗组、调脂积治疗组以10mL /kg 脂肪乳(脂肪乳成分:每1000mL 脂肪乳中含100g 胆固醇,250g 猪油,20g 胆盐,10g 丙赛优,200mL 丙二醇,250mL 吐温-80。

)灌胃,空白对照组灌服等量蒸馏水。

每天下午按1mL /100g 体重给调脂积组灌服调脂积溶液(药物为莪术、郁金、莱菔子、半夏、决明子、川朴、山楂、枳壳、王不留行、泽泻、虎杖、过路黄、白蔻仁等药物组10 中华中医药学刊成),每包净含量4.14g ,相当于原生药80g ,由浙江省中医院中药制剂室制备提供,按l m L /100g 体重给易善复组灌服易善复溶液(A.N atter m ann &C i e .Gm bh ,Rhone -Poulenc Ro r -er ,N a tter m annall ee1,50829K o l n 产品)。

模型组和空白对照组按l m L /100g 灌服生理盐水,连续8周。

并于第8周末末次给药后禁食造模。

1.3 观测方法 (1)血清A LT 、FFA 、FBG 及肝组织TC 、TG 的测定:除去饲养过程中死亡大鼠(灌胃失误死亡与中末期检验性死亡),余各组大鼠于末次给药后禁食12h ,在次日上午称大鼠体重后,既计算麻醉药用量,以10%水合氯醛0.3mL /100g 体重腹腔注射麻醉,解剖后于腹主动脉取血6~8mL ,立即送至离心机内3000r /m i n 离心15m i n ,移液枪吸出上清,置于EP 管4e 冰箱保存。

在抽取腹主动脉血之后,取出大鼠肝脏,在离肝脏最大叶距边缘0.5c m 处剪取少许肝组织,并用冰生理盐水冲洗,再用滤纸吸湿后称重。

后加入预冷的生理盐水而制成10%的匀浆,在4e 环境下,以4000r /m i n 的速度离心10m i n ,再用移液枪抽取上清液,置于EP 管4e 冰箱保存。

测定时把EP 管移至室温环境30m i n 复温,在全自动生化分析仪中检测ALT 、FBG 、FFA 、肝匀浆的T C 和TG 。

(2)血清胰岛素的测定和I R 指数的计算:测定上述指标后,用血清按试剂盒说明书步骤,采用放射免疫法测定血清胰岛素含量。

胰岛B 细胞功能评价采用稳态模式评估法(HOMA ),即I R 指数(HOMA -I R )=(FBG )*F I N S /22.5。

1.4 统计学处理方法 采用SPSS 13.0统计软件。

计量资料数据以均数?标准差( x ?s )表示(统计时未加入与均值偏离值较大的个别样本),采用单因素方差分析多重组间比较方法。

以P <0.05为有差异性,P <0.01为有显著差异性。

2结 果2.1实验大鼠肝组织T C TG 及血清A LT 的变化 模型组与正常组比较TC 、A LT 均有显著差异(P <0.01);与模型组相比,调脂积组肝组织TC 有明显差异(P <0.01),调脂积组ALT 明显降低(P <0.01)。

数据说明灌服高脂乳剂造成脂肪肝模型后,引起大鼠TC 、TG 均略有升高。

与模型组相比较,调脂积组TG 有改善、TC 不明显,表明调脂积冲剂有降低TG 作用,对TC 作用不明显。

实验数据结果证实调脂积冲剂、易善复在降低TG 方面有作用差异。

见表1。

表1实验大鼠肝组织TC TG 及血清ALT 检查结果( x ?s )组别nTC (m m o l/L )T G (mm o l/L )AL T (U /L)正常对照组80.16?0.051.54?0.2148.50?9.28模型组90.71?0.13##1.56?0.1970.33?12.01##调脂积组80.65?0.05##1.16?0.18#v v45.43?5.77v v 易善复组110.70?0.12##1.45?0.2258.91?10.31注:与正常组比较,#P <0.05,##P <0.01;与模型组比较,v P <0.05,v v P <0.01。

2.2 实验大鼠血清FB G F I NS 及I R 指数的变化 模型组与正常组比较F I NS 、HOM A -I R 均有显著差异(P <0.01);与正常组比较,调脂积组、易善复组大鼠血清中F I NS 及I R 指数有显著差异(P <0.01),FB G 显示无差异(P >0.05);与模型组相比,调脂积组、易善复组FBG 、F I N S 、HOMA -I R 显示无差异(P >0.05)。