吖啶橙染色液(1mgml)
实验室常用染色液
他用来染细胞质时， 能把 胶 胚胎材料等。
刚果红 可以跟苏 所以洗涤和脱水 处理要迅速。
三、常用染料介绍 （一）天然染料1、苏木精苏木精是从南美的苏木 （热带豆科植物） 干枝中用乙醚浸制出来的一种色素， 是最常用的染 料之 一。
苏木精不能直接染色， 必须暴露在通气的地方， 使他变成氧化苏木精 （又叫苏木素） 后才能 使用，这叫做“成熟” 。
苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力 愈强。
被染材 料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒 染剂。
常用的媒染剂 有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体， 易溶于酒精， 微溶于水和甘油， 是染细胞核的优良 材 料，他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因处理的情 况而异， 用酸性溶液 （如盐酸—酒精） 分化后呈红色， 水洗后仍恢复青蓝色， 用碱性溶液 （如 氨水）分 化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。
2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后，磨成粉末， 提取出虫红，再用明 矾处 理，除去其中杂质， 就制成洋红。
单纯的洋红不能染色， 要经酸性或碱性溶液溶解后才 能染色。
常 用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料， 染色的标本不易褪色。
用作切片或组织块染都适宜， 尤其适宜于 小型 材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后 再用。
（二）人工染料人工染料， 即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多， 应用极广。
它们的缺点是经日光照射容易 褪 色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。
在制片中注意掌握酸碱度，并避免日光直射，也 能经几年不 褪色。
1、酸性品红 酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3% ）。
他是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)
细胞自噬染色检测试剂盒(MDC 法)简介：自噬(autophagy)是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器，最终将吞食物在溶酶体内降解的过程，自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构，内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物，损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。
单丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine ,MDC )是一种荧光色素，是嗜酸性染色剂，通常被用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂，其检测激发滤光片波长。
阻断滤光片波长。
Leagene 细胞自噬染色检测试剂盒(MDC 法)，适用于培养细胞的自噬染色，又称为MDC 染色液，可与EB 合用双染。
组成：自备材料：1、 荧光显微镜2、 低速离心机3、 EB4、 载玻片、盖玻片操作步骤(仅供参考)：(一)、MDC 单独染色：1、 用去离子水稀释1×Wash buffer 。
2、 离心，收集细胞，用1×Wash buffer 清洗细胞，弃上清。
3、 加入适量的1×Wash buffer 重悬细胞，计数并调节细胞浓度。
4、 取适量的细胞悬液至新的EP 管中，加入MDC Stain ，轻轻混匀。
5、 室温避光染色15～45min 。
6、 离心，收集细胞，用 1×Wash buffer 清洗细胞，弃上清。
7、 加入Collection buffer 重悬细胞，滴加于载玻片上并加盖玻片。
编号 名称 DA0041 Storage 试剂(A): MDC Stain 1ml -20℃ 避光 试剂(B): 10×Wash buffer 20ml 4℃ 试剂(C): Collection buffer 10ml 4℃ 使用说明书 1份8、荧光显微镜下观察(激发滤光片波长，阻断滤光片波长)，计数并拍照。
(二)、与EB双染色：1、用去离子水稀释1×Wash buffer至1×。
DAPI染色液
北京雷根生物技术有限公司 DAPI 染色液(10μg/ml)简介：DAPI 染色液(DAPI Staining Solution)是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液。
DAPI ，即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride ，也称DAPI dihydrochloride ，分子式为C 16H 15N 5 · 2HCl ，分子量为350.25，是可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，和双链DNA 结合后可以产生比DAPI 自身强20多倍的荧光，灵敏度高于EB 。
Leagene DAPI 染色液可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，亦可以根据实验具体要求，稀释到相应浓度后进行染色。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、对于细胞或组织样品，固定后冲洗去除固定剂。
如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行DAPI 染色，如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的DAPI 染色。
2、室温放置。
轻轻吸除DAPI 染色液。
4、用无菌的PBS 或生理盐水清洗2～3次。
5、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。
染色结果：细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
注意事项：1、 Leagene DAPI 染色液(10μg/ml)的浓度适用于较难染色的细胞。
2、 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。
3、 为减缓荧光淬灭，可以使用抗荧光淬灭封片液。
4、 避免反复冻融，否则容易失效。
5、 DAPI 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
6、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 DA0002 DA0002 Storage DAPI Staining Solution(10μg/ml) 10ml50ml -20℃ 避光 使用说明书 1份。
核酸染色剂
电泳后;核酸需经染色才能显色出带型;常用以下核酸染色剂：1.ethidium bromide; EB 最常用的核酸;这种扁平分子可嵌入核酸双链的配对碱基之间;在紫外线激发下;发出桔红色荧光..激发荧光的能量来源于两个方面;一是核酸吸收波长为260nm的紫外线后能将能量传送给;二是结合在DNA分子中的EB本身;主要吸收波长为300nm和360nm 的紫外线的能量;来源于这两方面的能量;最终激发EB发射出波长为590nm的可见光谱红橙区的红色荧光.. EB-DNA复合物中的EB发出的荧光;比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍;因此无需洗净背景即可清楚观察核酸带型..若EB背景太深;可将凝胶浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCl2中5min;使非结合的EB褪色;这样可检查到10ng的DNA样品;EB也可用于检测或RNA;但其对单链核酸的亲和力相对较小;荧光产率也相对较低.. 在凝胶或电泳缓冲液中加入终浓度为0.5μg/ml的EB;染色可在电泳过程中进行;能随时观察核酸的迁移情况;这种方法使用于一般性的核酸检测..但EB带正电荷;嵌入碱基后增加了核酸分子的刚性;使迁移率减慢;故不宜用于测定核酸分子量的大小;这时应在电泳后将凝胶浸入0.5μg/ml的EB水溶液中10min进行染色..EB见光易分解;应于4℃避光保存..2.acridine orange;AO：吖啶橙可嵌入双链核酸碱基对之间;在254nm紫外线激发下发出530nm的绿色荧光；还通过静电与单链核酸的磷酸基结合;在254nm紫外线激发下产生640nm的红色荧光..因此可区分单链和双链核酸;灵敏度分别为0.1μg和0.05μg..但吖啶橙的染色操作要求严格;应在 22℃;0.01mol/LpH7.0中避光浸泡30min;然后在搪瓷盘中用该缓冲剂4℃脱色过夜或22℃脱色1~2小时..3.银Ag+试剂： Ag+与核酸形成稳定复合物;然后用甲醛使Ag+还原成银颗粒..AgNO3等试剂可使上的单链;及 RNA都染成黑褐色..银染法的灵敏度比EB染色高200倍左右;比染色高100~1000倍;在小于0.5mm厚的凝胶中;能检测出0.5ng的 RNA;其缺点是专一性不强;能与蛋白质;去污剂反应也产生褐色;而且对DNA的染色定量不准确..银与DNA稳定结合;对DNA有破坏作用;不适于DNA 片段回收的制备..4.亚甲蓝methylene blue：可将RNA染成蓝色;但灵敏度不高;而且操作时间长..染色过程：胶浸泡于0.02%的亚甲蓝;10mmol/L Tris-AcpH8.3;4℃放置1~2h;用净水洗5-8h反复换水;带型肉眼可见;最低检测量为 250ng..5.Gold View Ⅰ型核酸染色剂与溴化乙锭：Gold View是一种可代替溴化乙锭EB的新型DNA燃料;其灵敏度与EB相当;使用方法与之完全相同..在紫外灯下双链DNA呈现绿色荧光;而单链DNA成红色荧光..通过小鼠皮下注射实验;尚未发现Gold View有致癌作用;而溴化乙锭EB是一种强致癌剂..因此用Gold View代替EB不失为一种明智的选择..实验操作步骤：100mL溶胶液在微波炉中融化;冷却至60℃左右不烫手后加入10vL Gold View;轻轻摇匀后倒胶;待胶完全凝固后上样电泳;电泳完毕在紫外灯下观察..注意事项：1)胶厚度不要超过0.5cm;胶太厚会影响检测灵敏度2)加入Gold View的琼脂样凝胶反复融化可能会对DNA检测的灵敏度产生一定影响;但不明显..3)Gold View在pH 3.6-7.0之间能更好的与核酸结合;因此电泳时最好使用新鲜的电泳缓冲液..4)由于Gold View产生绿色荧光;因此不适合于用一般单色胶卷拍照;可以使用凝胶成像系统保存图像..5)含有Gold View的凝胶不适合于进行凝胶回收试验..要进行回收试验;请使用EB胶或supper GreenⅠ型核酸染色剂..6)Gold View特别适合于大片段DNA的检测大于1kb的片段;检测灵敏度与EB相当；当DNA片段小于1kb时;检测灵敏度低于EB;特别是低于500bp的片段;Gold ViewⅠ型可能亮度很弱或者检测不到;如要检测小片段的DNA;请选用supper GreenⅠ型核酸染色剂;该染色剂适合检测所有片段大小的DNA片段..7)虽然尚未发现Gold View有致癌作用;但由于Gold View溶液酸性较强;一次对皮肤;眼睛会有一定的刺激;操作是应戴手套..。
叶绿体的荧光染色与观察
姓名班级 13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目叶绿体的分离与荧光观察【实验题目】叶绿体的分离与荧光观察【实验目的】1、通过对植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法。
2、观察叶绿体的自发荧光和次生荧光3、熟悉荧光显微镜的使用方法。
【实验材料与用品】1. 器材：离心机、组织捣碎机、天平、荧光显微镜、烧杯、量筒、胶头滴管、刻度离心管六层纱布，载玻片、盖玻片等2. 材料：新鲜菠菜3. 试剂：0.35 mol/L氯化钠溶液，0.01％吖啶橙(acridine orange)【实验原理】I.叶绿体分离的原理匀浆破碎细胞：利用差速离心方法分离等渗介质中的悬浮颗粒，收集类叶绿体大小的颗粒，得到叶绿体。
差速离心:颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状和密度，也同离心力以及悬浮介质的黏度有关。
在一给定的离心场中，同一时间内，密度和颗粒大小不同的颗粒其沉降速度也不同。
依次增加离心力和离心时间，就能使非均一悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部，分批收集即可获得各种亚细胞组分。
叶绿体的分离应在等渗溶液中进行（0.35mol/L氯化钠溶液或0.4mol/L蔗糖溶液），以免渗透压的改变使叶绿体受到损伤。
分离过程最好在0-5℃条件下进行：如果在室温下，要姓名班级 13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目叶绿体的分离与荧光观察迅速分离和观察。
II.差速离心特点：介质密度均一，速度由高到低，逐级离心；用途：分离大小相差悬殊的细胞和细胞器；沉降顺序：核---线粒体---溶酶体和过氧化物酶体---内质网与高尔基体---核蛋白体，可将细胞器初步分离，常需要进一步通过密度梯度离心再进行分离纯化。
III.①荧光的概念光致发光：某些物质在照射下，吸收光能进入激发态，当从激发态回到基态时，可以以电磁辐射的形式释放出吸收的光能，这种现象称为“光致发光”。
紫外辐射、可见光以及红外辐射均可引起光致发光，如磷光和荧光。
荧光染料
荧光染料简介荧光染料会发出荧光，所谓荧光是指物质分子吸收紫外光后发出的可见光荧光以及吸收波长较短的可见光后发出的波长较长的可见光荧光。
荧光发生机理每个分子具有一系列严格的分立能级，室温下物质分子大部分处于"基态" ，当这些物质在光的照射下吸收光能后，进入新的状态，称为"激发态"。
处于"激发态"的分子是不稳定的，它可以通过以10-9-10-7 秒的极短时间内发射光量子回到基态。
这一过程称为荧光发射，也就是发光。
激发光谱和发射光谱任何发荧光的物质分子都具有两个特征光谱-- 激发光谱和荧光发射光谱。
在测定时，用以激发荧光的吸收光谱，一般称为荧光物质的激发光谱，它是指相对于不同激发波长的辐射所引起物质发射某一波长荧光的光谱。
荧光发射光谱简称为发射光谱，是指某一波长激发光引起物质发射不同波长荧光的光谱。
荧光效率和荧光强度分子能产生荧光必须具备两个重要的条件，一是物质的分子必须具有吸收一定频率光能的基团-- 生色团，二是必须具有能产生一定光量子的荧光团。
而物质发射荧光的能力用荧光效率表示。
荧光效率为荧光团发射荧光的光量子数与生色团吸收的光量子数的比值称。
荧光效率往往小于1。
如罗丹明B 的乙醇溶液的荧光效率为0.97 ；荧光素的水溶液的荧光强度为0.65 ，荧光效率与物质结构有关，还与所处的环境紧密相关。
而对于某种荧光物质在特定的环境下它的荧光效率是固定的。
在一定范围内，激发光越强，荧光也越强。
即荧光强度（发射荧光的光量子数）等于吸收光强度乘以荧光效率。
提高荧光强度的根本方法选择适当强度的光源作为荧光物质的激发光源，和选择适合于被检荧光物质选择性吸收的光谱滤光片作为激发滤光片，是提高荧光强度的根本方法。
许多染料的最大吸收峰并不是紫外光，而是在400nm-500nm 的蓝绿光，所以紫外光不是这些染料的最佳激发光源，可见光才是这些染料的最佳光源。
常用荧光色素波长名称最大吸收波长( nm ) 最大发射波长 ( nm ) 适用性吖啶橙( Acridine orange ) 405585中好吖啶黄( Acridine yellow )455620中碘化丙啶( Propidium iodide )488620中溴化乙啶( Ethidium bromide )488610好光神霉素( Mithramycin )457570好派若宁Y( Pyronin Y )488580540-660中罗丹明123( Rhodamine 123 )560差赫斯特33258 (Hoechst 33258 )338505好荧光素( Fluorescein )495525好荧光黄( Lucifer yellow )428544中伊红( Eosin ) 525546四甲基罗丹明( Tetramethyl rhodamine) 555580中SYBR Green I好498522SYBR Gold好495540SYPRO Orange好475580SYPRO Red中545635NBD好467538GelStar好495530好黄色荧光蛋白EYFP515530好绿色荧光蛋白EGFP490510蓝色荧光蛋白EBFP380440差常用抗体标记荧光染料的特性及其应用1、FITC （异硫氰酸荧光素）绿色：激发波长488nm 最大发射波长525nm1 ）其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪；2）在流式细胞仪的FL1通道检测；3）可用于荧光显微镜技术4）荧光强度易受PH值影响，PH值降低时其荧光强度减弱。
常见染色剂
0.2%考马斯亮蓝R250甲基绿—哌洛宁染液0.2%（或1%）詹纳斯绿B染液1%中性红溶液酸性品红二丙酸酯吖啶橙溴化乙锭卡宝品红
黑色素液墨汁染色液吕氏美蓝染色液革兰氏染色液鞭毛染色液0.5%沙黄液碱性孔雀绿碱性复红复红（酸性）姬姆萨染色液乳酸石炭酸棉蓝染色液1%瑞氏染色液阿氏异染粒染色液
棕红色结晶、有黄绿色金属光泽、易溶于稀NaOH，呈鲜红色，微溶于醇和醚、不溶于苯和氯仿、与金属生成盐类
细胞核染色、指示劑
改良品红
能使粘朊、弹性组织及嗜品红的颗粒染色、中枢神经的核染色、细菌学中用于鉴别结核杆菌
细胞有丝分裂的观察
最强的核染料
碱性品红
绿色金属光泽结晶，溶于乙醇、戊醇，微溶于水、溶液红色，不溶于醚
碱性复红
褐球固氮菌荚膜染色
复红（酸性）
绿色金属光泽的深红色
检定游离氯，结缔组织染色
姬姆萨染色液（giemsa）
沙眼衣原体的4种不同类型包含体；肺炎支原体
动物精母细胞减数分裂染色体制片与观察
乳酸石炭酸棉蓝染色液
霉菌菌丝和孢子均可染成蓝色
1%瑞氏染色液
对原生质的染色有区别嗜中性、碱性、酸性部分的作用
血液的染色
密封避光保存，强致癌物
卡宝品红
对原生质体融合产物染色，鉴别异核体
1%苯胺蓝
蓝色粉末，溶于水，几乎不溶于乙醇，与盐酸反应颜色不变，有沉淀，与NaOH反应，溶液变成棕红色，与H2SO4反应，溶液呈红黄色。
神黑色素液
用作荚膜的背景染色
墨汁染色液
吕氏美蓝染色液
叶绿体的荧光染色与观察
姓名班级 13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目叶绿体的分离与荧光观察【实验题目】叶绿体的分离与荧光观察【实验目的】1、通过对植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法。
2、观察叶绿体的自发荧光和次生荧光3、熟悉荧光显微镜的使用方法。
【实验材料与用品】1. 器材：离心机、组织捣碎机、天平、荧光显微镜、烧杯、量筒、胶头滴管、刻度离心管六层纱布，载玻片、盖玻片等2. 材料：新鲜菠菜3. 试剂：0.35 mol/L氯化钠溶液，0.01％吖啶橙(acridine orange)【实验原理】I.叶绿体分离的原理匀浆破碎细胞：利用差速离心方法分离等渗介质中的悬浮颗粒，收集类叶绿体大小的颗粒，得到叶绿体。
差速离心:颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状和密度，也同离心力以及悬浮介质的黏度有关。
在一给定的离心场中，同一时间内，密度和颗粒大小不同的颗粒其沉降速度也不同。
依次增加离心力和离心时间，就能使非均一悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部，分批收集即可获得各种亚细胞组分。
叶绿体的分离应在等渗溶液中进行（0.35mol/L氯化钠溶液或0.4mol/L蔗糖溶液），以免渗透压的改变使叶绿体受到损伤。
分离过程最好在0-5℃条件下进行：如果在室温下，要姓名班级 13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目叶绿体的分离与荧光观察迅速分离和观察。
II.差速离心特点：介质密度均一，速度由高到低，逐级离心；用途：分离大小相差悬殊的细胞和细胞器；沉降顺序：核---线粒体---溶酶体和过氧化物酶体---内质网与高尔基体---核蛋白体，可将细胞器初步分离，常需要进一步通过密度梯度离心再进行分离纯化。
III.①荧光的概念光致发光：某些物质在照射下，吸收光能进入激发态，当从激发态回到基态时，可以以电磁辐射的形式释放出吸收的光能，这种现象称为“光致发光”。
紫外辐射、可见光以及红外辐射均可引起光致发光，如磷光和荧光。
流式细胞仪筛选环磷酰胺诱导骨髓嗜多染红细胞微核的技术方法
流式细胞仪筛选环磷酰胺诱导骨髓嗜多染红细胞微核的技术方法刘仕杰;方展强【摘要】Objective To discriminate whether chemical compounds are micronuclei-inducing by counting the ratio of bone marrow micronucleus polychromatic erythrocytes ( MNPCE) dyed with a single fluorescence reagent ( acriding organe, AO) by single-laser flow cytometry.Methods Treating male KM mice and SD rat with cyclophosphamide ( CP) respectively, and counting their frequencies of micronucleated polychromatic erythrocytes ( MNPCE) as well as frequencies of micronucleated normochromatic erythrocytes ( MNNCE ) in bone marrow by AO and a single_laser flow cytometer (FCM), comparing and analyzing the results from different methods.Results The results showed that, along with increasing dose of CP, the ratio of MNPCE also corresponding increase, suggesting significant quantative-efficiency correlation.MNPCE were also counted manually by fluorescence microscopy, and the results showed no significant difference with that by flow cytometry.Conclusions AO_FCM fully automated detection method for the detection of MNPCE and MNNCE in mice and rat bone marrow micronucleus rate is reliable.%目的：利用单一荧光试剂吖啶橙（ acridine orange， AO）和简单的单激光流式细胞仪（ FCM）计数骨髓嗜多染红细胞的微核率，达到了解化合物诱导微核作用的目的。
化学诱变剂
化学诱变剂化学诱变剂2010-07-1521:12化学诱变剂的剂量主要决定于其浓度和处理时间。
化学诱变剂都具毒性，其中90%以上是致癌物质或极毒药品，使用时要格外小心，不能宜接用口吸，避免与皮肤直接接触，不仅要注意自身安全，也要防上污染环境，造成公害。
一、碱基类似物用于诱发突变的碱基类似物有5-BU、5-FU、BUdr、5-IU等他们是胸腺嘧啶的结构类似物，AP、6-MP是腺嘌呤的给、结构类似物。
最常用是5-BU和AP。
当将这类物质加人到培养基中，在繁殖过程中可以掺人到细菌DNA分子中，不影响DNA的复制。
它们的诱变作用是取代核酸分子中碱基的位置，再通过DNA的复制，引起突变，困此，也叫掺人诱变剂。
显然这一类诱变剂要求微生物细胞必顿处在代谢的旺盛期，才能获得最佳的诱变效果。
(一)碱基类似物的诱变机制正常的碱基存在着同分异构体，互变异构现象在嘧啶分子中以酮式和烯醇式的形式出现，而嘌呤分子中以氨基和亚氨基互为变构的形式出现、一般互变异构现象在碱基类似物中比正常DNA碱基中频率更高。
5-BU导致AT碱基对转换为GC碱基2-氨基嘌呤也可以诱发DNA分子中AT-GC或GC-AT的转换。
(二)碱基类似物的诱变处理方法(以5-BU为例)1.单独处理将微生物液体培养到对数期.离心除去培养液，加入生理盐水或缓冲液.饥饿培养8-10h，消耗其体内的贮存物质、将5-BU加入到经饥饿培养的培养液中，处理浓度为25-40ug/ml，温合均匀.取0.1-0.2ml菌悬液加人到琼脂培养基上涂布培养。
在适宜温度下，使之在生长过程中诱变处理。
培养后挑取单菌落，进行筛选。
如果是处理真菌、放线菌孢子，则要提高5-BU的浓度，常处理浓度为0.1mg/ml。
2.与辐射线复合处理据报道;如果菌体先用5-BU等碱基类似物进行处理，使它们首先渗人到DNA分予中，然后用辐射线照射，诱变效果会比单独使用射线要好。
因此碱基类似物也是一种辐射诱变的增敏剂。
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吖啶橙染色液(1mg/ml)
简介：
吖啶橙(Acridine Orange, AO)属于三环杂芳香燃料，可以标记DNA 、RNA ，属于异染性荧光染料。
该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA 和RNA 染色。
因此AO 常用于细胞内DNA 和RNA 进行检测。
Leagene 吖啶橙染色液(1mg/ml)为储存液，使用时应稀释到合适浓度后使用。
染色后在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。
吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 收集细胞(采用流式细胞仪检测时，应先固定细胞)，用PBS 清洗细胞1次，计数并调节
细胞浓度至106/ml 。
2、 取适量的细胞悬液，加入Acridine Orange Stain(1mg/ml)，轻轻混匀。
3、 室温避光染色15～20ml ，滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析。
4、 荧光显微镜下观察(激发滤光片波长488nm ，阻断滤光片波长515nm)，计数并拍照。
染色结果：
正常细胞
细胞被均匀染成黄绿色荧光 凋亡细胞
染色质浓缩，细胞核碎裂成点状，被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒
注意事项：
1、 Acridine Orange Stain(1mg/ml)不含破膜剂，较少单独使用。
2、 吖啶橙染色常与EB 染色合用，可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
3、 如有低温离心机进行离心效果更佳。
4、 操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。
编号 名称 DA0036 Storage Acridine Orange Stain(1mg/ml) 10ml 4℃ 避光 使用说明书 1份
相关：
编号名称
CC0007 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
CC0130 胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)
DA0001 DAPI染色液(5ug/ml)
DA0065 台盼蓝染色液(0.4%)
DC0032 Masson三色染色液
NH0043 SSC缓冲液(20×,pH7.0)
PE0103 Acr-Bis(30%,29:1)
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。