丹参提取物中酚酸类含量的快速检测法
丹参中丹酚酸B含量的测定方法
丹参中丹酚酸B含量的测定方法丹参是一种唇形科植物丹参的根茎和干燥根部分，而丹酚酸B则是从丹参中分离提取的一种也具有新木质素骨架和咖啡酰缩酚酸结构的水溶性成分。
单分散有抗前列腺肿瘤、抗氧化清除自由基、抗肝纤维化和放置神经推行性疾病等效用，其开发利用的前景极为广阔。
标签：丹参；丹酚酸B含量；测定方法由《中国药典》2005版和当前报道中丹酚酸B测定方法中可知，供试品溶液制备手段，是采用75%甲醇，进行1 h的加热回流后提取，并采取HPLC测定其含量[1]。
这种测定丹参中丹酚酸B含量的方法，具有良好的重现性，然而操作比较复杂，耗时较长，有方法改进的必要。
1材料和仪器从广州广弘中药材有限公司中购得丹参药材，且通过中药鉴定，确定其为唇形科植物丹参根茎和干燥根，与2005年版的《中国药典》中相关规定相符合。
其中，甲醇是色谱纯，水为纯净水，其他试剂都是分析纯。
仪器则采用由安捷伦科技有限公司生产的Agilent1100高效液相色谱仪，及上海科导SK1200H超声波提取器。
2方法和结果2.1丹酚酸B供试液制备方法2.1.1回流提取法去本品中粉0.2 g，在去本品粉末的测定水分，通过精密称定后，将其放置在色锥形的容量瓶中，再加入50 ml的75%甲醇，称定重量后，行1 h的加热回流，取出放冷后，再行重量称定，使用75%的甲醇不足所减失的重量，将其摇匀，再滤过，将滤液取出，即得，其编号定为1。
2.1.2超声提取法取本品中粉0.2 g，同时去本品粉末的测定水分四分，通过精密称定后，将其分别放置在四个100 ml的容量瓶中，再加入4 ml的75%乙醇，提取10，20，30，40 min，再精密量取其中的1 ml提取物，放置在100 ml的量瓶例，将甲醇加至刻度，摇匀后即得，其编号定为2，3，4，5。
2.2使用HPLC测定超声提取法和回流提取法中丹酚酸B含量2.2.1色谱条件色谱柱为Symmetry C18（4.6 mm ×150 mm，5 m）；流速为1.0 ml/min；柱温为35℃；检测波长为286 mm；流动相为甲醇.乙腈.甲酸水（30：10：1：59）；理论半数根据丹酚酸B峰值计算，且要高于2000。
高效液相色谱法测定丹参提取物中丹酚酸B的含量
高效液相色谱法测定丹参提取物中丹酚酸B的含量
鹿泽启
【期刊名称】《广东化工》
【年(卷),期】2017(044)014
【摘要】以体积分数80％的甲醇水溶液作为提取液,通过超声波提取法实现了丹参中丹酚酸B的高效提取,结合高效液相色谱法测定准确快速地测定了丹参提取物中的丹酚酸B含量.对方法的准确性、精密度、线性范围、定量限进行了评价.方法的回收率在100.3％～102.7％之间,检出限为70 mg/g,RSD为0.01％～0.35％.【总页数】2页(P243-244)
【作者】鹿泽启
【作者单位】山东省烟台市农业科学研究院,山东烟台 265500
【正文语种】中文
【中图分类】O65
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定养肝利水丸中丹酚酸B、五味子醇甲的含量 [J], 丁晓爽;李惠
2.高效液相色谱法测定丹酚酸胶囊中丹酚酸乙的含量 [J], 李丽敏;张胜强;罗厚蔚
3.高效液相色谱法测定丹参注射液中丹酚酸B含量 [J], 许晓君
4.高效液相色谱法测定清补通络丸中丹酚酸B含量 [J], 邱远金;王林;周卫刚;宋海龙;李江涛;刘纪杉;李晓瑾;高辉;朱国强
5.高效液相色谱法测定丹参提取物中3种水溶性成分的含量 [J], 典灵辉;崔燎;吴铁
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丹参药材用不同水温超声提取后丹酚酸B的含量测定
丹参药材用不同水温超声提取后丹酚酸B的含量测定戴金明;林徐剑;施晓萍;沈莹【摘要】目的测定丹参药材用不同温度的水超声提取后丹酚酸B的含量,以及含量的稳定性考察,并分析含量变化的原因。
方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Zorbax SB-C18,流动相为5%冰乙酸-乙腈（82∶18）,流速为1.0 m L·min-1,柱温为25℃,检测波长为285 nm。
结果加入2060℃的温度的水所超声提取的丹酚酸B 的含量低且不稳定性,随时间延长而下降较快,而采用70100℃的温度的水所超声提取的丹酚酸B的含量高且较稳定。
结论丹参药材中的某种酶类或菌类物质在一定温度和有水的条件下会水解丹酚酸B,应尽量避免丹参药材与水的接触。
【期刊名称】《药学研究》【年(卷),期】2016(035)008【总页数】3页(P460-462)【关键词】丹参;丹酚酸B;不同水温;超声提取;含量测定;高效液相色谱法【作者】戴金明;林徐剑;施晓萍;沈莹【作者单位】正大青春宝药业有限公司,浙江杭州310023【正文语种】中文【中图分类】R927.2中药丹参(Salvia miltiorrhiza)以唇形科植物丹参的干燥根及根茎入药，在《神农本草经》中列为上品，具有活血祛瘀、通经止痛、清心除烦、凉血消痈的功效。
现代药理研究表明，丹参具有抑制血小板聚集和抗血栓形成、抗动脉粥样硬化、扩张冠状动脉和改善微循环、保护受损心肌、抗心律失常、调节脂质代谢、降血压、抗氧化等诸多功效[1-4]。
随着对丹参研究的深入，发现丹参中酚酸类成分才是其主要的活性成分，而丹酚酸B在丹参酚酸类成分中所占的比例最大[5-6]。
所以丹酚酸B的含量也是丹参药材质量的一个重要指标[7]。
我们在丹参药材炮制成饮片的过程中发现，原丹参药材中丹酚酸B的含量较高，以丹参药材干燥品计含量有7%左右，但炮制成饮片后丹酚酸B的含量只有1%。
通过一系列试验以及数据分析后我们发现，丹酚酸B的含量与炮制丹参药材时加水闷润的时间以及温度有关。
高效液相色谱法测定白花丹参3种炮制品中5种酚酸类成分的含量
高效液相色谱法测定白花丹参3种炮制品中5种酚酸类成分的含量摘要】目的：观察高效液相色谱法运用到评定白花丹参3类炮制品中的5类酚酸类成分的总量。
方法：借助大连依利特C18（4.6mm×250mm，5μm）柱；流动相甲醇-5%的冰醋酸，梯度施以洗脱；流速是：1.0mL·min-1，监测波长是：286nm，进样总量是：20μL。
结果：样本中5类酚酸类成分的加样收回率都＞98%，RSD都＜1.6%。
结论：这一方式便利且迅捷，反复性较优，灵活程度较大，能够被当作白花丹参类药材中酚酸类成分总量的评定方式。
评定成果指出了，3类炮制品中都未含原儿茶酸，剩下4类成分的总量都体现为生品＜酒制品＜炒炭。
【关键词】白花丹参；高效液相色谱法；酚酸类成分【中图分类号】R284 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）07-0344-02白花丹参是丹参的一类白花变型，在山东地区中是独特的药材，大多来自于山东的丘陵区域。
当代医学证实了，白花丹参在对心脑血管类病症、癌症等施以治疗中具备较优的成效。
同时，其运用到治疗肝硬变与慢性肝炎等，也具备较优的成效[1]。
文章调研了高效液相色谱法运用到评定白花丹参3类炮制品中的5类酚酸类成分的总量，并总结结果如下。
1.相关资料与方式1.1 相关资料1.1.1设施岛津高效液相色谱仪（型号是：LC-10ATvpPlus），SPD-10A VP型监测器；KQ600DB式超声波清洗器（生产厂商是：昆山市超声仪器有限公司）；电子分析天平（生产厂商是：上海恒平科学设备有限公司）。
1.1.2药品原儿茶酸（批号是：110809-200503）、丹参素（批号是：110855-200809）、原儿茶醛（批号是：110810- 200506），来自于中国药品生物制品检定所，迷迭香酸（批号是：1231-050419），来自于中国固体制剂制造技术国家工程研究中心，丹酚酸B（批号是：SAB-E060720），来自于上海泸云医药开发有限公司；甲醇（生产厂商是：天津市彪仕奇科技发展有限公司），是一类色谱纯，冰乙酸（生产厂商是：天津市富宇精细化工有限公司），是一类分析纯，试验运用的水源是纯化水；白花丹参来自于泰山医学院中的药材种植基地，并通过了专家施以的鉴别。
丹参有效成分含量测定
丹参有效成分含量测定作者：杜坤来源：《中国科技博览》2013年第27期论文摘要：目的优选丹参脂溶性及水溶性成分的集成提取工艺条件。
方法采用正交设计法，以丹酚酸B、丹参酮ⅡA为测定指标，采用高效液相色谱法测定其含量，并以此为指标优选集成提取工艺条件。
主题词：丹参成份测定中图分类号：O723+.6丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎，主要含有二萜醌类脂溶性及酚酸类水溶性成分。
2005年版《中华人民共和国药典》（一部）以丹参酮ⅡA和丹酚酸B 为指标，对丹参药材进行质量控制。
为了能同时兼顾丹参脂溶性及水溶性两类有效成分，我们采用正交试验法，以丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量为考察指标，对丹参的提取工艺进行全面优选，以使丹参的提取工艺更科学、合理。
一、仪器与试药Agilent 1100高效液相色谱仪。
丹参酮ⅡA（批号110766- 200518）、丹酚酸B（批号111562-200605）标准品购自中国药品生物制品检定所；丹参药材购自安国药材市场（经河北省药品检验所中药室孙宝惠主任药师鉴定为正品）。
甲醇、乙腈为色谱纯；其他试剂均为分析纯。
二、方法与结果1 、丹参提取液中丹参酮ⅡA的含量测定方法采用Phenomenex Luna C18色谱柱（5 μm，250 mm×4.6 mm，广州菲罗门科学仪器有限公司），流动相：甲醇-水（75∶25），流速：1.0 mL/min，检测波长：270 nm。
精密称取丹参酮ⅡA对照品10.21 mg，置50 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取2 mL，置25 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液（每1 mL中含丹参酮ⅡA 16.32μg）。
分别取溶剂考察、粒度考察、正交试验及验证试验中回流提取液的稀释液，以0.45 μm 微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定回流液中丹参酮ⅡA的含量。
丹参药材丹酚酸B含量的NIR快速检测
丹 参 药 材丹 酚 酸 Ｂ含 量 的 Ｎ Ｉ Ｒ快 速 检 测
雷敬卫 ， 李 磊， 白 雁 ， 谢 彩侠 ， 胡春 月
（ 河南 中医学 院 ， 河 南 郑州 ４ ５ ０ ０ ０ ８ ）
摘要 ： 目的 利用近红外光谱技术， 快速测定丹参药材中丹酚酸Ｂ的含量。方法 运用偏最小二乘法（ Ｐ Ｌ Ｓ ） 建立丹参药材
丹参 Ｓ ａ ｌ ｖ ｉ ａ ｍｉ ｌ ｔ ｉ ｏ ｒ ｒ ｈ ｉ ｚ ａ Ｂ ｇ ｅ ． 的干 燥根及 根茎 。丹 酚 酸 Ｂ为水 ２ ． ２ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法测定丹酚酸 Ｂ的含量 溶性 的酚酸类 成分 ， 是丹参 的重要药用 成分 ， 具有活血化瘀 、 通经 ２ ． ２ ． １ 色 谱条件及 系统适用 性试 验 流 动相 为 甲醇 一 乙腈 一甲 活络之功效 ， 以及抗凝 、 抗氧化等作用 Ｅ ３ ］ 。２ ０ １ ０版 《 中国药典 》 将 酸 一 水（ ３ ０ ：１ ０ ：１ ：５ ９ ） ； 检测 波长 ２ ８ ６ ｎ ｍ ； 温度 ３ ０ ｏ Ｃ； 填充剂 其作 为指标性成分之一用来衡量丹参药材质量 。长期 以来 ， 丹参 为十八烷基硅烷键合硅胶 。理论板 数按丹酚 酸 Ｂ峰计 算应不低
０ ． ５ ８ ４ 。预 测值 的平均相对误差为 ２ ． ０ ４ ７ １ ％ 。结论 近红外光谱技术 测定丹 参药材 中丹酚酸 Ｂ的含量是 可行 的， 快速 准
确， 简单无损 ， 可应用于大批量样品的快速分析 。
关键 词 ： Ｐ Ｌ Ｓ 一 近红外光谱 ； 丹参； 丹酚酸 Ｂ Ｄ Ｏ Ｉ 标识 ： ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ８ － ０ ８ ０ ５ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ４ ． １ １ ０
图１ ４ ５份 样 品 的 近 红 外 光 谱 叠加 图
高效液相色谱法同时测定丹参中4种酚酸类成分的含量
Ｈｆｉ ２ ０ ３ ，ｈｎ ；． ｏｌ ｅ ￡ Ｓｉ ｃｓＲ ｓａｃ ｅｔ ａｕａ Ｐｏｕｔ，ｕ ａ ｎ ｅ ｉ ，ｈｎ ｈ ｉ ２０ ３ ， ｈ ａ ｅ ３０ Ｃ ｉ ２ Ｃ ｌｇ ｃ ｎｅ，ｅ ｒ Ｃｎｅ ｏ Ｎ ｔｒｌ ｒｄｃ Ｆ ｄｎＵ ｉ ｒｔ Ｓ ａｇ ａ ０４ ３ Ｃ ｉ ） ｅ １ ａ ｅ ｏ ｆ ｅ ｅ ｈ ｒｆ ｓ ｖ ｓｙ ｎ
关键词 ： 丹参 ； 酚酸类成分 ； Ｐ Ｃ； Ｈ Ｌ 含量测定
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高效液相色谱法测定丹参中丹酚酸B等3种有效成分_游勇基
药品质量及检验高效液相色谱法测定丹参中丹酚酸B 等3种有效成分游勇基1,陈铭辉2(1.福建省药品检验所,福建福州350001;2.福建中医学院药学系,福建福州350003)摘要:目的 测定丹参中丹酚酸B,丹参素和原儿茶醛等3种水溶性有效成分的含量。
方法 采用高效液相色谱法测定。
以甲醇-5%冰醋酸为流动相进行梯度洗脱,以对羟基苯甲酸为内标,检测波长为281nm,柱温30 。
结果 丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B 浓度分别在3.95~47.4 g mL -1(r =0.9996),5.14~61.68 g mL -1(r =0.9999),16.8~117.6 g mL -1(r =0.9994)范围内呈良好线性关系,丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B 的平均回收率分别为101.43%(RSD = 2.88%,n =6),99.89%(RSD=3.04%,n =6)和103.43%(RSD=1.52%,n =6)。
结论 方法简便,分离效果好,能同时测定丹参中丹酚酸B 、丹参素、原儿茶醛等3种水溶性有效成分的含量,结果准确可靠。
关键词:丹参;丹参素;原儿茶醛;丹酚酸B;高效液相色谱法中图分类号:R917文献标识码:A文章编号:1001-2494(2003)12-0950-03Determination of three effective components in Salvia miltiorrhiza by means of HPLCYOU Yong -ji 1,CHEN M ing -hui 2(1.Fuj ian I ns titute f or Dr ug Contr ol,Fuz hou 350001,China;2.D ep ar tment of Phar macy ,Fuj ian Colle ge of T r aditional Chinese M edicine,Fuz hou 350003,China)ABSTRAC T:OBJECTIVE T o investigate the determination of three water soluble components in S alvia miltior r hiz a .METHODS T he analysis w as carr ied on a column of Hypersil C 18(250mm 4.6mm,5 m)w ith a mobile phase of methano-l 5%acetic acid (gradient elution from 10 90to 35 65in 20minutes),using 4-hydrox y -benzoic acid as the internal standard.T he detection wave -length w as at 281nm.RESULTS T he linearit y w as obtained over 3.95~47.4 g mL -1(r =0.9996)for Danshensu,5.14~61.68 g mL -1(r =0.9999)for pro to catechuic aldrhyde and 16.8~117.6 g mL -1(r =0.9994)for salviamolic acid B,respectively.T he average recoveries w er e 101.43%(R SD=2.88%,n =6)for Danshensu,99.89%(RSD=3.04%,n =6)for protocatechuic a-l drhyde and 103.43%(RSD = 1.52%,n =6)for salv iamolic acid B,respectively.C ONC LUSION T his method appear ed to be r apid,simple and accurate.KEY WORDS :S atvia miltior r hiz a Bg e.;Danshensu;protocatechuic aldehyde;salv iamo lic acid B;HPL C 作者简介:游勇基,男,硕士,副主任药师Tel:(0591)7621966-3521E -mail:youyj @丹参为唇形科植物丹参(Salvia miltiorr hiz a Bge.)的干燥根及根茎,是重要的传统中药。
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丹参提取物中酚酸类含量的快速检测法励娜;胡荣;蒋成英;杨荣平;张小梅【摘要】建立丹参提取物中酚酸类含量的快速检测方法.以丹酚酸B为对照,采用分光光度法于482 nm处测定丹参提取物中酚酸类的含量.结果表明丹酚酸B在0.0782～1.0166 mg(r=0.9977)范围内线性关系良好,回收率为101.652％,RSD值为0.81％(n=9).该提取物中酚酸类含量测定结果为19.636％.该方法快速简便、准确、重现性好,可作为快速检测丹参中总酚酸含量的方法.%The objective of this study was to establisha fast method for the determination of salvianolic acid in the extract of Salviae miltiorrhizae Radix Et Rhizoma. Using salvianolic acid B as a reference substance, the concentration of salvianolic acid in extract of Salviae miltiorrhizae Radix Et Rhizoma was determined by UV absorption at wavelength 482 run. The linear relationship of salvianolic acid B was good in the ranges of 0.0782-1.0166 mg( r = 0.9977). The average recovery was 101.652% and RSD was 0.81% (n=9). The concentration of salvianolic acid in the extract of Salviae milti-orrhizae Radix Et Rhizoma was 19.636%. The method was simple, rapid and accurate for quality control of Salviae miki-orrhizae Radix Et Rhizoma.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2013(025)003【总页数】3页(P398-400)【关键词】丹参提取物;丹酚酸;分光光度法;快速检测【作者】励娜;胡荣;蒋成英;杨荣平;张小梅【作者单位】重庆市中药研究院,重庆400065【正文语种】中文【中图分类】R284.1丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge．的干燥根及根茎。
性微寒味苦，具有活血祛瘀、通经止痛、清心除烦、凉血消痈的功效。
用于胸痹心痛、脘腹胁痛、癥瘕积聚、热痹疼痛、心烦不眠、月经不调、痛经经闭、疮疡肿痛［1］。
丹参药材中主要含脂溶性和水溶性成分。
其中水溶性成分主要为丹酚酸类化合物，如丹参素、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、迷迭香酸等，具有改善微循环、抗血栓、促进组织恢复等作用。
现代医学认为，丹参酚酸类成分能够缩小心肌梗死的范围，减轻其病情，对大鼠心肌缺血、再灌注损伤具有保护作用，同时有明显的抑制血小板聚集、抗凝、溶纤及降低血脂、抗动脉粥样硬化的作用［2］。
《中国药典》2010年版(一部)丹参项下收载用HPLC法测定丹酚酸B的含量标准，测定时间在20 min以上，只能测定丹酚酸B单一组分的含量，不利于丹参药材水提物的整体质量控制。
本实验应用硝酸铝络合显色原理，采用紫外分光光度法测定丹参提取物中酚酸类的含量，并对方法的可行性进行了验证。
结果表明该含量测定方法简便、快捷、准确，大大缩短了丹酚酸含量测定时间，提高了丹参药材质量检测的效率，为丹参药材及其水提物质量控制提供了有效方法。
1 仪器与材料UV-1601紫外-可见分光光度计(日本岛津公司);BUG25-12超声波清洗机［220 W，50 KHz，必能信超声(上海)有限公司］;数显恒温水浴锅(上海梅香仪器有限公司);AEG-45SM电子天平(十万分之一，日本岛津公司);BP121S电子天平(万分之一，北京赛多利斯科学仪器有限公司)。
丹参药材提取物(南京泽朗医药科技有限公司提供，批号:090927);丹酚酸B对照品(南京泽朗医药科技有限公司提供，批号:115939-258A0056)。
试剂均为分析纯。
2 方法与结果2．1 对照品溶液与供试品溶液的制备2．1．1 对照品溶液的制备称取丹酚酸B对照品1．6 mg，置于10 mL容量瓶中，精密称定，加入75%甲醇溶解并定容至刻度。
即得每1 mL含0．16 mg的丹酚酸B对照品溶液。
2．1．2 供试品溶液的制备取丹参提取物粉末约0．02 g，精密称定，加沸水使溶解，冷却后定容于25 mL容量瓶，摇匀，作供试品溶液。
2．2 测定波长的选择取对照品溶液和供试品溶液5 mL，分别置于25 mL量瓶中，顺序加入5%NaNO2 3 mL、10%Al(NO3)3 0．5 mL、NaOH 试液 15 mL，加水至刻度，摇匀，放置5 min后，在400～800 nm波长范围内扫描，二者在482 nm有最大吸收，故选择482 nm为测定波长。
2．3 分光光度法条件筛选2．3．1 5%NaNO2用量考察取供试品溶液各5 mL，置于25 mL量瓶中，分别加入 5%NaNO2 0、1、3、5、10、13 mL，再加入10%Al(NO3)3 0．5 mL和NaOH试液5 mL，加水至刻度，摇匀，放置5 min后，在482 nm波长处测定其吸光度分别为0．074、0．330、0．441、0．398、0．438、0．432。
结果表明，5%NaNO2用量在3 mL时样品吸光度较高，故5%NaNO2用量选择在3 mL为宜。
2．3．2 10%Al(NO3)3用量考察取供试品溶液各5 mL，置于25 mL量瓶中，加入5%NaNO2 3 mL后，分别加入10%Al(NO3)3 0、0.1、0．5、1、3 mL，再加入 NaOH 试液 5 mL，加水至刻度，摇匀，放置5 min后，在482 nm波长处测定其吸光度分别为 0．065、0．431、0．469、0．522、0．511、0.478。
结果表明，10%Al(NO3)3用量在0．5 mL时样品吸光度较高，故10%Al(NO3)3用量选择在0．5 mL为宜。
2．3．3 NaOH 试液用量考察取供试品溶液各5 mL，置于25 mL量瓶中，加入5%NaNO2 3 mL、10%Al(NO3)3 0．5 mL 后，分别加入NaOH 试液0、1、5、10、15 、16 mL，加水至刻度，摇匀，放置5 min后，在482 nm波长处测定其吸光度分别为0．164、0．358、0．496、0．511、0．550、0．551。
结果表明，NaOH试液用量在15 mL和16 mL时样品吸光度均较高，同时吸光度值相差不大，故NaOH试液用量选择在15 mL为宜。
2．3．4 显色时间的考察取供试品溶液5 mL，置于25 mL量瓶中，加入5%NaNO2 3 mL、10%Al(NO3)3 0．5mL 和 NaOH 试液15 mL，加水至刻度，摇匀，分别在 0、3、5、10、20、30 min后，在482 nm波长处测定其吸光度分别为0.522、0．522、0.521、0．517、0．515、0．514。
结果表明，在放置5 min内吸光度值较高且稳定，5 min后吸光度值开始下降较明显，故选择的显色时间为5 min。
2．4 线性关系考察精密移取对照品溶液 0．5、1、2、4、6、6．5 mL，分别置于25 mL量瓶中，顺序加入5%NaNO2 3 mL、10%Al(NO3)3 0．5 mL、NaOH 试液 15 mL，加水至刻度，摇匀，放置5 min后，于482 nm波长下测定吸光度。
以丹酚酸B的浓度(mg/mL)为横坐标(X)、吸光度值为纵坐标(Y)，进行回归，回归方程为Y=0.8071X+0．0427(r=0．9977)。
结果表明，丹酚酸B含量在0．0782～1.0166 mg范围内，吸光度值与含量线性关系良好。
2．5 精密度实验精密吸取丹酚酸B对照品溶液(0．16 mg/mL)5 mL于25 mL容量瓶中，按2．4中显色条件操作，经放置显色后，于482 nm波长处测定吸光度，连续6次，RSD值为0．009%，表明仪器精密度较好。
2．6 稳定性实验2．6．1 对照品稳定性试验精密吸取丹酚酸B对照品溶液(0．16 mg/mL)5 mL于25 mL容量瓶中，按2．4中显色条件显色后，分别在 0、0．5、1、1．5、3、4、8、12、24 h 测定其在482 nm波长处的吸光度。
吸光度平均值为0．668，RSD值为1.57%。
结果表明，对照品溶液在24 h内较稳定。
2．6．2 样品稳定性试验取丹参提取物粉末约0．02 g，精密称定，按2.1．2项下制得供试品溶液，取供试品溶液5 mL，按2．4 中显色条件显色后，分别在0、0．5、1、1．5、3、4、8、12、24 h测定其在482 nm波长处的吸收度。
样品24 h内总酚酸含量平均值为19．553%，RSD值为3.26%;12 h内丹酚酸含量平均值为19．718%，RSD值为1．66%，表明供试品溶液在显色后12 h内基本稳定。
2．7 重现性实验取丹参提取物粉末约0．025 g，精密称定，5份，按2．1．2项下制得供试品溶液，分别取供试液5 mL，按2.4中显色条件显色后，测定其在482 nm波长处的吸收度。
计算丹酚酸的含量平均值为19.416%，RSD值为1．18%，表明实验重现性良好。
2．8 回收率试验精密称取已知含量的丹参提取物6份，精密称定。
按样品中丹酚酸含量的80%、100%、120%精密加入对照品，按2．1．2项下制得供试品溶液，分别取供试液5 mL，按2．4中显色条件显色后，测定其在482 nm波长处的吸收度。
计算回收率为101.652%，RSD值为0．81%，结果见表1。
表1 加样回收率试验结果(n=9)Table 1 Results of recovery test(n=9)样品Sample样品量Sample weight(g)加入量Added(mg)测得量Detected(mg)回收率Recovery(%)平均回收率Average recovery(%)RSD(%)1 0．0108 3．012 5．145 101．445 2 0．011 3．012 5．186 101．578 3 0．012 3．012 5．393 101．62 4 0．0124 3．765 6．188 100．431 5 0．0102 3．765 5．785 101．132 101．625 0．81 6 0．0103 3．765 5．868 102．83 7 0．0113 4．518 6．838 102．632 8 0．0104 4．518 6．57 100．819 9 0．0098 4．518 6．529 102．3822．9 样品的含量测定按拟定含量测定方法对丹参药材提取物3批样品进行检验，结果见表2。