做实验需要注意的五大细节

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做实验需要注意的五大细节

实验的成功率很重要,而要提高成功率,就必须注意细节。以下是做实验需要注意的五大细节:

一,记录

人的记忆力是有限的,在做实验的时候,不可能记住做过的每一步。例如实验记录如果不及时写,第二天就会忘记很多,一周之后就完全忘记了。所以做实验一定要做好实验记录。记录一要及时,否则就会忘记,最好是随时记录。二要详细,因为一个很小的细节可能就是实验失败或者成功的原因,如果没有记下这个细节,实验出问题了就难以找到原因。例如,做实验用的试剂是哪一瓶,什么时候配的(尤其是容易失效的试剂),如果是用PBST配的5%BSA,加了0.02%的Sodium Azide抑制微生物生长,就应该记录为5%BSA.PBST.N3Na,而不是5%BSA。三要整洁,如果过于潦草,看起来很不方便,需要找相关信息的时候就难以找到。配好的试剂做好标签也是一种记录,标签一定要详细:包括试剂名称、配置日期、配置者及其它必要信息。在配试剂的时候,为了防止忘记贴标签的情况,应该先贴标签,再加试剂。电子记录有易于检索的优点,对于某些重要信息,可以记录到电子文档(例如word文档)里面。

二,核查

很多时候,我实验失败的原因是没有仔细核查,例如没有核查果蝇的表型,没有仔细检查试剂的标签,没有核查离心机的转速,没有检查heat block的温度等等。每一个小错误都可能导致实验失败,所以一定要养成仔细核查的习惯。具体来说,在加试剂的时候,一定要仔细核查标签(包括试剂名称、配置日期),是否有沉淀,颜色是否改变等;使用仪器的时候,要核查设置,例如温度、转速、时间设置等;电泳的时候,要核查是否有气泡冒出;使用实验动物的时候,要核查表型等。

三,分装

谚语说:不要把所有鸡蛋都放到同一个篮子里。同样,在做实验的时候,有时也不要把所有试剂都放到同一个容器里。分装有很多好处。第一,保险。可以防止

因为污染、变质等原因损失全部试剂或者样品。第二,容易混匀。结冰的试剂需要全部溶解然后vortex才可以混匀,如果很大体积,有时会等不及全部溶解就开始加样,会导致浓度不均。一般溶液都是先溶解溶质浓度高的,就像是结冰的汽水一边融化一边喝,一开始很甜,最后几乎没有甜味了,是因为糖份的存在会降低熔点,含糖量高的先溶解了。分装后,每一管溶液量小,解冻时容易全部溶解。注意在分装的时候一定要全部溶解并充分混匀。第三,延长保质期。很多试剂都要低温保存。如果不分装,每次使用的时候都全部受热一次,变质就会很快。分装之后,每次使用只有少量试剂受热,其它的还可以继续保持于低温,可以延长使用寿命。抗体、体积较大的酶、热不稳定的其它试剂等最好分装保存于-20度或者更低的温度。

四,混匀

实验对很多试剂的用量都有明确要求。要保证实验的成功和可重复性,必须保证试剂用量一致。用量等于体积乘以浓度,如果溶液不混匀的话,浓度就会不同,即使加样体积一样,实际的量也可能不一样。所以,一定要保证试剂是充分混匀。结冰的试剂,必须完全溶解才可以使用。容易沉淀的试剂,使用之前必须充分vortex后再快速离心一下才能使用。

五,备份

在《At the bench》一书里,作者说如果实验室发生起火等危急情况,首先应该抢救的不是试剂,而是实验记录。因为有了实验记录才可以完成论文。其实,为了防止实验记录丢失的情况,可以把实验记录扫描为PDF文档以备份。同时,对于重要的研究数据,最好整理成电子文档例如excel或word文档,并且养成对自己的电脑文件定期备份的习惯。此外,质粒、转化后的细菌也需要备份。最好备份两份以降低丢失的概率。

关于实验记录,我这里有国内某个重点实验室的规定:

1 实验记录管理规定(暂行)

第一条为了规范科研实验记录,确保其真实、及时、准确、完整,提高实验质量,制定本规定。

第二条实验记录本的管理

1.实验记录本统一编号,使用者领用时必须登记、注册,并负责保管,登记内容包括:领用人、日期、课题组、实验记录本编号等;

2.实验人员领取新实验记录本时,必须将旧实验记录本交回到课题组负责人或项目负责人手中,由其保管并签字认可;

3.研究人员离开实验室时必须将实验记录本交回,方可办理离校手续。

第三条实验记录应包括如下内容:

1.实验名称。每项实验开始前应注明名称,并在其后注明该项实验记录的起止页码;如有参考文献,应注明参考文献的刊名、卷号、页码及作者等信息;

2.实验人员:应当记录所有参加该项实验的人员;

3.实验日期;每项实验须按年月日顺序记录实验日期和时间;4.实验正文应包括如下内容:

①实验目的:用简单的语言概括该实验要实现的主要目标;

②实验步骤:详细记录每一步实验操作及实验条件,所使用仪器、试剂的厂家、型号、级别、批次、保质期等;

③原始数据:包括实验所发生的现象、照片、胶片等。对于另外粘贴在实验记录本上的部分要签上名字和日期;

④整理过的数据:对于整理后的数据、图表等应该标明数据在电脑或者数据库中的位置以及是否共享等;

⑤基本结论:对该实验进行简单的总结(注意:此结论仅针对本次试验,是指实验事实的结论或是否达到预期目的,不能任意引申推广)。

5.每页实验记录后都必须由实验者签属姓名和日期,每2-3周由一名非实验参与人员作为该实验记录的旁证签属姓名,该旁证人员有责任发现明显实验记录错误并予以纠正;

6.定期在实验记录本的最前面按顺序填写目录;

7.实验记录本还可用于记录对实验的新的设想,创新性意见,包括实验方法,专利、论文新构思等,并署上日期,以便将来证实科研思想的起源。第四条注意事项

1.实验记录必须使用**微生物学国家重点实验室统一专用实验记录本。实验记录本应保持完整,不得缺页或挖补;如有缺、漏页,应详细说明原因;

2.严禁共用实验记录本;

3.实验记录不得随意删除、修改或增减数据。如必须修改,须在修改处划一斜线,不可完全涂黑,保证修改前记录能够辨认,并应由修改人签字,注明修改时间及原因;

4.实验记录本不得使用铅笔并且应该保证格式规范,字迹工整;5.常用英文缩写应当符合规范,首次出现应用中文或英文加以注释;

6.课题组负责人或项目负责人要定期检查实验记录,并签署检查意见。课题组负

责人对本组(分室)人员正确使用实验记录本负有责任,应在每项研究工作结束后,根据实验记录与实验结果指导研究生写出完整的实验总结报告或者学术论文;并且要正确、安全地保管实验记录本。

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