环肽固定相的制备及色谱行为研究
5%苯基-甲基聚硅氧烷为固定相
5%苯基-甲基聚硅氧烷为固定相
5%苯基-甲基聚硅氧烷为固定相是一种常用的色谱固定相。
在色谱分析中，固定相是色谱柱的核心部分，它决定了色谱分离的效果和分离的物质。
5%苯基-甲基聚硅氧烷作为固定相，具有以下特点：
极好的耐化学腐蚀性，可在强酸、强碱或高湿度环境中使用。
具有良好的疏水性，可用于分离极性化合物。
热稳定性高，可在高温下使用。
机械强度高，不易破碎。
在色谱分析中，5%苯基-甲基聚硅氧烷固定相可用于分离各种有机化合物，如脂肪酸、醇、酮、酯等。
此外，它还可用于分离某些无机化合物和金属离子。
需要注意的是，不同种类的化合物在5%苯基-甲基聚硅氧烷固定相上的保留行为会有所不同。
因此，在使用该固定相进行色谱分析时，需要根据待分离化合物的性质选择合适的流动相和操作条件，以达到最佳的分离效果。
液相色谱的固定相与流动相
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第一节 高效液相色谱的特点与仪器 feature and instrument of HPLC 第二节 基本原理与主要分离类型 basic principle and main separating types 第三节 固定相与流动相 stationary phase and mobile phase 第四节 影响分离的因素与操作条件选择 factors influenced separation and choice of operation condition 第五节 离子色谱法 ion chromatograph 第六节 超临界流体色谱 supercritical fluid chromatograph
2.流动相类别
按流动相组成分：单组分和多组分；
按极性分：极性、弱极性、非极性；
按使用方式分：固定组成淋洗和梯度淋洗。
常用溶剂： 己烷、四氯化碳、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙腈、水。
采用二元或多元组合溶剂作为流动相可以灵活调节流动相的极性或增加选择性，以改进分离或调整出峰时间。
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3.流动相选择
在选择溶剂时，溶剂的极性是选择的重要依据。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
一、液相色谱固定相 stationary phases of LC
液-液分配及离子对分离固定相 全多孔型担体
现采用10μm以下的小颗粒，化学键合制备柱填料；
30～40μm的玻璃微球，表面附着一层厚度为1 ～ 2μm的多孔硅胶。
由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体；早期采用100μm的大颗粒，表面涂渍固定液，性能不佳已不多见；
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化学键合固定相的特点
色谱柱固定相
色谱柱固定相色谱柱固定相，是指固定在色谱柱内壁的化学元素或化合物。
固定相是色谱分离的关键之一，对色谱柱的分离性能有着重要的影响。
一、固定相种类1.硅胶固定相硅胶固定相是一种常见的无定型材料，在色谱柱中的应用比较广泛。
硅胶固定相具有强吸附性和选择性，特别是对极性化合物的分离具有良好的效果。
2.聚合物固定相聚合物固定相是以聚合物为基础，利用交联网络固定在色谱柱内壁上。
聚合物固定相具有化学惰性、热稳定性好、强度高等特点，适用于分离非极性和弱极性化合物。
3.矽胶固定相矽胶固定相是一种常见的亲水性固定相。
它是以硅酸酯为基础，固定在色谱柱内壁。
矽胶固定相具有化学稳定性、亲水性强、表面积大等特点，适用于分离极性化合物。
4.金属氧化物固定相金属氧化物固定相是一种具有吸附性和离子交换性质的固定相。
金属氧化物固定相的种类较多，如氧化硅、氧化铝等。
金属氧化物固定相具有射电稳定性好、化学稳定性及选择性强等特点，适用于分离有机物和无机物的混合物。
二、固定相的选择1.选择合适的固定相在进行色谱分离时，首先需要选择一种适合的固定相。
一般来说，根据待分离的样品，选用具有良好的结构选择性及物化功能的固定相，以达到最佳分离效果。
2.考虑固定相容性在选择固定相时，还需要考虑固定相的稳定性和兼容性。
若固定相与待分离的目标物质具有反应性，会导致固定相的损坏和失活。
因此需要选择稳定性强、兼容性好的固定相。
3.考虑初始状态在选择固定相的同时，需要考虑固定相的初始状态。
不同种类的固定相具有不同的初始状态，如表面积、孔径大小、表面活性等。
对于一些需要实现特殊的色谱分离机制的分析，选择具有特定表面活性的固定相能够更好地提高分离效果。
总之，选择一种合适的固定相是影响色谱分离效率的重要因素。
根据不同的分析原理和待分离的目标物质，合理选择固定相可以达到最佳的分离效果。
肽的结构分析——圆二色谱
许多生物大分子都是手性分子。
所谓手性就是具有不能重叠的三维镜像对应异构体。
一般来说，凡具有手性的分子就具有旋光活性，这一点很早就认为人们所认识并广泛应用于研究分子的非对称性结构。
振动方向在同一平面内的电磁波为平面偏振光。
当一束平面偏光通过介质时，光学活性物质分子对左、右圆偏振光的吸收不同，其差值称为圆二色性。
由于存在圆二色性，平面偏振光通过光学活性物质后，其两圆偏振光分量的强度将不同，它们合成的不再是平面偏振光，而是椭圆偏振光。
吸收随波长的变化构成圆二色谱。
圆二色谱仪利用这一原理，将平面偏振光调制成左圆偏振光和右圆偏振光，并以很高的频率交替通过样品，这两束圆偏振光通过样品产生的吸收差由光电倍增管接收检测。
圆二色谱是快速确定蛋白质和肽二级结构的方法。
在紫外区段主要的生色团是肽链，这一范围的圆二色谱包含着肽主链的构象信息。
在近紫外区占支配地位的生色基团是芳香氨基酸侧链，这一区域的圆二色谱能给出局域侧链间相互作用的信息。
在波长大于300nm 的区域，包括可见光区，对圆二色谱的贡献主要来自含有金属离子的一类生色团，这一波段的圆二色谱对于金属的氧化态、配位体以及链一链相互作用均较敏感。
不含非氨基酸发色团的肽和蛋白质在300nm 以上没有吸收或圆二色谱带。
通常由样品圆二色谱形状、谱峰位置、强度以及它们随时验条件的变化本身就可以得到很重要的结构信息。
最主要的圆二色谱参量是谱峰位置及该处摩尔椭圆率。
酰胺基是用圆二色谱观察肽和蛋白质的最重要的发色团。
已确定它的两种电子迁移方式。
n-π迁移通常很弱，在220nm附近呈一个负带。
它的能量对氢键的形成敏感。
π-π迁移一般较强，在192nm附近出现一个正带，在210nm附近出现一个负带。
а-螺旋、β-折叠构象和不规则构象的比例可用圆二色谱确定。
а-螺旋构象的特征是常在222nm和208nm处出现负带，在192nm 处为一正带。
短肽在溶液中通常不形成稳定的螺旋，但已表明加入2，2，2-三氟乙醇能使大多数肽的螺旋成分增加。
环肽by离子二级质谱
环肽by离子二级质谱全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：环肽是指由多个氨基酸残基经肽键连接而成的环状多肽分子，在生物体内具有重要的生物学功能。
环肽的结构稳定性和生物活性使其成为药物研发和生物分析中的重要对象。
离子二级质谱（MS/MS）是一种常用的生物质谱技术，能够对复杂生物样品中的分子进行准确、快速的分析。
本文将重点介绍环肽分析中离子二级质谱技术的应用，探讨其在环肽结构鉴定、生物活性研究和药物开发中的作用。
一、环肽的结构鉴定环肽具有复杂的结构和多样的氨基酸组合方式，传统的蛋白质分析技术往往难以准确地解析环肽的结构。
离子二级质谱技术通过对环肽分子进行碎裂反应，可以得到其氨基酸序列和分子结构信息。
离子二级质谱拥有高灵敏度、高分辨率和高准确性的优势，可以区分不同的氨基酸残基和连接方式，为环肽的结构鉴定提供重要的帮助。
二、环肽的生物活性研究环肽在体内具有多种生物学活性，如抗菌、抗病毒、抗癌等。
离子二级质谱技术可以通过对环肽样品的分析，了解其与生物分子的相互作用机制，探究其生物活性表现。
利用离子二级质谱技术，研究人员可以定量分析环肽在生物体内的分布和代谢途径，揭示其在生理和病理过程中的作用机制，为环肽的药理学和临床应用提供理论依据。
三、环肽的药物开发由于环肽具有独特的结构和生物活性，被广泛应用于药物开发领域。
离子二级质谱技术能够对环肽药物进行定量分析、代谢研究和药效评价，为环肽药物的研发提供技术支持。
利用离子二级质谱技术，研究人员可以对环肽药物的药代动力学、药效学和毒性进行全面评估，筛选出具有潜在临床应用前景的环肽药物候选化合物。
离子二级质谱技术在环肽分析中具有重要的应用前景，其高灵敏度、高分辨率和高准确性为环肽结构鉴定、生物活性研究和药物开发提供了有力的支持。
未来随着离子二级质谱技术的不断发展和完善，相信在环肽研究领域将取得更加深入的进展，为环肽药物的创新和发展注入新的活力。
第二篇示例：环肽是一类由氨基酸组成的环状小分子，通常在蛋白质合成的过程中由蛋白酶切割而成。
固定相与流动相课件
在食品分析中的应用
食品添加剂检测
01
色谱分离技术可用于检测食品中的添加剂和污染物，确保食品
的安全和卫生。
营养成分分析
02
通过色谱分离技术，可以分析食品中的营养成分，了解食品的
营养价值和功能。
食品真伪鉴别
03
色谱分离技术可以用于鉴别食品的真伪，防止假冒伪劣食品的
流通。
在环境监测中的应用
1 2
污染物检测
色谱柱的选择
分离度
根据待分离组分的性质和分离度 要求，选择合适的色谱柱。
固定相
根据待分离组分与固定相的相互作 用类型，选择合适的固定相材质和 粒径。
耐压性
根据色谱仪器的压力限制，选择能 承受压力的色谱柱。
色谱柱的维护与保养
清洁
使用前和使用后应清洗色谱柱， 以去除杂质和残留物。
储存
储存时应避免将色谱柱暴露在空 气中，以防止固定相干燥和污染
。
更换
当色谱柱性能下降时，应及时更 换色谱柱。
05
色谱分离技术应用
在药物分析中的应用
药物成分分离
色谱分离技术可用于分离药物中的有效成分和杂 质，提高药物的纯度和质量。
药物含量测定
通过色谱分离技术，可以精确测定药物中有效成 分的含量，确保药物质量和安全。
药物代谢研究
色谱分离技术可以用于研究药物的代谢过程，了 解药物在体内的变化和转化。
缓冲液
缓冲液是一种特殊的流动 相，常用于生物大分子和 药物的分离分析。
流动相的选择
根据待测组分的性质选择
对于不同性质的待测组分，应选择与其相容性好的流动相，以提 高分离效果。
根据分离目标选择
根据分离目标的不同，如定性分析、定量分析或制备分离，选择合 适的流动相以达到最佳分离效果。
液液色谱的固定相
液液色谱的固定相液液色谱（Normal Phase Liquid-Liquid Chromatography, NPLC）是一种基于液体相互作用的色谱技术。
在液液色谱中，固定相是一种由有机溶剂和无机溶剂组成的液体混合物，被涂覆在固定相的支撑物表面上，用于分离混合物中的化合物。
液液色谱通常用于分离非极性化合物和溶解度极低的复杂混合物，如天然产物提取、环境样品和石油产品等。
液液色谱中的固定相主要由两个组分组成：固体素和液体素。
固体素是指将支撑物涂覆在色谱柱的内壁上，常见的固体素有硅胶、纤维素和硅烷等。
而液体素则是溶解在有机溶剂中的无机盐或某种组分，用来调节固定相的性能。
液体素通常选择具有一定极性的溶剂，如乙腈、甲醇、乙醇和丙酮等。
液液色谱的分离原理是基于化合物在液相中的分配行为，即各种化合物在液相中具有不同的亲溶性和相对溶解度。
当混合物样品通过液相柱时，化合物在液固界面之间进行分配，有一部分溶解于液体相，而另一部分则吸附在固体素上。
这样，化合物将以不同的速率在固体素和液体素之间进行扩散和分配。
较亲水性的化合物更容易被液体素溶解，而较亲油性的化合物更容易被固体素吸附。
液液色谱的固定相主要起到分离混合物中化合物的作用。
固体素通过液体素的调节，可以选择性地吸附或释放目标化合物，从而实现化合物的分离。
调节液体素中的溶剂种类和浓度可以更改固定相的挟持力和亲溶性，进而影响化合物的迁移速率。
不同的固体素和液体素的组合可以针对不同类别和性质的化合物进行分离。
液液色谱的固定相具有以下特点：首先，固定相的选择和调节灵活多样，可以根据需求对液体相的极性、溶剂种类和浓度进行调整，从而实现对不同类型化合物的分离。
其次，由于液液色谱中使用的是液体相，与其他色谱技术相比，固定相的亲溶性和选择性更高，适用于非极性和部分极性化合物的分离。
第三，液液色谱相对易于操作和控制，适用于大规模分析和工业生产。
然而，液液色谱也存在一些局限性。
首先，液液色谱中的固定相比较脆弱，在高压下容易碎裂，因此液液色谱的最高操作压力受到一定限制。
气相色谱手性固定相研究进展
收稿:2006年3月,收修改稿:2006年5月 3国家自然科学基金项目(N o.30160092)、高等学校青年教师教学科研奖励计划(N o.2001298)以及云南省自然科学基金项目(N o.2005E0006Z )资助33通讯联系人 e 2mail :yuan -limingpd @气相色谱手性固定相研究进展3李 莉 字 敏 任朝兴 袁黎明33(云南师范大学化学化工学院 昆明650092)摘 要 本文评述了气相色谱手性分离的发展过程,介绍了氨基酸、二肽、金属配合物、环糊精、多糖、手性离子液体、环肽、键合以及交联类气相色谱手性固定相以及各类型的拆分机理,展望了气相色谱手性固定相的研究前景。
关键词 气相色谱 手性固定相 手性分离中图分类号:O657.7+1 文献标识码:A 文章编号:10052281X (2007)02Π320393211The Development of Chiral Stationary Phase in G as ChromatographyLi Li Zi Min Ren Chaoxing Yuan Liming33(Department of Chemistry ,Y unnan Normal University ,K unming 650092,China )Abstract The development of chiral separation in gas chromatography is briefly described in this paper ,and the advances in chiral stationary phases of G C are reviewed ,including amino acids ,dipeptides ,coordinated metal com plexes ,cyclodextrins ,polysaccharides ,chiral ionic liquids ,cyclopeptides ,covalently bonded and linked chiral group.The prospects of chiral stationary phases are als o discussed.K ey w ords gas chromatography ;chiral stationary phases ;chiral separation1 早期的气相色谱手性分离 利用气相色谱分离手性化合物的研究始于1950年代末期,但真正第一次成功地分离是在1966年,G il 2Av 等首次报道了氨基酸对映异构体的分离,手性固定相为N 2三氟乙酰基2D 2异亮氨酸月桂醇酯[1]。
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环肽固定相的制备及色谱行为研究
李媛媛1,2，李娇1，陈桐1，许娈1，刘晓燕1，张海霞1*
1
兰州大学化学化工学院，兰州，730000，
2
宁夏大学能源化工重点实验室，银川，750000
*
E-mail: zhanghx@lzu.edu.cn
在众多的 HPLC 固定相中，线性多肽固定相已有不少报道, 最初用于分离多肽和氨基酸，随后发现具
有手性位点，而变成了手性固定相的一个主要分支[1，2]。然而，环状多肽固定相还未见报道。环状多肽
具有独特的空间结构，它可以选择性吸附一些物质,从而可以提高分析方法的选择性和灵敏度。因此，本文
合成了一种新颖的环状四肽修饰的固定相。一些代表性的极性化合物被用于色谱评价。结果表明，此环肽
固定相具有立体选择性，是典型的亲水作用色谱固定相，可以用于乙腈富集和水富集流动相中分离核苷类、
磺胺类、苯酚类等极性化合物，而且具有高的柱效。在复杂样品的分析上具有应用潜力。
Fig. 1 The structure of cyclopeptide stationary phase Fig. 2 The separation chromatograms of five nucleosides. Mobile
phase: ACN/water (95/5, v/v); UV detection: 248 nm. Analytes: (1)
thymine, (2) adenosine, (3) adenine, (4) cytosine, (5) inosine.
关键词：环肽；固定相；作用机理；亲水作用色谱
参考文献
[1] A. Shundo, A. K. Mallik, T. Sakurai, M. Takafuji, S. Nagaoka, H. Ihara, J. Chromatogr. A，2009，1216： 6170.
[2] K. Ohyama, K. Oyamada, N. Kishikawa, Y. Ohba, M. Wada, T. Maki, K. Nakashima, N. Kuroda, J. Chromatogr.
A，2008，1208：242.
Preparation and Chromatographic Evaluation of Cyclopeptide Stationary
Phase
Yuanyuan Li1,2, Jiao Li1, Tong Chen 1, Luan Xu1, Xiaoyan Liu1, 1Haixia Zhang1*
1
Department of Chemistry, Lanzhou University, Lanzhou, 730000
2
Key Laboratory of Energy and Chemical Engineering, Ningxia University, Yinchuan 750000
In this paper, cyclopeptide stationary phase, cyclo[-Ala-Ala-Ala-Glu-], was synthesized by solid-phase
synthesis method. The obtained stationary phase had the stereoselectivity for polycyclic aromatic hydrocarbon such
as athracene. Retention behavior of polar compounds was studied through varying the water content, column
temperature, pH and ion strength in corresponding acetonitrile-rich and water-rich mobile phases. The separation of
five nucleosides, five sulfa compounds and phenol compounds were investigated by using the new column in
acetonitrile-rich and water-rich mobile phases, respectively.