1、液相芯片的概念

1、液相芯片的概念

液相芯片，又称悬浮阵列、流式荧光技术，是基于美国Luminex 公司研制的多功能流式点阵仪（Luminex 100TM）开发的多功能生物芯片平台，通常用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究。也是目前唯一得到权威机构和医学界共同认可用于临床诊断的生物芯片平台。液态芯片是一种全新概念的生物芯片。该技术的核心是把微小的聚苯乙烯小球（5.6um）用荧光染色的方法进行编码，然后将每种颜色的微球（或称为荧光编码微球）共价交联上针对特定检测物的探针、抗原或抗体。应用时，先把针对不同检测物的编码微球混合，再加入微量待检样本，在悬液中靶分子与微球表面交联的分子进行特异性地结合，在一个反应孔内可以同时完成多达100种不同的生物学反应。最后用LuminexTM分析软件进行分析，仪器通过两束激光分别识别编码微球和检测微球上报告分子的荧光强度。因为分子杂交或免疫反应是在悬浮溶液中进行，检测速度极快，而且可以在一个微量液态反应体系中同时检测多达100个指标。

2、液相芯片的优势

（1）一次检测，100个指标；

（2）既能检测蛋白，又能检测核酸；

（3）既能用于临床，又能用于科研。

3、液相芯片的应用

（1）DNA杂交分析

SNP检测

基因表达谱分析

（2）免疫学分析

免疫分析

受体－配体分析

酶分析

蛋白质－蛋白质相互作用分析

蛋白质－DNA相互作用分析

4、应用实例

Liquichip液相系统是一个高度灵活的多元分析平台，可以适用于学研究，临床研究和药物研究中的各种蛋白质分析。

美国圣祖德儿童研究医院的Dr. Richard等人,使用液相对100μL样本中的15种不同的细胞因子同时进行了精确的定量测定。结果说明在T辅助细胞1型与2型中，某些细胞因子的表达量有显著差异。在测定过程中，Dr. Richard将15种不同的细胞因子的抗体分别标记在15种不同的球形基质上，混合后加入到一个反应体系中，对同一样本中的15种细胞因子进行测定。同时用ELISA的方法，分别对15种细胞因子进行检测。将两组结果进行对比后发现，趋势基本上一致，但是液相可同时对多个分子进行检测，同时灵敏度和可靠性更好，操作更为简单。这样只需要使用微量的样品，在较短的时间内，就可以得到所需的数据。

Luminex 是多功能的液相芯片分析平台，适用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究。Luminex有机地整合了有色微球（color-coded microphere or beads）、激光技术、应用流体学、最新的高速数字信号处理器和计算机运算法则，造就了Luminex液相芯片系统无与伦比的检测特异性和灵敏度。Luminex液相芯片分析平台其卓越的产品性能与广阔的应用前景使得它成为众多生命科学研究单位的首选！

Luminex®200TM是在己有的数千台Luminex®100TM的基础之上,为满足临床与科研工作中的多种高通量检测而开发的新一代系统。和以往的Luminex®100TM相比, Luminex®200TM操作更简单方便，检测运行更稳定可靠。做出的改进包括更为方便的样品针调节旋钮，更精密的XYP机械校准功能以及高性能的空气压缩机等等。

整个系统包括：

1、Luminex®200TM主机

2、XYP平台

3、鞘液系统

4、操作分析软件

5、相关耗材

基于Luminex公司专利的xMAP技术，它能够在微孔板的一个孔内同时检测多达100个不同成分，而且与市场上所有Luminex相关试剂完全兼容。

Luminex®200TM System优势

新的样品针垂直校正旋钮——用户可以自由校正样品针高度以适应不同类型微孔板直

接调整，无需专门工具或者专业工程师。

更精确——精密的机械校准功能使微孔板与XYP平台的相对位置更为精确，提高了仪

器的自动化性能与检测速度。

可拆卸的前面板——方便了仪器内部校正，同时关键的核心工作区还是完全隔离开。

防腐蚀涂层保护的流体工作仓及改进的加固仪器底座——避免可能发生的部件腐蚀，

而且提高了系统本身的稳定性。

新型空气压缩器——提供工作高压，使仪器运行更稳定更安静，尤为重要的是检测数

据重复性更高。

其它改进——仪器运行检测的稳定性更好，使用维护更简单方便。

XYP平台：

尺寸规格：44cmW×61cmD×8cmH

重量：14.5kg

温度控制范围：35℃to55℃

SD鞘液系统：

尺寸规格：20cmW×30cmD×24.75cmH

重量:9kg

Luminex采用特殊的微球，它们的颜色是通过两种荧光染料染色得到的，调节两种荧光染料的比例可以获得100种不同颜色的微球，每种颜色的微球可以携带一种生物探针。探针通过羟基结合到微球表面，因此一个反应孔内的可以完成100种不同的生物学反应。Luminex 通过鉴定微球的颜色来确定反应类型，而对反应的定量分析是通过靶物质上的报告分子完成的。

实验流程

1、将探针包被的beads、报告分子以及样本混合，静置一段时间；

2、将混合物上样到Luminex，采用微流技术将beads分为单个细胞流；

3、激光检测beads，获得光信号、处理数据就可完成对生物反应的实时、定量分析；

优点

1、多元分析，可节约试剂、时间和精力；

2、操作简单，减少实验误差，具有更好的稳定性、更好的重复性与更小的批间差；

3、对样本量的要求少，非常适合分析稀有样本；

4、开放性的实验平台，同一个仪器可以用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等多种研究工作，增加实验的灵活性；

5、液相反应体系，更快地达到平衡点，缩短实验时间；

6、Millipore旗下的Upstate及Linco公司可提供最多选择的试剂盒供实验者选择，试剂盒涉及细胞因子，细胞信号传导，内分泌/糖尿病研究，自身免疫性疾病研究，激酶活性分析以及转录因子活性检测等诸多领域，为Luminex平台上研究提供了极大的方便。

7、提供最新分析软件xPONENT，充分发挥Luminex®200TM系统的高通量性能，软件特点：

a、模块化操作：开机/校准/关机/维护；

b、试剂设置方便，可下载商业化KLT；

c、预设磁珠校准程序，与磁珠应用兼容；

d、实时数据分析；

e、触摸屏操作，图形化界面，设置好PROTOCOL/STD，操作人员仅需通过触摸屏即可完成实

验操作；

f、用户界面友好的数据分析报告；