流体切应力促永生化大鼠BRL-3A肝细胞增殖的研究解析
柴胡对小鼠肝再生及胆汁分泌作用的研究_杨错
[13] M oore J ,Wilson M ,Kieser JB.T he distributi on of bacteriallipopolysaccharide(endotoxin)in relation to periodontal ly i n -volved root surfaces[J].J Clin Periodontol,1986,13(8):748~750[14] 李虹,王顺靖,萧卓然,等.牙周病优势菌群内毒素脂多糖对人牙龈成纤维细胞向人牙根面趋动附着和定向生长的影响[J].华西口腔医学杂志,1993,11(1):68~71[15] 赵宜群.五倍子一味治牙病[J].中医杂志,1998,39(2):72[16] 朱秀丽,陈强,唐荣银,等.五倍子对5种常见牙周细菌抑制作用的体外研究[J].牙体牙髓牙周病学杂志,2002.5[17] 王志良.五倍子水提取物对牙周炎症抗炎机理的实验研究[D].西安:第四军医大学硕士论文,2003[18] 岳小红.五倍子水提取物在牙周炎症中的作用及其分子机制研究[D].西安:第四军医大学硕士论文,2004Studies of the Protective Effects of Galln ut Water Extract on PDLCWA NG Jing,T A NG R ong -yin,WA NG Zh-i liang(College of Stomatology,Fourth M ilitary M edical University,Xi an 710032,Shanxi,China)Abstract:O bj ective:T o observe the effects of the g allnut water ex tract o n L PS w hich lead to the decreases of PDL Cs and A LPs activities,the impairments of PDL Cs ultrastructur es,the attachments of human PDLC inhibited by L PS on the slices of cement ,and try to di scov er the mechanism of the effects.Methods :T he cell culture technique,3H -T dR,cell count -ing,transmission electron microscope(T EM ),scanning electron microscopy (SEM ),and enzyme kinetics methods w er e used.Results :At t he concentration o f 100 g /mL ,L PS can inhibit the activities of PDLCs and AL P r emarkably ;it has significant impairmental effects o n PDLC ultrastructur es and it has inhibitory effects on PDLC attachment o n the slices of cement.Af -ter adding g allnut water ex tract,PDL Cs and AL Ps activit ies,the impairment of ultrastructur es and the number of cells at -tached to root slices can gr eatly improved.T he r esults become the most remarkable when the concentration is at 10 g/mL.Conclusion:T he results sugg est that gallnut water extract has prot ective effects on PDLC inhibited by L PS and has possibil-i ties to prevent and tr eat periodontal disease.Key words:g allnut water ex tract;PDL C;L PS;periodontal disease;ultr astructure cement ;AL P收稿日期:2005-05-25作者简介:杨错(1976-),女,辽宁沈阳人,硕士研究生,研究方向:药理学。
肉苁蓉对低温环境致急性肝损伤防治作用的实验研究
肉苁蓉对低温环境致急性肝损伤防治作用的实验研究【摘要】目的：探索肉苁蓉对低温环境诱导的急性肝损伤是否具有防治作用及可能存在的机制。
方法：通过检测大鼠血清中ALT、AST、SOD、MDA、TNF-α及caspase-3等指标的变化，观察大鼠肝脏病理的改变，以研究低温环境诱导下大鼠急性肝损伤的发生机制；通过比较肉苁蓉高剂量组、肉苁蓉低剂量组与水飞蓟宾葡甲胺片组之间的实验结果，进而探索肉苁蓉对低温环境诱导的急性肝损伤是否具有防治作用。
结果：（1）肝功：与模型组相比，各时间段的低剂量组均无统计学意义（P>0.05），2h组、4h组中水飞蓟组和高剂量组较之有差异（P<0.05）。
（2）氧化应激：各时间段内模型组较空白组SOD活力及MDA含量变化明显（P<0.01）；与模型组SOD活性比较，各时间段的高剂量组与水飞蓟组均有统计学意义（P<0.05）。
结论：肉苁蓉对低温环境诱导的急性肝损伤具有一定的防治作用，作用机制可能与其能够提高SOD的活性，降低炎性反应及抑制肝细胞凋亡有关。
【关键词】低温环境；急性肝损伤；肉苁蓉；保肝寒冷环境对机体活动的影响不可忽视[1]，肝脏在低温环境下,会出现酶活性改变、氧化应激、炎症反应及细胞凋亡等多种不同的病理变化，造成肝脏损伤[2]。
肉苁蓉具有保肝、抗氧化、抗炎、保护神经等作用。
本文通过研究低温环境诱导下大鼠急性肝脏损伤的发生机制，探索肉苁蓉对低温环境诱导的急性肝损伤的保护作用，为防治冷应激状态下的急性肝脏损伤提供理论依据。
资料与方法1.材料：肉苁蓉成人（以70Kg为标准）每日用量为12g，根据《中国药理实验方法学》公式计算出大鼠每日等效用药量为成人的6.3倍，即0.216g，大鼠每日灌胃量为2ml，两者结合计算出肉苁蓉煎成汤剂达到含生药 0.108g /ml的标准，以此为低剂量组，高剂量组煎成含生药 0.432g /ml的标准。
取水飞蓟宾葡甲胺片按照上述同样计算方式配成4.05mg/ml的浓度，冷藏备用。
DIABLO及caspase3在暴发性肝功能衰竭大鼠肝组织中的表达的开题报告
Smac/DIABLO及caspase3在暴发性肝功能衰竭大鼠肝组织中的表达的开题报告
背景：
暴发性肝功能衰竭（ALF）是一种严重的疾病，临床表现为急性肝功能损伤、多器官功能衰竭和高死亡率。
凋亡信号通路在ALF中发挥重要
作用。
Smac/DIABLO是一个协同作用于caspase的蛋白，参与调节凋亡
途径。
Caspase3是细胞凋亡的执行酶。
然而，关于Smac/DIABLO和caspase3在ALF的研究还比较少。
因此，本文旨在探究Smac/DIABLO
及caspase3在ALF大鼠肝组织中的表达情况，为ALF的诊治提供新思路。
目的：
研究Smac/DIABLO及caspase3在ALF大鼠肝组织中的表达情况，
探讨其可能的作用机制。
方法：
从大鼠肝脏组织中分离总RNA，通过反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测Smac/DIABLO及caspase3的mRNA表达水平。
同时，采用
免疫组化法检测Smac/DIABLO及caspase3的蛋白表达水平。
预期结果：
ALF大鼠肝组织中，Smac/DIABLO和caspase3的表达与正常大鼠相比将有所改变。
可能存在Smac/DIABLO通路调节caspase3介导的细胞
凋亡。
这些发现有可能提供新的治疗策略和预防ALF的方法。
结论：
该研究有望为ALF的早期检测、治疗和预防提供新思路。
同时，也
为ALF的临床处理提供了有益的参考。
SRC-3在CAR调节肝细胞增殖和药物代谢中起重要作用
SRC-3在CAR调节肝细胞增殖和药物代谢中起重要作用陶懿
【期刊名称】《肝脏》
【年(卷),期】2012(17)7
【摘要】孕烷X受体和组成型雄烷受体（CAR）等核受体（NR）在药物代谢中起重要作用，包括P450酶代谢、外源性代谢调节以及肝细胞增殖，然而CAR独自绑定到NR的应答元件不足以激活基因表达。
因此，我国厦门大学的Chen等通过研究类固醇激素受体辅助激活因子（SRC）家族成员，旨在阐明其在CAR介导的肝细胞增殖和药物代谢中的作用。
【总页数】1页(P528-528)
【关键词】肝细胞增殖;药物代谢;代谢调节;CAR;辅助激活因子;组成型雄烷受体;类固醇激素受体;孕烷X受体
【作者】陶懿
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】R735.7
【相关文献】
1.增殖细胞核抗原、人类N-myc下游调节基因1在肝细胞性肝癌中的表达及临床意义 [J], 李永明;范文艳;高建芝;许娜;崔鑫华;徐振平
2.肝药物代谢的调节:核受体PXR和CAR的作用 [J], 陆伦根
3.细胞核增殖抗原和细胞凋亡调节蛋白在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义 [J], 骆杨;霍亮;许家亮;何婷玉;欧龙;胡伟
4.长链非编码RNA ST8SIA6-AS1通过调节微小RNA-142-3p促进肝细胞癌的增殖和侵袭 [J], 张杨;马丹丹;刘志苏;金炜东;梅洪亮;张翌;张建新;李中虎
5.NF-κB信号通路在大鼠肝再生中调节肝细胞增殖的机理研究 [J], 王彬彬;常翠芳;鲁艳平;贾艺峰;徐存拴
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护肝解毒冲剂的抗肝损伤作用研究_李万平
体ER 结合形成ER 2复合物,通过核内转录通路,即在细胞核内利用DNA 反应元件的基因转录,翻译成效应蛋白,起到促进细胞增殖的生物学效应,取代完整的雌激素反应[9]。
黄芪因浓度不同分别起雌激素和抗雌激素的双相作用。
低浓度(1@10-5~1@10-8)m ol/L 时表现出雌激素作用,而高浓度(1@10-4~1@10-5)m ol/L 时则表现出抗雌激素作用。
其类似雌激素作用是由ER 介导的,标志是刺激肽合成酶2(PS2)mRNA 的表达;而抗雌激素作用并不由ER 介导,在ER 阴性细胞中仍然表现出抗增生作用[10]。
本研究首先成功构建了含有雌激素受体配体结合域的细胞杂交基因报告系统,并成功研究了黄芪注射液与雌激素受体的关系,为将来中药作用机理的研究提供了一个新的思路和技术平台。
参考文献:[1] Toft D ,Shy m al a G ,Gors k i J .A receptor m olecu le f or estrogens :stud i es us i ng a cell -free syste m [J].ProcNatlA cad SciU SA ,1967,57:1740.[2] Ku i per GG,Enm ark E ,Pelt o -H u i kkoM,et al.C l on i ng of a novelreceptor expressed i n rat prostat e and ovary [J].Proc N atl Acad S ciUSA ,1996,93:5925.[3]M ossel m an S ,Pol m an J ,D ij ke m a R.ER -B :i den tifi cati on and charact eriz ati on of a novel hum an estrogen receptor[J].FEBS Lett ,1996,392:49.[4]T re m blay GB ,Tre mb lay A ,Copel and NG,et a.l C lon i ng ,c h ro m o -so m al l ocalizati on ,and f uncti onal analysis of t h e m uri ne estrogen re -ceptor[J].M o lEndocri nol,1997,11:353.[5] Speirs V ,Keri n M J.Prognos tic si gn ifi gance of estrogen recep t or beta i n breast cancer[J].Br J Surg ,2000,87:405.[6] 徐仁宝.核受体家族研究的进展[J].第二军医大学学报,2001,22(11):1053.[7]任 澎,程祖亨,马依彤,等.黄芪注射液对充血性心力衰竭患者的急性血液动力学效应[J].中国中西医结合杂志,1998,18(8):460.[8] 邬伟里,戴耀华.黄芪治疗早期糖尿病肾病疗效观察[J].上海医药,2000,21(3):19.[9]郭瑞霞,魏丽惠.17B -雌二醇对子宫内膜癌细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B 信号传导通路的激活作用[J ].中华妇产科杂志,2004,39(7):469.[10]Ku rzerM S H or monal effects of s oy i soflavon es :s t ud i es i n p re m enopau s -al and post m enopausalw o m en[J].J Nutr .2000;130(3):660S.收稿日期:2006-01-05; 修订日期:2006-09-06基金项目:国家/八五0攻关课题(No .85-919-04-02)作者简介:李万平(1968-),女(汉族),四川泸州人,现任四川泸州医学院药理教研室药理学副教授,硕士学位,主要从事肝病的药物研究.护肝解毒冲剂的抗肝损伤作用研究李万平1,黄爱萍1,谢碧桃1,王永安1,孙同郊2(1.泸州医学院,四川泸州 646000; 2.泸州医学院附属中医医院,四川泸州 646000)摘要:目的观察护肝解毒冲剂的抗肝损伤作用。
Caspase-3及Cleaved-Caspase-3在氟中毒大鼠肝脏中表达
Caspase-3及Cleaved-Caspase-3在氟中毒大鼠肝脏中表达李永宁;肖晶晶;赵建勇【摘要】目的探讨氟中毒大鼠肝脏组织中Caspase-3及Cleaved-Caspase-3的表达情况.方法选用36只健康SD大鼠分为对照组、低氟组、高氟组(饮用含氟量分别为＜1 mg/L、5mg/L及50 mg/L的自来水),每组12只(雌雄各半).饲养6个月后,股动脉放血处死,氟离子电极法检测大鼠尿氟含量;自动血生化分析仪检测大鼠肝功能;免疫组织化学法和蛋白印记(Western blot)法检测Caspase3及Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平.结果低氟组、高氟组大鼠尿氟[(1.85±0.13)、(2.23±o.10) mg/L均高于对照组[(1.63±o.11) mg/L] (P＜0.05);低、高氟组大鼠血清谷丙转氨酶及谷草转氨酶活性[(48.66±5.55)、(68.17±8.39)U/L及(142.57±16.21)、(165.89±28.26) U/L]均高于对照组[(38.49±2.98)、(117.98±9.88) U/L](P＜0.05);高过剂量氟组Caspase-3及Cleaved-Caspase-3蛋白表达[(98.08±13.08)、(106.33±9.14)]明显高于对照组[(53.92±6.36)、(59.78±7.54)l(P＜0.05).结论氟可促进Caspase-3及Cleaved-Caspase3蛋白的表达,其可能参与慢性氟中毒所致肝脏损伤发病过程.【期刊名称】《贵州医药》【年(卷),期】2016(040)003【总页数】3页(P239-240,封3)【关键词】氟中毒;Caspase-3;Cleaved-Caspase-3;细胞凋【作者】李永宁;肖晶晶;赵建勇【作者单位】贵州医科大学,贵州贵阳550004;贵州医科大学,贵州贵阳550004;贵州医科大学,贵州贵阳550004【正文语种】中文【中图分类】R392.11氟不仅可以导致骨质疏松、骨硬化、骨软化等一系列的骨相损害，还能造成中枢神经、心血管、消化、内分泌等多系统的非骨相损害[1]。
肝动脉灌注3-溴丙酮酸阻断大鼠肝癌能量代谢的实验研究
凋亡 。 ② 取３ ０只 雄 性 Ｗｉ ｓ ｔ ａ ｒ 大 鼠建 立 肝 癌 模 型 ， 并 于肿 瘤 种 植 后 １ １ ｄ行 胃十 二 指 肠 动 脉 逆 行插 管动 脉 灌注治疗 ， 随机 分 为 动 脉 灌 注 ３ 一 溴丙酮 酸组 （ Ａ组 ） 、 生理盐水 组 （ Ｂ组 ） 和丝裂霉 素联合碘油 栓塞组 （ Ｃ 组） 。介 入 术 前 １ ｄ和 术 后 第 ３天 进 行 磁 共 振 成 像 （ ＭＲ Ｉ ） 检测肿瘤体 积 ， 之后处死 大鼠， 病 理 检 查 肿 瘤 坏
死 情 况 。结 果 体 外研 究 显 示 ， １ 、 ５ 、 １ ０ 、 ２ ５ 、 ５ ０￣ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ ３ － 溴丙 酮 酸 对 Ｗａ ｌ ｋ ｅ ｒ ２ ５ ６细胞 抑 制 率分 别为 （ １ ０ ． ９－ － ４
０ ． ９ ） ％、 （ １ ８ ． ５± １ ． ７ ） ％、 （ ２ ４ ． ２－ －１ ４ ． ３ ） ％、 （ ４ ０ ． ４ ±３ ． ０ ） ％、 （ ５ ５ ． １± ２ ． ４ ） ％， ５ ０ ｐ ￣ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ ３ 一 溴 丙 酮 酸 能 诱 导 Ｗａ ｌ ｋ ｅ ｒ ２ ５ ６细 胞 凋 亡 。３ 一 溴丙 酮 酸 治 疗 后 第 ３天 ， Ａ、 Ｂ、 Ｃ组 肿 瘤 平 均 体 积 分 别 为 （ ４ ８ ２ ． ９ ８±１ ０ ３ ． ８ ８ ） ｍｍ ３ 、 （ ４ ３ ２ ． ４ ４± ４ ３ ７ ． ３ ９ ） ｍ ｍ 、 （ ５ ６ ９ ． ７ ９±２ ６ ８ ． ８ ９ ） ｌ ｎ ｍ ， 组 问差 异 无 统 计 学 意 义 （ Ｐ＞０ ． ０ ５ ） 。 Ａ 组 中 ７只 Ⅲ级 坏
脂肪间质干细胞对肝星状细胞活化、增殖、凋亡相关作用的研究
Ａ Ｓ ｓ 有 分 泌 细 胞 因子 抑 制 Ｈ Ｃ 活 化 增 殖 ， 进 凋 亡 的 潜 能 。Ａ Ｓ ｓ的治 疗 作 用 可 能 与其 分 泌 的 细 胞 因 子 有 关 。 ＤＣ具 Ｓｓ 促 ＤＣ
３ ０ ２５ ００，Ｃｈｎａ ｉ
Ａｂ ｔａ ｔ Ｏｂ ｅ ｔ ｅ Ｔ ｎ ｅｔ ａｅｔｅｒｇ ｌｔｏ ｆ ｃ ｆａ ｉｏｅ ｄ ｒ ｅ ｔｍ ｅｌ Ａ Ｃｓ ｎｈ ｐ ｔ ｔｌ ｔ ｅ ｓ（ｔ Ｃｓ ｓｒ ｃ ｊｃｉ ｏｉｖ ｓ ｇｔ ｈ ｅ ｕａｉｎ ｅｆ ｔｏ ｄｐ ｓ ｅ ｖ ｄ ｓ ｖ ｉ ｅ ｉ ｅ ｃｉｓ（ ＤＳ ）ｏ ｅ ａｉ ｓｅｌ ｅｃｌ ｔＳ ） ｃ ａ ｌ
ｎ ， ｈ ｎ ｉ ． ｅａ ｔ ｅ ｔ ｆ Ｈ ｐ ｔｂ ｉｒ ｎ ａ ｃ ａｉ Ｓ ｒｅ ， ｈ ｉ ｔ ｆ ｌ ｔ ｏ ｉ ｌ Ｗｅｚ ｏ ｄｃ ｌ ｏｌ ｅ Ｚ ｅ ａ ｇ ｇ Ｚ ａ ｇ Ｑ ｙ Ｄ ｐ ｒ ｎ ｏ ｅ ａ ｉａｙ ａ ｄ Ｐ ｎｒ ｔ ｕｇ ｒ Ｔ ｅ Ｆｒ ｉ ｉ ｅ Ｈ ｓ ｔ ， ｎｈ ｕ Ｍｅ ｉ ｌ ｇ ， ｈ ｉ ｕ ｍ ｏ ｌ ｅ ｃ ｙ ｓＡ ａ ｄ ｐａ ａ Ｃ ｅ ｊｎ
纳豆激酶对大鼠酒精性肝损伤的干预作用及机制的研究黄思敏1顾越1王振军2隋宏书3
纳豆激酶对大鼠酒精性肝损伤的干预作用及机制的研究黄思敏 1 顾越 1 王振军 2 隋宏书 3*发布时间：2023-06-09T07:26:12.487Z 来源：《医师在线》2023年5期作者：黄思敏 1 顾越 1 王振军 2 隋宏书 3*[导读] 目的研究纳豆激酶对大鼠酒精性肝损伤的干预保护作用及其机制。
1.山东第一医科大学口腔医学院，济南，2500002.山东第一医科大学临床与基础医学院病理学与法医学系济南 2500003.山东第一医科大学临床与基础医学院组织学与胚胎学系济南 250000摘要：目的研究纳豆激酶对大鼠酒精性肝损伤的干预保护作用及其机制。
方法适应性饲养一周体重大致相同的雄性SD大鼠一周后，将其随机分成三组：对照组（A组）、模型组（酒精肝）（B组）、纳豆激酶组（C组），每组20只。
A组每日给予生理盐水灌胃，同时B组、C组每日给予56度红星二锅头灌胃，由于一次性灌入过大剂量酒精易导致大鼠死亡，故酒精灌入量应逐渐增加，剂量依次为5ml/(kg•bw•d)1周，8ml/(kg•bw•d)1周，随后每周10ml/(kg•bw•d)持续五周，期间C组给予纳豆激酶每天500FU/(kg•bw•d)，A组、B组给予生理盐水，剂量与纳豆激酶相同，每天观察大鼠活动状态，测量大鼠体重。
最后一次灌胃给药后，禁食12h，测量大鼠体重和肝脏湿重，处死3组小鼠，采集腹主动脉血液检测ALT、AST水平，计算肝脏指数，HE染色法观察大鼠肝脏变化，进行数据统计与分析。
结论纳豆激酶可以防治大鼠酒精性肝损伤，保护肝脏。
关键词：酒精性肝损伤；纳豆激酶；大鼠1. 前言长期大量的进行饮酒会导致的肝脏损伤疾病，其中酒精性肝损伤(alcoholic liver disease，ALD)就是主要疾病之一，随着社会发展、酒桌文化的出现、人们饮食不规律等影响，酒精性肝病发病率逐年升高[1]，饮酒导致的肝脏相关疾病正逐渐成为导致肝脏疾病的第二大病因，是威胁人民生活的常见病[2]。
IL-1β诱导肝星状细胞IL-1Ⅰ型受体及AP-1表达的研究
山东 医药 ２ １ ０ ０年第 ５ ０卷 第 期
Ｉ一Ｉ诱 导 肝 星 状 细 胞 Ｉ一 Ｉ型受 体 Ｌ１ ３ Ｌ１ 及 Ａ 一 达 的 研 究 Ｐ １表
张亚 平 刘 ， 玲 姚希 贤 ，
（ １河北 医科 大学 第三 医院 ， 家庄 ０ ０ ５ ； 石 ５ ０ １２河 北 医科 大 学 第二 医院 ）
Ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｆＩ一 ａ ｄ ＡＰ－ ｉｄ ｃ ｄ ｂ Ｌ １ ａ ｅ ａ ｉ ｔ ｌ ｔ ｅｌ ｘ ｒｓ ｉｎ ｏ Ｌ １ Ｉ ｎ Ｒ １ ｎ ｕ ｅ ｙ Ｉ －Ｂ ｉ ｒｔｈ ｐ ｔ ｓｅｌ ｅ ｃ ｌ ｎ ｃ ａ
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３种模式，其对应的力学参数如表２所示。在流体切应 力加载过程中，除蠕动泵以外的整个装置均放置于细 胞培养箱内，最大程度上保证细胞生存环境的一致。 在储液瓶中加入３７℃预热的ｐＨ值稳定在７．２—７．４ 之间高糖ＤＭＥＭ培养基，连接整个系统，缓慢上调蠕 动泵转速（缓慢上调转速以利于细胞适应，约２ ｍｉｎ内 即可），直到达到目标流量。对贴壁肝细胞加载不同 时间长度的流体切应力（分别加载１２、２４、７２、１６８ ｈ）。 空白对照组细胞，在相同的实验条件下不加载流体切
肝再生；
永生化大鼠ＢＲＬ－３Ａ肝细胞株；
流体切应力；
肝细胞生长因子
基金项目：国家自然科学基金面上项目（８１０６００４１）；云南省科技厅．昆明医科大学联合基金
ｏｎ
Ｍａ Ｘｉｎｙｉ，
地历咖增，Ｗｅｉ Ｊｉａ，Ｍａ Ｄｕｏ，Ｄｅｎｇ Ｙａｎ，Ｌｉｕ Ｑｉａｏｙｕｎ，Ｃ．ａｏ Ｚｅｈａｉ，Ｃａｉ Ｑ谊昭，Ｚｈｉ Ｃｈｕｎｐｉｎｇ Ｔｈｅ ３ｒｄ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｓｕｒｇｅｒｙ，ｔｈｅ ４ｔｈ Ａｆｆｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｋｕｎｍｉｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ
ｉｍｍｏｒｔａｌｉｚｅｄ ｒａｔ ｓｈｅａｒ ｓｔｒｅｓｓ ｗａｓ
ｂｕｉｌｔ，ｉｎ ｗｈｉｃｈ ｔｈｅ ｉｍｍｏｒｔａｌｉｚｅｄ ｒａｔ ＢＲＬ一３Ａ ｌｉｖｅｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ｗｅｒｅ ｃｕｌｔｕｒｅｄ．Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗａｓ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｇｒｏｕｐ Ａ（ａｄｄｅｄ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ（ＨＧＦ））ａｎｄ ｇｒｏｕｐ Ｂ（ｄｉｄ ｎｏｔ ａｄｄ ＨＧＦ），ｉｎ ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ ０、 １２ ｄｙｎ／ｅｍ２ ａｎｄ ２４ ｄｙｎ／ｅｍ２ ｆｌｕｉｄ ｓｈｅａｒ ｓｔｒｅｓｓ ｗａｓ ｌｏａｄｅｄ ｓｅｐａｒａｔｅｌｙ．Ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｄｙｎａｍｉｃｓ
注：Ａ：未添加ＨＧＦ组；Ｂ：添加ＨＧＦ组；ＨＧＦ：肝细胞生长因子 １
ｘ
１０ ７／Ｌ的细胞悬液，以充满小室为准（约ｌ
ｍ１），盖
上培养皿的盖子后放入细胞培养箱继续培养，常规换 ３．流体剪切力加载装置的制作：ＹＺｌ５１５Ｘ型号的 蠕动泵，其流量范围：０．２７～１６２．００ ｍｌ／ｍｉｎ，符合本实 验要求。重庆医科大学附属永川医院中心实验室制作 的平行平板流体小室，小室底部为一普通载玻片的玻 液，至９０％融合后连接加力装置，在加力１２、２４、４８、
６５００２１，Ｃｈｉｎａ
Ｍａ Ｘｉｎｙｉ ａｎｄ Ｙｕ Ｚｈｉｙｏｎｇ
ａｒｅ ｔｈｅ ｆｉｎｔ ａｕｔｈｏｒｓ ｗｈｏ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｄ ｅｑｕ血ｌｙ ｔｏ ｔｈｅ ａｒｔｉｃｌｅ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：Ｙｕ Ｚｈｉｙｏｎｇ，Ｅｍａｉｆ：ｒｓｙｂｙ＠１３９．ｃｏｍ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓｈｅａｒ ｓｔｒｅｓｓ ｏｎ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＢＲＬ一３Ａ ｌｉｖｅｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｃｅｌｌ ｃｕｌｔｕｒｅ ｄｅｖｉｃｅ ｗｈｉｃｈ ｃｏｕｌｄ ｌｏａｄ ｗｉｔｈ ｆｌｕｉｄ
Ｆｕｎｄｓ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｙｕｎｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ ａｎｄ Ｋｕｎｍｉｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
・１５３５・
Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ
（２０１４ＦＢ０７３）
多种化学因子参与肝再生的调节，其中，肝细胞生 长因子（ＨＧＦ）介导的ｃ．Ｍｅｔ信号传导通路对促进肝细 胞增殖有重要作用…。近年来，人们注意到门静脉血 流动力学的变化对肝再生有明显的影响，是启动甚至 是终止肝再生可能的必要因素，其机制可能是门静脉 血流力学改变了肝细胞周围的微环境，胞外的物理／化 学信号转导至细胞内，经过系列级联放大反应，表现出 肝细胞增殖等生物学行为的变化心圳。向正常大鼠的 门静脉中注入ＨＧＦ，肝细胞增殖不明显，而向行３０％ 肝切除术的大鼠门静脉中注入ＨＧＦ，肝细胞明显增 殖∞Ｊ。由此，我们推测，血流力学因素和化学因素 （ＨＧＦ等）均参与了肝再生过程的调节，两者可能对肝
ｔｌｅ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｎｏｎ—ｓｔｒｅｓｓ ｇｒｏｕｐ ａｔ １６８ ｈ ｔｉｍｅ ｐｏｉｎｔ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｆｌｕｉｄ ｓｈｅａｒ ｓｔｒｅｓｓ ｃｏｕｌｄ ｐｒｏｍｏｔｅ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｍｍｏｒｔａｌｉｚｅｄ ｒａｔｓ ＢＲＬ一３Ａ ｌｉｖｅｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ，ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ｍｏｒｅ ａｐ・
细胞增殖还可能有协同作用。我们以永生化大鼠
璃部分（注意避开磨砂部分），小室侧面以及顶部由聚 甲基丙烯酸甲酯（ＰＭＭＡ）制成，小室内腔尺寸为
３０．０ ｍｍ×１０．０ ｍｍ×０．１
ｍｍ。将平行平板流体小室、
蠕动泵和储液瓶通过硅胶管连接在一起即成为流体应 力加载细胞培养装置。 ４．流体切应力大小的计算与加载：流体切应力强 度计算及相应参数，细胞在流体小室内承受的流体切 应力计算公式为：Ｔｗ＝６斗Ｑ／ａ２ｂ。其中，Ｑ为循环液流 量，斗为循环液黏滞系数［本实验循环液为高糖杜尔伯 科改良伊格尔（ＤＭＥＭ）基础培养基，黏滞系数为
１６８
ｈ细胞增殖动力学的变化。结果未加载流体切应力时，Ｂ组细胞增殖优于Ａ组；加载流体切应
力越大，Ａ组和Ｂ组细胞均增殖更明显；在同一时间点加载同样大小切应力时，Ｂ组细胞增殖由于Ａ 组（Ｐ＜０．０５）。加载大小为２４ ｄｙｎ／ｃｍ２的切应力培养细胞２４ ｈ，Ａ和Ｂ组的细胞计数和ＣＣＫ－８分光 光度计吸光度（Ａ）值均达到最高值，细胞计数分别为Ａ组（１０．７３ ４－２．５４）×１０６个和Ｂ组（１５．９３ ２．００）×１０６个（Ｐ＜０．０５），ＣＣＫ一８分光光度计Ａ值分别为Ａ组（２．０４ ４－０．５１）和Ｂ组（３．０９
ｉｎｇ ｆｌｕｉｄ ｓｈｅａｒ ｓｔｒｅｓｓ ｏｆ ２４ ｄｙｎ／ｃｍ２ ａｔ ｔｈｅ ２４ ｈ ｔｉｍｅ ｐｏｉｎｔ，ａｌｌ ｇｒｏｕｐｓ ｒｅａｃｈｅｄ ｔｈｅ ｐｅａｋ ｏｆ ｅｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ， ｉｎ ｗｈｉｃｈ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｗａｓ ｓｔｉｌｌ ｂｅｔｔｅｒ ｔｈａｎ Ｇｒｏｕｐ Ａ（ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｗａｓ（１５．９３ ４－２．００）×１００ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ
ｐａｒｅｎｔ
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｌｉｖｅｒ
ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｆａｃｔｏｒｓ（ｆｌｕｉｄ ｓｈｅａｒ ｓｔｒｅｓｓ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ＨＧＦ）． Ｉｍｍｏｒｔａｌｉｚｅｄ ｒａｔｓ ＢＲＬ一３Ａ ｌｉｖｅｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ； Ｆｌｕｉｄ ｓｈｅａｒ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ；
ｗａｓ
Ｒｅｓｕｌｔｓ
ｅｒ
ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｄｉｒｅｃｔ ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｏｒ ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｋｉｔ一８（ＣＣＫ一８）ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｉｎ １２，２４，４８，１６８ ｈ． Ｗｉｔｈｏｕｔ ｌｏａｄｉｎｇ ｆｌｕｉｄ ｓｈｅａｒ ｓｔｒｅｓｓ，ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｗａｓ ｂｅｔｔｅｒ ｔｈａｎ ｇｒｏｕｐ Ａ；ｔｈｅ ｈｉｓｈ—
ａｎｄ（１０．７３ ４－２．５４）×１００ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ａ，ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ Ａ ｏｆ ＣＣＫ一８
２．０４ ４－０．５ １ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ａ
ｗａｓ
３．０９ ４－０．４０ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ ａｎｄ
ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ（Ｐ＜０．０５）；Ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｄｒｏｐｐｅｄ ｇｒａｄｕａｌｌｙ ｄｕｒｉｎｇ ２４－７２ ｈ， ｂｕｔ ｉｔ ｓｔｉｌｌ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｇｒｏｕｐ ｗｈｉｃｈ ｗｉｔｈｏｕｔ ｌｏａｄｉｎｇ ｆｌｕｉｄ ｓｈｅａｒ ｓｔｒｅｓｓ（Ｐ＜０．０５），ｉｔ ｇｏｔ ｃｌｏｓｅ ｔｏ ｏｒ ａ ｌｉｔ－
应力。
表２实验模式下流体切应力加载装置的力学参数
ｄｙｎ／ｃｍ２的流体切应力，将力值大小标示为下标以
区别各实验分组。检测不同时相点细胞增殖动力学情
况，如表１。
表１实验分组
应力大小 （ｄｙｎ／ｃｍ２）
壁塑堕生量旦王
无 有
５．直接细胞计数：平行平板流动小室高温高压灭 菌后放人细胞培养皿中，从人口处加入终质量浓度为
４－４－０．４０，源自Ｐ＜０．０５）；２４～７２ ｈ逐渐下降，但仍高于未加载应力组（Ｐ＜０．０５），１６８ ｈ则接近或略高于未加载应 力组。结论流体切应力对永生化大鼠ＢＲＬ－３Ａ肝细胞株增殖有促进作用，而且，理化因素（流体切
应力联合ＨＧＦ）共同作用下肝细胞增殖更明显。 【关键词】
（２０１４ＦＢ０７３）
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｆｌｕｉｄ ｓｈｅａｒ ｓｔｒｅｓｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｍｍｏｒｔａｌｉｚｅｄ ｒａｔｓ ＢＲＬ－３Ａ Ｈｖｅｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．Ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－９０３０．２０１６．０６．０３１
【摘要】
目的观察不同大小流体切应力对永生化大鼠ＢＲＬ一３Ａ肝细胞株增殖动力学的影
响。方法构建流体切应力加载细胞培养装置，以永生化大鼠ＢＲＬ－３Ａ肝细胞株为研究对象，实验 分为未添加肝细胞生长因子（ＨＧＦ）的Ａ组和添加ＨＧＦ的Ｂ组，各组加载０、１２、２４ ｄｙｎ／ｃｍ２大小的 流体切应力，采用直接细胞计数和分光光度计测定细胞计数试剂盒（ＣＣＫ．８）的方法检测１２、２４、４８、
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・实验研究・
流体切应力促永生化大鼠ＢＲＬ一３ Ａ肝细胞 增殖的研究
马心逸喻智勇 韦嘉