实验一CB法提取植物基因组DNA
细菌基因组DNA的提取
四、注意事项——核酸分离、纯化
四、注意事项——核酸沉淀、溶解
当沉淀时间有限时，用预冷的乙醇或异丙醇沉淀，沉淀会更充分 沉淀时加入1/10体积的NaAc（pH5.2，3M），有利于充分沉淀 沉淀后应用70％的乙醇洗涤，以除去盐离子等 晾干DNA，让乙醇充分挥发（不要过分干燥） 若长期储存建议使用TE缓冲液溶解 TE中的EDTA能螯和Mg2+或Mn2+离子，抑制DNase pH值为8.0，可防止DNA发生酸解
原因
02
材料不新鲜或反复冻融 未很好抑制内源核酸酶的活性 提取过程操作过于剧烈，DNA被机械打断 外源核酸酶污染 反复冻融
尽量取新鲜材料，低温保存材料避免反复冻融 液氮研磨或匀浆组织后，应在解冻前加入裂解缓冲液 在提取内源核酸酶含量丰富的材料的DNA时，可增加裂解液中螯合剂的含量 细胞裂解后的后续操作应尽量轻柔 所有试剂用无菌水配制，耗材经高温灭菌 将DNA分装保存于缓冲液中，避免反复冻融
01
小心吸出上清液转入新的eppendorf管，用预冷的两倍体积的无水乙醇沉淀，放置－20℃冰箱30min，然后13000rpm离心15min，可见白色丝状沉淀物。
02
小心吸出液体，弃上清液，用预冷的400µl 70％乙醇洗涤2次，室温干燥后，用50µlTE （含20µg/ml的Rnase）溶解DNA，－20℃冰箱放置备用。
核酸制备的步骤： 破碎细胞
01
一、实验原理
核酸酶的抑制和抑制剂 降低温度，改变pH及盐的浓度，都利于对核酸酶活性的抑制，但均不如利用核酸酶抑制剂更有利，当然，几个条件并用更好。 对于DNA，抑制DNase活力很容易，但防止机械张力拉断则更重要。 对于RNA，因分子较小，不易被机械张力拉断，但抑制RNase活力较难，故在RNA提取中设法抑制RNase更重要。
分子生物学实用技术实验操作教程
实验一 CTAB法提取植物基因组总DNA及分析一、实验目的分离纯化植物DNA是植物分子生物学和基因工程的基本技术要求，CTAB法是提取植物基因组DNA的一种新型方法，可以抽提许多其它方法难以抽提的植物材料（如含多酚较多的植物材料、干燥后的茶叶、老树根等）中的DNA，得率高，质量好，用于PCR、Southern杂交、分子标记、DNA文库构建等。
二、基本原理植物材料在液氮中研磨可以迅速破坏其细胞壁，游离出细胞器和原生质，并防止DNA降解。
采用CTAB （十六烷基三甲基溴化胺，一种非离子型去污剂）抽提液抽提（65℃）上述研磨物，在高盐条件下不但溶解细胞膜相物质，而且CTAB与核酸形成可溶性的复合物，采用离心可以将变性的蛋白质和多酚、多糖等杂质（沉淀相）去除，水相中含有核酸与CTAB的复合物及其它可溶性的杂质。
直接向水相中加入异丙醇则导致核酸的沉淀，CTAB和其它多数杂质留于异丙醇与水的混合相中，吸出核酸沉淀团经过多次乙醇漂洗和沉淀、TE溶解得到DNA粗提物。
粗提的DNA一般可用于粗略PCR等。
用于精细PCR、Southern杂交和DNA文库构建的DNA则应进一步纯化。
用RNase水解RNA，用酚/氯仿/异戊醇和氯仿/异戊醇抽提去除蛋白杂质等，经乙醇沉淀后可获得较为纯净的植物总DNA。
三、实验材料甘蓝型油菜(Brassica napus L.)幼叶。
四、主要仪器设备及耗材Eppendorf 5804R低温离心机，Hettich Universal 32R低温离心机，Eppendorf Minispin离心机，Sanyo SIM-F124制冰机，TOMY SS-325自动灭菌锅，Millipore Elix纯水系统，Eppendorf research微量移液器系列，GingTian JA2003A电子天平，Satorius PB-10 pH计，HH·S21-4-S恒温水浴锅，UVP GDS8000自动高效紫外透视成像仪，DYY-8C型双稳定时电泳仪及水平电泳槽，Gene spec I快速核酸蛋白自动分析仪，长岭BCD-239家用冰箱，TNZ-30-50液氮生物容器及液氮，微波炉，研钵，离心管（15ml、1.5ml），枪头（10、200和1000μl），两面板，枪头盒，离心管盒（1.5ml）等。
分子生物学实验
实验一基因组DNA的提取1.实验目的：基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交（包括RFLP）及PCR分离基因等。
通过本实验熟悉不同生物的基因组DNA提取原理和方法，并具备根据不同材料调整提取液成分以获得高质量DNA的能力。
2.实验原理利用基因组DNA较长的特性，可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。
加入一定量的异丙醇或乙醇，基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中，可用玻棒将其取出，而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部，从而达到提取的目的。
在提取过程中，染色体会发生机械断裂，产生大小不同的片段，因此分离基因组DNA时应尽量在温和的条件下操作，如尽量减少酚/氯仿抽提、混匀过程要轻缓，以保证得到较长的DNA。
一般来说，构建基因组文库，初始DNA长度必须在100kb以上,否则酶切后两边都带合适末端的有效片段很少。
而进行RFLP和PCR分析，DNA长度可短至50kb，在该长度以上，可保证酶切后产生RFLP片段（20kb以下），并可保证包含PCR所扩增的片段（一般2kb以下）。
不同生物（植物、动物、微生物）的基因组DNA的提取方法有所不同，不同种类或同一种类的不同组织因其细胞结构及所含的成分不同，分离方法也有差异。
在提取某种特殊组织的DNA时必须参照文献和经验建立相应的提取方法，以获得可用的DNA大分子。
尤其是组织中的多糖和酶类物质对随后的酶切、PCR反应等有较强的抑制作用，因此用富含这类物质的材料提取基因组DNA时，应考虑除去多糖和酚类物质。
材料植物愈伤组织，真菌菌丝，细菌培养液。
设备微量移液器，冷冻高速离心机，台式高速离心机，水浴锅，陶瓷研钵，50ml离心管（有盖）及5ml 和1.5ml离心管，弯成钩状的小玻棒。
试剂1.尿素提取液(7 mol /L Urea、50 mm ol /L Tris-HC l pH 8.0、62.5mmol /L NaCl、1% SDS )2.CTAB 提取液( 0.1 m ol /L Tris.HCl pH 7.5、1.5% CTAB、0.7 m o l /L NaCl、10 mm ol /LED TA) ，用前加入1%β-巯基乙醇3.CTAB/NaCl溶液：4.1g NaCl溶解于80ml H2 O,缓慢加入10g CTAB,加水至100ml。
分子实验报告
实验一植物基因组DNA的提取及其定性定量分析【实验目的】通过本实验学习利用CTAB法从植物组织中提取DNA 并通过琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度法对DNA进行定性定量分析。
【实验原理】通过CTAB法提取植物基因组DNA是由Murray和Thompson (1980) 修改而成的简便方法。
CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)是一种阳离子型去污剂，可溶解细胞膜，在高离子强度下(大于0.7M NaCl)，与蛋白和中性多糖形成复合物沉淀出来。
利用液氮对植物组织进行研磨，从而破碎细胞。
然后加入CTAB缓冲液将DNA溶解出来，再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋白，最后经乙醇沉淀得到DNA。
琼脂糖凝胶电泳是分离和纯化DNA片段的常用技术。
把DNA样品加入到一块包含电解质的多孔支持介质(琼脂糖凝胶)的样品孔中，并置于静电场上。
DNA分子在高于等电点的pH 溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。
DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。
由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此，在一定的电场强度下，DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应，即DNA分子本身的大小和构型。
具有不同的相对分子质量的DNA片段泳动速度不一样，DNA分子的迁移速度与相对分子质量的对数值成反比关系，分子量小的DNA分子比分子量大的DNA分子迁移速率快，迁移距离远，由此得到分离。
凝胶电泳不仅可分离不同相对分子质量的DNA，也可以分离相对分子质量相同，但构型不同的DNA分子。
如pUC19质粒，有3种构型：超螺旋的共价闭合环状质粒DNA(covalently closed circular DNA，简称cccDNA)，开环质粒DNA，即环状质粒DNA的1条链断裂，(open circular DNA，简称ocDNA)，线状质粒DNA，即环状质粒DNA的2条链在同一处发生断裂(linear DNA，简称L DNA）。
实验一细菌基因组DNA的提取
细胞破碎 机械方法： 超声波处理法、研磨法、匀浆法； 化学试剂法：用SDS处理细胞； 酶解法： 加入溶菌酶或蜗牛酶，破坏细胞壁。 DNA提取 SDS（十二烷基硫酸钠 ）法 ：SDS是有效的阴离子去垢剂, 细胞中DNA与 蛋白质之间 常借静电引力或配位键结合, SDS能够破坏这种价键。 CTAB（十六烷基三甲基溴化铵 ）法 ：CTAB是一种阳离子去垢剂，它可 以溶解膜与脂膜，使细胞中的DNA-蛋白质复合物释放出来，并使蛋白质 变性，使DNA与蛋白质分离。 DNA纯化（去杂质） 蛋白质： 常用苯酚：氯仿：异戊醇（25：24：1）或氯仿：异戊醇（24：1） 抽提。 RNA ：常选用RNase消化 ，或是用LiCl来消除大分子的RNA。 酚类物质： 提取液中加少量巯基乙醇，选取幼嫩的材料。 多糖： 提取液中加1％PVP。
三、操作步骤
1、细菌 37℃ 过夜培养，取1ml培养物 12000rpm 室温离心 1min。
2、沉淀物加入180ul TE缓冲液，充分重悬细菌；再加入20ul 50mg/ml溶菌酶，混匀后于 30℃温育10min。 3、12000rpm 离心 5min, 弃上清后加入200 ul Buffer BTL，漩涡震荡悬浮细胞。 4、加入25ul 蛋白酶K溶液，振荡器混匀，于55℃温育30min，每隔10min 漩涡震荡一次。 5、加入220ul Buffer BDL，颠倒混匀，于65℃温育10min。 6、加入220ul 无水乙醇，以最大速度漩涡震荡20s。 7、转移样品至DNA 纯化柱中，纯化柱下端安装2ml收集管,12000rpm离心1min使DNA结 合在纯化柱上，弃去收集管。 8、将DNA纯化柱安装到新的2ml收集管中，加入500ul Buffer HB，12000rpm离心1min， 弃去滤液。
动物dna的提取实验报告
动物dna的提取实验报告动物DNA的提取实验报告一、引言DNA（脱氧核糖核酸）是生物体内负责遗传信息传递的重要分子。
通过提取动物体内的DNA，我们可以更深入地了解动物的遗传特征和进化历程。
本实验旨在探究动物DNA的提取方法，并观察提取到的DNA的形态和纯度。
二、实验材料与方法1. 实验材料：- 实验动物：我们选择了小鼠（Mus musculus）作为实验对象。
- 实验器材：离心管、显微镜、酒精灯、显微镜玻片等。
- 实验试剂：细胞裂解缓冲液、蛋白酶K、乙酸酒精、异丙醇、盐酸、乙醇等。
2. 实验步骤：a) 准备工作：将实验器材消毒并摆放整齐，准备所需试剂。
b) 细胞裂解：将小鼠组织样本切碎并转移到离心管中，加入适量的细胞裂解缓冲液，并加入蛋白酶K，进行细胞裂解。
c) 蛋白质去除：加入盐酸和异丙醇，使蛋白质凝固并沉淀，离心后将上清液倒掉。
d) DNA沉淀：加入乙酸酒精，使DNA沉淀出来，用离心机离心后将上清液倒掉。
e) 洗涤与纯化：加入乙醇洗涤沉淀的DNA，用离心机离心后将上清液倒掉，重复此步骤两次。
f) DNA溶解：加入适量的去离子水，使DNA溶解。
三、实验结果与讨论通过以上步骤，我们成功地提取到小鼠的DNA，并进行了初步观察和分析。
1. DNA形态观察：在显微镜下观察提取到的DNA样本，我们可以看到DNA呈现出长丝状的形态，这是由于DNA分子的高度聚合性所致。
此外，我们还观察到DNA的颜色呈现出乳白色，与DNA的理化性质相符。
2. DNA纯度分析：为了进一步评估提取到的DNA的纯度，我们使用了比色法和吸光度测定法进行分析。
结果显示，提取到的DNA的吸光度比值（A260/A280）为1.8，接近1.8-2.0的理想范围，表明提取到的DNA相对纯净。
3. 实验优化与改进：在实验过程中，我们发现了一些问题和改进的空间。
首先，细胞裂解的时间和温度对DNA的提取效果有一定影响，可以进一步优化条件以提高DNA的提取率。
2022届高中生物新教材同步选择性必修第三册 第3章 实验突破一 DNA的粗提取与鉴定
一、实验原理1．提取DNA的原理利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
如：(1)DNA在酒精溶液中的溶解性：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精。
(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2_mol/L的NaCl溶液。
2．鉴定DNA的原理在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。
二、方法步骤1．称取约30 g洋葱，切碎，然后放入研钵中，倒入10 mL研磨液，充分研磨。
2．去除滤液中的杂质方案一在漏斗中垫上纱布，将洋葱研磨液过滤到烧杯中，在4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液方案二直接将研磨液倒入塑料离心管中，在1 500 r/min的转速下离心5 min，再取上清液3.DNA的析出方案一在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为95%)，静置2～3 min，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA；用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分方案二将溶液倒入塑料离心管中，在10 000 r/min的转速下离心5 min，弃上清液，将管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干4.DNA的鉴定取两支20 mL的试管，各加入2 mol/L的NaCl溶液5 mL。
将丝状物或沉淀物溶解于其中一支试管的NaCl溶液中，再向两支试管中加入4 mL的二苯胺试剂。
混合均匀后，将试管置于沸水中加热5 min，待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化。
三、操作提示1．以血液为实验材料时，每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠，防止血液凝固。
2．加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
四、关键点拨1．利用动物细胞提取DNA 破碎细胞的方法：动物细胞无细胞壁，可直接吸水涨破。
2．不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
《DNA的粗提取与鉴定》教师教案
口头表达和ppt
交流
讨论
1.PPT演示【知识体系梳理】答案
2.点拔学生学习过程中提出的问题
3.引导学生思考导学案中【基础学习交流】栏目的问题，要求通过小组讨论交流后，各小组将问题的答案以实物投影呈现出来，并给以评价。
1.修正答案
2.倾听老师的指点，解决学习中的问题，并作以记录
课堂教学过程设计
程序
学习内容
教师行为
学生行为
媒体运用
导入
新课
创设
情境
开门见山，使学生明白DNA提取技术的重要性，引发学生的学习兴趣。DNA的提取技术是整个基因工程技术基础。大到人类基因组计划，小到今天已经被我们熟知的亲子鉴定，DNA提取技术都是其中基础的基础。
积极思考老师所提出的话题
口头表达
第一
层级
2.让各组学生观察自己所提取出的DNA，并和相邻组间比较：提取量和DNA颜色。并分析出现不同差异的原因，主要从实验过程的操作差异分析。
3.布置完成导学案知识点二的1、2、3小问
1.学生亲自操作，完成DNA的粗提取与鉴定。
2.比较并分析与其他实验小组所提出的DNA的异同，找出不同原因
3.小组讨论出答案并展示
层级
学习
过程
反思
感悟
（一）提取DNA的思路与环节
１.选适宜的材料：DNA主要在染色体上，所以选动植物细胞，(植物细胞需要加洗涤济和食盐研磨),而动物细胞没有细胞壁更容易打破细胞结构，得到DNA
2.破坏细胞膜，核膜等细胞结构得到核物质
3.从核物质中将DNA与蛋白质等物质分开，得DNA
4.提纯，去掉DNA中的杂质，进一步提纯DNA
2.再次强调【基础智能检测】中所出现的典型问题。
CTAB提取拟南芥基因组DNA
用 70%预冷乙醇 1ml 冲洗沉淀两 次，上下颠倒几次，不能 Vertex， 12,000g 离心 3min，弃上清 乙醇充分挥发后（通风橱吹干， 为无色透明） ，用 30ul ddH2O 溶解。保存于冰上 电 泳
若没分离好 12,000rpm， 离 心 10min
取上清约 600ul，加入与上清等 体 积 的 氯 仿 ， 可 Vertex. 12,000rpm 离心 10min 离好（即上下分层）后 取上清约 350ul，加入 100%乙醇 约 700ul 混匀，上下颠倒几次， 不要 Vertex。 在-80℃放置 30min 4℃ 12,000g 离心 20min， 弃上清
生物科学专业分子生物学实验流程
实验一
植物基因组 DNA 的提取步骤
称取约 100mg 拟南芥嫩叶， 在液 氮中研buffer 混 匀，颠倒几次，可 Vertex.
65℃温浴 30min，其间每 10min 有规律的颠倒 tube
平衡至室温（开 tube 盖前甩一 下） ，加入 0.6ml 苯酚/氯仿（1︰ 1）混匀，充分悬浮，可 Vertex.
实验一基因组DNA的提取
实验十菌落PCR筛选阳性重组子【实验目的】学习利用菌落PCR技术筛选阳性重组子的方法【实验原理】细菌细胞内的重组DNA以裸露状态存在。
在高温条件下，细菌细胞破裂，细胞内DNA暴露并因高温的作用而变性成为单链状态的DNA，此时该DNA可作为模板用于PCR，进而检测该DNA中是否含有重组的外源DNA序列。
【仪器、材料与试剂】1 仪器生化培养箱，超净工作台，离心机，PCR仪，电泳仪，电泳槽，连续可调移液器，凝胶成像系统2 材料含待检测菌的阳性筛选平板，PCR试剂盒，引物1（primer 1）和引物2（primer 2），PCR管，移液器枪头，ddH2O，电泳级琼脂糖，Tris碱，硼酸。
3 试剂PCR试剂盒：10X PCR buffer，MgCL2或MgSO4，dNTPs，DNA聚合酶；primer 1和primer 2：均配成10μmol的使用液；DNA Marker：根据PCR产物大小确定。
【实验步骤】1 配制25μL的PCR反应体系10×buffer 2.5 μLMgCL2或MgSO4 1.5～2.5μL（若buffer里有，则可不加或少加）dNTPs（2µmol） 2.5μLprimer 1 (10µmol ) 1μLprimer 2 (10µmol ) 1μLTaq 酶（或其他用于PCR扩增的DNA聚合酶）1UddH2O 补至25μL最后用移液器挑取筛选平板中的待检测菌落，放入上述反应体系中。
2 PCR程序配制好反应体系后，将其放入PCR仪中。
然后根据最初设计引物时的相关数据，设定PCR程序中的每一步的反应条件。
通常设计的反应条件如下：94℃预变性3～5min；94℃变性30sec～1min50～60℃退火1min 30～35个循环72℃延伸2min72℃最终延伸8～10min设定好程序后，即可开始运行程序，进行PCR。
3 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测见实验六PCR完成后，取5～8μL PCR产物与适宜的上样缓冲液（loading buffer ）混匀后，加样电泳。
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实验一 CTAB法提取植物基因组DNA
实验目的：
学习从植物组织中（幼叶）提取基因组DNA的基本原理和方法。
实验原理：
采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞，由于植物细胞匀浆含有多种酶类（尤其
是氧化酶类），其对DNA的抽提产生不利的影响，所以在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强
还原剂（如巯基乙醇）以降低这些酶类的活性。在液氮中研磨，材料易于破碎，并减少研
磨过程中各种酶类的作用。
CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵)，是一种阳离子
去污剂，可溶解细胞膜并与核酸形成复合物。
该复合物在高盐的溶液中（>0.7mol/L NaCl）是可溶的，通过有机溶剂抽提，去除蛋
白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀（CTAB能溶于乙醇）即可使核酸分离出来。
CTAB溶液在低于15度时会形成沉淀洗出，因此再将其加入冰冷的植物材料中之前必须
预热（65度），且离心温度不要低于15度。
实验步骤：
1、取幼嫩的植物叶片（3-5g）剪碎液氮研磨成粉，转入1.5ml离心管内。加入等体积
的65℃预热的DNA提取缓冲液置于65℃的恒温水浴摇床上1-2h(1.5h)。
2、加入等体积的氯仿：异戊醇(24：1)，轻轻上下颠倒5分钟，静置5分钟，之后于12000rpm
离心10分钟。
3、吸取上层水相，重复步骤2一次。
4、吸取上层水相，加入预冷2/3体积的异丙醇，轻缓颠倒2分钟并置-20℃冰箱内10min，
待DNA沉淀后于12000rpm离心收集，收集的DNA于70%乙醇中洗2-3次。将弃去乙醇风干后的
DNA加适量水使其溶解。
5、待DNA完全溶解后加入1-2μl不含RNAaseA（10mg/ml），37℃保温1h以除去DNA中的
RNA。
6、于Eppendorf管中加入1mL氯仿：异戊醇（24：1）轻轻上下颠倒10分钟后10000rpm
离心10分钟。
7、吸取上层水相并先后加入1/10体积的3M醋酸钠及2倍总体积的预冷的无水乙醇，接
着置于-20℃冰箱，10分钟后10000rpm离心10分钟，弃去无水乙醇，加入70％乙醇洗涤2-3
次，风干，最后将DNA溶于适量（200-500μl） TE中。
8、待DNA完全溶解后进行1%琼脂糖凝胶电泳，检查DNA的质量并据已知的DNA 分子量标
准估计其浓度。调整浓度后的DNA置于-20℃备用。
实验试剂：
1、1M Tris-HCL（pH8.0）
121.1g Tris溶于800ml无菌水中，加浓HCL调pH到8.0，定容至1L，高压灭菌。
2、0.5M EDTA（pH8.0）
186.1g EDTA-Na·2H2O溶于800ml无菌水中，需用磁力搅拌器剧烈搅动，用NaOH调pH值
到8.0（约20g），定容至1L，高压灭菌。
3、3.5M NaCL
204.75g NaCL溶于1L无菌水中，高压灭菌。
4、10% CTAB溶液
10gCTAB溶于80ml无菌水中，定容至100mL，高压灭菌。
5、DNA提取液（500ml）
6、氯仿-异戊醇
（24:1体积比）
7、RNAaseA
8、异丙醇
9、无水乙醇
10、3M醋酸钠
11、1×TE缓冲液
实验仪器：
液氮罐、1.5ml离心管、1.5ml离心管架、恒温水浴摇床、枪及枪头（1ml和200ul）、离
心机（转速可调至4000rpm和10000rpm）、剪刀
3.5M NaCL 200ml
Tris-HCL 50ml
EDTA 50ml
10%CTAB 100ml
Water 100ml
注意事项
（1）叶片磨得越细越好。
（2）移液器的使用。
（3）由于植物细胞中含有大量的DNA酶，因此，除在抽提液中加入EDTA抑制酶的活性外，
第一步的操作应迅速，以免组织解冻，导致细胞裂解，释放出DNA酶，使DNA降解。