植物组织DNA的提取和鉴定
植物的DNA提取与鉴定

电泳结束后,取出凝胶板,在波长为254nm的凝胶成像系统下,观察电泳图谱,如果电泳条带清晰(如果EB染色看到桔黄色荧光条带,GV染色则看到绿色荧光条带),将凝胶照相。根据标准DNA的电泳图谱,可以得知样品DNA的分子大小。
(3) 再加两倍体积的预冷异丙醇,混匀静止10分钟以上,在4℃下10000rpm/分钟离心10分钟后,弃上清。
(4) 用600μL70%乙醇洗涤沉淀,重复一次,在室温下倒置晾干。
(5)沉淀用TE溶液溶解DNA,再加入RNase至终浓度50μg/mL,在37℃下保温半小时,将DNA样品放入冰箱保存。
Ⅱ 植物DNA 纯度的鉴定——紫外分光光度计法
一、原理
由于核酸中的碱基都具有共轭双键,所以具有紫外光吸收性质。核酸在紫外光谱区有一条典型的吸收曲线,其吸收高峰在260nm处,吸收低谷在230nm处。蛋白质在紫外区的吸收高峰在280nm处,所以核酸的紫外吸收光谱数据是鉴定核酸的重要依据之一。但紫外法不能区分DNA和RNA,只能用来鉴定核酸的纯度和含量。
在DNA提取过程中必须始终注意以下几个关键问题:
(1)DNA的二级结构和双链易受多种因素(如强酸、强碱、加热、低盐浓度、有机溶剂、酰胺类、尿素等)的影响引起双链解开,即“变性”,因此抽提时避免使用变性的条件。
(2)抑制内外源DNase的活力。DNase就象一把刀,它能把大分子的DNA切成碎片,所以要加以杜绝,现可以通过多种途径来做到这一点:a、低温操作;b、调节pH,使偏碱(pH8.0);c、抽提液中加表面活性剂;d、加螯合剂(EDTA)除去酶的铺助因子(Mg2+),使酶活性丧失。
纯度鉴定时,需测定在230、260和280nm处的消光值,经验数据表明,
植物基因组DNA的提取及分析

植物基因组DNA的提取及分析一、植物基因组DNA提取的步骤:1.样本的准备:从植物中选择健康和新鲜的组织样本,如叶片、茎、根等。
样本选择要避免含有大量的绒毛、叶色不正常等因素的部位。
2.细胞破碎:将样本放入液氮中迅速冷冻,然后用研钵和研钉对样本进行研磨,直至样本完全破碎。
3.细胞裂解:将研磨的样本加入裂解缓冲液,边振荡边研磨使样本均匀混合。
4.蛋白质去除:使用酚/氯仿提取法去除蛋白质。
加入等体积的酚/氯仿/异丙醇混合液,轻轻混合,然后离心离心管以分离上清和下层。
5.DNA沉淀:将上清转移至新的离心管中,加入等体积的冷乙醇进行DNA沉淀。
静置一段时间后,离心离心管以沉淀DNA。
6.DNA洗涤:将DNA沉淀物用70%乙醇洗涤一至两次,去除残留的盐和其他杂质。
7.DNA溶解:用适量的稳定缓冲液溶解DNA,使其达到一定浓度并避免降解。
二、植物基因组DNA分析的方法:1.PCR扩增:PCR技术可以通过放大DNA片段来研究特定基因或DNA 序列。
首先选择适当的引物,然后将DNA样本与引物、核酸酶、dNTPs等反应液混合,进行多次循环的变温扩增反应。
2.聚丙烯酰胺凝胶电泳:将PCR扩增的产物与DNA分子量标记物置于聚丙烯酰胺凝胶中,然后进行电泳。
电泳结束后,通过紫外线照射或染色剂染色,观察电泳图谱,可以得到DNA片段的大小和数量。
3.酶切电泳:使用限制性内切酶切割DNA片段,然后将切割后的DNA 片段进行电泳分析。
根据DNA片段的大小和相对迁移速度,可以进行DNA 的分析和比较。
4.南方杂交:将DNA样本与标记了放射性同位素或荧光染料的DNA探针进行杂交反应。
通过探针与目标DNA片段的互补配对,可以检测目标DNA的存在和数量。
5.DNA测序:通过测序技术获得DNA序列信息,可以揭示基因组的结构和功能。
通过以上方法,我们可以提取和分析植物基因组DNA,更好地了解植物基因组的组成和功能,为植物的遗传改良和研究提供重要的信息。
实验一 植物组织DNA的提取与琼脂糖凝胶电泳检测

实验一植物组织DNA的提取与琼脂糖凝胶电泳检测一、实验目的(1)掌握用氯仿-异戊醇-核糖核酸酶法提取植物组织DNA的基本操作。
(2)掌握植物基因组DNA的提取方法。
(3)了解琼脂糖凝胶电泳检测核酸的原理和操作。
二、实验原理利用液氮对植物组织冻干脆化进行研磨,从而破碎细胞。
细胞提取液能溶解膜蛋白而破坏细胞膜,使蛋白质变性而沉淀下来,核裂解液能使细胞核裂解释放DNA。
EDTA 抑制 DNA 酶的活性,氯仿、异戊醇能使蛋白质乳化沉淀去除蛋白,得到的 DNA 溶液经乙醇沉淀。
琼脂糖凝胶电泳是用于分离、鉴定和提纯DNA片段的标准方法。
琼脂糖是一种线性多糖聚合物。
浓度越高,空隙越小,其分辨能力就越强。
DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。
在一定电场强度下,DNA分子的迁移速度与相对分子质量的对数成反比。
溴化乙锭(EB)可嵌入DNA分子碱基对间形成荧光络合物,经紫外线照射后,可分出不同的区带,达到分离的目的。
三、材料、器材及药品1.材料玉米或水稻幼嫩的叶片2.药品十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)、山梨醇、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、盐酸(HCl)、乙二胺四乙酸(EDTA)、十二烷基肌氨酸钠、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、液氮、氯仿、异戊醇、异丙醇、乙酸钠、无水乙醇、RNA酶(RNase A)、乙酸、硼酸、溴酚蓝、溴化乙锭等。
3.器材研钵、研杵、玻璃棒、50mL离心管、1.5mL离心管、水浴锅、离心机、—20℃冰箱、高压灭菌锅、超净工作台、微量移液器及吸头、电泳仪、电泳槽及灌胶模具等。
4.试剂配制(1)DNA提取缓冲液:0.35mol/L山梨醇,0.1mol/L Tris-HCl(pH7.5)(用前需灭菌)。
(2)核裂解缓冲液:0.2mol/L Tris-HCl(pH7.5),0.05mol/L EDTA,2mol/L NaCl,2%CTAB(用前需灭菌)。
(3)5%十二烷基肌氨酸钠(用前需灭菌)。
植物基因组DNA的提取与检测

生命科学学院专业生物技术 2016级生技班666组姓名余梓棋同实验者黄剑宇黄少凯 2018年 5 月 8日题目:植物基因组DNA的提取与检测一.实验目的:1.了解真核生物基因组DNA提取的一般原理;2.掌握基因组DNA提取的方法和步骤。
二.实验原理1.液氮研磨:液氮能迅速将植物组织温度降到零度以下,使组织细胞变得脆而易碎,此时对植物组织进行研磨,能大大提高研磨的效率,植物组织迅速变为粉末状,增大表面积,提高提取植物DNA的效率。
2.SDS等离子型表面活性剂处理:SDS等离子型表面活性剂能溶解膜蛋白而破坏细胞膜,使核蛋白解聚,从而使DNA游离出来,且使DNA保持溶解溶液状态,易于分离3.苯酚和氯仿处理:苯酚和氯仿等有机溶剂能使蛋白质变性,并使抽提液分相,因核酸水溶性很强,经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质;4.异丙醇处理:上清液中加入异丙醇使DNA沉淀,离心后DNA沉淀于离心管底部,便于移去提取液。
而后将沉淀DNA溶于TE缓冲液中,即得植物基因组DNA溶液;5.DNA的琼脂糖凝胶电泳鉴定:带电荷的物质,在电场中的趋向运动称为电泳。
DNA的琼脂糖凝胶电泳可以分离长度为200bp至近50kb的DNA分子。
DNA的迁移率(U)的对数与凝胶浓度(T)之间存在反平行线性关系。
因此,要有效地分离不同大小的DNA片生命科学学院专业生物技术 2016级生技班666组姓名余梓棋同实验者黄剑宇黄少凯 2018年 5 月 8日段,选用适当的琼脂糖凝胶浓度是非常重要的。
三.实验材料及设备1.实验材料:新鲜的植物幼嫩叶片2.实验仪器:(1)研磨皿,10、100、1000μL取液器各一支,台式高速离心机,漩涡器;(2)电泳仪,电泳槽,样品槽模板(梳子),有机玻璃内槽,水平仪,取液器,微波炉,凝胶成像系统。
3.实验试剂:(1)植物DNA提取a.细胞提取液:100mmol/L Tris-HCl, pH8.0, 5mmol/L EDTA,500mmol/L NaCl, 1.25% SDS,1%β-巯基乙醇(去除酚类);b.氯仿:异戊醇(24:1);c.其它试剂:液氮、无水乙醇、 TE缓冲液、异丙醇、洗涤缓冲液;作用:氯仿可使蛋白质变性,有助于液相与有机相的分离。
植物dna提取方法

植物dna提取方法
提取植物的DNA可以通过以下几个步骤:
1. 植物材料准备:选择新鲜的植物组织,如叶片、茎、根或花朵。
使用刀片将组织切碎,将其放入离心管或试管中。
2. 细胞破碎:可以使用物理或化学方法将细胞破碎,以释放DNA。
常用的方法有研钵法、冻融法或特定的细胞破碎缓冲液。
3. DNA溶出:将细胞破碎液加入含有溶出缓冲液的试管中,使DNA从细胞中溶出。
溶出缓冲液通常含有EDTA、盐和洗涤剂等成分。
4. 蛋白质消化:加入蛋白酶K等蛋白质消化酶,去除DNA溶液中的蛋白质。
蛋白酶K可以在高温下活性化,并能降解多种蛋白质。
5. DNA沉淀:加入等体积的冷乙醇或异丙醇,使DNA分子沉淀。
可以通过离心沉淀DNA,并将上清液倒掉。
6. DNA纯化:用70%的乙醇洗涤DNA沉淀物,以去除杂质。
然后用适量的缓冲液重新溶解DNA。
7. DNA检测:可以使用紫外光谱仪或凝胶电泳等方法检测DNA的浓度和质量。
注意事项:
- 实验操作时应注意无菌条件,以避免污染。
- 建议在化学通风橱等无菌环境下进行DNA提取。
- 每个步骤中所用试剂和设备应事先消毒或经过无菌处理。
- DNA提取过程中应尽量避免DNA的降解,可以采取低温、迅速和轻柔的操作方式。
植物组织中dna的提取及鉴定实验报告

植物组织中dna的提取及鉴定实验报告实验目的:1、了解植物组织中DNA的提取和鉴定方法;2、学习DNA凝胶电泳和显色的实验操作;3、掌握实验数据处理和分析方法。
实验原理:DNA提取:DNA提取是从生物体组织中分离出DNA分子的过程。
植物组织的DNA提取主要采用CTAB法,其基本步骤如下:1. 将植物样本冷冻在液氮或在-80℃的冰箱中保存。
2. 取出植物组织并磨碎,用盐水淋洗去表面的杂质。
3. 加入抑制物质,如PVP(聚乙烯吡咯烷酮)和β-多聚糖。
4. 加入CTAB提取缓冲液,破解细胞壁并溶解细胞质。
5. 加入丙酮使DNA沉淀。
6. 安排离心管,离心沉淀。
7. 用乙醇洗涤、重悬DNA。
DNA鉴定:鉴定常用的方法包括电泳、吸光度法、荧光PCR 等。
本实验采用琼脂糖凝胶电泳法,基本步骤如下:1. 制备琼脂糖凝胶。
2. 调制电泳缓冲液。
3. 加载DNA样品。
4. 进行电泳。
5. 显色染色。
实验材料:1、植物样本(如玉米叶片、小麦胚芽等)2、CTAB提取缓冲液(含CTAB,EDTA,NaCl,Tris-HCl等)3、琼脂糖4、电泳缓冲液5、DNA标准品6、DNA分子量标记实验步骤:1. 取少量植物样本,将其用盐水淋洗,除去表面污垢和杂质。
2. 装入离心管并加入CTAB提取缓冲液,放在60℃水浴中孵育20分钟。
3. 加入冷丙酮沉淀DNA,离心5分钟。
4. 加入70%乙醇,洗涤DNA,离心5分钟。
5. 将DNA重悬于1 x TE缓冲液中,放在冰箱中储存。
6. 取一定体积的DNA样品,加入适量电泳缓冲液稀释。
7. 制备含DNA分子量标记的DNA样品,混合后加入琼脂糖凝胶槽中。
8. 加载DNA样品,与分子量标记一起进行琼脂糖凝胶电泳。
9. 进行电泳10-20分钟,直至DNA分子离子迁移完毕。
10. 取出琼脂糖凝胶,进行染色与分析。
实验结果:通过电泳可见DNA样品的带状图谱,观察带状图谱的大小、稠密程度、条带间距和条带的清晰度等特征,进而分析DNA样品的品质和纯度。
植物和动物的核酸dna和rna提取方法

提取植物和动物的核酸DNA和RNA是生物学研究中的重要步骤,它们可以帮助科学家们更深入地了解生物的遗传信息和基因表达。
本文将介绍植物和动物核酸DNA和RNA的提取方法,让读者对这一过程有一个清晰的认识。
一、植物核酸DNA提取方法1. 细胞破碎:需要将植物组织破碎,以释放细胞内的DNA。
这可以通过磨粉或切碎的方法来实现。
2. 细胞裂解:接下来,使用裂解缓冲液来裂解细胞膜和细胞壁,释放DNA分子。
裂解缓冲液的配方可以根据不同植物的特性进行调整。
3. 蛋白质沉淀:通过向裂解液中加入溴化苯酚等物质,可以沉淀掉大部分蛋白质,使得DNA分子得以分离。
4. 乙醇沉淀:将裂解液中的DNA用乙醇沉淀,这样可以将DNA分子从溶液中提取出来。
5. 溶解和纯化:将沉淀的DNA分子溶解在适当的缓冲液中,并进行进一步的纯化和浓缩处理,得到纯净的DNA溶液。
二、植物核酸RNA提取方法1. 细胞破碎:与DNA提取类似,首先需要将植物组织破碎,以释放细胞内的RNA。
2. 细胞裂解:使用特制的裂解缓冲液来裂解细胞膜和细胞壁,释放RNA分子。
不同植物组织的RNA特性可能有所不同,需要根据具体情况进行优化。
3. 蛋白酶处理:加入蛋白酶来降解蛋白质,使RNA得以更好地纯化。
4. 酚-氯仿提取:利用酚-氯仿混合液可以有效地将RNA从裂解液中提取出来,与DNA提取类似。
5. 洗涤和纯化:对得到的RNA进行洗涤和纯化处理,得到纯净的RNA溶液。
三、动物核酸DNA提取方法1. 组织裂解:将动物组织进行细胞破碎,释放细胞内的DNA。
2. 细胞裂解:使用特制的裂解缓冲液来裂解细胞膜,释放DNA分子。
对于硬质组织,可能需要较强的裂解条件。
3. 蛋白酶处理:加入蛋白酶来降解蛋白质,使DNA得以更好地纯化。
4. 酚-氯仿提取:利用酚-氯仿混合液可以有效地将DNA从裂解液中提取出来,与植物DNA提取类似。
5. 溶解和纯化:对得到的DNA进行溶解和纯化处理,得到纯净的DNA溶液。
分子鉴定植物流程

分子鉴定植物流程好的呀,那咱们就开始聊聊分子鉴定植物的流程吧。
一、取样。
植物分子鉴定的第一步当然就是取样啦。
这就像是要认识一个新朋友,得先找到这个朋友在哪里一样。
你得从你想要鉴定的植物上取一部分组织下来。
这个组织呢,可以是叶片呀,茎段呀,甚至是根的一小部分。
不过要注意哦,取样的时候要尽量保证取到的组织是健康的,没有病虫害的。
如果取到了生病或者被虫子咬得乱七八糟的组织,就像你要认识一个新朋友,结果找到的是个病恹恹的或者被欺负得很惨的人,那肯定是不太好的啦。
而且取样的工具也要干净,避免把其他杂质或者微生物带到样品里去,就像你去见新朋友,可不能带着一身脏东西去呀。
二、提取DNA。
取好样之后呢,就该提取DNA啦。
这可是个很神奇的过程呢。
你要把植物细胞里的DNA给弄出来,就像是从一个小宝藏盒子里把宝藏取出来一样。
这个过程有好多小步骤。
首先得把植物组织弄碎,把细胞打破,这样DNA才能跑出来呀。
可以用研磨的方法,就像把东西磨成粉一样,不过要很小心,可不能把DNA也给磨坏了。
然后呢,要加一些特殊的溶液,这些溶液就像是魔法药水一样,能把DNA和其他东西分开。
最后经过离心等操作,就能得到比较纯净的DNA啦。
这时候的DNA就像一个小精灵,静静地待在溶液里,等着我们去研究它呢。
三、选择合适的分子标记。
有了DNA之后,我们得选择合适的分子标记来鉴定植物。
这就好比给这个植物找一个独特的标签。
比如说,有一些常见的分子标记像SSR、RAPD之类的。
不同的植物可能适合不同的分子标记。
这就需要我们根据植物的种类、我们想要得到的鉴定结果的准确性等因素来选择。
如果选错了分子标记,就像给植物贴错了标签,那可就会得出错误的结果啦。
这就像是你把一个男生的名字标签贴到了女生身上,那不是乱套了嘛。
四、进行PCR扩增。
选好分子标记之后,就进入PCR扩增这个环节啦。
PCR扩增就像是一个复印机,不过它复印的是DNA。
它能把我们想要研究的那部分DNA大量地复制出来。
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拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定
实验目的
1.通过实验学习并掌握用CTAB来提取DNA的方法。
2.了解CTAB的成分及作用。
3.学习PCR的原理并掌握其方法。
4.学习琼脂糖凝胶电泳的原理与方法。
实验原理
植物组织中绝大部分是核DNA,它和组蛋白、非组蛋白结合在一起,以核蛋白(即染色质或染色体)的形式存在于细胞核内。
CTAB(十六烷基三甲基溴化铵,简称CTAB):是一种阳离子去污剂,可溶解细胞膜,它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中(0.7mol/L NaCl)是可溶的,当降低溶液盐的浓度到一定程度(0.3mol/L NaCl)时从溶液中沉淀,通过离心就可将CTAB与核酸的复合物同蛋白、多糖类物质分开,然后将CTAB与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液中,再加入乙醇使核酸沉淀,CTAB能溶解于乙醇中。
DNA是遗传信息的载体和基本遗传物质,它在遗传变异、代谢调控等方面起着重要作用,是分子生物学和基因工程研究的对象,但无论是研究植物DNA的结构和功能,还是开展外源DNA的转化、转导的研究,首先要做的就是从植物组织中提取天然状态的高分子量的纯化DNA。
T-DNA,转移DNA(transferred DNA ),是根瘤农杆菌Ti质粒中的一段DNA 序列,可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物基因组。
人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,获得转基因植株。
除用于转基因以外,T-DNA插入到植物的基因中可引起基因的失活,从而产生基因敲除突变体;T-DNA大多为单拷贝插入,使其利于进行遗传分析。
PCR基本原理:
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是一种分子生物学技术,用于在体外快速扩增DNA,具有类似细胞内DNA的复制过程:由一对
引物介导,通过温度的调节,使双链DNA变性为单链DNA、单链DNA能与引物复性(退火)成为引物-DNA单链复合物、以及在dNTPs存在下DNA聚合酶能使引物沿单链模板延伸成为双链DNA(引物的延伸);这种热变性-复性-延伸的过程,就是一个PCR循环;一般通过20-30个循环之后,就可获得大量的要扩增的DNA 片段。
琼脂糖凝胶电泳:
琼脂糖凝胶电泳是分离、纯化、鉴定DNA片断的典型方法,其特点为简便、快速。
DNA片断琼脂糖凝胶电泳的原理与蛋白质的电泳原理基本相同,DNA分子在高于其等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。
DNA分子在电场中通过介质而泳动,除电荷效应外,凝胶介质还有分子筛效应,与分子大小及构想有关。
对于线形DNA分子,其电场中的迁移率与其分子量的对数值成反比。
在凝胶中加入少量溴化乙锭(有毒!),其分子可插入DNA的碱基之间,形成一种光络合物,在254~365nm波长紫外光照射下,呈现桔红色的荧光,因此可对分离的DNA进行检测。
电泳时以溴酚蓝及二甲苯氰(蓝)作为双色电泳指示剂。
其目的有:①增大样品密度,确保DNA均匀进入样品孔内;②使样品呈现颜色,了解样品泳动情况,使操作更为便利;③以0.5×TBE做电泳液时溴酚蓝的泳动率约与长700bp的双链DNA相同,二甲苯氰(蓝)则与2Kbp的DNA相同。
T-DNA插入突变体PCR鉴定图解:
T-DNA插入突变体的引物位点
PCR电泳图
验仪器材料和试剂
实验材料:
拟南芥叶片
实验仪器:
电热恒温水浴锅;离心机;液氮罐;研钵;离心管;移液管;稳压稳流电泳仪;可调微量移液器;水平电泳槽;暗箱紫外透射仪。
实验试剂:
CTAB分离缓冲液;氯仿/异戊醇;无水乙醇;70%乙醇溶液;NaAc;TE缓冲液;电泳缓冲液;加样缓冲液;溴化乙锭(EB)溶液;琼脂糖凝胶(浓度为1.2%)。
实验步骤
⑴.植物DNA的提取
1.取CTAB分离缓冲液加入离心试管中,于65℃水浴预热;
2.取2-3片新鲜叶片于离心管,加入液氮研磨细粉末;
3.加入600 ul预热的CTAB分离液,轻轻转动,混匀,65℃水浴保温45min;
4.12000rpm离心10min;
5.将上清液转移到新离心管,加入等体积的氯仿/异戊醇,轻轻摇动,混匀;
6.12000rpm离心5-10min,将上清液转移到新离心管;
7.向上清中加入1/10体积3M NaAc,再加入两倍体积预冷的无水乙醇,轻轻混匀,冰上放置10min;
8.12000rpm离心10min,弃上清,加入500 ul70%乙醇溶液洗涤2min;
9.12000rpm离心5min,弃上清吸干残留并干燥;
10.加40 ulTE缓冲液溶解DNA。
⑵.PCR反应
按照下表装填反应体系:
调节PCR仪,使其按照94℃ 5min,94℃ 30s,53℃ 30s,72℃ 1min30s,重复33次,72℃ 10min的方式进行。
⑶.琼脂糖凝胶电泳
1.凝胶板的制备:
取琼脂糖0.48g,加0.5×TBE缓冲溶液40ml,微波熔化,制成1.2%的琼脂糖胶液。
将60℃凝胶不间断倒入胶床,高3-4mm,避免气泡,室温下凝固。
完全凝固后,置于电泳槽中,加入电泳缓冲液,高于胶面1-2mm,从一头轻轻斜拉出梳子,除去产生的气泡。
2.加样:
在两份PCR产物中各加4 ul6×Loading Buffer,在样品DNA中加缓冲液2 ul,混匀,用微量进样器加样,加样量10 l (加样时应防止碰坏样品孔周围的凝胶面以及穿透凝胶底部)。
3.电泳:
120V电压电泳,至少40min。
4.染色、观察、显微照相与记录:
关闭电源,取出胶床,浸入EB溶液中,10min后取出。
在紫外检测仪下观察凝胶中的DNA,并进行显微照相。
实验结果及分析
1.实验结果:
注释:
第一孔道为DL2000 marker;第五至七孔道为本人实验结果(25号样品),依次是PCR前的样品DNA、引物为LP&RP的PCR产物和引物为BP&RP的PCR产物。
2.实验分析:
若拟南芥为野生型,即无T-DNA插入,不存在BP位点,因此,电泳时,只有LP&RP的PCR产物存在,而BP&RP的PCR产物不存在;
若拟南芥为纯合突变体,即两条链均有T-DNA插入,都存在BP位点,因此电泳时,由于大片段的插入,LP&RP的PCR产物不存在,只有BP&RP的PCR 产物存在;
若拟南芥为杂合突变体,即有一条条链有T-DNA插入,其中存在BP位点,因此电泳时,突变的那条链,由于大片段的插入,LP&RP的PCR产物不存在,只有BP&RP的PCR产物存在,另外一条链则只存在LP&RP的PCR产物。
观察图片,两个PCR产物电泳所得的结果均是一条条带。
LP&RP的PCR产物大小在1000bp左右,BP&RP的PCR产物大小在800bp左右,与预期结果相符,因此,25号拟南芥为杂合突变体。