4定量分析方法概述

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(二)应用 1.对仪器的一般要求 (1)色谱柱 反相:十八烷基硅烷键合硅胶 正相:硅胶 离子交换:离子交换填充剂 C18硅胶表面
分子排阻:凝胶或高分子多孔微球
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一、高效液相色谱法
<2000 样品 分子量 >2000 填料直径30nm以上
填料直径15nm以下
温度要求:≤40℃ 流动相pH:2~8
121.4mg的C12H15ClO3
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二、应用与实例
(一)酸碱滴定法 实例三 丙戊酸钠含量测定—直接滴定(电位滴定法) 溶剂:水+乙醚 指示终点:电位法 滴定液:盐酸滴定液(0.1mol/L) 滴定度:每lml盐酸滴定液(0.1mol/L)相当于
16.62mg的C8H15NaO2
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一、基本原理及特点
酸碱滴定 氧化还原
化学反应 类型
沉淀、配位滴定
非水滴定
原料药纯度达到98.5%以上时首选容量分析法
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二、应用与实例
(一)酸碱滴定法 1.直接滴定法 适用范围:C· Ka≥10-8的弱酸、C· Kb≥10-8的弱碱 终点:指示剂变色 2.剩余滴定法 适用范围:药物难溶于水或有其他原因不宜采用
波长(nm) 吸收系数的规定值 吸收系数的许可范围 235(最小) 124.5 123.0~126.0 257(最大) 144.0 142.8~146.2 313(最小) 48.6 47.0~50.3 350(最大) 106.6 105.5~108.5
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二、应用
(二)仪器的校正和检定 3.杂散光的检查
全国高职高专药品类专业第二轮规划教材
—《药物分析》
第四章 药典中常见定量分析方法概述
药物的定量分析是指准确测定药品有效成分或 指标性成分的含量。 它是评价药品质量、判断药物优劣的重要手段。 对药物进行定量分析时,应按药品质量标准进 行测定。
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药物定量分析可选用化学分析法和仪器分析法。
T:0.95~1.05
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一、高效液相色谱法
(二)应用 3.测定方法 (1)内标法 对照品+内标
AS /cS 校正因子( f ) AR /cR
6min 8min
内标物峰As 对照品峰AR
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一、高效液相色谱法
(二)应用 3.测定方法 (1)内标法 供试品+内标
含量(c X ) f AX AS / cS
定容

100ml量瓶
对照品:呋喃唑酮
检测波长:367nm
对照品比较
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第三节
色谱分析法
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在《中国药典》现行版中,使用的色谱法有 高效液相色谱法、气相色谱法、离子色谱、凝 胶色谱等
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一、高效液相色谱法
(一)基本原理
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一、高效液相色谱法
试剂 碘化钠 亚硝酸钠 浓度 (g/100ml) 1.00 5.00 测定用波长(nm) 220 340 透光率(%) <0.8 <0.8
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二、应用
(三)对溶剂的要求 含有杂原子的有机溶剂,使用范围不能小于截 止使用波长
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三、实例
(一)奥沙西泮片含量测定
20片,精密称定
(二)非水溶液滴定法 1.有机弱碱 Kb≥10-10:冰醋酸介质 Kb<10-10:冰醋酸-醋酐的混合溶液为介质,且随着 醋酐用量的增加,滴定范围显著增大 2.有机酸碱金属盐的滴定:高氯酸滴定液直接滴定
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二、应用与实例
(二)非水溶液滴定法 3.有机碱的氢卤酸盐:3~5ml醋酸汞冰醋酸溶液 4.有机碱的硫酸盐:只能滴定至HSO4-的程度 5.有机碱的硝酸盐:电位法指示终点 6.有机碱的有机酸盐:冰醋酸或冰醋酸-醋酐的混合溶 剂,结晶紫为指示剂,高氯酸为滴定液
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二、应用与实例
(三)氧化还原滴定法 2.亚硝酸钠滴定法 (1)基本原理
H+ Ar-NH2+RCOOH Ar-NHCOR+H2O △ Ar-NH2+NaNO2+2HCl Ar-N2+Cl-+NaCl+2H2O
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二、应用与实例
(三)氧化还原滴定法 2.亚硝酸钠滴定法 (2)应用:含有芳香第一胺或水解后能生成芳香第一胺 的化合物 注意:加入过量的盐酸 在室温条件(10~30℃)下滴定
除另有规定外,定量分析 时分离度应大于1.5
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一、高效液相色谱法
(二)应用 2.高效液相色谱系统适用性试验 (3)重复性(R) 连续进样,峰面积,RSD≯2.0%
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一、高效液相色谱法
(二)应用 2.高效液相色谱系统适用性试验 (4)拖尾因子(T)
W0.05 h T 2 d1
入适当的显色剂显色后测定
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二、应用
4.标准曲线法 以吸光度与相应的浓度绘制标准曲线,再根据 供试品的吸光度在标准曲线上查得其相应的浓度, 并求出其含量
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二、应用
(二)仪器的校正和检定
单色器 光源
吸收池
检测器
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二、应用
(二)仪器的校正和检定 1.波长:常用汞灯中的较强谱线、氘灯的谱线 、钬玻璃尖锐吸收峰、高氯酸钬溶液 2.吸光度的准确度:重铬酸钾的硫酸溶液
H3C H3C N N
CH3 O N S O O ONa ,H2O
安乃近片含量测定—直接碘量法
溶剂:乙醇与0.01mol/L盐酸溶液 滴定液:碘滴定液(0.05mol/L) 终点:浅黄色(或带紫色)在30秒钟内不褪
滴定度:每1ml碘滴定液(0.05mol/L)相当于17.57mg
的C13H16N3NaO4S•H2O
H N
CH3 CH3 CH3
, HCl
芳香第 一胺
盐酸克仑特罗含量测定
滴定液:亚硝酸钠滴定液(0.05mol/L) 滴定度:每lml亚硝酸钠滴定液(0.05mol/L)相当于
15.68mg的C12H18Cl2N2O· HCI
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第二节
紫外-可见分光光度法
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分光光度法是通过测定物质在特定波长处或一 定波长范围内的吸光度或发光强度,对该物质进行 定性和定量分析的方法
5ml续滤液 研细
片粉,Wቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
200ml量瓶
150ml甲醇
过滤
定容,摇匀 乙醇
奥沙西泮溶解 UV 检测波长:229nm 吸收系数:1252
100ml量瓶
稀释,定容
吸收系数法
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三、实例
(二)呋喃唑酮含量测定
约20mg,精密称定 研细 250ml量瓶+40ml二甲基甲酰胺 溶解 定容 精密量取10ml
重量分析法
化学测定法
容量分析法:滴定法,准确,RSD ≤0.2%, 专属性差,适用于化学原料药
光学分析法:紫外-可见分光光度法最常用, 灵敏度高,准确度高
仪器测定法
色谱分析法:高效液相色谱法(HPLC)、 气相色谱法(GC)最多 电化学分析法
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滴定分析法
紫外可见分光光度法
色谱分析法 分析方法的验证
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一、基本原理
定量依据:朗伯-比尔定律 单色光辐射穿过被测物质溶液时,在一定的浓度范 围内被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度 成正比
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一、基本原理法
朗伯-比尔定律
吸收系数,溶液浓度为1% (g/m1),液层厚度为lcm时 的吸光度值; 为液层厚度(cm) 为100ml溶液中所含被测物质 的重量(按干燥品或无水物 计算)(g);
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一、高效液相色谱法
(二)应用 2.高效液相色谱系统适用性试验 (1)色谱柱的理论板数(n)
n 5.54 (t R / Wh / 2 ) 2
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一、高效液相色谱法
(二)应用 2.高效液相色谱系统适用性试验 (2)分离度(R)
2 (t R 2 t R1 ) R W1 W2
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二、应用与实例
(三)氧化还原滴定法 1.碘量法 (1)基本原理
直接碘量法
滴定液:碘滴定液 指示剂:淀粉
碘量法
剩余碘量法
定量过量碘滴定液
滴定液:硫代硫酸钠 用于强氧化剂测定 KI+硫代硫酸钠
置换碘量法
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二、应用与实例
(三)氧化还原滴定法 1.碘量法 (2)应用 实例一
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二、应用与实例
O
O O CH3
(一)酸碱滴定法
Cl
H3C CH3
实例二 氯贝丁酯含量测定(剩余滴定法) 溶剂:中性乙醇
先水解 再回滴
水解溶液:定量过量氢氧化钠溶液(0.5mol/L) 指示剂:酚酞 滴定液:盐酸滴定液(0.5mol/L)
滴定度:每1ml氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)相当于
滴定时加入溴化钾作为催化剂
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二、应用与实例
(三)氧化还原滴定法 2.亚硝酸钠滴定法 (2)应用 滴定的方式:一次性加入大部分 指示终点的方法:永停滴定法
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二、应用与实例
(三)氧化还原滴定法 2.亚硝酸钠滴定法 (2)应用 实例 溶剂:盐酸溶液(1→2)
OH Cl H2N Cl
定量分析有关计算
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第一节
滴定分析法
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一、基本原理及特点
滴定分析法是将一种已知准确浓度的溶液(滴 定液)滴加到待测物质的溶液中,直到化学反应按 计量关系完全作用为止,然后根据所用滴定液的浓 度和体积计算出待测物质含量的一种分析方法,又 称“容量分析法”。
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二、应用与实例
(三)氧化还原滴定法 1.碘量法 (2)应用 实例二 右旋糖酐20葡萄糖注射液中葡萄糖 的含量测定—剩余碘量法
溶剂:定量过量(0.05mol/L)碘滴定液
滴定液:硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L) 指示剂:淀粉,近终点加入,滴定至蓝色消失 滴定度:每1ml碘滴定液(0.05mol/L)相当于 9.909mg的C6H12O6•H2O
直接滴定法
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二、应用与实例
(一)酸碱滴定法
CH3 H3C HCH2C H3C CHCOOH
实例一 布洛芬含量测定(直接滴定法) 溶剂:中性乙醇(对酚酞显中性) 指示剂:酚酞 滴定液:氢氧化钠(0.1mol/L)
羧基 酸性
滴定度(T):每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)
相当于20.63mg的C13H18O2
2
3
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二、应用
(一)测定方法 1.对照品比较法
AX cX cR AR
c X 为供试品溶液的浓度
AX 为供试品溶液的吸光度
c R 为对照品溶液的浓度
AR 为对照品溶液的吸光度
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二、应用
2.吸收系数法 在规定的波长处测定其吸光度,以该品种在规 定条件下的吸收系数计算含量 3.比色法 供试品本身在紫外-可见区没有强吸收,或在紫 外区虽有吸收但为了避免干扰或提高灵敏度,可加
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二、应用与实例
(二)非水溶液滴定法 实例 盐酸可乐定含量测定 溶剂:冰醋酸+醋酸汞
Cl N HN Cl
H N .HCl
有机碱氢 卤酸盐
滴定液:高氯酸滴定液(0.1mol/L) 指示剂:结晶紫 滴定终点:蓝绿色
滴定度:每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于
26.66mg的C9H9Cl2N3•HCl。
6min 8min
内标物峰As 供试品峰Ax
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一、高效液相色谱法
(二)应用 3.测定方法 (2)外标法
AX 含量(cX ) cR AR
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一、高效液相色谱法
(二)应用 1.对仪器的一般要求 (2)检测器
1
二极管阵列检测器 荧光检测器 蒸发光散射检测器
4
示差折光检测器 电化学检测器 质谱检测器
2
5
3
6
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一、高效液相色谱法
(二)应用 1.对仪器的一般要求 (3)流动相 甲醇-水 乙腈-水 尽可能少用含有缓冲液的流动相
1 A lg EcL T
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二、应用
含有共轭体系、芳香环等发色 基团,均可在紫外区(200~400nm
)或可见光区(400~760nm)产生
吸收
药物在可见光区若无吸收,但
在一定条件下加入显色试剂或经过 处理显色后,能对可见光产生吸收 。
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二、应用
1
空白对照:配制供试品溶液的同批溶剂 检测波长:最大吸收波长 吸光度数值:0.3~0.7
二、应用与实例
(二)非水溶液滴定法(主要介绍非水碱量法) 溶剂:非水介质 非水碱量法应用范围:有机碱及其氢卤酸盐、磷 酸盐、硫酸盐或有机酸盐、以及有机酸碱金属盐类 非水碱量法滴定液:高氯酸滴定液(0.1mol/L) 非水碱量法常用溶剂溶剂:冰醋酸、 冰醋酸-醋酸

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二、应用与实例
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