微生物学检验实验指导
微生物细菌实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解细菌的基本形态结构。
2. 掌握细菌的分离、纯化和鉴定方法。
3. 学习细菌生理生化反应的检测原理和应用。
二、实验原理细菌是单细胞微生物，具有典型的原核细胞结构。
通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应，可以鉴定细菌的种类。
三、实验材料与仪器1. 材料：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等纯菌株。
2. 仪器：显微镜、接种环、培养皿、酒精灯、无菌水、生理盐水、革兰氏染色液、生理生化试剂等。
四、实验方法1. 细菌形态观察- 将细菌涂布在载玻片上，进行革兰氏染色。
- 使用显微镜观察细菌的形态、大小、染色性等特征。
2. 细菌分离与纯化- 将纯菌株接种于琼脂平板，进行划线分离。
- 观察菌落特征，挑选单菌落进行纯化。
3. 细菌生理生化反应检测- 进行糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验、V-P试验等。
- 观察反应结果，判断细菌的生理生化特性。
五、实验结果与分析1. 细菌形态观察- 大肠杆菌：革兰氏阴性，呈杆状，两端钝圆。
- 金黄色葡萄球菌：革兰氏阳性，呈球形，呈葡萄串状排列。
- 肺炎克雷伯菌：革兰氏阴性，呈短杆状，两端钝圆。
2. 细菌分离与纯化- 划线分离后，观察到单菌落形成。
3. 细菌生理生化反应检测- 糖发酵试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均能发酵葡萄糖。
- 吲哚试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。
- 甲基红试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。
- V-P试验：金黄色葡萄球菌呈阳性，大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均呈阴性。
六、讨论与分析1. 通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应，可以初步鉴定细菌的种类。
2. 细菌的生理生化反应具有特异性，可用于细菌的鉴定和分类。
3. 在实际应用中，细菌的分离、纯化和鉴定是微生物学研究和临床诊断的重要环节。
七、实验结论1. 通过本次实验，我们掌握了细菌的基本形态结构、分离、纯化和鉴定方法。
2. 我们学会了利用生理生化反应进行细菌的鉴定和分类。
3. 本实验有助于提高我们对微生物学基本理论的认识和应用能力。
微生物学和微生物学检验的目的要求
微生物与微生物学检验实验指导医学技术系微生物与免疫检验教研室微生物与微生物学检验实验的目的要求1．通过实验来验证理论，使课堂效果更为生动，学到的知识更为巩固。
2．通过学生亲自动手操作，得到比较全面的微生物学基本操作技术的训练。
3．在微生物学实验课的过程中，帮助学生建立无菌观念，掌握无菌操作技术。
4．帮助学生熟悉和掌握常见病原微生物的生物学性状、分离培养和鉴定的方法以及各种临床标本的微生物学检查的基本程序。
5．在实验过程中培养学生独立操作、独立思考、分析问题和解决问题的能力。
微生物学实验室规则及注意事项一、微生物学实验室规则在进行微生物学实验时，须时刻牢记实验的对象是病原微生物，任何疏忽都可能导致严重的后果，不仅自身有可能被感染，而且有可能将病原微生物传给他人。
因此决不能有丝毫侥幸心理，冒任何不必要的危险。
迸入实验室时必须遵守下列规则。
1．进实验室时必须穿自大衣，离室时脱下反折，白大衣要经常清洗消毒。
2．每次实验后均要用肥皂洗手，必要时用消毒药水泡手。
3．书包、衣物等勿带入实验室，必要的文具、实验指导、笔记等带入后，放在指定的地方。
4．每次实验后均用消毒药水擦洗工作台面，并用紫外线灯照射过夜。
5．在实验室内不准吃东西、喝饮料和吸烟，不可把任何东西放入嘴中，也不要用手抚摸头面等部位。
6．进入实验室后要保持安静，禁止高声谈话，不准打闹嘻笑。
7．必须按照老师指定的方法，小心地处理传染性材料、培养物和污染的物质，要正确地使用存放污染器材的各种消毒容器。
8．接种环使用前后必须进行烧灼灭菌。
9．必须小心地避免任何有菌材料的溅出，若不慎污染了工作台、手、眼、衣服和地面等处，应立即报告老师，以便及时作适当处理。
10．培养物和传染性材料须放在工作台的安全部位，尽可能保持台面的清洁整齐。
11．爱护公物，合理使用实验材料和器材，如不慎损坏了某些器具，应及时报告老师，听候处理。
12．实验完毕后值日生清理台面，将需培养的标本及时放入培养箱，并打扫地面，关闭水、电、煤气和门窗，带课教师检查合格后方可离开实验室。
环境工程微生物学大实验实验报告
环境工程微生物学大实验实验报告实验十二环境中四环素抗性细菌的分离鉴定组员：吴富华，张真，，金炯震环5205一、实验目的1、自行设计实验方案从环境中分离四环素抗性菌的实验方法。
2、分离获得四环素抗行菌。
3、检测并分析获得的菌株的四环素抗性强弱。
4、学会通过16SrDNA鉴定实验获得的菌株的种属。
二、实验要求1、自行设计实验证明富集培养是否成功。
2、观察并记录实验现象，作适当的分析或解释。
3、获得至少一株四环素抗性菌（不要多于三株），并进行短期保存。
4、根据实验视频指导和说明，完成菌株基因组DNA纯化，16SrDNA的PCR扩增。
5、比较各组筛选出的抗性菌抗性强弱。
6、各组间交流实验过程和实验结果，分析抗性菌抗性的影响因素。
7、养成良好的实验习惯和团队合作的作风，并给出评价。
三、实验器材1、培养基（营养琼脂，琼脂粉，酵母膏，胰蛋白胨，氯化钠），提供四环素，琼脂糖，灭菌条件。
2、室温和37℃恒温培养箱和摇床。
3、离心机，漩涡震荡仪，PCR仪，电泳仪，紫外成像分析仪。
四、实验步骤（略）1、配置富集培养基和四环素梯度培养基2、四环素抗性菌富集培养3、单菌株筛选4、四环素抗性强弱比较5、单菌株基因组DNA的提取6、16SrDNA的PCR扩增7、PCR产物电泳实验内容、具体操作单菌株基因组DNA提取（5.17进行步骤1-4；5.18进行步骤5-10；5.20进行步骤11）（1）选择5.8号挑选的菌株进行DNA提取实验；（2）取200μL菌液转移到1.5mL灭过菌的EP管中，10000rpm常温离心1min，去掉上清（得到菌细胞）。
菌细胞可在-20℃冻存。
（3）如果是革兰氏阳性菌，取100μL，1mg/mL的溶菌酶/TE加到菌液中，漩涡震荡混匀，37℃温浴1h（溶菌步骤）。
（4）用取液器（移液枪）缓慢吸加500μL（革兰氏阳性）或600μL（革兰氏阴性）裂解缓冲液和20μL，20mg/mL蛋白酶K（proteinase K），充分混匀，50℃过夜（完全裂解细菌并降解所有蛋白质）。
医学微生物学实验指导
1．通透性学说革兰阳性菌细胞壁结构较致密，肽聚糖层厚，脂质含量少，乙醇不易透入；革兰阴性菌细胞壁结构疏松，肽聚糖层薄，含大量脂质，乙醇易渗入。
2．等电点学说革兰阳性菌等电点（pI 2 ~3）比革兰阴性菌（pI 4 ~5）低，在相同pH条件下，革兰阳性菌所带负电荷比革兰阴性菌多，故与带正电荷的结晶紫染料结合牢固，不易脱色。
2．革兰染色：
⑴初染：将已固定的涂片标本，加结晶紫染液于涂面上染色1 min，然后水洗。
⑵媒染：加革兰氏碘液媒染1 min，水洗。
⑶脱色：滴加95%酒精，频频摇动载玻片，斜持载玻片，使脱下的染液流下，再次滴加酒精脱色，直至流下酒精无色或稍呈淡紫色为止，水洗。
⑷复染：用稀释复红或沙黄染液复染30 s至1 min，水洗，自然干燥或吸水纸印干。
3．观察结果：
用油镜观察染好后的标本片，记录所见结果，染成紫兰色者为革兰氏阳性菌，染成红色者为革兰氏阴性菌。
注意事项
1．玻片一定要清洁无油。
2．加生理盐水切莫贪多以免难于干燥，涂片要均匀且薄。
3．固定标本时切勿过热，以免菌体变形。
4．要掌握好染色时间，尤其是酒精脱色的时间，不宜过长或过短，以脱色至涂片为灰色为宜。
高等医学院校实验教材
医学微生物与免疫学
三峡大学医学院病原生物与免疫学教研室
二00五年六月
高等医学院校实验教材
医学微生物与免疫学
实验指导
主编韩莉
副主编张昌菊宋利琼
编者（以姓氏笔画为序）
王磊朱平刘嘉刘英
宋利琼吴红艳杨建林周永芹
张颖张昌菊韩莉
三峡大学医学院生物病原部
2005年6月29日
前言
本教材由医学微生物学和医学免疫学两部分组成，通过实习课教学使学生了解和掌握医学微生物学、医学免疫学的基本实验技能操作和基本研究方法，同时也能获取相应的感性知识。为培养学生的思维能力和独立操作能力，在进行设计性实验课教学时，学生也能利用本实习指导作为工具，顺利地进行实验操作，以节省学生获取知识的时间。为此目的，对每项实验的目的及实际意义都有所交代，对实验结果的观察与分析，也予以必要的辅导。限于教学时数和条件，有些内容将以示教、电视或电影教学方式教学，这部分尤其需要加强复习，以弥补未能亲自操作之不足。有关实验课的改革设想，仍须不断地接受实践考验，发扬成绩克服缺点，以不断地充实和提高。
微生物学试验
微生物学实验Lab work on Microbiology三峡大学生物与制药学院 微生物学教学组实验指导老师：涂 璇实验三 放线菌、霉菌形态观察一、实验目的 二、实验原理 三、实验器材 四、实验步骤 五、实验报告一、 实验目的• 学习并掌握观察放线菌、霉菌形态的基本 方法。
• 初步了解放线菌和四类常见霉菌的基本形 态特征。
二、基本原理• 放线菌（原核微生物）：由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌 丝体。
菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营 养菌丝（或称基内菌丝）和生长在培养基以上的 气生菌丝。
有些气生菌丝分化成孢子丝，呈螺旋 形、波浪形或分枝状等。
孢子常呈圆形、椭圆形 或杆状。
气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为分 类的重要依据。
放线菌培养和观察方法• 扦片法：在放线菌平板上扦上盖玻片后培养，使 放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生 长而附着在盖玻片上。
观察时直接取出盖玻片置 于载玻片上镜检。
镜检：用镊子拔出盖玻片，擦去背面培养物，将 有菌的一面朝上置于载玻片上，直接镜检。
宜用略暗光线观察，低倍镜—高倍镜；染色后观 察效果更好。
• 玻璃纸法：将玻璃纸覆盖在平板表面，接种放 线菌、培养，放线菌在玻璃纸上形成菌苔。
观 察时取下玻璃纸固定在载玻片上镜检。
• 镜检：先在载玻片上滴一小滴水，取下玻璃 纸，使菌面朝上，使玻璃纸平贴于载玻片上。
• 优点：可观察到放线菌自然生长状态 下的特征，和不同生长期的形态。
注意:整过程勿触动菌面培养物。
• 印片法：将要观察的放线菌的菌落或菌苔直接印在 载玻片上，经染色后观察。
• 用接种铲或解剖刀将平板上的菌苔连同培养基一起 切下，菌面朝上。
另取一载玻片，微热后，轻轻按 压菌苔，固定，染色后镜检。
• 主要用于观察孢子丝的形态，孢子的排列及其形状 等，但形态特征可能有所改变。
• 霉菌（真核微生物）：霉菌是一类可产生复杂分枝菌丝的真 核微生物的统称。
分枝菌丝分为基内菌丝 和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分 化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
微生物检验时的注意事项
微生物检验时的注意事项对微生物进行检验时有很多需要注意的事项，检测环境一定要非常干净，同时实验室的器具也需要保持洁净，进行操作的有关人员一定要具备非常强的专业性，操作要在无菌环境下进行，避免因为工作人员的失误导致检验结果出现差错。
除此之外，还要保持适宜的温度，保证决策的合理性。
1.微生物检验概述微生物检验指的是对病原微生物进行研究，借助检验手段和先进的技术将病原体检测出来，让临床诊断变得更加准确和科学，同时为下一步的治疗提供思路，给接下来的用药提供科学指导，防止出现感染扩散。
2.培养基的灭菌及使用2.1在每一次进行配置前，都要保证生产日期在保质期的时间之内，检查开瓶日期以及瓶口的密封度是否完好，不可以出现变质和受潮等现象。
2.2在进行培养基的配置时，要保证称量非常准确，并且分装的盐水准确无误。
2.3必须做到现配置现灭菌，不能长时间没有灭菌地配好培养基，坚决不允许出现过夜的情况。
2.4灭菌的时候要保证恒定的温度，同时保证在恒压环境下进行，对灭菌时间也要有严格的要求，确保在有效的时间内进行灭菌。
2.5进行灭菌处理的培养基要放在冰箱中进行保存，时间最长可以保存一周，但是原则上不能超过三天。
并且要按照“先入先出”的原则，优先使用最先培养好的。
2.6使用的时候也要对使用量有着严格要求，先使用水浴锅把培养基溶化到液态，紧接着迅速调低水浴的温度，培养基一定不能长时间接触高温环境。
2.7对产品微生物进行检测的时候，将培养基温度保持在四十五度左右，温度不能过高，也不能过低。
过高的温度容易将菌烫死，过低的温度则会造成培养基结块凝固，给观察结果制造麻烦。
2.8每瓶培养基都需要做空白。
2.9在集中的时间做样，对同一瓶培养基的打开不要过于频繁，造成培养基的污染，减少误差结果的出现。
2.10当培养基的数量很少时，可以先把少量的培养基倾倒成空白用板。
3.维持检测环境3.1检测室3.1.1进行检测的时候，要管好检测室的窗户和空调，用医用酒精对检测室进行消杀，避免检测室内的空气流动对超净工作台的内部环境产生影响。
微生物实验教程
实验 1—1 普通光学显微镜的使用……………………………………………………………
实验 1—2 细菌的形态结构观察 (简单染色、革兰氏染色、抗酸染色) ……………………
实验 1—3 细菌的特殊结构和运动性观察 (芽胞染色、荚膜染色、鞭毛染色) ……………
实验 1—4 放线菌的形态结构观察 …………………………………………………………
一滴镜油作为介质。国产显微镜的油镜常标有“油”字，国外产品则常用“oil”（oil Immersion）
或“HI”（Hemcyeneous Immersion）字样，以供识别。物镜上通常标有放大倍数、数值孔径
（亦称镜口率）、工作距离等主要参数。
3、聚光器：也叫集光器，由聚光镜和可变光阑组成。聚光镜由一片或数片透镜组成，
面是平面镜，另一面是凹面镜，其作用是使光源发出的光或自然光射向聚光镜。光强时用平
面镜，光弱时用凹面镜。有的显微镜的人工光源安装在镜座内，其反光镜也固定在镜座内。
（三） 普通光学显微镜的光学原理
心
由单透镜构成的放大镜和由几块透镜组成的实 体显微镜（解剖镜）称单式显微镜生物学教学及科 研所用的光学显微镜一般是复式显微镜。
高学生的综合能力与创新意识。
教
验
实 3. 提高学生分析问题和解决问题的能力。根据本学科的特点，逐步使学生认识微生物的基本
学 特性，比较它们与其它生物的相似和不同之处，知道如何研究微生物以及对研究中所出现的
问题点样分析，
范
师
京
南
第一节 微生物的形态结构观察
微生物的个体微小，肉眼难以看见，必须借助显微镜才能观察到。因此．显微镜就成为 微物学研究工作者不可缺少的基本工具，从事有关微生物学教学、科研和生产的人员，都应 该了解显微镜的种类、结构、功能和正确地掌握不同显微镜的使用方法。
微生物学实验报告
微生物学实验报告（格式标准）(生命科学专业)*****目录索引实验一油镜的使用和细菌的简单染色法 3实验二细菌的革氏染色与芽孢染色 5实验三常用培养基的配制7实验四酵母菌霉菌的形态结构观察及酵母死活细胞的鉴别8实验五、微生物大小的测定与显微计数10实验六环境中微生物的检测和分离纯化11实验七细菌鉴定中常用的生理生化反应12实验八（综合实验）化能异养微生物的分离与纯化13课程名称：微生物学实验班级：化生系生命科学本科实验日期：指导教师：黎勇实验一油镜的使用和细菌的简单染色法〔目的要求〕学习并熟练掌握油镜的使用技术；观察细菌的基本形态；学习观察细菌的运动性的基本方法。
〔基本原理〕1. N·A=n·sinα2. D=λ/2N.A3. 目镜可提高放大倍数，但有效放大率取决于镜口率。
已经分辨的物体不放大看不清，未分辨物放得再大也看不清。
4. 用悬滴法或凹玻片法观察细菌的运动性时，可以通过真运动能定向地由一处快速运动来区别于颗粒的布朗运动。
〔器材用具〕显微镜、载玻片、凹玻片、盖玻片、接种环、香柏油、二甲苯、凡士林、吸水纸、擦镜纸；细菌、放线菌等固定装片；培养18小时左右的B.subtilis. S.arueus 菌斜面培养物；无菌水、生理盐水。
〔方法步骤〕：（一）油镜的使用镜检装片在中倍（或高倍镜）下找到目的物，并使位于视野正中聚光镜上升到最高位置，虹彩光圈开到最大，镜头转开成八字形在玻片的镜检部位（光斑处）滴一滴香柏油油镜转入正下方侧视小心上升载物台（缩短镜头与装片距离，镜头浸入油中，至油圈不扩大为止镜头几与装片接触）粗调器徐徐下降载物台（密切注视视野，当捕捉到物像时，立即用细调器校正）仔细观察并绘图取出装片，清洗油镜：擦镜纸拭去镜头上的香柏油擦镜纸沾少许二甲苯擦去残留（用手指辅助，迅速拭擦一、二次）用清洁擦镜纸仔细擦干二甲苯（2-3次）。
（二）细菌的简单染色法：涂片干燥火焰固定染色水洗干燥油镜观察（三）细菌运动性的观察取洁净盖玻片，四周涂上凡士林滴加一小滴菌悬液凹玻片的凹窝向下盖于盖玻片上翻转观察〔结果分析〕1、画一圆圈表示视野，选取所观察的微生物绘图，注意特殊结构、形状和排列。
环境微生物检测标准操作规程作业指导书
环境微生物检测标准操作规程作业指导书持有部门：院感办文件编号：
制定者：审核者：版次：1 制定日期：审核日期：执行日期：
一、监测目的
1.感染暴发或感染流行时，环境因素在感染传播中有流行病学意义。
2.监测潜在的危险环境状况，证明有危险的病原体存在或证明危险的病原体已被清除。
3.当某项感染控制措施改变时，评估其效果。
4.目标性监测的需要。
5.询证医学证据支持。
二、空气培养（沉降法）
1.采样时间：Ⅰ类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。
2.采样高度：距地面垂直高度
80-150cm。
3.采样点设定：
（1）Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境：室内面
积≤30m2，在对角线上设里、中、外3点，里、外两点位置各距。
食品微生物实验技术指导书
实验一普通显微镜的使用和细菌形态观察1 目的(1)学习并掌握油镜的工作原理和使用方法。
(2)复习光学显微镜的结构、各部分的功能和使用方法。
2 原理微生物的最显著特点是个体微小，必须借助显微镜才能观察到它们的个体形态和细胞结构。
熟悉显微镜和掌握其操作技术是研究微生物不可缺少的手段。
实验将介绍目前微生物学研究中最常用的普通光学显微镜的结构和样品制作。
的在于使同学们通过实验，对光学显微镜有比较全面的了解，并重点掌握明视野通光学显微镜中油镜的使用。
3 材料3.1 菌种金黄色葡萄球菌(Staphlococcus aureus)及枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)染色玻片标本。
链霉菌(Streptomyces sp .)及青霉菌(Penicillium sp.)的水封片。
3.2 溶液或试剂香柏油、二甲苯。
3.3 仪器及其他用品显微镜、擦镜纸等。
4 流程安置一＞调光源一＞调目镜一＞调聚光器一＞镜检(低倍镜一＞高倍镜一＞油镜)一＞擦镜一＞复原5 步骤5.1 观察前的准备5.1.1 显微镜的安置置显微镜于平整的实验台上，镜座距实验台边缘约l0cm。
镜检时姿势要端正。
5.1.2 光源调节安装在镜座内的光源灯可通过调节电压以获得适当的照明亮度，若使用反光镜采集自然光或灯光作为照明光源时，应根据光源的强度及所用物镜的放大倍数选用凹面或凸面反光镜并调节其角度，使视野内的光线均匀，亮度适宜。
5.1.3 双筒显微镜的目镜调节根据使用者的个入情况，双筒显微镜的目镜间距可以适当调节，而左目镜上一般还配有屈光度调节环，可以适应眼距不同或两眼视力有差异的不同观察者。
5.1.4 聚光器数值孔径值的调节正确使用聚光镜才能提高镜检的效果。
聚光镜的主要参数是数值孔径，它有一定的可变范围，一般聚光镜边框上的数字是代表它的最大数值孔径，通过调节聚光镜下面可变光阑的开放程度，可以得到各种不同的数值孔径，以适应不同物镜的需要。
5.2 显微观察在目镜保持不变的情况下，使用不同放大倍数的物镜所能达到的分辨率及放大率都是不同的。
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微生物学检验实验指导2009．7一、《微生物学检验》实验目的要求1．通过实验验证理论知识，并掌握比较全面的微生物学基本操作技术。
2．在微生物学实验过程中建立无菌观念，掌握无菌操作技术。
3．通过实验进一步掌握临床常见病原微生物的生物学性状、分离培养和鉴定的方法、各种临床标本的微生物学检验程序和方法。
4．在实验过程中逐渐培养独立思考问题、分析问题和解决问题的能力。
二、微生物学实验室规则及实验室意外处理方法1．微生物学实验室规则由于微生物学实验是以病原微生物为研究对象，在实验过程中任何疏忽大意都有可能引起实验人员的自身感染或实验室和周围环境的污染。
因此，实验中应严格遵守实验规则，建立无菌观念，严格无菌操作，防止实验过程中出现意外情况，并确保实验结果的准确。
（1）试验前须预习实验内容，了解实验目的、方法和注意事项，做到心中有数，避免发生错误，提高实验效率。
（2）进入实验室必须穿工作服，必要时还须戴口罩、帽子和手套，并做好实验前的各项准备工作。
（3）非必需物品禁止带入实验室，带入实验室的物品应远离操作区，放在指定的区域。
（4）实验室内不准大声喧哗、嬉戏，应保持实验室的安静、整洁和有序。
不准在实验室内吸烟、饮水和进食，尽量避免用手触摸头、面部，防止感染，尽量减少室内活动，以免引起风动。
（5）实验中注意节约试剂，爱护仪器，避免有菌材料的污染，如有传染性材料污染桌面、地面、手、衣服或发生其他意外情况，应立即报告老师及时作适当处理。
（6）用过的污染物品应放到指定的地点，经专人消毒灭菌之后再进行清洗，切勿乱丢或冲入水池中。
禁止将本实验室的物品带出实验室外。
需送温箱培养的物品，应标记清楚后送到指定地点。
（7）实验完毕后应将桌面整理清洁，试剂、仪器放回原处，并用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，打扫卫生，关好水、电、门窗。
（8）离室前脱下工作服，反折放在指定的地方；双手在2％来苏液中浸泡5min左右，再用肥皂、清水洗净，方可离开实验室。
2．实验室意外的紧急处理方法（1）发生皮肤破损或刺伤：首先用肥皂和水冲洗伤口，尽量挤出损伤处的血液，并用70%乙醇或其他皮肤消毒剂进行消毒，立即进行医疗处理。
（2）化学药品腐蚀伤：若为强酸，用大量清水冲洗后再以5%碳酸氢钠溶液中和；若为强碱，用大量清水冲洗后再以5%醋酸或5%硼酸溶液中和；若受伤处是眼部，经上述方法处理后，再滴入橄榄油或液体石蜡1~2滴。
（3）烧伤：局部涂凡士林、5%鞣酸或2%苦味酸。
（4）菌液误入口中：立即将菌液吐入消毒容器中，再用1∶1000高锰酸钾或3%过氧化氢漱口，根据菌种服用适当抗生素预防感染。
（5）菌液污染环境：将适量2~3%来苏或0.1%新洁尔灭浸泡污染面半小时后除去，如手上有菌污染，也可浸泡于上述消毒液中3~5min，之后用肥皂和清水洗净。
三、生物安全防护知识简介医学检验工作人员长期接触有潜在传染性的血液、粪便、体液等标本，这些标本往往是各种细菌、病毒等病原微生物的传播载体，无论是实验人员感染，还是造成实验室和周围环境的污染，都将导致严重的后果。
因此实验室工作人员在实验过程中必须高度重视实验室生物安全防护，强化生物安全意识，熟悉生物安全防护有关知识，严格无菌操作。
1．微生物的分类等级根据世界卫生组织（WHO）出版的《实验室生物安全手册》，将微生物分为四个不同危险度等级：危险度1级是指不能引起人或动物致病的微生物，此类微生物无或仅具有极低的个体和群体危险；危险度2级的病原体具有中度个体危险，低度群体危险，能引起人或动物致病，但对实验室工作人员、社区、家畜或环境不易导致严重危害，所引起的感染具有有效的预防和治疗措施，并且疾病传播的危险有限；危险度3级的病原体具有高度个体危险，低度群体危险，通常能引起人或动物的严重疾病，但一般不会发生感染的播散，并且对感染具有有效的预防和治疗措施；危险度4级的病原体具有高度的个体危险和群体危险，通常能引起人或生物的严重疾病，并且很容易发生个体之间的直接或间接传播，对感染一般没有有效的预防和治疗措施。
基于以上划分标准，结合微生物的致病性、传播方式、目前所具有的预防和治疗措施等因素，我国卫生部于2006年制定了《人间传染的病原微生物名录》，对各种病原微生物的危害程度及其相关实验活动需要达到的生物安全实验室级别做了详细分类，各实验室进行有关实验均需参照此标准。
2．生物安全实验室分级与要求由于各种病原微生物的危险度等级不同，因此实验室必须达到相应的生物防护等级才能开展有关实验。
根据WHO《实验室生物安全手册》和我国卫生部2002年颁布的《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》，实验室从生物安全防护的角度共分为四级：一级生物安全防护实验室（BSL-1）为实验室结构设施、安全操作规程、安全设备适用于危险度1级的微生物，依据标准操作程序可进行开放性操作，如用于教学的普通微生物实验室即属此类。
二级生物安全防护实验室（BSL-2）适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物，即危险度2级的病原体，该级别实验室应具备生物安全柜和密封的离心管，以免发生泄漏和产生气溶胶。
三级生物安全防护实验室（BSL-3）适用于有明显危害、可以通过空气传播的病原微生物（如结核杆菌、伯氏立克次体等），通常已有预防传染的疫苗，该级别实验室除了有严格的一级和二级安全设施要求外，还需具备合适的空气净化系统。
四级生物安全防护实验室（BSL-4）适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。
BSL-4实验室必须与其他实验室隔离，并具备特殊的空气和废物处理系统，实验操作须在Ⅲ级生物安全柜内或全身穿戴特制的正压防护服。
根据以上定义，医院内的临床实验室因接触可能含有致病微生物的标本，通常应达到二级生物安全防护实验室要求。
根据《实验室生物安全认可准则》，二级生物安全实验室结构设施需符合以下几点：（1）实验室需具有防止节肢动物和啮齿动物进入的设计，有可开启的窗户，有纱窗，实验室门有可视窗带锁并能自动关闭。
（2）每个实验室均应设置洗手池，宜设置在靠近出口处。
（3）实验室工作区域外有足够的存储空间及摆放个人衣物的设施。
（4）实验室内墙壁、地面应平整、防滑、易于清洁，不适宜用地毯。
（5）实验台面应能防水、耐腐蚀、耐热。
（6）实验室内应保证工作照明，避免反光和强光。
（7）在实验室内应穿戴隔离衣、帽、手套，必要时戴防护眼镜。
实验室应备有生物安全柜。
（8）有适当的消毒设施，如高压蒸汽灭菌器，并设置洗眼装置、应急喷淋装置、急救药箱、灭火器等。
（9）有可靠的电力供应和应急照明。
（10）在实验室出口处设有在黑暗中可明确辨认方向、通道的标识。
（11）在实验室入口处和装有传染性物质的设备表面贴有生物危险标志。
3．实验室生物安全管理制度实验室生物安全制度建设对于临床实验室而言是生物安全防护的核心，实验室生物安全管理制度应包括：实验室准入制度、生物安全培训制度、生物安全责任制和责任追究制度、生物防护与安全制度、安全检查制度、个人防护制度、实验室管理制度、清洁消毒制度、安全计划审核制度、废弃物处理制度、事故报告制度、生物安全防护应急预案、标准操作程序等。
建立健全了各项生物安全制度，还应成立生物安全管理领导小组，加强生物安全制度实施情况的监督管理，实验室入口处须粘贴生物安全标志，注明危险因素，生物安全级别，负责人姓名和电话，进入实验室的特殊要求及离开程序，禁止非工作人员进入实验室，如需参观实验室等特殊行为需经实验室负责人的批准后方可进入。
4．实验室常见生物危险实验室生物污染的途径包括：空气传播（临床标本中的污染源在空气中传播、微生物气溶胶的吸入）、直接传播（工作中偶然刺伤、割伤，碎玻璃划伤直接感染）、皮肤粘膜接触（临床标本中的传染源通过破损皮肤粘膜接触造成的感染）、其他不明原因的实验室相关感染。
实验室伤害以及与工作有关的感染主要是由于人为失误﹑不良实验技术以及仪器使用不当造成的。
因此，实验室人员必须提高生物安全意识，认真学习生物安全相关的各种法规和文件，定期进行生物安全防护知识培训，熟悉生物防护有关知识，加强基本技能的培养，严格执行操作规程。
实验室管理者应对实验室的风险级别进行分析，尤其对风险级别较高的、接触高危标本几率较大的区域如微生物和分子生物学室予以高度重视，保护实验室工作人员和环境的安全。
5．生物废弃材料的管理实验室内所有用过的样本、培养物及其他生物性材料等废弃物，严禁未经处理就随意丢弃，应置于贴有生物危害标志的专用废弃物处理容器内，注意容器的充满量不能超过其设计容量，利器（如针头、小刀、玻璃等）应置于耐扎锐器盒内，在去污染或最终处置前应存放在指定的安全地方，经过高压灭菌或其他无害化处理后再安全运出实验室；有害气体、气溶胶、污水、废液等均需经无害化处理后排放；动物尸体、组织的处置和焚化应符合国家相关要求。
处理危险废弃物的人员需经过专业培训，并使用适当的防护设备。
第一章微生物学检验基本技术实验一细菌的形态结构观察及显微镜油镜的使用【目的和要求】1．熟悉微生物实验室规则并自觉遵守。
2．掌握细菌基本形态和特殊结构的观察方法。
3．掌握光学显微镜油镜的使用和维护方法，了解荧光显微镜和暗视野显微镜的构造和使用方法。
【试剂与器材】1．示教片：各种球菌、杆菌、弧菌、荚膜、鞭毛、芽胞的示教片。
2．器材及其他：光学显微镜、载玻片、擦镜纸、香柏油、脱油剂等。
【实验内容】一、细菌基本形态和特殊构造的观察1．细菌的基本形态（各种球菌、杆菌、弧菌等）观察要点：注意细菌的染色性、相对大小、形状及排列方式。
2．特殊结构的观察（荚膜、芽胞、鞭毛）观察要点：注意这些特殊结构的大小、形状及其在菌体中的位置，均有助于细菌的鉴定。
二、光学显微镜油镜的使用1．光学显微镜的构造光学显微镜是观察细菌形态最常用的一种仪器，其构造分为机械部分和光学部分，机械部分包括：镜座、镜臂、载物台、镜筒、镜头转换器、调焦装置等；光学部分包括：接物镜、接目镜、反光镜、聚光器、光圈等（见图1-1）。
图1-1 光学显微镜的构造显微镜的接物镜有低倍镜、高倍镜、油镜三种，放大倍数依次增高，其识别方法为：（1）低倍镜：镜头标志为10×或10/0.25，镜头最短，其上常刻有黄色环圈。
（2）高倍镜：镜头标志为40×或40/0.65，镜头较长，其上常刻有蓝色环圈。
（3）油镜：镜头标志为100×或100/1.30，镜头最长，其上常刻有白色环圈，或“oil”字样。
2．油镜的使用原理图1-2 显微镜油镜的使用原理油镜的放大倍数高而透镜很小，自标本片透过的光线，因玻片和空气的折光率不同（玻璃n=1.52，空气n=1.0），部分光线经载玻片进入空气后发生折射，不能进入接物镜，致使射入光线较少，物象不清晰。