药物的镇痛作用
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▪ 为减轻疼痛而在临床上应用的镇痛（催眠）药、镇痛 药和麻醉药等，一般就是通过提高痛觉阈值来达到镇 痛目的。本实验应用热板法和化学刺激法，观察镇痛 药吗啡或哌替啶对小白鼠痛觉阈值的影响及其表现。
25.05.2020
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一、热板法
【材料与方法】
一、实验动物：雌性小白鼠，18～22g。 二、器材与药品：Woolfe热板、天平、1ml
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三、方法与步骤：
1.取体重相近的小白鼠4只称重，随机 分为2组即实验组和对照组（每组2 只），并观察每组动物的活动情况。
2.实验组小白鼠腹腔注射1％盐酸哌替 啶40mg/10g（0.1ml/10g）,对照组腹 腔注射点等容量的生理盐水。
⑷实验组小白鼠腹腔注射0.1%盐酸吗啡 10mg/kg(0.1ml/10g)或0.4%盐酸哌替啶 40mg/kg（0.1ml/10g）、对照组小白鼠腹 腔注射等容量生理盐水，并于注射后15、 30、45min分别再次测定小鼠痛阈值。其 中，对于60s不舔后爪的小鼠，痛阈按60s 计算。
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三、甩尾法
【材料与方法】 一、实验动物：小白鼠，18～22g，雌雄不
限。 二、器材与药品：恒温水浴箱、天平、1ml
注射器3支、注射针头、小鼠固定器、 0.4%盐酸哌替啶、 30%安乃近、生理盐 水。
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注射器2支、注射针头、鼠笼、秒表、 0.1％盐酸吗啡或0.4%盐酸哌替啶、生理 盐水。
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三、方法与步骤：
⒈筛选实验动物
⑴将浴槽加满水并使水面接触热板，通过控温仪装置使 热板表面温度维持在55±1℃，然后将小白鼠置于热板 上，密切观察它的活动；在正常情况下，大多数小白 鼠在热刺激下出现不安的表现如举前肢、抬后肢、跳 跃等。但以上指标不稳定而不宜作为痛阈指标，若将 舔后爪出现的时间作为疼痛反应的指标，则更具客观 性。
【实验目的】
1.学习痛阈测定及三种痛觉测定方法。 2.观察吗啡或哌替啶的镇痛作用。
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【实验原理】
▪ 疼痛是临床常见的病症之一。它除了表现为痛觉即由 伤害性刺激引起的一种主观感受外，还经常在痛觉的 基础上伴发并表现出各种痛反应如自主神经反应、躯 体防御反应和心理情感及行为反应等
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实验组 对照组
动物数
扭体反应数 无扭体反应数
小白鼠发生和未发生扭体反应数目的统计
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【注意事项】
1.酒石酸锑钾或醋酸需临用时配制, 若存放过久，作用会明显减弱
2.哌替啶给药剂量要准确，否则剂 量过大会造成呼吸抑制，剂量过 小则不出现作用。
内凹、躯干和后腿伸张、臀部抬高等）。
此时将给药组与对照组相比，若前者使 扭体反应发生率减少50％以上，即可认 为哌替啶产生了镇痛作用。
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4.汇总实验结果，将各组发生扭体反应和 未发生扭体反应的小鼠记入下表，并计 算药物镇痛百分率
药物镇痛百分率＝（实验组无扭体反应数－对照组 无扭体反应数）/对照组扭体反应数×100％。
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Fra Baidu bibliotek
⑸汇总实验结果，用下列公式计算痛阈改 变百分率:
痛阈改变百分率＝（用药后平均痛阈值－ 用药前平均痛阈值）/用药前平均痛阈值 ×100%
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5.将给药前、后小白鼠痛阈值记入下 表。并计算各时间点的痛阈改变百分
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3.20min后，两组小白鼠均腹腔注射1％ 酒石酸锑钾0.1ml/10g或0.6%醋酸 0.1ml/10g，并观察15min内各组出现扭 体反应的动物数。如在注射药物之后，
小白鼠会因腹腔受刺激而出现强烈的腹
痛，进而外在地表现为扭体反应（腹部
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痛阈改变百分率时效曲线
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【注意事项】
1.热板法个体差异大，实验动物应预先筛选。一 般以疼痛反应在30s以内者为敏感鼠可供实验 用。
2.小鼠应选雌性，因雄性小鼠遇热阴囊松弛，易 与热板接触而影响实验结果。
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三、方法与步骤：
1.取体重相近的小白鼠3只称重，观察每只动物的活 动情况。将小鼠装入小鼠固定器，暴露鼠尾，将 鼠尾的1/3~1/4浸入55℃热水中，约6s内小鼠出现 甩尾动作，作为小鼠痛阈值。超出6s的小鼠应弃 除。
3.用药后小鼠痛阈值超过60s者应立即取出，以防 止烫伤足部而影响实验结果，其痛阈值按60s 计算。
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二、化学刺激法
【材料与方法】 一、实验动物：小白鼠，18～22g，雌雄不限。 二、器材与药品：天平、1ml注射器2支、注射针
头、鼠笼、0.4%盐酸哌替啶、生理盐水、0.6％ 醋酸或1％酒石酸锑钾溶液。
⑵当小白鼠出现舔后爪时，立即记录时间并同时将其取 出（以免烫伤足部），该时间即为小白鼠的痛阈值。 用此法筛选痛阈值在30s以内的小鼠以供实验用。
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⑶取已选出的小白鼠4只称重，随机分为两 组即对照组和实验组（每组2只），按上述
方法分别测定给小白鼠注射药物和生理盐 水前的痛阈值。
率。以横坐标表示时间、纵坐标表示 痛阈改变百分率，绘出用药后15min、 30min、45min小鼠的痛阈改变百分率 时效曲线。
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给药后前小白鼠痛阈值
动物只数 给药前痛阈值（s）
给药后痛阈值（s）
15min
30min
45min
实验组
对照组
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一、热板法
【材料与方法】
一、实验动物：雌性小白鼠，18～22g。 二、器材与药品：Woolfe热板、天平、1ml
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三、方法与步骤：
1.取体重相近的小白鼠4只称重，随机 分为2组即实验组和对照组（每组2 只），并观察每组动物的活动情况。
2.实验组小白鼠腹腔注射1％盐酸哌替 啶40mg/10g（0.1ml/10g）,对照组腹 腔注射点等容量的生理盐水。
⑷实验组小白鼠腹腔注射0.1%盐酸吗啡 10mg/kg(0.1ml/10g)或0.4%盐酸哌替啶 40mg/kg（0.1ml/10g）、对照组小白鼠腹 腔注射等容量生理盐水，并于注射后15、 30、45min分别再次测定小鼠痛阈值。其 中，对于60s不舔后爪的小鼠，痛阈按60s 计算。
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三、甩尾法
【材料与方法】 一、实验动物：小白鼠，18～22g，雌雄不
限。 二、器材与药品：恒温水浴箱、天平、1ml
注射器3支、注射针头、小鼠固定器、 0.4%盐酸哌替啶、 30%安乃近、生理盐 水。
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注射器2支、注射针头、鼠笼、秒表、 0.1％盐酸吗啡或0.4%盐酸哌替啶、生理 盐水。
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三、方法与步骤：
⒈筛选实验动物
⑴将浴槽加满水并使水面接触热板，通过控温仪装置使 热板表面温度维持在55±1℃，然后将小白鼠置于热板 上，密切观察它的活动；在正常情况下，大多数小白 鼠在热刺激下出现不安的表现如举前肢、抬后肢、跳 跃等。但以上指标不稳定而不宜作为痛阈指标，若将 舔后爪出现的时间作为疼痛反应的指标，则更具客观 性。
【实验目的】
1.学习痛阈测定及三种痛觉测定方法。 2.观察吗啡或哌替啶的镇痛作用。
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【实验原理】
▪ 疼痛是临床常见的病症之一。它除了表现为痛觉即由 伤害性刺激引起的一种主观感受外，还经常在痛觉的 基础上伴发并表现出各种痛反应如自主神经反应、躯 体防御反应和心理情感及行为反应等
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实验组 对照组
动物数
扭体反应数 无扭体反应数
小白鼠发生和未发生扭体反应数目的统计
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【注意事项】
1.酒石酸锑钾或醋酸需临用时配制, 若存放过久，作用会明显减弱
2.哌替啶给药剂量要准确，否则剂 量过大会造成呼吸抑制，剂量过 小则不出现作用。
内凹、躯干和后腿伸张、臀部抬高等）。
此时将给药组与对照组相比，若前者使 扭体反应发生率减少50％以上，即可认 为哌替啶产生了镇痛作用。
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4.汇总实验结果，将各组发生扭体反应和 未发生扭体反应的小鼠记入下表，并计 算药物镇痛百分率
药物镇痛百分率＝（实验组无扭体反应数－对照组 无扭体反应数）/对照组扭体反应数×100％。
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⑸汇总实验结果，用下列公式计算痛阈改 变百分率:
痛阈改变百分率＝（用药后平均痛阈值－ 用药前平均痛阈值）/用药前平均痛阈值 ×100%
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5.将给药前、后小白鼠痛阈值记入下 表。并计算各时间点的痛阈改变百分
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3.20min后，两组小白鼠均腹腔注射1％ 酒石酸锑钾0.1ml/10g或0.6%醋酸 0.1ml/10g，并观察15min内各组出现扭 体反应的动物数。如在注射药物之后，
小白鼠会因腹腔受刺激而出现强烈的腹
痛，进而外在地表现为扭体反应（腹部
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痛阈改变百分率时效曲线
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【注意事项】
1.热板法个体差异大，实验动物应预先筛选。一 般以疼痛反应在30s以内者为敏感鼠可供实验 用。
2.小鼠应选雌性，因雄性小鼠遇热阴囊松弛，易 与热板接触而影响实验结果。
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三、方法与步骤：
1.取体重相近的小白鼠3只称重，观察每只动物的活 动情况。将小鼠装入小鼠固定器，暴露鼠尾，将 鼠尾的1/3~1/4浸入55℃热水中，约6s内小鼠出现 甩尾动作，作为小鼠痛阈值。超出6s的小鼠应弃 除。
3.用药后小鼠痛阈值超过60s者应立即取出，以防 止烫伤足部而影响实验结果，其痛阈值按60s 计算。
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二、化学刺激法
【材料与方法】 一、实验动物：小白鼠，18～22g，雌雄不限。 二、器材与药品：天平、1ml注射器2支、注射针
头、鼠笼、0.4%盐酸哌替啶、生理盐水、0.6％ 醋酸或1％酒石酸锑钾溶液。
⑵当小白鼠出现舔后爪时，立即记录时间并同时将其取 出（以免烫伤足部），该时间即为小白鼠的痛阈值。 用此法筛选痛阈值在30s以内的小鼠以供实验用。
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⑶取已选出的小白鼠4只称重，随机分为两 组即对照组和实验组（每组2只），按上述
方法分别测定给小白鼠注射药物和生理盐 水前的痛阈值。
率。以横坐标表示时间、纵坐标表示 痛阈改变百分率，绘出用药后15min、 30min、45min小鼠的痛阈改变百分率 时效曲线。
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给药后前小白鼠痛阈值
动物只数 给药前痛阈值（s）
给药后痛阈值（s）
15min
30min
45min
实验组
对照组
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