大孔吸附树脂对葛根中葛根素的分离纯化工艺研究
葛根中葛根素的分离纯化技术进展
重要 意 义 。葛根 素 结构 如 图ｌ所示 。
目前 ，从 葛根 异黄酮 中分 离纯 化葛 根素 的方 法 主要 有
溶 剂 法 、酸水解 法 、盐析法 、络合 萃 取技 术 、大孔 吸附树
脂法 、聚 酰胺 柱层 析 吸 附法 和环 糊精 键合 固定相 技术 等 。
图 １ 葛根素结构式
１ 溶剂 法
贺 云 等【６１用 超 声水解 法 从野 葛根 中提取 纯 化 葛根素 。葛根提 取 液在 ６％盐 酸下 超 声水解 ４５ ｍｉｎ，水 解完 全 后过 滤 。滤液 用 乙酸 乙酯萃取 ，萃 取后 的酸 水解液 加 水稀释 ｌ倍 ，放置 ４ ｄ 析 出葛根 素粗 晶，并用ＨＡｃ．ＣＨ３ＯＨ （１：１）重结 晶两次 ，得 葛根 素 ，收率 １．２％，纯 度９７．８％。
目前己报道了采用金属纳米膜分离综合提取葛根淀粉黄酮类药物的新工艺l如何在现有基础上发展及改进分离纯化葛根素的方法提高葛根素的收率向绿色环保和降低成本的工艺技术发展为工业化大生产提供指导是目前研究葛根素分离纯化技术的发展方向
第 ３２卷第 １期 ２００７年 ３月
广 州 化 学
Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
４ 络合萃取法
在络 合萃 取时 ，溶液 中待分 离溶 质 与含有 络合 剂 的萃取 剂 相接 触形 成络合 物 ，将其 转移 至萃取相 内，当进行逆 向反应时溶质得以回收，萃取剂循环使用。络合萃取对于极性有机物 稀溶 液 分离 具有 高效 性和高 选择 性 。
贺 云等 Ｊ利用Ｆｅ 能够 和 葛根 素生 成 可溶性 络合物 的性 质 ，将 葛根 总黄 酮提取 液 水解 、 中和 ，￣Ｉ：１５，．ＦｅＣ１３使葛根 素 与Ｆｅ 络 合 溶解 ，过滤 除去其 它不 溶性 物质 ，用盐 酸解 聚Ｆｅ 葛根 素络合物 ，得葛根素粗品，将其重结晶可得葛根素纯品，其收率为１，２％，纯度９６，５％。
大孔吸附树脂吸附分离技术
H－107
D－ l D－ 2 南开大学 化工厂 D－ 3 D－ 4 D－ 5 D－ 6 D－ 8
苯乙烯 非极性 1000-1300
苯乙烯 非极性 乙基 非极性 苯乙烯 乙基 非极性 苯乙烯 乙基 非极性 苯乙烯 乙基 非极性 苯乙烯 乙基 非极性 苯乙烯 乙基 非极性 苯乙烯 466 712 7.3 6.6 382 13.3 55-59 65-70 43-48 74-78 62-66 1.20-1.24 2.10-2.15 0.73-0.77 2.88-2.92 1.25-1.29
沉降密度：干树脂重量（W）与水 中沉降后的体积（V）的比值。是树脂 体积与重量的换算参数，可用于准确评 价大孔吸附树脂吸附、洗脱效果。
比上柱量：达吸附终点时，单位质量干树 脂吸附夹带成分的总和。用于评价树脂吸附、 承载能力。比上柱量越大，承载能力越强，是 确定树脂用量的关键参数。计算公式为： S＝（M上－M残）／W 其中M上为上柱溶液中指标成分的质量（上 柱溶液体积×指标成分浓度）；或以上柱溶液 相当于药材质量表示，则为上柱溶液体积与单 位体积浸出液相当于药材质量的乘积。M残为 过柱流出液中指标成分的质量（过柱流出液体 积×指标成分浓度）。W为干树脂重量。
大孔树脂吸附法在中药分离_纯化中的应用
2009年1月摘要：大孔吸附树脂是70年代以来发展起来的有机高聚吸附剂，具有选择性吸附有机化合物的能力。
它的吸附作用是通过表面吸附、表面电性或形成氢键。
树脂吸附法是非常有效、工艺简单、生产成本较低的一种提取分离中药中有效成分或有效部位的方法。
但其吸附性能及解吸纯化条件参数受被吸附化合物的理化性质和其他条件的影响。
本文就在中药分离纯化中的应用以及影响其吸附能力的因素用作一概述。
关键词：大孔树脂；纯化；概述大孔树脂吸附法在中药分离、纯化中的应用白金刚*，**张典瑞*刘向荣**中图分类号：R284.2文献标识码：B 文章编号：1006-0979（2009）01-0089-02*山东大学药学院（２５００１２）**青岛国风药业股份有限公司（２６６５１０）２００８年１１月１１日收稿1在中草药有效成分的分离、纯化中的应用大孔树脂有在中草药分离中有着广泛的应用前景，尤其在水溶性成分的分离中显示出越来越重要的作用。
如对生物碱、黄酮、皂苷、香豆素及其他一些成分都有一定的吸附作用。
对糖类的吸附能力很差，对色素的吸附能力较强[1]。
其操作的基本程序大多是：中药提取液→通过大树脂→吸附上有效成分的树脂→洗脱→洗脱液→回收溶液→药液→干燥→半成品。
1.1苷类化合物分离纯化中的应用：大孔树脂在苷类的纯化中已得到广泛应用。
如从甜叶菊中提取甜味菊苷，从绞股蓝中提取绞股蓝皂苷、白芍总苷、刺人参苷、丝瓜皂苷等。
刘雄[2]考察D-101大孔吸附树脂对柴胡总皂苷的吸附性能和洗脱条件，以柴胡提取液15mL （0．2g 药材/mL ）上柱，70的乙醇洗脱，柴胡总皂苷洗脱率为71.83%，且除杂能力强。
蔡雄、刘中种[3-5]等人用D-101大孔树脂（天津）富集纯化人参总皂苷、三七总皂苷、毛冬青总苷，将提取液上柱，依次用100ml 蒸镏水和50ml 乙醇洗脱。
人参总皂苷洗脱率在90%以上，50%乙醇洗脱液干燥后总固物中人参总皂苷纯度可达71.1%；毛冬青总皂苷洗脱率达95%，50%乙醇洗脱液干燥后总固物中毛冬青总皂苷纯度可达57.5%。
水提-壳聚糖澄清-大孔树脂纯化法制备葛根总黄酮工艺研究
Ｍ ｅｈｏ ｆ Ｗ ａ ｅ ｔ ａ ｔｏ — Ｃｈｉｔ ｓ ｎ Ｃｌ ｒ ｆｃ ｔｏ — Ａｄ ｏ ｐ ｉ ｎ Ｓｅ ｒ ｔｏ ｈｒ ｕｇ ｔ ｄ ｏ ｔ ｒ Ｅｘ ｒ ｃｉ ｎ ｓｏ ａ ａ ｉ ａ ｉ ｎ ｉ ｓ ｒ ｔｏ ｐａ ａ ｉ ｎ ｔ ｏ ｈ
Ｍ ａ ｒ ｐｏ ｏ ｓ Ｒｅ ｉ ｃ ｏ ｒ ｕ ｓｎ
剂（ 乙醇） 浓度、 解吸温度、 洗脱速度 ３个 因素， 以总黄酮提取量、 葛根素提取量、 膏率为考察指 标综合评价 。结果 壳聚 得 糖澄 清工艺能有效保留 葛根 中葛根 素及 总黄酮等有 效成分 ， 节省 乙醇用量 ， 缩短 生产周期 。选取 最佳 纯化条件 ： 乙醇浓 度为 ７ ％ ， ０ 洗脱温度 ３ ℃ ， ５ 洗脱速 度为 ２ Ｖ ｈ Ｂ ／ 。采 用该工艺 葛根 总黄 酮纯度达 ６ ％ 以上。结论 该 法简单可取 ， ０ 适合 于
大孔树脂纯化野葛总黄酮的工艺研究
１ ７等 型号 大 孔树 脂 由河北 沧州 宝 恩化 ＿ 限公 司提供 。 ５ Ｔ有 ９ ％ 乙醇 、 酸 、 氧 化钠 等试 剂均 购 白天津 市化 学 试剂 ｉ 厂 ， 盐 氢 且 均为 分析 纯 。
ｔｃ ｎ ｌｇ ｆ ｏａ ａ ｏ ｏｄ ． ｅｈ ｄ ｔｔ ｄ ｏｐｉｎ ｃ ａａ ｔｒｓｉｓｏ ｖ ｄ ｌ ｓ ｄ ｍａ ｒｐ ｒｕ ｅ ｉｓｆ Ｄ一７ ０ ｅ ｈ ｏｏ ｙ ｏ ｔｌｆ ｖ ｎ ｉｓ Ｍ ｔ ｏ ｓＳａｉ ａ ｓ ｒ ｔ ｈ ｒｃｅ ｉｔ ｆｆ ｅｗｉｅｙｕ ｅ ｃｏ ｏｏ ｓｒｓｎ ＨＰ ｔ ｌ ｃ ｏ ｃ ｉ ５ 。
ＨＰ ６ ０ Ａ 一 ， Ｋ Ｄ一 ０ ， Ｂ ８ Ｎ Ａ一Ⅱ， Ｄ 一 ７ ｏ ｅｓ ｐ ｒｔ ｎｈ ｄ ｂ ｅ ｒ ｉａｌ ｅ ａｕ ｔｄ Ｄ ｎ ｍ ｃａ ｓｒ ｔ ｎ ａ ｄ ｄ ｓｒ ｔ ｎ Ａ Ｓ １ １ ｒ ｈ ｅ ａａｉ ａ ｅ ｎ ｃｉ ｃ ｌ ｖ ｌ ａｅ ． ａ ｉ ｄ ｏｐ ｉ ｎ ｅ ｏｐ ｉ ｆ ｔ ｏ ｔ ｙ ｏ ｏ
Ｉ 作者简 介】陈雅维 （９ ３ ， ， １８ 一）女 汉族 ， 硕士研究 生 ， 助教 ， 从事天然 产物
分 离 提 取
每 ５ｒｉ 动 １次 ， ｎ振 ａ 持续 ２ｈ， 置 ２ 使 树 脂 达 到饱 和 吸 静 ４ｈ， 附 ， 滤 得 澄 清溶 液 ， 定 吸光 度 并 计 算 各 种 树脂 对 野 葛 总 抽 测
【 关键 词】野 葛 ； 总黄 酮 ； 大孔 树 脂 ； 纯化 【 中图分 类号】Ｒ ８ ． ２ ４２ 【 文献标 识 码】 Ａ
【 文章 编 号】１ ７ — ２ ０（ ０ ２）３（ ） ０ Ｏ 一 ３ ６３ ７ １ ２１ ０ ｃ一 １６ Ｏ
大孔树脂纯化葛花总异黄酮的工艺条件研究
Ｓ ｐ ｒ ｔ ｎ ａ ｄ Ｐ ｒｆ ａ ｉ ｎ ｏ ｈ ｓ ｆ ｖ ｎ ｉ ｓ ｆ ｏ Ｆｌｓｐ ｅ ａ ｉｅ Ｕｓｎ ａ ｒ ｐ ｒ ｕ ｓｎ ｅ ａ ａ ｏ ｎ ｕ ｉ ｃ ｔ ｆ ｔ ｅ Ｉｏ ａ ａ ｏ ｄ ｒ ｍ ｏ ｕ ｒ ｒ ｉ ｇ Ｍ ｃ ｏ ｏ ｏ ｓＲｅ ｉ ｉ ｉ ｏ ｌ ａ
体积 ； 流速为 ２ｍ ／ ｉ； Ｌ ｍｎ 葛花 总异黄 酮上 样液 的质量浓度 为 ２ ｍ／ｍ 速 率 为 ２ ｍ ／ ｉ； ｒ Ｅ， Ｌ ｍ ｎ 冲洗杂质 用水 体积 为 ２ Ｌ 试验表明， ０ｍ 。 该法简单可行， 离效果好 ， ｘ一 分 经 ５处理后 的葛花异黄酮含量可达 ５ ％ 。 ４ 关键词： 大孔树脂 ； 葛花 ； 总异黄酮 ； 离； 分 纯化 中图分类号 ：２ ４ ２ Ｒ ８ ． 文献标识码： Ａ 文章编号：０ ８— ４ ７ ２ １ Ｏ — ０６— ５ １０ ０ ５ （００）１ ０ ５ ０
（ 贵州大学 生命科学学院 ， 贵州 贵阳 ５０２ ） ５０５
摘 要： 以葛花总异黄酮含量及回收率为考察指标 ， 选用大孔树脂对 葛花总异黄酮进行分离纯化 。结果表明 ， ｘ一
５树脂对 葛花总异黄酮有较好 的吸附和解吸效果， 最佳 工艺条件 为： 洗脱 荆为 ７ ％ 乙醇； ０ 洗脱剂用量为 ３倍树脂
ｍｅｈ ｄ Ｗａ ｉ ｌ ｎ ｅ ｉ ｌ ｔ ｏ ｄ ｓ ｐ ｒｔｏ ｆ ｃ．Ａｆｅ ｕ ｉ ｅ ｙ Ｘ－ ｔ ｏ ｓ ｓｍｐ ｅａ ｄ ｆａ ｂ ｅｗｉ ｇ ｏ ｅ ａａｉｎ ｅ ｅ ｔ ｓ ｈ ｔｒｐ ｒｆ ｄｂ ５，ｔｅ ｅ ｔａ ｔｏ ｏ ａ ａ ｏｄ ｉ ｈ ｘｒｃ ｆｉ ｆ ｖ ｎ ｉｓ ｓｌ
异黄酮
பைடு நூலகம்
。周艳晖等 也曾从峨眉葛花（ ｕ ａ ａｏ ｅ ｎｉ Ｐ ｅ ｒ ｉｓ ｒ ｉ ｍ ｅ ｓ）中分离出鸢尾苷等异黄酮。异黄酮类化合
大孔吸附树脂法分离纯化工艺流程
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葛根蛋白酶解物大孔树脂吸附工艺优化及其体外抗氧化活性研究
葛根蛋白酶解物大孔树脂吸附工艺优化及其体外抗氧化活性研
究
岳奕含;严铭铭;邵帅;丁奕元;江婷
【期刊名称】《食品与机械》
【年(卷),期】2024(40)1
【摘要】目的:优化大孔树脂吸附葛根蛋白酶解物工艺及其抗氧化活性研究。
方法:采用Box-Behnken响应面法确定大孔树脂吸附葛根蛋白酶解物最佳工艺。
以维生素C为对照,测定最佳工艺下纯化前后葛根蛋白酶解物的抗氧化活性。
结果:大孔树脂的最佳吸附—解吸工艺为上样液质量浓度10.0 mg/mL,洗脱液流速2.6 mL/min,洗脱液乙醇体积分数74%,纯化后葛根蛋白酶解物含量提升至37.19%。
大孔树脂纯化后的葛根蛋白酶解物对DPPH自由基、ABTS+自由基、羟自由基的清除率均强于吸附前的。
结论:大孔树脂纯化后的葛根蛋白酶解物抗氧化效果良好,可以作为一种潜在的蛋白多肽应用于食品中。
【总页数】8页(P167-174)
【作者】岳奕含;严铭铭;邵帅;丁奕元;江婷
【作者单位】长春中医药大学
【正文语种】中文
【中图分类】R28
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5.大孔吸附树脂纯化茶多酚的工艺优化及抗氧化活性研究
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琼脂凝胶微球纯化葛根素的工艺研究
琼脂凝胶微球纯化葛根素的工艺研究葛根素是葛根中黄酮类物质主要活性成分，该研究以葛根素粗品为原料，利用廉价易得的琼脂制备琼脂凝胶微球键合β环糊精分离介质（AGβCD），结合AB8大孔树脂进行前处理，以高回收率分离纯化得到高纯度的葛根素。
以葛根素纯度和回收率以及相关杂质的色谱纯度为考察指标，对4种不同性质的大孔树脂ADS7（强极性）、ADS17（中极性）、ADS21（极性）和AB8（弱极性）进行分离效果筛选以及工艺优化，并对AGβCD纯化工艺优化和验证。
结果表明，优选弱极性树脂AB8作为葛根素粗品的前处理树脂效果最佳，通过8%乙醇洗脱15 BV后，葛根素纯度为8768%的回收率达到8966%；通过琼脂凝胶微球键合β环糊精分离介质进行纯化，流动相15%乙醇，承载量（上样量与柱体积之比）133 g·L-1，上样浓度8 g·L-1，流速1 mL·min-1时，葛根素纯度高于95%的回收率达到97%以上。
标签：葛根素；AB8树脂；琼脂凝胶微球；β环糊精葛根是一种传统的中药材，因具有较高的食用和药用价值而被列入“药食同源植物”。
葛根中的黄酮类物质为主要的药用活性成分，其中葛根素含量最高，并具有多种药用活性如改善心肌细胞膜及心律失常，抗心肌纤维化损伤、抗心血管疾病、抗糖尿病[1]、神经保护[2]、抗阿尔兹海默症[3]、抗帕金森病[4]、防治骨质疏松症[5]等作用，因此受到更为广泛的关注与研究。
葛根中化学成分复杂多样，除了葛根素外还有3′羟基葛根素，3′甲氧基葛根素等多种黄酮类化合物，由于结构类似，理化性质相近，以较高的回收率纯化制备得到高纯度的葛根素较为困难。
目前分离纯化葛根素较为传统的工艺有溶剂萃取[6]，氧化铝和硅胶柱色谱[7]和大孔树脂分离[89]，但上述方法单独应用难以取得较高纯度亦或是回收率较低。
利用超临界流体萃取[10]，快速离心分配色谱（FCPC）[11]，双水相萃取和高速逆流色谱（HSCCC）[12]等分离技术纯化葛根素，虽能取得较高纯度和回收率，但体系复杂，设备要求高，有机溶剂消耗大，对环保和安全生产要求过高，导致成本过高等诸多缺陷。
药用大孔吸附树脂及其在中药分离纯化方面的应用
药用大孔吸附树脂及其在中药分离纯化方面的应用药用大孔吸附树脂及其在中药分离纯化方面的应用1. 引言中药作为我国传统医学宝库中的瑰宝，具有多种疗效和广泛的应用。
然而，中药复杂的组分和疗效中的多样性给其分离纯化带来了挑战。
其中，吸附技术作为一种有效的分离纯化方法，已经在中药领域取得了显著的应用。
药用大孔吸附树脂作为一种新型吸附材料，在中药分离纯化方面具有重要的应用价值。
2. 药用大孔吸附树脂的特点药用大孔吸附树脂是以高分子材料为基础的吸附材料，具有孔径较大、比表面积较大、副作用较小等特点。
它能够有效地吸附和分离中药中的特殊组分，并具有良好的再生性能和稳定性。
3. 药用大孔吸附树脂在中药品种分离纯化上的应用3.1 中药材的提取与分离使用药用大孔吸附树脂进行中药材的提取和分离可以获得高纯度的中药提取物，并将有益成分与有害成分分离开来，提高中药材的药效和质量。
3.2 中药复方的分离与纯化中药复方中包含多种活性成分，药用大孔吸附树脂可以根据各种成分之间的相互作用，快速有效地对其进行分离和纯化，提高中药复方的疗效和安全性。
3.3 中药制剂的纯化与提纯药用大孔吸附树脂可以用于中药提取物和中间体的纯化和提纯过程，去除其中的杂质和有害物质，提高中药制剂的质量和稳定性。
4. 药用大孔吸附树脂在中药分离纯化中的应用案例4.1 利用药用大孔吸附树脂分离罗布麻提取物中的六种生物碱通过调节药用大孔吸附树脂的孔径和表面性质，成功地将罗布麻提取物中的六种生物碱进行分离纯化，提高了罗布麻提取物的药效。
4.2 药用大孔吸附树脂在汉防己中的应用通过引入药用大孔吸附树脂，成功地分离出了汉防己中的水溶性成分，并获得了高纯度的中草药提取物。
5. 药用大孔吸附树脂在中药分离纯化中的优势和挑战5.1 优势药用大孔吸附树脂具有孔径较大、比表面积较大以及副作用较小的特点，能够有效地分离纯化中药中的特殊成分。
5.2 挑战药用大孔吸附树脂在中药分离纯化中还存在一些挑战，如吸附与解吸过程中的选择性、吸附效率的提高等问题需要进一步研究和解决。
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大孔吸附树脂对葛根中葛根素的分离纯化工艺研究臧 霖，王 帅，孟宪生＊，包永睿，曹爱民（辽宁中医药大学药学院，辽宁大连１１６６００）摘 要：目的：葛根素是葛根中含有的一种异黄酮类化合物，具有扩张心脑血管，降低心肌氧耗，改善心肌收缩功能等功效。
实验采用大孔吸附树脂法考察葛根中葛根素的分离纯化工艺条件，为研制治疗冠心病的新型药物奠定实验基础。
方法：采用大孔吸附树脂法，以葛根素和出膏率为综合指标，对６种不同类型的树脂进行考察，优选最佳树脂及纯化条件。
结果：选取ＡＢ－８型树脂，７０％乙醇洗脱，径高比为１∶３，洗脱流速为１ｍＬ／ｍｉｎ，药材与树脂用量比为１∶７，洗脱剂用量为４ＢＶ，纯化后的葛根素纯度可达６０．２％。
结论：采用大孔树脂法分离纯化葛根中葛根素，证明该法具有简便、快速、准确等优点，为其工业化生产奠定了良好基础。
关键词：葛根；葛根素；大孔吸附树脂法；纯化工艺中图分类号：Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３－２１９７（２０１３）０２－０００９－０３收稿日期：２０１２－１１－０８作者简介：臧霖（１９８１－），男，辽宁中医药大学硕士研究生，研究方向为中药质量分析。
通讯作者：孟宪生（１９６４－），男，博士，辽宁中医药大学教授，研究方向为中药现代化与中药质量分析。
Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｕｅｒａｒｉｎ ｉｎ Ｒａｄｉｘ Ｐｕｅｒａｒｉａｅｂｙ Ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ Ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ＲｅｓｉｎＺａｎｇ Ｌｉｎ，Ｗａｎｇ Ｓｈｕａｉ，Ｍｅｎｇ Ｘｉａｎｓｈｅｎｇ＊，Ｂａｏ Ｙｏｎｇｒｕｉ，Ｃａｏ Ａｉｍｉｎ（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｄａｌｉａｎ １１６６００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｐｕｅｒａｒｉｎ ｉｓ ａ ｋｉｎｄ ｏｆ ｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｏｆ Ｒａｄｉｘ Ｐｕｅｒａｒｉａｅ，ｗｈｉｃｈ ｐｏｓｓｅｓｓｅｓ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ ｏｆ ｅｘｐａｎｄｉｎｇｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃｕｌａｒ，ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｏｘｙｇｅｎ ｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ｔｈｅ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｓｙｓｔｏｌｉｃ ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｒｅｓｉｎ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｉｎｓｐｅｃｔ ｔｈｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐｕｅｒａｒｉｎ，ｗｈｉｃｈ ｌａｙｓ ａｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｄｅｖｅｌｏ－ｐｉｎｇ ｎｅｗ ｄｒｕｇ ｔｏ ｃｕｒｅ ｈｅａｒｔ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｐｕｅｒａｒｉｎ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔ ｙｉｅｌｄ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ｉｎｄｅｘ ｔｏ ａｓｓｅｓｓ ｔｈｅ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｑｕａｎｔｉｔｙ ｏｆ ｓｉｘ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ＡＢ－８ｔｙｐｅ ｗａｓ ｐｒｏｖｅｄ ｔｏ ｂｅ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｏｎｅ ｔｏ ｓｅｐａｒａｔｅ ｐｕｅｒａｒｉｎｆｒｏｍ Ｒａｄｉｘ Ｐｕｅｒａｒｉａｅ．Ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ：ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｓｏｌｖｅｎｔ ｗａｓ ７０％ｅｔｈａｎｏｌ，ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｄｉａｍｅｔｅｒ ｔｏｈｉｇｈｔ ｗａｓ １∶３，ｅｌｕｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ １ｍＬ／ｍｉｎ，ｔｈｅ ｗｅｉｇｈｔ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｒｅｓｉｎ ｗａｓ １∶７ａｎｄ ｔｈｅ ｅｌｕｅｎｔ ａｍｏｕｎｔ ｗａｓ ４ＢＶ．Ａｎｄ ｔｈｅｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｃａｎ ｒｅａｃｈ ｕｐ ｔｏ ６０．２％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｉｔ ｉｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｔｏ ｓｅｐａｒａｔｅ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｙ ｐｕｅｒａｒｉｎ ｂｙ ｍａｃｒｏｐｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｗａｓ ｐｒｏｖｅｄ ｔｏ ｂｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ａｄｖａｎｔａｇｅ ｏｆ ｓｉｍｐｌｅ，ｆａｓｔ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ，ｗｈｉｃｈ ｌａｉｄ ａ ｇｏｏｄ ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｉｔｓ ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌｉｚｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．Ｋｅｙ Ｗｏｒｄｓ：Ｒａｄｉｘ Ｐｕｅｒａｒｉａｅ；Ｐｕｅｒａｒｉｎ；Ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ Ｒｅｓｉｎ Ｍｅｔｈｏｄ；Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓ 葛根系为豆科植物野葛Ｐｕｅｒａｒｉａ ｌｏｂａｔａ（Ｗｉｌｌｄ．）Ｏｈｗｉ的干燥根，具有解肌退热，生津止渴、透疹，升阳止泻，通经活络，解酒毒的功效。
葛根在我国古代的医学著作《本经》、《伤寒杂病记》和《医学大辞典》中均有记载。
葛根素是从葛根中所提取得到的一种异黄酮类化合物，临床证明具有扩张心脑血管，降低心肌氧耗，改善心肌收缩功能和促进血液微循环等作用，可用于治疗冠心病、视网膜动、静脉阻塞和突发性耳聋等微循环障碍性疾病。
本实验采用大孔吸附树脂法［１］，对葛根中的葛根素分离纯化工艺进行研究，为其工业化生产奠定基础。
１ 仪器与试药１．１ 仪器岛津ＬＣ－１０Ａｖｐ高效液相色谱仪（Ｎ３０００工作站）；ＡＣ－ＣＵＬＡＢ ＡＬＣ－１１Ｃ．４型电子天平（德国Ｓａｒｉｔｏｒｉｕｓ集团）。
１．２ 试药葛根药材（亳州市中药饮片厂），经辽宁中医药大学翟延君教授鉴定为野葛Ｐｕｅｒａｒｉａ ｌｏｂａｔａ（Ｗｉｌｌｄ．）Ｏｈｗｉ的干燥根；葛根素对照品（批号：０７５２－９９０７，中国药品生物制品检定所）；大孔吸附树脂Ｄ－２１、Ｄ－１０１、ＡＢ－８、ＨＰＤ－３００、ＨＰＤ－６００、ＨＰＤ－７００（河北沧州宝恩化工有限公司）；乙醇、甲醇（色谱—９—纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）；水为重蒸馏水。
２ 方法与结果２．１ 色谱条件色谱柱：ＭｅｔａＣｈｅｍ Ｃ１８（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ）；流动相：甲醇－水（２５：７５）；检测波长：２５０ｎｍ；流速：１ｍＬ／ｍｉｎ；柱温：２５℃。
２．２ 溶液配制对照品溶液的制备：精密称取葛根素对照品适量，加甲醇制成每１ｍＬ含０．４６３ｍｇ的溶液，即得。
供试品溶液的制备：精密称取葛根药材粗粉约５０ｇ，以１０倍量７０％乙醇回流提取２次，每次２ｈ，合并提取液，滤过，滤液挥干，以７０％乙醇定容至５００ｍＬ量瓶中，备用。
上柱溶液的制备：精密量取葛根供试品溶液５０ｍＬ置于蒸发皿中，水浴蒸干，加１０ｍＬ蒸馏水，充分搅拌，超声处理１０ｍｉｎ，使其充分溶解，即得。
２．３ 葛根素含量测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各５μＬ，注入液相色谱仪，外标法测定峰面积，计算含量。
２．４ 树脂筛选２．４．１ 不同型号树脂对葛根中葛根素的静态吸附实验精密称取处理好的树脂约５ｇ，置１００ｍＬ烧杯中，精密吸取上柱溶液１０ｍＬ，每隔１０ｍｉｎ振摇２０ｓ，持续２ｈ，静置２４ｈ后，使其达到饱和吸附，吸取上层液ＨＰＬＣ法测定葛根素含量。
按下式计算树脂的静态吸附量［２］，结果见表１。
饱和吸附量（ｍｇ／ｇ干树脂）＝（样品总葛根素含量－吸附后滤液中葛根素含量）／树脂量；洗脱率＝洗脱量／饱和吸附量×１００％表１ 不同型号树脂的静态吸附量和静态洗脱率测定结果树脂类型吸附前总葛根素含量（ｍｇ）吸附后葛根素含量（ｍｇ）饱和吸附量（ｍｇ／ｇ湿树脂）洗脱量（ｍｇ／ｇ湿树脂）洗脱率（％）Ｄ２１ １８ ２３．６ １９ ８０．５Ｄ１０１ ２６ ２２ １５．２ ６９．１ＡＢ－８１３６４１ １９ １４．７ ７７．４ＨＰＤ－３００ １０ ２５．２ １７ ６７．５ＨＰＤ－６００ ４５ １８．２ １２．２ ６７．０ＨＰＤ－７００ ２７ ２１．８ １８ ８２．６２．４．２ 不同型号树脂对葛根中葛根素的动态吸附试验 精密称取６种处理过的树脂约１０ｇ，控制流速１ｍＬ／ｍｉｎ，再以大量蒸馏水洗至无醇味。
精密吸取上柱液１０ｍＬ，预吸附３０ｍｉｎ，过柱液重新吸附１次，放置１２ｈ。
收集过柱液，（过柱液蒸干，以７０％乙醇定容至１０ｍＬ量瓶中，用ＨＰＬＣ法进行测定葛根素含量），以蒸馏水洗至无色，再以７０％乙醇洗脱至无色，分别收集各段过柱液，蒸干，７０％乙醇定容至１０ｍＬ量瓶中，ＨＰＬＣ法测定葛根素含量［３］。
结果见表２。
表２ 不同型号树脂的动态吸附洗脱工艺研究树脂类型上柱总葛根素量（ｍｇ）过柱残余葛根素含量（ｍｇ）葛根素吸附量（ｍｇ）７０％乙醇洗脱量（ｍｇ）７０％乙醇洗脱率（％）Ｄ２１ １２．８４ ４３．０３ ２１．１６ ４９．２Ｄ１０１ １６．８ ３９．０７ １７．８６ ４５．７ＡＢ－８５５．８７１４．１１ ４１．７６ ４１．３０ ９８．９ＨＰＤ－３００ １５．９９ ３９．８８ ２２．９９ ５７．６ＨＰＤ－６００ １６．５０ ３９．３７ ２０．１９ ５１．３ＨＰＤ－７００ １５．０８ ４０．７９ ３６．２８ ８８．９ 由结果可知，ＡＢ－８型树脂在静态吸附和动态吸附试验中表现出良好的综合性能，所以确定ＡＢ－８型树脂为分离葛根总黄酮的最佳树脂。
２．５ 纯化工艺研究２．５．１ 洗脱溶剂浓度选择 分别称取预处理好的ＡＢ－８型树脂约１０ｇ，共４份，湿法装柱，精密加入１０ｍＬ上柱液预吸附完全后，分别用３０％、５０％、７０％、９０％乙醇各１００ｍＬ进行洗脱，结果测得葛根素含量分别为１．１８、１．４６、１．８０、１．８２（％，ｎ＝２）。
可知，用７０％～９０％的乙醇洗脱，含量无明显差异，从节约成本角度考虑，选７０％乙醇作为洗脱剂。
２．５．２ 树脂径高比、药材－树脂用量比和洗脱流速考察 ①正交试验因素、水平的确定。
影响大孔吸附树脂吸附性能的因素主要有树脂径高比、药材－树脂用量比和洗脱流速３个因素，每个因素选择３个水平，优选出最佳洗脱条件。
见表３。
②出膏率试验和葛根素洗脱率的测定。
根据上述因素水平表，选择Ｌ９（３４）正交试验表，考察上述３个因素对结果的影响。
准确称取适量的ＡＢ－８型树脂１５ｇ，药材－树脂用量为１∶３的加入上柱液５０ｍＬ，１∶５的加入上柱液３０ｍＬ，１∶７的加入上柱液２１ｍＬ。
预吸附３０ｍｉｎ，加入７０％乙醇洗脱，收集洗脱液，测定葛根素含量和出膏率。
结果见表４，方差分析见表５。
表３ 大孔吸附树脂吸附因素水平水平因素Ａ径高比Ｂ洗脱流速（ｍＬ／ｍｉｎ）Ｃ药材－树脂用量比１ １∶３ １ １∶３２ １∶５ ２ １∶５３ １∶７ ３ １∶７ 综合评分：以葛根素含量及出膏率为考察指标，其中葛根—０１—素含量（Ｍ）的权重系数为０．６，出膏率（Ｎ）的权重系数为０．４，进行综合评价，综合评分＝Ｍ／Ｍｍａｘ×６０％＋Ｎ／Ｎｍａｘ×４０％。