浓缩血小板研究进展
混合浓缩血小板定义
混合浓缩血小板定义一、前言混合浓缩血小板是一种新型的生物技术产品，其研制和应用在临床上已经得到了广泛的关注和应用。
混合浓缩血小板是将自体血液经过特殊处理后，提取出的富含生长因子和细胞因子的浓缩血小板，可以在各种医疗领域中发挥重要作用。
二、定义混合浓缩血小板（Mixed Concentrated Platelets，MCP）是指采用特殊技术将自体全血中含有丰富生长因子和细胞因子的血小板进行分离、浓缩并混合后制成的一种生物技术产品。
混合浓缩血小板具有极高的生物活性和生理功能，在创伤修复、组织再生、美容整形等方面具有广泛应用前景。
三、制备方法混合浓缩血小板制备方法包括以下步骤：1. 采集自体全血；2. 经过离心分离得到含有富含生长因子和细胞因子的血小板；3. 经过特殊处理将其进行分离、浓缩；4. 按照一定比例混合后制成混合浓缩血小板。
四、生物学特性1. 混合浓缩血小板中含有丰富的生长因子和细胞因子，如血小板源性生长因子（PDGF）、转化生长因子（TGF-β）、成纤维细胞生长因子（FGF）等；2. 混合浓缩血小板中含有大量的血小板膜糖蛋白，可促进细胞黏附和增殖；3. 混合浓缩血小板可以激活各种类型的细胞，如成纤维细胞、内皮细胞、骨髓基质干细胞等，促进组织再生和修复。
五、应用领域1. 创伤修复：混合浓缩血小板可以促进创伤部位的愈合和修复，加速创伤愈合过程；2. 骨科领域：混合浓缩血小板可以促进骨再生，并在骨折治疗、关节置换术后恢复等方面具有重要作用；3. 美容整形：混合浓缩血小板可以促进皮肤细胞的增殖和修复，改善皮肤质量和延缓衰老；4. 牙科领域：混合浓缩血小板可以促进牙槽骨再生，加速口腔修复过程。
六、优点和不足1. 优点：（1）混合浓缩血小板来源于自体血液，不存在免疫排斥反应；（2）混合浓缩血小板具有高生物活性和生理功能，可以在各种医学领域中发挥重要作用；（3）制备方法简单，操作方便。
2. 不足：（1）混合浓缩血小板的质量受采集、处理等因素影响较大；（2）目前尚未建立统一的标准和规范。
富血小板血浆治疗技术（PRP）在慢性创面中的应用及研究进展
富血小板血浆治疗技术（PRP）在慢性创面中的应用及研究进展张圆圆，李雪梅山东省滨州市滨城区滨州医学院附属医院康复医学科，山东滨州256600[摘要]富血小板血浆（platelet-rich plasma, PRP）是抽取静脉血进行离心后得到的血小板浓缩物，广泛应用于医学及美容学等各个领域。
慢性创面具有治疗时间长、易复发、难度大的特点。
PRP通过激活成纤维细胞、加速伤口血凝块、控制感染和免疫防御、提高创伤自噬水平等机制，在深度压疮、难愈性伤口等各类慢性创面方面应用广泛。
富血小板血浆由于其制作过程并不复杂、价格适中，无传播血源性疾病的风险，成为近年来治疗慢性创面的一种新型手段。
本文对富血小板血浆参与创面愈合的机制和临床研究进行综述，旨在为富血小板血浆治疗慢性创面提供新的思路和线索。
[关键词]富血小板血浆；慢性创面；治疗[中图分类号]R4 [文献标识码]A [文章编号]2096-1782（2023）04(b)-0178-05 Application and Research Progress of Platelet-rich Plasma Therapy (PRP) in Chronic WoundsZHANG Yuanyuan, LI XuemeiDepartment of Rehabilitation Medicine, Affiliated Hospital of Binzhou Medical College, Bincheng District, Binzhou, Shandong Province, 256600 China[Abstract] Platelet-rich plasma (PRP) is a platelet concentrate obtained after centrifugation of venous blood, which is widely used in various fields such as medicine and cosmetology. Chronic wounds have the characteristics of long treat‐ment time, easy recurrence, and great difficulty. PRP is widely used in various chronic wounds such as deep pressure sores and difficult-to-heal wounds by activating fibroblasts, accelerating wound blood clots, controlling infection and immune defense, and improving wound autophagy levels. Platelet-rich plasma has become a new type of treatment for chronic wounds in recent years because of its uncomplicated production process, moderate price, and no risk of spreading blood-borne diseases. The paper reviews the mechanism and clinical research of platelet-rich plasma in wound healing, aiming to provide new ideas and clues for platelet-rich plasma in the treatment of chronic wounds.[Key words] Platelet-rich plasma; Chronic wound; Treatment富血小板血浆（platelet-rich plasma, PRP）来源于自体全血，是指经浓缩离心得到的富含血小板、纤维蛋白、生物活性蛋白及不同浓度白细胞的血浆浓缩物[1]。
血小板浓缩制品PRP PRF CGF 综述(仅供参照)
血小板浓缩制品血小板作为一种多功能细胞,不仅在血栓形成和止血中发挥作用,而且在血管发生、组织修复和炎症过程中也扮演着重要的角色[1]。
血小板被激活后，可释放多种生物活性物质，在促进组织愈合方面起重要作用。
目前的血小板浓缩制品经过几代发展主要有以下几种：富血小板血浆（platelet rich plasma，PRP），富血小板纤维蛋白（platelet rich fibrin，PRF）,浓缩生长因子（CGF，Concentrate Growth Factors）。
一发展历史1984年，As s o i o n[2]等发现了人血浆中提取的富血小板血浆(platelet—rich plasma，PRP)中含有多种生长因子，当PRP与氯化钙以及牛凝血酶混合后，各种生长因子即从血小板中的α颗粒中释放出来。
但是牛凝血酶的使用往往伴随着凝血因子Ⅴ、Ⅺ抗体的形成，并且存在着威胁生命的凝血紊乱发生的可能性[3]。
作为第二代浓缩血小板，富血小板纤维蛋白（PRF）是由Choukroun。
PRF是富纤维蛋白凝胶，由患者静脉中抽取的新鲜血液制作而成，属于新一代的血小板浓缩物，它制备简单无需任何生物添加剂的处理。
在PRF通过离心分离的制备过程中，血小板被激活同时大量脱颗粒细胞中蕴含的重要的生长因子释放出来[4]。
浓缩生长因子(CGF)是Sacco首先研发的[5]，与PRF一样，CGF由静脉血分离制备而成。
不过，两项技术的离心速度有所不同。
与PRF不同，CGF技术采用的速度从2400到2700rpm不等，这是为了分离静脉血中的细胞，因此CGF中富含纤维蛋白凝块比PRF中的大得多，而且更粘稠，纤维蛋白的含量也更多。
二详细介绍1 PRP1.1 PRP 制取方法及组成结构PRP 最早由 Assoian 于 1984 年提取制备[2]，是自身静脉血经梯度离心分层后位于白细胞上方的富含血小板的血浆部分，含有全血中 70%以上的血小板，于其中加入凝结剂(常用 10%氯化钙和凝血酶)可形成胶状物，激活后血小板α颗粒释放出多种生长因子，如转化生长因子-β(TGF-β)、骨形成蛋白(BMPs)、血小板衍生生长因子(PDGF)、类胰岛素生长因子(IGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)和成纤维细胞生长因子(FGF)等[6-8]。
集量浓缩血小板的制备
目前 国 外 汇 集 法 制 备 的集 量 血 小 板 多 由 ４～６份 同 型 白膜 （ 份 白膜 含 血 浆 ３ ｌ 右 ） 集 而 成 ， 集 后 集 量 血 小 板 量 每 ０ｍ 左 汇 汇 达 ２５ ０ ４２ ０ ． ×１”～ ． ×１“的 范 围 内 。 本 实 验 方 法 血 小 板 质 量 ， 除 血小板计 数较对照组偏低外 ， 白细 胞 污 染 量 及 红 细 胞 混 入 量 均 优 于对 照 组 ， 达 到 单 采 血 小 板 （ 袋 ） 家 质 量 标 准 ； 小 板 可 每 国 血
板 损 失 情 况 见 表 ２ 。
表 １ 本 实 验 集 量 浓 缩 血 小 板 质 量 及 与 对 照 组 比 较 情 况
１１ 材料 ．
４ ０ｍ 采 血 四 联 袋 （ ０ ｌ 山东 威 高集 团 生 物 制 品 股 份 有
限 公 司 ）Ｂ ｃｍ ｎＪ Ｂ型 离 心 机 （ 国 ） ：ｅｋ ａ － ６ 美 ，ｒ＝２ ｍ；Ｓ Ｄ ２ １ ５ｃ Ｔ Ｃ ０Ａ 无 菌 导 管 连接 器 （ ｔ ）Ｂ ｃｍ ｎｃｕｔ Ｃ Ｔ ．ｉ－ 血 细 胞 计 Ｅ本 ；ｅｋ ａ ｏｎ ｒ ．５ ｄｆ ｅＡ ｆ２ 数仪 （ 国 ）Ｐ 美 ；Ｆ型 白 细 胞 过 滤 器 （ 京 双 威 生 物 制 品 有 限 公 南
完 成 后 热 合 下 含有 血 小 板 的 袋 子 ， 即 为 制 备 的 集 量 浓 缩 血 小 此 板制剂 。 １２４ 血 小 板 计 数 及 红 细 胞 混 入 量 的检 测 ： 制 备 的 集 量 浓 ．． 将 缩 血 小 板 混 匀 后 取 样 ， Ｂ ｃｍ ｎｃｕｔ 血 细 胞 计 数 仪 说 明 书 按 ｅｋ ａ ｏｎ ｒ ｅ 提 供 的方 法 进 行 检 测 。 Ｉ２５ 白细 胞 污 染 量 的 检 测 ： 经 过 滤 血 小 板 的 白 细 胞 污 染 ．． 未
浓缩血小板的制备及临床应用
浓缩血小板的制备及临床应用【摘要】随着现代医学科学技术的迅速发展，使现代输血法进入了成分输血的新时代。
成分输血能够提高临床输血疗效，减少输血不良反应，并且还可以使血液综合利用，因此，它被视为临床输血中的一大重要进展。
当今，成分输血成为临床治疗中一种新的特殊方法。
其中，浓缩血小板可为骨髓移植病人提供血液保障，使他们能够安全度过骨髓抑制期，为骨髓移植的成功提供了保证。
【关键词】血小板的制备；临床应用制备浓缩血小板的技术目前主要有手工分离法和自动化的机器分离法。
前者需要多个供血者才能达到一个治疗量，后者只需要一个供血者即可达到治疗量，并且产品纯度高，质量好超浓缩，治疗效果好，最大限度地减少了肝炎、梅毒、艾滋病等血液传染病的传播。
我们利用美国BAXTER公司CS3000PLUS的血细胞分离机采集血小板10袋，与手工采集血小板对比，其特点总结见下表。
附表采集血小板方法比较1 制备方法应用美国BAXTER公司生产的CS3000 PLUS血细胞分离机，选择程序：①分离夹TNS-6; ②产品收集夹A-35; ③抗凝剂ACD-A; ④采用双臂式循环采血，分别穿刺双肘正中静脉，一侧采血，一侧回输; ⑤采用1次性全密闭式分离管道，采集过程中献血员血容量始终保持平衡;⑥全血与抗凝剂之比为9～11:1，离心速度为1600rpm,产品容量为190ML，血小板计数可达3.0～5.0×1011个。
浓缩血小板采集后，可以立即输注，也可以保存5天，保存时需放在22°C 振荡器上，保存期末PH值顺大于6.0。
2 质量标准浓缩血小板的质量与供血者密切相关。
选择供血者，除了要符合国家卫生部献血员体检标准外，还要求献血员血小板计数为1.5×1011/L以上，且供血者前1周不得服用阿司匹林、消炎药、保太松、布洛芬、潘生丁及抗过敏药物。
以避免血小板功能遭到抑制，造成受血者输注无效。
供血者前一天避免进食高脂肪食物，以防出现脂肪血。
混合浓缩血小板的制备及取消白细胞过滤的研究分析
混合浓缩血小板的制备及取消白细胞过滤的研究分析发表时间：2014-12-29T14:42:25.903Z 来源：《医药前沿》2014年第23期供稿作者：冯晓静[导读] 有充足的血样来源每一例浓缩血小板都是根据一定数量的400ml的全血样分离出来的。
冯晓静(河南省漯河市中心血站漯河 462000)【摘要】目的对混合浓缩血小板进行过滤，得出3种不同的血小板过滤器呈现的多样性的效果方法根据血小板回收率特定值制造混合浓缩血小板的离心条件，使用富血小板血浆法制备混合浓缩血小板过滤，并在浓缩血小板过滤之后进行计算，得出血小板回收率值、白细胞清除率数值、红细胞清除率数值等，最后把上述研究进行比较分析，并得出结论。
结果 3种过滤方法的研究所得出结果均有差异，并都具有统计学的意义。
由12U浓缩血小板所制备的血小板计数结果与《全血及成分质量要求》中对混合型浓缩血小板所要求的计数含量相差无几，红细胞混入量的符合率也达到71.8%，混合浓缩血小板的研究总体符合率是67.2%。
：可略掉关于混合浓缩血小板中白细胞过滤的程序，既采用12U型的浓缩血小板制就可达到预期成效。
【关键词】混合浓缩血小板过滤器白细胞过滤血小板回收率【中图分类号】R94 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）23-0164-02 1、资料与方法1.1临床资料1.1.1有充足的血样来源每一例浓缩血小板都是根据一定数量的400ml的全血样分离出来的，然后通过无菌的连接介质混合而成，在此之中7袋混合制备所得出的血小板数量为135例，6袋混合制备所得出的血小板的数量是259例。
1.1.2在实验的过程中，所需要的实验材料:所用实验材料过滤器A是由国内的厂家供应的，所用实验材料过滤器，B是由德国的生产厂家供应的，所用实验材料过滤器，C是由美国的生产厂家所供应的，不管是什么地区所生产的过滤器都务必按照说明书上的操作步骤进行准确无误的操作。
采血专用袋应采用带有15ml样品的血样采集带，以及血小板专用的保存带，保存带务必使用400ml一次性的塑料使用的三联血袋。
机采浓缩血小板在白血病治疗中的应用观察
２０ ２０ ０ ４～ ０７年 收 治 白血 病 患 者 ７ ５ 例 ， 中急性 白血病患 者 ５ 其 ７例 ， 慢性 白血
病患者 ｌ 。５ ８例 ７例 急 性 白血 病 患 者均
表现 为中 （ ） 重 度贫 血 和严 重 出血 倾 向，
白血病患者输 注血小板 Ｃ Ｉ 果 ， Ｃ结 见
表 １ 。
在 两 组 中分 别 统 计 输 血 （ 输 注 血 小 板 、 含
采 血 小板 的 临床 效 果 ， 以及 影 响 血 小板 输
注效 果 的 因 素 。
但无 明显 出血 的 白血 病患 者及 时输 注机
采血小板 ， 获得 很好 的治疗 效果 ， 防止 了
出 血 现 象 发 生 ， 白血 病 患 者 的完 全缓 解 使
时， 无并 发症 组 输 注 效果 优 于有 并 发 症 组 。有并发 症患 者输 注血 小板 效果 与输
血次数 关 系 不 大 ， Ｃ ＜１ ， 于 无 效输 Ｃ Ｉ ０属 注 。在无并 发症组 ， 注效果随输血次 数 输 的增 加 而下 降。输 血次 数 ≤６次 ， Ｃ ＞ Ｃ Ｉ １ ， 于输 注有 效。输 血 ４—６次 效 果较 ０属
１ 仇铭华 ． 机采 血小 板 的采集 与质 量研 究进
展． 中国输血杂志 ，０ ５ １ （ ） ２ ８ ２０ ，８ ３ ：５ ．
输注 ３— ９个 治疗量 Байду номын сангаас机 采浓 缩血 小 板。
机采 血小板可 以提 高血小 板 ３ ６×１’Ｌ， ０／
ＣＩ ０ Ｃ ＞１ 。从表 １可 见 ， 输 血次 数相 同 在
２ 李锡金 ， 刘景汉 ， 马曙轩 ， 血小 板输血 的 等． 临床应用 观察 ． 放军 医 学 杂志 ，９ ５ ２ 解 １９ ，０
-80℃保存机采浓缩血小板的研究
实用 医学杂 志 ２０ ０ ８年第 ２ ４卷第 １ ６期
胺类 、 四环 素类 、 诺酮 类 药 物敏 感 率较 高 ， 疗 应 首 喹 治
４ 参 考 文 献 ［ ］ 严 律南 ， １ 李波． 原位 肝移植 术后 近期并 发症 的防治 ［］ 临 床外 Ｊ．
异均无 显著性 （ Ｐ＞００ ） 而冻存 ６～９个 月的冰冻血小板的黏 附功 能与新 鲜机 采血 小板相 比则差异有 高度显著性 ．５ ，
（ Ｐ＜０ １ ３组冰冻血 小板 的第Ⅲ因子 活性测定与新鲜血小板相 比。 ．） ０ 均在 正常范围， 平均回收率为 ８ ．％。两组 患 ５２
者在输 注冰冻血 小板 ２ 能有 效控 制 出血症状 的 比率平 均为 ９ 、％； Ｃ Ｉ ≥１ ０ ４ｈ后 ３ ３ 而 Ｃ值 ００ ０／ Ｌ的 比率 ， 非血液病 组显著 高于血液病组。结论 ：％二 甲基亚砜 一 ０ ５ ８ ℃冰 冻保存半年 以内的机采 浓缩血 小板具有 良好的止血功能 。
关键词 血 小板 一０ ８℃ 二 甲基 亚砜 保存 机 采 ’
血 小 板输 注 是 治疗 各 种 血 小 板 减 少 或 功 能 障碍 导致 出血的重要手段 。 由全 自动血细胞分离机制备的 浓 缩 血 小 板 。 其 纯度 高 、 效 显 著 、 因 疗 白细 胞 污 染 少 、 同种免疫发生率低等优点 。 为临床广泛应用＿ 。 更 ｌ 然 ＿ 而 。 小 板在 ２ ℃恒 温 条 件下 。 振 荡 或 旋 转 式 保存 血 ２ 用
科 杂 志 ，０ ２ ｌ （Ｏ ：３ — ３ ． ２ ０ ， 综上所述 ，肝移植术后医院感染的发生率较高 ， 尤 以呼吸 道感 染 多见 ， 以鲍 曼 不动 杆 菌为 主 。革 兰 阴 性 杆 菌具 有较 强 的耐 药性 ， 了减 少 感染 的发 生 和及 为 时有 效地 控制 感染 。应 加强 临床 与实 验 室 的联 系 ， 重 视对 病原 菌 进行 耐 药性 的监测 ， 根据 药 敏结 果 合 理选 用抗生素， 从而达到 良好 的治疗效果 。
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3
明确有传染病的患者，如乙肝、梅毒、艾滋等； 肿瘤患者； 服用血小板抑制剂的或血小板功能存在障碍的患者；如口服阿司匹 林、氯吡格雷等； 血小板减少的患者；
19
在创面修复中的作用
Growth Factor
Platelet Derived Growth Factor, PDGF-AB/BB Transforming Growth Factor-beta, TGF-β1/2 Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF Epidermal Growth Factor, EGF Basic Fibroblast Growth Factor, bFGF Insulin like Growth Factor (IGF 1 and 2) Connective Tissue Growth Factor (CTGF) Keratinocyte Growth Factor (KGF) Hepatocyte Growth Factor(HGF) Platelet Derived Endothelial Growth Factor (PDEGF) Platelet Derived Angiogenic Factor(PDAF)
1
0.6 2 2 1
1
Platelet Concentration
Activator(+/-)
Activator:PRP Leukocytes(+/-)
1-1.5× 9.3× 2-3× 4-6× 2-3× 3-9× 1-18× 9×
CaCl2 Trombin
None Trombin
CaCl2 CaCl2 None CaCl2
12
浓缩血小板的激活
Activated versus Nonactivated
Activated
浓缩血小板的激活方式应该考虑以下三个方面： 血小板激活剂的种类
牛凝血酶、人凝血酶、钙剂、凝血酶受体激活肽（TRAP）、 胶原、类凝血酶-巴曲酶、反复冻融、壳聚糖、纳秒脉冲电 场（nsPEF） ； 激活剂的浓度的选择 激活剂和浓缩血小板的比例 ① 影响细胞因子的释放时间 ② 影响细胞因子的释放量
细胞因子在创面修复中的作用
This is true for bacteria like MSSA, Group A Streptococcus, and Neisseria gonorrhoeae as well.[7] .
22
缺乏统一的浓缩血小板的制备标准
临床应用时能否激活仍存在争议，若激活，激活剂种类、浓度及其与 浓缩血小板的比例如何确定
[4]. Scherer SS, Tobalem M, Vigato E et al. Nonactivated versus thrombin-activated platelets on wound healing and fibroblast-to-myofibroblast differentiation in vivo and in vitro. Plast Reconstr Surg 2012 129(1): 46e-54e
[3]. Dohan Ehrenfest DM, Rasmusson L Albrektsson T. Classification of platelet concentrates: from pure plateletrich plasma (P-PRP) to leucocyte- and platelet-rich fibrin (L-PRF). Trends Biotechnol 2009 27(3): 158-167
17
In vitro three-dimensional tissue defect assay .[5]
Activated versus Nonactivated
Schematic depiction of the effect of physiologic and unspecific activation of platelets on wound healing .[4]
1:10
-
1:10
+
1:10
-
1:10
+
1:10
-
1:10
+
1:10
+/-
1:10
NS
1.6×
Trombin Bovine
1:10
NS
NS
Batroxobin
1:10
+
3-6×
Thrombin
1:10
NS
5-9×
CaCl2 and Thrombin
1:10
+
5-6×
CaCl2 and Thrombin
浓缩血小板类型
PRGF
L-PRF PRF
R-PRF
PRP
. Classical manual platelet-rich plasma (PRP) protocol using a two-step centrifugation procedure. [3]
9
PRGF
PPGF: plasma poor in growth factors PRGF: plasma rich in growth factors
[6]. Everts PA, Knape JT, Weibrich G et al. Platelet-rich plasma and platelet gel: a review. J Extra Corpor Technol 2006 38(2): 174-187
[7]. Li H Li B. PRP as a new approach to prevent infection: preparation and in vitro antimicrobial properties of PRP, <http:// www. ncbi. nlm /pubmed/23609458> (2013).
纳秒脉冲电场（Nanosecond Pulse Electric Field， nsPEF）
15
Non-activated
Diabetic mouse full-thickness wound healing .[5]
16
Non-activated
Effects of platelet treatment on fibroblast cultures .[5]
1:10
+
7-8× 0.5×
CaCl2 CaCl2
1:10
+
1:10
+
4-5×
CaCl2 and Thrombin
1:10
+
3-4×
CaCl2 and Thrombin
1:10
+
Flow chart describing preparation of PRP. [2]
L-PRP PRP
P-PRP
浓缩血小板研究进展
Platelet ultrastructure. [1]
血小板是血细胞中的一种，它是从骨髓巨核细胞的细胞质脱落的的具有生物活性的小块胞 质，体积小，无细胞核，呈双面微凸的圆盘状。
生理特性：粘附、聚集、释放、收缩
基本功能：止血凝血、维持血管内皮的完整性
浓缩血小板
浓缩血小板（Platelets Concentrate）根据其临床用途可分为两类： 第一类：体内，是外科常用的成分输血制品，浓缩血小板一般用于血小板 减少，失血症状明显而又需手术者。
Centrifugation(No.of Commercial System Blood Vol(ml)
Spins)
Cascade ® GPS Ⅲ
9-18
1
60
1
ACP®
9
1
Smart PRP2®
20-120
2
PRGF®
9-72
1
Magellan®
30-60
2
Angel®
40
2
Genesis CS®
14
Activator
Representative voltage and current tracing for pulse electric field condition used to activate PRP. Electrical signals were measured on a 2mm cuvette containing PRP and stimulated with pulse electric field for PRP activation. Each sample was exposed to five pulses, of approximately 500 nanoseconds pulse width, 4 kV peak voltage and more than 300 A peak current per pulse .[4]
The End
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谢谢观赏
无法确定有临床疗效的浓缩血小板中最适的血小板的浓度
[1]. Yeaman MR. The role of platelets in antimicrobial host defense. Clin Infect Dis 1997 25(5): 951-968; quiz 969970
[2]. Dhurat R Sukesh M. Principles and Methods of Preparation of Platelet-Rich Plasma: A Review and Author's Perspective. J Cutan Aesthet Surg 2014 7(4): 189-197