高二生物选修三2.2动物细胞工程知识点
选修3-2.2动物细胞工程
植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目 植物组织培养 细胞全能性 固体培养基 蔗糖 植物激素
已分化的组织→愈 伤组织→胚状体、 丛芽→完整植株
动物细胞培养 细胞增殖 液体培养基 葡萄糖 动物血清
动物组织→单个细 胞→细胞悬液→原 代培养→传代培养
原理
培养基状态 培养基特有成分 培养过程 生长特点 接种前处理 培养目的
动物细胞培养过程中需注意的问题 2、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外， 长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损 伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
二、动物细胞培养的条件
1、无菌、无毒的环境
添加一定量的抗生素，定期更换培养液
2、营养
可以补充培养 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等 基中缺乏的物 质如生长因子， 通常需加入动物血清等一些天然成分 保证细胞顺利 的生长增殖
此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些行为、 习性的形成与所处环境有很大关系，核供体动物生活的环境与克 隆动物所生活的环境不会完全相同，其形成的行为、习性也不可 能和核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是核供 体动物100%的复制。
一、动物细胞核移植技术和克隆动物
3、体细胞核移植技术的应用前景
受精卵发育成新个体的生殖方式。
无性生殖：不经过两性生殖细胞结合，直接由母体
的一部分发育成新个体的生殖方式。如细胞有丝分裂、 植物组织培养、动物体细胞核移植等。
克隆：群细胞或者生物个体。现在指个体水平的 核移植技术、细胞水平的动物细胞培养、基因水平的 DNA复制等。
⑷为什么用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以 内的细胞？ 培养的动物细胞一般当传代至10～50代左右时，
2.2.动物细胞工程课件-高二下学期生物人教版选择性必修三
1.动物细胞培养的条件 一般使用液体培养基，也称培养液。
糖类 氨基酸 无机盐 维生素
血清
营养物质 <
血清中含有人类未知，细胞 生长增殖所必须的物质。
动物细胞 培养的
条件
<
稳定的 内环境
适宜的温度、pH和 渗透压
适宜的气体环境
无菌、无毒的环境
如何维持无菌、无毒的环境？
与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备
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教材基础诊断
√ 2. 灭活是用极端的物理或化学手段杀灭细菌或病毒，使其各种结构都失去相应的 功能。（选必3 P48相关信息）( × ) 3. 在选择性培养基上，未融合的亲本细胞会死亡，融合的三种细胞类型（只考虑 两个细胞间融合）都能生长。（选必3 P48、P49图2-16）( × )
A. 步骤①的操作不需要在无菌环境中进行 B. 步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离 C. 步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理 D. 步骤④培养过程中不会发生细胞转化
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3. （2020江苏，23，3分）不定项 小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，
制备流程如图所示。下列叙述错误的是( ABC )
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（3） 为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中 筛选1所采用的培养基属于__选__择__培__养__基__，使用该培养基进行细胞培养的结果是 __只__有__杂__交__瘤__细__胞__能__够__生__存__。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是 __抗__原__与__抗__体__的__反__应__具__有__特__异__性__。
(完整版)动物细胞工程知识点
动物细胞工程12月20日动物细胞工程常用技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
一、动物细胞培养1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
2、原理：细胞增殖3、过程分散成单个细胞，制成细胞悬液注意：①10代以内细胞保持正常的二倍体核型，无突变发生，常用于实践或冷冻保存。
②超过50代，极少数细胞突破自然寿命极限，突变成癌细胞，具有无限增殖能力；若超过50代，细胞不再增殖，全部死亡，则说明细胞没有发生癌变。
③分瓶之前，称原代培养；出现接触抑制用胰蛋白酶处理，再分瓶培养为传代培养。
思考回答：⑴、为什么选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养?答：其细胞的分化程度低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。
⑵、动物细胞培养需要脱分化吗?为什么?答：不需要。
因为高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力，所以没有类似植物组织培养的脱分化过程，要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。
⑶、进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗? 答：主要是蛋白质，不行，因为胃蛋白酶作用的适宜PH约为2，当ＰＨ大于6时就会失去活性，多数动物细胞培养适宜PH为7.2－7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。
（胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2－8.4，胰蛋白酶活性较高）⑷、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?答：胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质，长时间作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤，因此必须控制好消化时间。
⑸、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体4、重要概念①细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。
2.2动物细胞工程
培养液和培养用具杀菌消毒 (4)无菌、无毒环境培养过程加抗生素杀菌 无菌、 无菌 定期更换培养液，清除代谢产物 定期更换培养液，
4．实践应用 ． (1)生产生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克 生产生物制品： 生产生物制品 病毒疫苗、干扰素、 隆抗体等。 隆抗体等。 (2)与基因工程相结合。 与基因工程相结合。 与基因工程相结合 (3)检测有毒物质，判断某种物质的毒性。 检测有毒物质， 检测有毒物质 判断某种物质的毒性。 (4)科研方面：筛选抗癌药物、治疗和预防疾 科研方面： 科研方面 筛选抗癌药物、 病。
(2009年山东高考题 人类在预防与诊疗 年山东高考题)人类在预防与诊疗 年山东高考题 传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。 传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。 已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该 病毒， 已知某传染性疾病的病原体为 病毒 病毒表面的A蛋白为主要抗原 蛋白为主要抗原， 病毒表面的 蛋白为主要抗原，其疫苗生产和 抗体制备的流程之一如下图。 抗体制备的流程之一如下图。
三、动物细胞融合与单克隆抗体制备 1．原理：细胞膜的流动性。 ．原理：细胞膜的流动性。 2．诱导融合的因素：聚乙二醇 ．诱导融合的因素：聚乙二醇(PEG)、灭活 、 的病毒、电激等。 的病毒、电激等。 3．意义：最重要的用途是制备单克隆抗体。 ．意义：最重要的用途是制备单克隆抗体。
4．单克隆抗体的制备 ． (1)过程： 过程： 过程
【答案】 (1)逆(反)转录 (2)限制性核酸内 答案】 逆 反 转录 限制性核酸内 切酶(限制性内切酶 限制酶) 限制性内切酶、 切酶 限制性内切酶、限制酶 DNA连接酶 连接酶 (注：两空顺序可颠倒 (3)细胞融合 杂交瘤 注 两空顺序可颠倒) 细胞融合 基因)序列 细胞 (4)A蛋白 核酸 基因 序列 抗A蛋白 蛋白 核酸(基因 蛋白 的单克隆抗体
高中生物(新人教版)选修三：专题2《细胞工程》：2.2《动物细胞工程》课件(新人教版选修3)
第一节 动物细胞培养
1、动物细胞培养的概念
从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成 单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些 细胞生长和增殖.
胚胎或幼龄动物的 2、动物细胞培养过程： 组织、器官 单个细胞
胰蛋白酶或胶原蛋白 酶 加培养液
遗传物质 未改变
细胞悬浮液 原代培养 10代细胞 细胞株
50代细胞
遗传物质 已改变
传代培养
细胞系 无限传代
多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的 内环境的知识，思考以下问题： 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质？ 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子和动物 血清等。
2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？
适宜温度、PH和气体环境；无菌无毒环境
比较项目
原 理 培养基类型 培养基特有成分 培养结果 培养目的
植物组织培养
细胞的全能性 固体培养基 蔗糖、植物激素 新的个体或细胞产品
动物细胞培养
细胞增殖 液体培养基 葡萄糖、动物血清促生长 因子 细胞或细胞产品
快速繁殖、培育无病毒植 获得细胞
高中生物选修三专题二 2.2 动物细胞工程
传代10-50代左右，增长缓慢以 至于完全停止，部分细胞核型可 能发生变化（遗传物质可能改变）40-50代细胞 继续传代培养少部分细胞获得 不死性，细胞突变，遗传物质 已经改变，等同于癌细胞。无限传代细 来自 系4、动物细胞培养条件
无菌、无毒的环境
离体培养的细胞对微生物和 有毒物质没有防御能力。 保证细胞顺利 的生长增殖
胰蛋白酶处理 单个细胞
细胞培养
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础
增殖能力强，分裂旺盛，分化程 度低，容易培养
动物组织细胞间隙中含 胚胎或幼龄动物器官组织 有一定量的蛋白质，将 取出组织 细胞网络起来形成具有 一定弹性和韧性的组织 剪碎 分散成细胞悬浮液利于培养 胰蛋白酶处理 和器官。
单个细胞 细胞悬液
2、下列属于动物细胞工程中的工具是 （ C） A．限制性内切酶 B．DNA连接酶 C．胰蛋白酶 D．果胶酶
3、下列属于动物细胞培养与植物组织培养 主要区别的是 A A.培养基成分不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能 D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能 培养成植株
人耳鼠
在京展出的数天，尽管门票高达20元，但还是有将近20 万人，心甘情愿地掏钱一睹“人耳鼠”的风采。
人耳鼠的出现，透露了怎样的信息？
一、动物细胞培养
发展历史:
20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的 细胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他 细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈 的争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harrison) 从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝 固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周， 并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验不 仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织 培养的先河。此后，在许多科学家的不懈努力下，动 物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。
动物细胞工程知识整理
＿＿＿培养 ② 单个细胞 细胞悬液 培养 接触抑制 动物细胞 ① 细胞培养 供体 体细胞 ＿＿＿＿＿＿ 卵巢卵 母细胞 减 Ⅱ中 期 去核 无核卵母细胞 注 入 ＿＿＿＿＿＿ 发 育 胚 胎 胚胎移植 代孕母体 生出与供体遗传 物质相同的个体动物细胞工程要点梳理一、动物细胞培养1．概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成＿＿＿＿＿＿＿，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和＿＿＿＿＿。
2．过程：注：①②代表的是＿＿＿＿＿＿或胶原蛋白酶。
10～50代的细胞群叫细胞株。
50代以后的细胞群叫＿＿＿＿＿。
3．条件：（1）无菌、无毒的环境：培养液应进行＿＿＿＿＿处理。
（2）营养（合成培养基成分）：糖类、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素，通常需加入＿＿＿、血浆等。
（3）温度：适宜温度36.5±0.5 ℃；pH ＿＿＿＿。
（4）气体环境：空气95%，＿＿＿5%。
4．应用：如病毒疫苗、干扰素、＿＿＿＿＿。
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1．动物体细胞核移植：将一个动物细胞的＿＿＿＿＿移入一个去核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物个体。
2．种类：（1）体细胞核移植：难。
（2）＿＿＿＿＿移植：易。
3．过程：4．应用：（1）加速家畜＿＿＿＿改良进程，促进＿＿＿＿＿繁育。
（2）保护濒危物种。
（3）生产＿＿＿＿＿＿。
（4）作为异种移植的＿＿＿＿。
（5）用于组织器官的移植。
5．问题：克隆动物存在＿＿＿＿＿、生理缺陷、＿＿＿＿＿等。
三、动物细胞融合不同＿＿＿＿＿的两个细胞灭活的病毒PEG杂交细胞选择B淋巴细胞抗原刺激骨髓瘤细胞克隆检测＿＿＿＿＿浆细胞杂交瘤细胞单克隆抗体B－B细胞瘤－瘤细胞杂交瘤细胞体外培养1．概念：＿＿＿＿＿＿动物细胞结合形成一个细胞的过程，又叫细胞杂交。
2．结果：形成＿＿＿＿细胞。
3．过程：4．意义：克服了＿＿＿＿杂交的不亲和性。
四、单克隆抗体1．抗体的产生：＿＿＿＿＿＿产生的抗体具有特异性。
高二动物细胞工程知识点
高二动物细胞工程知识点动物细胞工程是指运用细胞生物学、遗传学、分子生物学等理论和技术，对动物细胞进行研究、操作和改良的一门学科。
它在农业、医学和科学研究等多个领域具有重要的应用价值。
本文将介绍一些高二动物细胞工程的基础知识点。
一、细胞培养基础动物细胞培养是动物细胞研究中最基本的技术手段之一。
常见的细胞培养基包括无血清培养基和含血清培养基。
无血清培养基不含动物血清，通过添加人工合成的营养物质来满足细胞生长所需。
而含血清培养基则利用动物血清中所含有的生长因子和营养物质来维持细胞的生长。
二、细胞培养技术1. 细胞传代：细胞传代是指将原始培养的细胞分为若干个小培养皿中，使细胞继续生长和分裂。
细胞传代的目的是为了扩增细胞数量，以满足后续的实验需求。
2. 细胞冻存：细胞冻存是将细胞在低温下保存，以便日后使用。
通过添加特定的保护剂和冷冻液，可以在极低温度下减少细胞的代谢活动，避免细胞死亡。
3. 细胞鉴定：细胞鉴定是通过观察细胞的形态、生长特性、标记物等来确定细胞的身份和纯度。
常用的方法包括细胞形态观察、细胞分子标记和遗传分析等。
4. 细胞转染：细胞转染是将外源基因导入细胞的过程。
常用的转染方法有化学法、电穿孔法和病毒介导的转染法等。
三、动物细胞培养的应用1. 药物筛选：动物细胞培养可以用于药物的筛选和评价。
通过将药物添加到细胞培养系统中，观察其对细胞的影响，可以评估药物的毒性和疗效。
2. 组织工程：动物细胞培养可以为组织工程提供细胞来源。
通过培养和增殖体外的细胞，可以获得大量的细胞用于组织重建和移植。
3. 基因工程：动物细胞培养可以用于基因工程研究。
通过导入外源基因，可以改变细胞的性质和功能，用于疾病基因治疗和基因表达研究。
四、动物细胞工程的挑战与展望尽管动物细胞工程在许多领域都已取得了重要的成果，但仍面临着一些挑战。
例如，细胞培养过程中的细胞衰老、细胞突变和污染等问题需要得到解决。
此外，细胞工程的应用还需要更深入的研究和探索，以满足不断发展的医学和科学需求。
生物选修三 第二单元知识点
细胞工程知识点2.1 植物细胞工程2.2 动物细胞工程2.1 植物细胞工程一、细胞工程的概念1、原理和方法：应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法2、操作水平：细胞水平或细胞器水平3、工程目的：按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品4、分类：根据操作对象不同，可分为植物细胞工程和动物细胞工程。
二、植物细胞工程1、原理：细胞的全能型概念：已分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能原因：生物体的任一细胞都含有包含本物种的全部遗传信息生物体上的细胞未表现出全能性，而是形成特定的组织器官，其原因是：细胞中的基因进行了选择性表达，使细胞分化成不同的组织和器官表现出全能性的条件：脱离母体，适宜的营养物质等条件全能性表达的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞2、植物组织培养技术（1）概念：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织，丛芽，最终形成完整的植株。
（2）过程：离体的植物器官、组织或细胞―→愈伤组织―→试管苗―→植物体（3）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。
（4）地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。
3.植物体细胞杂交技术（1）概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术（2）过程：（3）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。
化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。
（4）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。
三、植物细胞工程的实际应用1、植物繁殖的新途径（1）微型繁殖：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
特点：保持优良品种的遗传特性；高效快速的实现种苗的大量繁殖。
（2）作物脱毒：选取作物无毒组织（如茎尖）进行组织培养，获得脱毒苗的技术。
（3）人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽、腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。
动物细胞工程知识清单高二下学期生物人教版选择性必修3
生物选必三必背长空（第2章动物细胞工程）1.细胞的全能性是指细2.人工诱导原生质体融合的方法3.杂交是指4.植物体细胞杂交的原理5.微型繁殖技术的优点6.什么叫次生代谢物7.分散动物细胞时不用胃蛋白酶的原因是28.动物细胞培养时需要分瓶传代培养的原因是9.诱导动物细胞融合的方法有10.杂交瘤细胞的特点11.制备单克隆抗体时，第一次筛选的目的是，第二次筛选时进行，目的是。
12.单克隆抗体的优点是。
13.单克隆抗体的应用有。
14.ADC在临床上具有靶点清楚，副作用小的优点，原因是。
15.核移植时，受体选择卵母细胞的原因是。
16.克隆动物是供体100%的复制吗？为什么？。
17.卵母细胞去核的原因是。
18.体细胞核移植难度明显高于胚胎细胞核移植的原因是。
19.动物细胞培养加入血清的作用是。
20.胚胎工程是指。
21.防止多精入卵的两道屏障，名称及发生时间：22.受精的标志。
23.内细胞团将来发育成。
24.胚胎移植是指。
25.胚胎移植的基本程序（5步）26.供体的选择标准，受体的选择标准27.同期发情处理的意义：28.胚胎移植的实质是29.胚胎移植的意义：30.胚胎分割是指248生物选必三必背长空（第2章动物细胞工程）1.细胞的全能性是指细胞经分裂和分裂后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能，即细胞具有全能性。
2.人工诱导原生质体融合的方法物理法包括电融合法、离心法；化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca—高PH 融合法等。
3.植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。
4.植物体细胞杂交的原理细胞膜的流动性、植物细胞的全能性5.微型繁殖技术的优点高效、快速地实现种苗的大量繁殖；保持优良品种的遗传特性；可实现工厂生产。
6.什么叫次生代谢物一般认为不是植物基本的生命活动所必需的的产物。
7.分散动物细胞时不用胃蛋白酶的原因是多数动物细胞生存的适宜PH为7.27.4,，而胃蛋白酶最适PH为2，PH>6会失活，胃蛋白酶在此环境中没有活性。
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高二生物选修三2.2动物细胞工程知识点
高二生物选修三2.2动物细胞工程知识点
动物细胞工程动物细胞工程常用技术：动物细胞培养细胞核移植动物细胞融合单克隆抗体的制备其中动物细胞的培养，是动物细胞工程的基础，也即动物细胞培养是细胞核移植，动物细胞培养，单克隆抗体的制备的基础。
动物细胞培养1. 概念：就是从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
2. 原理：细胞增殖
3. 动物细胞培养过程动物组织块剪碎组织用胰蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养原代培养
4. 细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，（单层）要求：培养瓶（皿）内表面光滑无毒易于贴附。
接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着有丝分裂，数量不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
原代培养：动物组织消化后的初次培养称为原代培养。
特点：10代以内，能保持正常的二倍体核型。
目前使用或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。
传代培养：原代培养接触抑制时用胰蛋白酶处理后的分瓶培养称之为传代培养。
细胞株：10-50代，遗传物质没有发生改变细胞系：50代后，遗传物质发生改变5. 细胞培养条件（1）无菌，无毒无菌：添加抗生素无毒:定期更换培养，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
（2）营养糖，促生长因子，无机盐，氨基酸，血清，血浆，微
量元素加入血清，血浆的目的：血清，血浆可以补充培养基中缺乏的物质。
（3）温度，pH 温度：36.5+0.5 pH：7.2-74 （4）气体环境95%空气加5%CO2 O2是细胞代谢所必须的CO2主要作用是维持培养液pH 6. 动物细胞培养与植物组织培养的培养基相比其特点是：动物细胞培养：液体培养基，含有血清和血浆植物细胞培养：固体培养基，含有植物激素动物细胞核移植技术与克隆动物1.概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成新的个体。
核移植的方法得到的动物称为克隆动物原理：动物细胞核具有全能性2.核移植分类胚胎细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易体细胞核移植：细胞分化程度高，恢复全能性不容易3.体细胞核移植过程（1）供体细胞：10代以内细胞：
原因：10代以内细胞一般能保持正常的二倍体核型（2）受体细胞：减数第二次分裂中期去核卵母细胞卵母细胞作为受体细胞的原因：
体积大，易操作含有激发细胞核全能性的物质去核的原因：使后代的性状主要由供体细胞核决定去核的方法：显微操作（3）激活细胞的方法：电脉冲，钙离子载体，乙醇，蛋白酶合成抑制剂（4）获得克隆动物与供核动物性状不完全相同的原因：
可能发生基因突变性状是由基因和环境共同作用的结果克隆动物大部分DNA来自供体细胞的细胞核，但其核外线粒体中DNA来自受体细胞动物细胞融合1.动物细胞融合：是两个或多个细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。
杂交细胞：融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。
动物细胞融合的原理：细胞膜的流动性 2.动物细胞融合诱导方法（1）物理法：离心，振动，电激（2）化学法：聚乙二醇(PEG) （3）生物法：灭活的病毒(动物细胞融合特有的方法) 3.注意（1）细胞融
合的过程包括细胞膜的融合、细胞质融合和细胞核融合。
（2）在细胞膜融合中体现出细胞膜具有流动性。
（3）其中细胞膜的融合是细胞融合的先导，没有细胞膜的融合就不会有细胞质和细胞得到融合。
(4)动物细胞融合的实质及结束的标志都是细胞核的融合。
4.优点与(1)优点;突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。
应用(1)细胞融合技术是研究细胞遗传，细胞免疫，肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。
单克隆抗体1.传统抗体的获得：
(1)方法：
①向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体；
②从动物血清中分离所需抗体。
(2)缺陷：产量低、纯度低、特异性差。
2.比较制备单克隆抗体中的几种细胞：
B淋巴细胞：能产生单一抗体，但不能无限增殖骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体杂交瘤细胞：既能产生专一抗体，又能无限增殖3.制备单克隆抗体需要的技术手段：动物细胞融合和动物细胞培养原理：细胞膜的流动性和细胞增殖4.单克隆抗体的制备（1）免疫处理：提供B淋巴细胞的动物必须先经过免疫处理，否则不会产生特异性抗体。
（2）诱导融合的方法：
物理法：离心，振动，离心化学法：聚乙二醇(PEG) 生物法：灭活的病毒(动物细胞融合特有的方法) 5.仅考虑两两融合的情况，形成的杂交细胞有三种B淋巴细胞和B淋巴细胞融合的细胞骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合的细胞杂交瘤细胞6.杂交瘤细胞的特点：既能迅速大量增殖，又能产生某种特异性抗体7.两次筛选的目的：第一次筛
选的目的：筛选出杂交瘤细胞第二次筛选的目的：筛选出产生特定抗体杂交瘤细胞8.获取单克隆抗体的场所(1)若在培养基中进行杂交瘤细胞培养，则培养液中提取(2)若在小鼠和其他动物的腹腔中进行培养，则从腹水中提取。
腹腔培养：易于控制培养条件，成本低，但规模小，产量低体外培养：规模大，产量高，但不易于控制培养条件，成本相对较高9.杂交瘤细胞的特点：既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗体单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏性高，可大量制备10.单克隆抗体的应用：
(1)作为诊断试剂(2)用于治疗疾病和运载药物。